抑郁对大鼠肠道菌群的影响研究

目的 观察抑郁对大鼠肠道菌群的影响.方法 选取16只SPF级雄性Wistar大鼠,按照糖水偏好基线结果随机分为应激组和对照组,各8只.对照组正常饲养,应激组采用不可预知性慢性应激构建抑郁大鼠模型.造模成功后,采集大鼠粪便,通过16S rDNA高通量测序的方法分析大鼠肠道菌群的变化.结果 应激组和对照组大鼠肠道菌群结构存...     

母鼠在不同应激状态下子鼠肠道菌群结构与环境因子关系

目的探讨母鼠在不同应激状态下,对子鼠肠道菌群结构特征的影响及其与环境因子之间的关系。方法选择健康成年SD大鼠,雌鼠32只,随机分为4组,每组8只;雄鼠24只,只用于交配。采用慢性不可预知温和应激(CUMS)建立模型。子鼠在出生后20 d收集新鲜粪便,出生后21 d断乳,在出生后28和42 d进行眼内眦静脉采血并称重。利用放射免疫法测定血浆皮质酮水平,ELISA检测子鼠肠道菌群代谢产物的表达水平,采用Illumina MiSeq测序技术,测定大鼠粪便中微生物16S rRNAV3-V4区序列,并对群落结构和环境因子进行交互分析。结果与对照组比较,模型组、模型+枸杞多糖组母鼠血浆皮质酮水平明显升高(P 0.05)。提示,母鼠在孕期处于不同的应激状态。母鼠在不同应激状态对子鼠体重、皮质酮水平、5–羟色胺(5-HT)、γ–氨基丁酸(GABA)、短链脂肪酸(SCFA)、胆囊收缩素(CCK)含量均具有显著影响(P 0.05);子鼠肠道菌群多样性指数明显不同:乳杆菌科(Lactobacillaceae)、穆氏杆菌科(Muribaculaceae)、普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)在子鼠肠道中相对丰度较大;SCFA和CCK对于物种数据的影响程度最大,GABA和5-HT与食物谷菌科(Victivallaceae)呈负相关(P 0.05),PND42体重与巴斯德菌科(Pasteurellaceae)呈负相关(P 0.05),PND28皮质酮水平与拟杆菌科(Bacteroidaceae)呈负相关(P 0.05)。结论母鼠在不同应激状态下,通过影响子鼠环境因子的表达水平,进而影响子鼠肠道菌群群落结构。     

维生素A缺乏对雌性大鼠生长发育及胚胎影响

目的建立维生素A（VA）完全及边缘缺乏的雌性大鼠模型,观察维生素A缺乏（VAD）对雌性大鼠及胚胎的影响。方法将初断乳SD雌性大鼠60只,随机分为VA缺乏组（AD）、VA边缘缺乏组（AM）、正常对照组（AN）,喂饲VA含量不同的饲料,耗竭性喂养后交配。将交配后的雌鼠在各组内随机分为VA缺乏组（A）、VA缺乏妊娠0d补充组（B）、VA边缘缺乏组（C）、VA边缘缺乏妊娠0d补充组（D）。B、D组于妊娠第0d喂饲补充饲料。于妊娠第19.5d将所有孕鼠处死并观察胚胎发育情况。结果发生AD组雌鼠出现明显的生长发育抑制。A组胚胎全为吸收胎,C组胚胎生长发育明显低于AN及B、C组,而畸胎死胎出现率明显高于AN及B、C组。结论VAD可明显影响雌性大鼠及其胚胎的生长发育,孕期补充VA可有效降低VAD对胚胎的发育毒性。     

母婴交换小鼠模型的孕期雌鼠血浆中存在胎儿脱细胞DNA

胎儿脱细胞DNA(fDNA)可在人类妊娠期血浆中检测到,并在临产后迅速清除。研究观察能否在小鼠模型的血浆中检测到fDNA,并比较妊娠期母体和胎儿的fDNA是否同源。动物为高绿色荧光蛋白(GFP)的转基因小鼠。将小鼠分为4组。组1:8周大的C57BL/6J处女雌鼠与同源GFP+的雄鼠交配。组2:8周大的DBA/2J处女雌鼠与异源的GFP+的雄鼠交配,认为此组中胎儿与母体同源。组3:曾与同源GFP+雄鼠交配过的C57BL/6J的雌鼠,曾产过三四窝小鼠。组4:C57BL/6J雌鼠,曾3次与同源GFP+雄鼠交配,并产下三窝小鼠。组1与组2怀孕后处死,组3与组4在哺乳后期处死…     

