第12批磷酸组织胺国家对照品的建立

目的制备、标定第12批磷酸组织胺国家对照品。方法用第11批磷酸组织胺国家对照品(批号:150510-9411)为标准,采用猫血压法标定。结果此批待标品,经4个实验室的标定结果合并计算效价为101.83%。结论可以作为第12批磷酸组织胺国家对照品使用。此批国家对照品效价定为100%,即1 mg的磷酸组织胺相当于0.342 mg的组织胺,并已于2005年6月正式分发使用。     

首批抗甘露聚糖肽血清国家参考品的研制

目的 建立首批抗甘露聚糖肽血清国家参考品.方法 制备冻干抗甘露聚糖肽血清候选国家参考品,组织3家实验室采用补体结合法协作标定其效价,并对其进行稳定性考察.结果 抗甘露聚糖肽血清候选国家参考品的效价为1:16,且具有较好的稳定性.结论 该候选国家参考品符合国家参考品的各项要求,并已被国家有关部门批准正式使用.     

RFFIT法血清系列参考品的建立

目的建立血清参考品,用于RFFIT法检测抗狂犬病毒中和抗体。方法狂犬病疫苗免疫后人血清,采用小鼠脑内中和试验确定抗狂犬病毒中和抗体滴度后,混匀,分装,以第2批人免疫球蛋白国际标准品为参考品用RFFIT方法进行标定,并考察所建参考品的稳定性。结果检测用标准血清效价为22.14IU.mL-1,弱阳性、强阳性参考品分别1.11IU.mL-1,9.20IU.mL-1,阴性参考品低于0.1IU.mL-1。结论建立的系列参考品适用于RFFIT法检测人血清中抗狂犬病中和抗体水平。     

牛血清白蛋白残留量检测试剂盒内部参考品的制备及标定

目的    制备牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）残留量检测试剂盒的内部参考品,用于考察试剂盒的稳定性。方法   首先对乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中的3种工作液（病毒稀释液、病毒浸泡液、细胞上清液）进行BSA残留量检测。然后选择BSA含量适宜的工作液,适当稀释后制成内部参考品。由2名实验人员同时选取3个不同批号的试剂盒,在不同的日期进行3次检测,对内部参考品进行标定,并根据标定结果确定其赋值范围。分别采用方差分析和t检验对不同批号试剂盒和不同实验人员的检测结果进行比较。标定后连续8个月20次使用该参考品考察试剂盒的稳定性。结果   根据BSA残留量检测结果,选择病毒浸泡液,以疫苗冻干保护剂3倍稀释后制成内部参考品。2名实验人员的108次检测均值为33.46 ng/ml,标准差为2.15 ng/ml,变异系数为6.40%。根据标定结果,确定内部参考品的赋值范围为27.01～39.91 ng/ml。不同批号试剂盒检测结果的差异有统计学意义（F=11.497,P<0.01）,不同实验人员检测结果的差异无统计学意义（t=0.500,P>0.05）。采用5个批号试剂盒总共对该参考品进行20次检测,BSA残留量均在30.00～36.63 ng/ml范围内,均值为33.14 ng/ml,标准差为1.73 ng/ml,变异系数为5.20% ,不同批号试剂盒检测结果的差异无统计学意义（F=0.997,P>0.05）。结论   制备的BSA残留量检测试剂盒内部参考品可用于试剂盒的稳定性考察。     

矛头蝮蛇血凝酶工作标准品的协作标定

目的：标定我公司生产矛头蝮蛇血凝酶工作标准品。方法：以蛇毒血凝酶质量标准WS-349（X-317）-2001中效价测定为基础,改进测定方法,组织多名实验人员协作标定,并对数据进行统计分析。结果：本批矛头蝮蛇血凝酶工作标准品酶活性单位为103 U/支,加权均值标准差为0.806 8,95 %加权均值可信限的范围为101.0～105.1 U/支。结论：我公司生产的矛头蝮蛇血凝酶工作标准品标化科学、赋值准确,可以用于本公司产品的效价检测。     

