Slit3/Robo4在大鼠角膜新生血管中的表达

目的：通过研究神经轴突导向因子Slit3及Robo4受体在大鼠正常角膜与新生血管化角膜中的差异性表达,探讨其在角膜新生血管（ corneal neovascularization,CNV）形成中的作用。 方法：采用角膜微囊袋法建立以碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）诱导的大鼠CNV模型,采用眼前段照相,免疫组化染色、彩色图像分析系统分别计算1,4,7,10,14d共5个时间点的CNV面积和Slit3, Robo4的平均光密度值。结果：Slit3及Robo4在新生血管化角膜中表达增加,在第7 d达到最高,且二者的表达水平与 CNV 的面积除第1 d外,在其他各时间点均呈正相关（r=0.84~0.91,P〈0.05）。结论：Slit3/Robo4与CNV形成明显相关,其可能成为抑制CNV的重要靶点。     

卡托普利对大鼠角膜新生血管生长的影响

目的研究血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对角膜新生血管生长的影响。方法缝线诱导角膜新生血管模型，28只SD大鼠随机分为正常对照组、角膜新生血管对照组、卡托普利灌喂组、卡托普利球结膜下注射组。比较第8d各组新生血管并计算生长面积，分别检测血管内皮生长因子(VEGF)在基因和蛋白质水平的表达。结果卡托普利灌喂或球结膜下注射均显著抑制了角膜新生血管的生长，以后者更为明显；免疫组织化学染色，VEGF在正常角膜不表达或在上皮基底细胞有弱表达，新生血管对照组染色明显增强，球结膜下注射组表达明显减弱；VEGFmRNA和蛋白质水平表达有一致性。结论卡托普利球结膜下注射较全身应用更有效地抑制了角膜新生血管的生长，其抑制金属蛋白酶活性可能只是卡托普利治疗角膜新生血管机制的一部分。     

苦参碱对大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的观察苦参碱对大鼠角膜烧伤后新生血管生成的抑制作用。方法选取Wistar大鼠32只,建立碱烧伤角膜新生血管模型,随机分成对照组和3个不同剂量的苦参碱实验组,每组8只(16眼)。模型建立后,实验组大鼠在结膜下注射不同剂量的苦参碱(0.2mg、0.4mg、0.8mg),对照组注射生理盐水,在裂隙灯下动态观察大鼠角膜新生血管生长情况并计算角膜新生血管的面积,观察周期为21d。于造模后4d、7d、14d、21d取不同剂量的苦参碱实验组大鼠角膜进行组织病理学检测,采集各组大鼠的角膜标本,用免疫组化法检测角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,计算其平均光密度值;采用RT-PCR方法检测各组大鼠角膜组织中VEGF mRNA的表达。结果碱烧伤后4d、7d、14d、21d,与对照组相比,各实验组大鼠新生血管面积明显减少,差异均有显著统计学意义(P<0.01);造模后14d时,不同剂量的苦参碱实验组新生血管密度计数(17.83±2.32、11.00±2.37、10.87±2.41)明显低于对照组(21.11±2.14)(P<0.05);各实验组角膜VEGF的平均光密度值均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各实验组VEGF mRNA水平与对照组相比也显著下降(P<0.05)。结论结膜下注射苦参碱对大鼠角膜碱烧伤后的新生血管生长有抑制作用。     

角膜新生血管的发病机制

角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成是角膜化学烧伤、角膜炎等疾病带来的一个难题,严重影响角膜的透明性,最终可导致眼部组织结构的破坏和视功能的损害,是致盲的主要原因之一。随着细胞分子生物学的发展,大量实验研究表明,许多因素参与CNV的形成过程。我们就血管内皮生长因子等主要促角膜血管生长因素及其与CNV的关系作一综述。     

Bevacizumab对大鼠角膜新生血管的抑制作用

目的：评价Bevacizumab抑制大鼠角膜新生血管的效果。 方法：碱烧伤诱导角膜新生血管模型,对20只wistar大鼠40眼随机平均分4组。角膜碱烧伤后分别给予结膜下注射药物溶剂和不同剂量Bevacizumab。比较并计算角膜新生血管生长面积。16d后角膜标本行HE检验和免疫组织化学检测VEGF的表达。 结果：各用药组与对照组新生血管面积比较差异有统计学意义;治疗组间新生血管面积比较差异没有统计学意义。组织学发现各药物治疗组炎性细胞浸润、新生血管形成均明显轻于对照组。新生血管对照组VEGF染色明显增强,药物注射组表达明显减弱。 结论：结膜下注射一定浓度的Bevacizumab对大鼠角膜碱烧伤形成的新生血管有抑制作用。     