姜黄素联合有氧运动对高脂饮食大鼠肠道菌群调节作用研究

目的本研究将姜黄素与有氧运动联合,用于调节高脂饮食大鼠肠道菌群。方法本研究按照随机分组原则,将40只SD野生雄性大鼠分为普通饮食+安静组（C组）、高脂饮食+安静组（H组）、高脂饮食+姜黄素+安静组（J组）、高脂饮食+有氧运动组（S组）和高脂饮食+姜黄素+有氧运动组（U组）,共5组,每组8只。有氧运动方案为：坡度：5°,运动强度：70%最大摄氧量,每次运动60min,每周6次;姜黄素补剂量为200mg/（kg·d）,灌胃时间为运动前0.5h。整个实验周期为8w,最后一次有氧运动结束后24h,取盲肠内容物进行测试。结果（1）与H组相比,姜黄素干预、姜黄素联合有氧运动干预增加了高脂饮食大鼠与C组的OTU组成的相似性。（2）在肠道菌群结构分析中发现：与H组相比,J组、S组、U组大鼠肠道菌群中F/B比值发生变化,并且出现不同程度的下降,其中J组、S组大鼠肠道菌群中F/B比值显著性减少（P<0.05）,U组大鼠肠道菌群中F/B比值无显著性变化（P>0.05）;与U组比较,J组、S组大鼠肠道菌群F/B比值没有显著性变化（P>0.05）。（3）Beta多样性分析中,主要“元素”在三个...     

锌对慢性应激仔鼠学习记忆能力的影响

目的 观察锌对慢性应激仔鼠学习记忆能力的影响.方法 将孕期接受21 d慢性不可预知性温和应激(CUMS)小鼠所生的雄性仔鼠设为模型组,模型+锌组仔鼠在模型组的基础上每天按0.1 mL/10 g体重给予4.55 mg/kg的ZnSO4灌胃,孕期不给任何刺激小鼠所生的雄性仔鼠设为对照组;每组8只,采用Morris水迷宫实验...     

维生素A对小鼠胚胎Hox3.5基因表达的影响

为观察维生素Ａ（ＶＡ）缺乏及再补充对小鼠胚胎ＨｏｘＣ４（３．５）基因表达的影响,将初断乳的６０只昆明种雌鼠随机分为４组：正常对照组（Ｎ）饲含ＶＡ４０００ＩＵ／ｋｇ饲料,其他３组（Ａ、Ｂ、Ｃ组）在交酸前饲缺乏ＶＡ饲料,Ｂ和Ｃ组分别在妊娠的第０和７天饲含ＶＡ１００００ＩＵ／ｋｇ的饲料,Ａ组饲料不变。３０只雄鼠饲以普通饲料,在饲料的第１６周按雌：雄＝２：１合笼交配。在妊娠第１２天脱颈椎处死雌鼠,立即剖腹     

机场噪声对小鼠认知功能及肠道菌群的影响

目的 研究慢性机场噪声暴露对小鼠认知功能及肠道菌群的影响，探讨肠道菌群变化是否介导噪声导致的认知功能下降，为长期飞机噪声暴露人群预防认知功能下降提供科学依据。方法 30只5周龄c57bl/6j小鼠随机分为对照组和噪声暴露组，每组15只，噪声暴露组在最大声压级85 dB，等效连续声压级69 dB的飞机噪声中暴露100 d，对照组置于背景噪声<50 dB的饲养室中。噪声暴露结束后，通过Morris水迷宫实验和旷场实验检测小鼠认知功能水平，16s r DNA测序分析肠道菌群变化，靶向代谢组学测定血清短链脂肪酸（short-chain fatty acids, SCFAs）（包括乙酸，丙酸，丁酸）水平，通过qPCR检测小鼠结肠组织闭合蛋白（CLDN-1），咬合蛋白（Occludin）和闭合小环蛋白（ZO-1）以及脑组织肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-6(interleukin-6, IL-6)、白介素-10(interleukin-10, IL-10)mRNA表达水平。结果 两组小鼠的平均逃避潜伏期均呈下降趋势，机场噪声暴露组的逃避潜...     