水蛭抗凝血活性的效价单位定义与对照药材赋值研究

目的:研究水蛭抗凝血活性效价单位的定义，并考察对照药材的按定义的赋值方法和赋值的适用性。方法:先理论设计出抗凝血效价的单位定义：在50μL家兔血浆中加入20μL水蛭溶液的比例下，使家兔空白血浆的部分活化凝血酶原时间(APTT)延长0.5倍，1 mL血浆中需要的量为1个效价单位(U);在此定义下可推算出利用浓度-APTT测定值计算效价赋值的公式；然后联合5家实验室对蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材进行赋值测定和统计，将赋值结果对药材和制剂的适用性进行考察。结果:5家实验室按统一的标准操作规程，均可采用效价定义的公式，利用APTT的延长值测定出蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材的抗凝血活性，经统计蚂蟥对照药材的赋值为每1 g的抗凝血活性为325 U、菲牛蛭对照药材的赋值为每1 g的抗凝血活性为295 U;这2种对照药材赋值后，分别适用于蚂蝗、日本医蛭药材和制剂的抗凝血活性测定。结论:水蛭的抗凝血效价定义是科学合理的，能够通过试验进行赋值，赋值对药材和制剂均具有适用性。     

乙型肝炎病毒RNA检测试剂国家参考品的研制

目的：研制乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)RNA检测试剂国家参考品并制定其质量标准。方法：收集并筛选HBV RNA阳性和阴性血浆样本,制备HBV RNA候选参考品。采用不同企业的试剂进行协作标定,根据协作标定结果确定参考品的组成及制定质量标准,并考察其均匀性和稳定性。结果：HBV RNA检测试剂国家参考品由10份阳性参考品,10份阴性参考品,1份精密度参考品和1份灵敏度参考品组成。其质量标准：阳性参考品符合率为10/10;阴性参考品符合率为10/10;精密度参考品稀释10倍后重复检测10次,要求CV≤5%;最低检测限不高于2.1×10³ U·mL^-1。该参考品均匀性符合要求,室温(25℃)放置3 d、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性。结论：研制了首批HBV RNA检测试剂国家参考品并制定了质量标准,为相关试剂的质量控制和评价提供依据。     

柯萨奇病毒A组16型感染性滴度检测用国家参考品的制备及标定

目的 制备柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)感染性滴度检测用国家参考品,为CA16疫苗生产过程中的病毒滴度控制和CA16疫苗的免疫效果评价提供国家参考品.方法 将验证合格的CA16(C1亚型)培养液分装(0.5 ml/支)制成候选参考品.3个独立实验室分别对候选参考品进行协作标定,用细胞培养法检测CA16感染性滴度,用Behrens-K(a)rber法计算半数细胞感染量(50％ cell culture infective does,CCID50).同时,将CA16参考品分别置于-20、4、22～25(室温)和37℃条件下或反复冻融,进行热稳定性、长期稳定性和冻存稳定性研究.结果 制备的CA16参考品的病毒滴度为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.CA16参考品于-60℃保存12个月、-20℃保存6个月和4℃保存28 d后的病毒滴度无显著下降,表明稳定性较好;在22～25℃(室温)和37℃条件下,CA16参考品每天的病毒滴度损失率分别为3.4％和4.4％,而且分别保存27和21 d后病毒滴度无明显下降;对CA16参考品反复冻融的病毒滴度损失率为4.8％/次.结论 成功制备了CA16感染性滴度检测用候选国家参考品,将CA16参考品赋值确定为(6.80±0.95) lgCCID50/ml.     