孕鼠的铅动员

本实验采用4周成熟的Sprague-Dawley雌鼠。将硝酸铅溶于去矿物质的饮水中,使含铅浓度为1ppm。实验动物分成4组,每组8只雌鼠。对照组(a)只接受去矿物质的饮水,其中4只鼠饮用150天,另外4只鼠饮用200天;(b)组雌鼠从交配前150天(交配雄鼠未经铅处理)直到分娩后3周连续给含铅饮水;(c)组雌鼠只在交配前150天给含铅饮水,而在妊娠期和分娩后都不给铅;(d)组给含铅饮水150天,而从妊娠前50天直到分娩后都不给铅,故该组动物比(b)组和(c)组晚50天处     

母婴交换小鼠模型的孕期雌鼠血浆中存在胎儿脱细胞DNA

胎儿脱细胞DNA（fDNA）可在人类妊娠期血浆中检测到。并在临产后迅速清除。研究观察能否在小鼠模型的血浆中检测到fDNA．并比较妊娠期母体和胎儿的fDNA是否同源。动物为高绿色荧光蛋白（GFP）的转基因小鼠。将小鼠分为4组。组1：8周大的C57BL／6J处女雌鼠与同源GFP＋的雄鼠交配。     

Cloudy Apple Juice Fermented by Lactobacillus Prevents Obesity via Modulating Gut Microbiota and Protecting Intestinal Tract Health

Obesity and hyperglycemia are two serious chronic diseases that are increasing in incidence worldwide. This research aimed to develop a fermented cloudy apple juice with good hyperglycemia intervention activities. Here, cloudy apple juice (CAJ), cloudy apple juice rich in polyphenols (CAJP) and fermented cloudy apple juice rich in polyphenols (FCAJP) were prepared sequentially, and then the effects of the three apple juices on weight, lipid level, gut microbiota composition and intestinal tract health were evaluated for obese mice induced by a high-fat diet. The research findings revealed that the FCAJP showed potential to inhibit the weight gain of mice, reduce fat accumulation, and regulate the blood lipid levels of obese mice by decreasing the ratio of the Firmicutes/Bacteroidotas, improving the Sobs, Ace, and Chao indexes of the gut microbiota and protecting intestinal tract health. In addition, the FCAJP augmented the abundance of Akkermansia and Bacteroides, which were positively related to SCFAs in cecal contents. This study inferred that FCAJP could be developed as a healthy food for preventing obesity and hyperglycemia.     

青春期雌性小鼠抑郁模型的建立及其意义

目的 建立青春期雌性小鼠抑郁模型,为女性青春期抑郁症高发机制研究奠定基础。方法 C57BL/6J 18天雌性、雄性小鼠各16只分别随机分为雌性对照组和雌性组,雄性对照组和雄性组 （n=8）。4组小鼠适应2 d后于第20天测试行为学。雌性组和雄性组自第21天制备3周慢性轻度不可预知应激 （chronic unpredictable mild stress,CUMS） 模型,3周后再对4组进行行为学测试。结果 造模前4组行为学均无统计学差异 （均有P> 0.05）。造模后雌性组较雌性对照组体质量变化、糖水消耗百分比、旷场运动距离及中央区时间、高架十字迷宫开放臂时间减少 （均有P<0.05）,悬尾和强迫游泳不动时间增加（均有P<0.05） ;雄性组较雄性对照组体质量变化、糖水消耗百分比、旷场运动距离及中央区时间减少,强迫游泳不动时间增加 （均有P<0.05）。与造模前比较,雌性组糖水消耗百分比和中央区时间均减少 （均有P<0.05）,悬尾和强迫游泳不动时间均增加（均有P<0.05）;雄性组较造模前糖水消耗百分比减少（t=6.02,P<0.001）,强迫游泳不动时间增加 （t=2.91,P=0.013）。造模后雌性组较雄性组运动距离和开放臂时间均减少 （均有P<0.05）,悬尾和强迫游泳不动时间均增加（均有P<0.05）。结论 成功造模后雌性组较雄性组抑郁样行为更加明显,表明青春期雌性小鼠比雄性小鼠对CUMS更加易感。     

钙对去势骨质疏松大鼠肠道菌群结构的影响

目的研究钙对去势骨质疏松大鼠肠道菌群结构的影响。方法30只SPF级雌性Wistar大鼠,按体重随机分为假手术组、模型组、碳酸钙补充组,去卵巢建立去势骨质疏松大鼠模型。造模1周后开始灌胃,碳酸钙补充组灌胃280mg/mL碳酸钙溶液10mL/kg,钙摄入量为1.34g/kg,其他两组灌胃等量无菌水,每日1次。连续灌胃12周后处死动物,取左侧股骨,用双能X射线骨密度仪测定骨密度;无菌提取粪便DNA,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。结果与假手术组相比,模型组大鼠体重增重显著增加,骨密度显著降低(P<0.05),肠道菌群多样性未见明显变化,厚壁菌门丰度降低,拟杆菌门丰度增加;与模型组相比,碳酸钙补充组大鼠体重增重显著降低,骨密度显著增加(P<0.05),肠道菌群多样性未见明显变化,厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门丰度降低。结论实验周期内补钙能够升高大鼠骨密度,并抑制体重增加,其作用机制可能与调节肠道菌群结构有关。     

孤独症谱系障碍儿童与健康儿童粪便肠道菌群结构及短链脂肪酸的差异性研究

目的 分析孤独症谱系障碍(ASD)儿童与健康儿童粪便肠道菌群结构及短链脂肪酸变化差异,从肠道菌群角度为ASD的防治提供新思路。方法 选取2019年1—11月在江苏大学附属医院被诊断为ASD的25名儿童和同期体检的24名生长发育正常的健康儿童为研究对象,分别为ASD组和对照组。收集其粪便,采用16SrRNA测序分析肠道菌群结构;气相色谱法检测粪便短链脂肪酸含量。结果 与对照组比较,ASD组儿童肠道菌群丰富度(Chao1指数及Ace指数)及多样性(Shannon指数)显著降低,差异均有统计学意义(t=2.917、2.890、3.353,P<0.05);门水平上厚壁菌门、变形菌门丰度显著增高,拟杆菌门丰度明显降低,差异均有统计学意义(t=3.180、5.761、5.970,P<0.05);属水平上拟杆菌属、双歧杆菌属、布劳特氏菌属、链球菌属丰度显著降低,梭状芽胞杆菌属、萨特氏菌属丰度显著增加,差异均有统计学意义(Z=2.440、3.100、3.620、3.500、4.200、4.054,P<0.05);粪便短链脂肪酸中乙酸、丙酸及总短链脂肪酸含量显著增高,丁酸含量显著下降,...     

简单易操作的大鼠CUMS抑郁模型的构建方法

目的本文探讨了简单易操作的大鼠慢性温和应激(CUMS)抑郁模型的构建方法。方法将30只Wistar大鼠随机地分为2组,即实验组和对照组。对实验组大鼠实施潮湿笼子、鼠笼倾斜、明暗颠倒、夹尾、禁食、禁水等6种应激因子,历时50d后,用强迫游泳法来检测模型的构建成功与否。结果强迫游泳法中测得的不动时间于实验组与对照组的大鼠有显著性差异,表明CUMS抑郁大鼠模型构建成功。结论应用简单易制作的应激因子也可以构建出CUMS抑郁大鼠模型。     

孕期铁营养不良对成年大鼠血脂与脂质过氧化影响的实验研究

目的:通过建立大鼠孕期铁营养不良模型探讨孕期低铁干预对成年大鼠脂质过氧化及血脂的影响。方法:将健康Wistar雌性大鼠随机分为二组,实验组(即低铁组)饲喂低铁饲料(含铁7.4 mg/kg);对照组饲喂加铁饲料(含铁274 mg/kg)。与健康成年Wistar雄鼠同笼交配2周(即孕1周)后,开始铁干预至子鼠出生后23周时转至普通颗粒饲料喂养即铁平衡期,持续8个月测定大鼠血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、脂蛋白a[LP(a)]、游离脂肪酸(FFA),血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)。结果:实验组与对照组相比成年期大鼠铁蛋白(SF)、FFA、SOD升高;HDL降低(P<0.05)。结论:孕期铁营养不良可造成成年大鼠对脂代谢的调节能力下降,出现血脂紊乱,促进体内脂质过氧化反应的同时抗氧化酶类SOD活性上升。     