重组肠道病毒71型疫苗（汉逊酵母）抗原冻干参考品的制备及稳定性研究

目的  制备重组肠道病毒71型（enterovirus A71，EV-A71）疫苗（汉逊酵母）抗原冻干参考品，用于重组EV-A71疫苗（汉逊酵母）的抗原含量测定。方法  选取检定合格的重组EV-A71疫苗（汉逊酵母）原液，加入冻干保护剂，冷冻干燥制备重组EV-A71疫苗（汉逊酵母）抗原冻干参考品，对其进行保护剂抗原含量标定，并对其进行反复冻融试验，37 ℃、2~8 ℃和-20 ℃稳定性研究。结果  制备的抗原冻干参考品鉴别试验、无菌检查结果均符合规定，水分含量为1.4%。经标定，几何均值为2 146 U/ml，几何变异系数为7.2%。10次反复冻融，抗原含量仍无明显变化；37 ℃放置3个月，抗原含量无明显变化；2~8 ℃和-20 ℃分别放置30个月，抗原含量仍较为稳定。 结论  制备了一批稳定的、均一性良好的抗原冻干参考品，可以用于重组EV-A71型疫苗（汉逊酵母）抗原含量测定。     

重组人淋巴毒素α衍生物活性测定国家标准品的研制

目的:建立重组人淋巴毒素α衍生物(rhLT α)生物学活性测定用国家标准品.方法:标准品按WHO重组细胞因子要求制备、检测,采用L929细胞毒法测定rhLT α的生物学活性,并以NBSB提供的国际标准品为标准,由2家实验室对rhITα国家标准品的效价进行协作标定.结果:rhLT α国家标准品经检定各项指标均符合要求,效价协作标定结果经统计学分析,均数的95%可信区间为4.21×104～4.52×104IU/支,单次测定的95%标准值范围为3.07×104～6.19×104IU/支.这批国家标准品效价确定为4.40×104IU/支.加速热稳定性实验表明活性在-20℃,4℃,25℃条件下20个月保持稳定.结论:该批rhLTα经协作标定,质量可靠,效价稳定,可作国家标准品使用.     

去甲万古霉素标准品量值传递方法的研究

目的:建立去甲万古霉素标准品量值传递的方法。方法:选用稳定物质阿莫西林和水杨酸为参比基准物;通过 HPLC测定参比基准物与去甲万古霉素的标准曲线,以其斜率的比值表征二者的摩尔紫外吸收系数比值,并作为校正因子;通过参比基准物的量值结合校正因子来传递去甲万占霉素的量值。结果:阿莫西林与去甲万古霉素的校正因子为1.003 7,RSD1.0%(n=6),水杨酸与去甲万古霉素的校正因子为1.003 2,RSD1.2%(n=6)。结论:通过校正因子可将去甲万古霉素标准品的量值准确的传递下去。     

力达霉素标准品量值传递方法的研究

目的：建立力达霉素标准品量值传递的方法。方法：选用稳定物质头孢唑林为表征性参比物质；通过HPLC测定表征性参比物质与力达霉素发色团的标准曲线，以其斜率的比值表征二者的摩尔紫外吸收系数比值，并作为校正因子；通过表征性参比物质的量值结合校正因子来传递力达霉素的量值。结果：表征性参比物质与力达霉素的校正因子为36．58，RSD为2．5％(n=6)。结论：通过校正因子可将力达霉素标准品的量值准确的传递下去。     

首批米非司酮国家对照品的研制

目的建立首批米非司酮国家对照品。方法采用红外光谱、紫外光谱、飞行时间质谱和核磁共振谱进行结构确证,反相高效液相色谱法和DSC法测定纯度,通过质量平衡法计算含量。结果确证了米非司酮原料的结构,并确定了首批米非司酮国家对照品的含量为99.5%。结论首批米非司酮国家对照品（批号：410003-201301）可作为米非司酮原料和相关制剂的鉴别和含量测定用对照品。     

免疫测定用甲胎蛋白国家标准品的制备与定值

目的 制备并标定免疫测定用甲胎蛋白（AFP）国家标准品.方法 制备AFP国家标准品冻干品,以酶联免疫法（ELISA）、化学发光法（CLIA）及时间分辨荧光法（TRFIA）对AFP国家标准品进行联合定值,并以AFP国际标准物质做校准,以实现国际单位的溯源.对国家标准品的赋值不确定度进行评定,对均匀性和稳定性进行检验.结果 AFP国家标准品赋值为645 IU/支,不确定度为±43 IU,瓶间精度为1.75％;2～8℃储存16周,与-20℃常规储存比较,相对偏差不大于5.0％,长期稳定性考察18个月,测定值偏差不大于5.0％.结论 本研究制备的免疫测定用AFP标准品符合国家标准物质的要求.     

首批醋酸特利加压素化学对照品的研制

目的：建立供含量测定用的首批醋酸特利加压素化学对照品。方法：应用红外光谱和液质联用仪等对醋酸特利加压素进行结构确证,采用高效液相色谱法测定样品色谱纯度、醋酸含量及氨基酸比值,同时测定水分和残留溶剂,以质量平衡法计算醋酸特利加压素的含量。结果：确定首批醋酸特利加压素对照品含量为85.4%。结论：首批醋酸特利加压素化学对照品的建立可有效控制产品质量。     

阿苯达唑工作参照品的测定

目的建立测定阿苯达唑参照品含量的方法。方法用二极管阵列检测器优化检测条件,采用两种色谱条件,从对照品纯度与参照品归一两个方面测定。通过C18色谱柱反相分离,流动相分别用乙腈-水(磷酸调pH4.5)(55:45)和甲醇-水(磷酸调pH4.5)(65:35)测定阿苯达唑及相关物质的含量。结果阿苯达唑含量为99.8%。结论所建测定方法灵敏,能互相印证,结果准确可靠,可作为阿苯达唑工作参照品含量控制的定量方法。     

大黄素国家级纯度有证标准物质研制

目的 通过建立准确的定值分析方法及不确定度的研究,研制具有可溯源性、高准确度量值的大黄素国家级化学纯度有证标准物质。方法 根据我国计量法和一级标准物质研制技术规范与相关技术文件要求,采用高效液相色谱法(HPLC)和差示扫描量热法(DSC)对大黄素纯度标准物质联合定值,并完成不确定度评估。结果 研制的大黄素纯度标准物质符合国家一级有证标准物质要求,其化学纯度标准值与不确定度值为(99.54±0.18)%(k=2, P=0.95)。结论 本实验研制的大黄素国家一级纯度有证标准物质具有量值准确、可溯源的特性,属于国际公认的标准物质,将为我国药品的有效物质和成分标准化与国际化,提供必要的标准物质与物质标准。     

首批重组人组织纤溶酶原激活剂国家标准品的研制

目的：建立ｒｈｔ－ＰＡ效价测定用国家标准品。方法：用ＵＶ法测定蛋白含量;ＨＰＳＥＣ法分析浓度;体外凝块裂解气泡上升法测定效价;用ｔ－ＰＡ国际标准品（８６／６７０）对国家标准品的效价进行标定。结果：标准品的效价为每支３００００ＩＵ,ＲＳＤ＝３．３４％（ｎ＝１０）。结论：建立的ｒｈｔ－ＰＡ国家标准品可用于国内同类药物的研究开发和进口药品的质控。     

首批酒石酸溴莫尼定国家对照品的研制

目的:建立首批含量测定用酒石酸溴莫尼定国家对照品.方法:应用红外光谱、核磁共振及液质联用仪对酒石酸溴莫尼定进行结构确证.采用高效液相色谱法测定纯度,并测定溶剂残留、炽灼残渣、水分等,通过质量平衡法计算酒石酸溴莫尼定含量.结果:确证酒石酸溴莫尼定的结构,确定首批酒石酸溴莫尼定对照品含量为99.8％.结论:首批酒石酸溴莫尼...