母鼠妊娠前慢性不可预见性应激对子代学习记忆能力及海马突触结合蛋白I和突触结合蛋白IV表达的影响

目的 探讨母鼠妊娠前慢性不可预见性应激(chronic unpredictable stress,CUS)对1月龄子鼠学习记忆能力及大脑海马突触结合蛋白 I(synaptotagmin I,syt I)和突触结合蛋白 IV(syt IV)表达的影响。方法 SD系成年健康雌性大鼠随机分为正常对照组(8只)和CUS组(10只);采用11种刺激方法构建CUS模型;子鼠1月龄时行Morris水迷宫试验;应用Elisa法检测实验动物血清的皮质醇(cortisol,COR)和促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)水平;采用免疫组织化学法检测子鼠大脑海马syt I和syt IV的表达情况。 结果 1)应激结束时和分娩后,CUS组母鼠血清CRH和COR水平均高于正常对照组。2)水迷宫实验中,CUS组子鼠寻找平台潜伏期长于正常对照组子鼠,而穿越平台次数少于正常对照组子鼠,差异有统计学意义。3)1月龄CUS组子代CRH和COR水平均高于正常组子代。4)CUS组和正常对照组子鼠大脑海马syt I和syt IV蛋白表达的平均光密度(MOD)值,只在CA3层和DG层差异均有统计学意义。 结论 母鼠妊娠前CUS会使子鼠的学习记忆能力下降,并使大脑海马syt I和syt IV的表达减少。     

Change in calcium balance and bone mineral density during pregnancy in female rats

This study investigated changes in Ca balance and BMD during pregnancy in female rats. During pregnancy, the intestinal Ca absorption increased significantly, and Ca accumulation was also markedly elevated. However, BMD values for the lumbar spine decreased significantly during pregnancy. Twenty female SD rats, 10 weeks of age (Japan SLC Co., Shizuoka, Japan) were acclimated for 2 weeks. Then, the rats were divided into two groups; the control (no pregnancy) group (n=10) and the pregnant group (n=10). The rats in the pregnant group were kept in a cage with a male rat for 5 days at 12 weeks of age, and all 10 were successfully impregnated. During the pregnancy period, the values for intestinal Ca absorption and the rate of the intestinal Ca absorption in the pregnant group were significantly greater than those of the control group. In addition, in spite of the significant increase in urinary Ca excretion in the pregnant group, the Ca accumulation was markedly elevated during the latter half of pregnancy. On the other hand, the BMD value in the lumbar spine for the pregnant group significantly decreased during pregnancy. These findings suggest that pregnancy accelerated intestinal Ca absorption and Ca accumulation in female rats, while the lumbar spine BMD decreased during pregnancy.     

基于高通量测序的鼠类肠道细菌群落多样性分析

目的 探明鼠类肠道细菌群落组成和多样性.方法 分离鼠类完整肠道并提取总DNA,利用Oxford Nanopore Technologies公司(MK1C)的纳米孔单分子测序技术对其肠道细菌16S rRNA的全区序列进行测序,统计肠道细菌的操作分类单元(operational taxonomic unit,OTU)数量,...     

溧阳市新确诊结直肠癌病例肠道菌群特征研究

目的 探讨溧阳市新确诊结直肠癌病例肠道菌群特征。方法 选取150例新确诊结直肠癌（结直肠癌组）及150例健康体检者（对照组）,提取新鲜粪便中纯化基因DNA后采取聚合酶链反应扩增,采用16S rDNA高通量测序,同时将粪便样本接种于培养基中进行细菌培养,对菌群进行鉴定及计数。结果 结直肠癌患者中男性84例,女性66例,年龄32~75岁,平均（56.88±8.74）岁。NM分期：Ⅰ期26例、Ⅱ期94例、Ⅲb期30例。对照组中男性79人、女性71人,年龄30~68岁,平均（56.73±8.28）岁。2组性别及年龄比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。16S rDNA高通量测序结果,结直肠癌组Shannon指数及Chao指数表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义（均P<0.01）,结直肠癌组患者厚壁菌门丰度低于对照组,拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门、放线菌门丰度值高于对照组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。细菌培养结果显示,结直肠癌组患者肠道内大肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌数量明显高于对照组,双歧杆菌、乳酸杆菌、消化球菌、酵母菌数量明显低于对照组,差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论 溧阳市新诊断结直肠癌患者肠道菌群与健康人群比较多样性明显下降,患者厚壁菌门水平丰度下降,而拟杆菌门、变形菌门、梭杆菌门、放线菌门丰度升高,双歧杆菌、乳酸杆菌等益生菌数减少,大肠杆菌、肠球菌等条件致病菌数量增加。