角膜新生血管药物治疗的最新进展

角膜新生血管是角膜疾病中一种常见的病理性改变,也是导致视力下降的重要原因。在一系列临床疾病的病理过程中,角膜血管生成因子和抑制因子之间的平衡被打破,继而引发了角膜新生血管。本文主要对国内外角膜新生血管治疗的最新研究进展加以综述。     

SiRNA和角膜新生血管

角膜病是一类严重的致盲眼病,而角膜新生血管(CNV)是角膜化学伤、外伤、感染等多种疾病的共同病理改变.导致CNV形成的原因仍不明确.血管内皮生长因子(VEGF)可能是CNV形成中最主要的血管形成因子.CNV的治疗方法 包括药物、手术和激光等,但效果均不理想.RNA干扰技术给CNV机制研究和治疗带来新的思路.使用siRNA针对恰当的基因靶点产生沉默效应,是治疗CNV的潜在有效途径.     

反应停对大鼠碱烧伤诱导角膜新生血管的影响

目的:研究反应停(thalidomide)对碱烧伤诱导角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的影响。方法:建立大鼠角膜碱烧伤诱导CNV模型,SD大鼠36只随机分成角膜新生血管对照组(A组)、反应停灌胃组(B组)和反应停球结膜下注射组(C组)。采用裂隙灯照相、免疫组化和RT-PCR等方法,检测碱烧伤后各时间点不同处理方法大鼠CNV的生长情况及VEGF的表达情况。结果:B组和C组的角膜新生血管面积和VEGF的表达均显著少于A组(P均(0.05);C组的角膜新生血管面积和VEGF的表达少于B组(P均<0.05)。结论:反应停可有效抑制大鼠角膜碱烧伤诱发CNV的生长,降低角膜新生血管VEGF的表达。球结膜下注射较全身应用更有效。     

Bevacizumab inhibits corneal neovascularization in an alkali burn induced model of corneal angiogenesis

BACKGROUND: New and uncontrolled blood vessel development in the cornea is a pivotal process in the pathogenesis of several corneal diseases. These corneal diseases may finally cause blindness and managing them therapeutically is problematic. The data supporting a causal role for vascular endothelial growth factor in corneal neovascularization are extensive. This study aimed to evaluate the effect of subconjunctival bevacizumab (Avastin) on experimental corneal neovascularization in rabbits. METHODS: Chemical cauterization of the cornea was performed by touching central cornea with a 5-mm-diameter NaOH-soaked cotton applicator for 10 s in 20 eyes of 20 White New Zealand rabbits. The rabbits were then divided randomly into two equal groups. Bevacizumab (2.5 mg) was administered to 10 eyes (group 1) by a subconjunctival injection immediately after chemical cauterization of corneal surface. As a control, 10 eyes (group 2) received an injection of distilled water. Rabbits were examined daily for detection of the first signs of neovascularization. Three weeks later, the extent of corneal neovascularization was evaluated by direct examination and photograph analyses. Total corneal neovascularization area, degree of circumference involved and longest neovascular pedicle length were assessed. RESULTS: Bevacizumab significantly decreased the total neovascularization area (P < 0.009), the circumference involved (P < 0.011) and the longest neovascular pedicle length (P < 0.023). CONCLUSION: Local injection of bevacizumab has a significant effect on inhibition of alkali burn-induced corneal neovascularization. This shows the potential value of bevacizumab in the treatment of corneal neovascularization.     

PXN-pY31、PXN-pY118在小鼠角膜新生血管形成中的表达变化

目的　探讨Paxillin（PXN）-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸在小鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管形成过程中的表达变化。方法　取健康6~8周龄雄性C57BL6小鼠36只,均右眼建立角膜碱烧伤模型为实验组,左眼不作任何处理为对照组,观察碱烧伤后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d 角膜新生血管情况,并行免疫组织化学染色;Western blot 检测实验组碱烧伤后1 d、3 d、5 d、7 d时PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸在角膜中的表达变化。结果　对照组角膜无新生血管生成,PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸在角膜中未见表达。实验组角膜新生血管长度、钟点数及面积随着碱烧伤后时间的延长均呈曲线样改变。免疫组织化学染色检测结果显示,实验组角膜中PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸的表达均较对照组增强,其动态过程与角膜新生血管的发展进程一致。Western blot检测结果示,实验组碱烧伤后3 d PXN-pY³¹,PXN-pY¹¹⁸的表达显著升高;碱烧伤后5 d,PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸的表达达到高峰;碱烧伤后7 d,PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸表达开始下降。碱烧伤后3 d、5 d、7 d时PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸的表达与碱烧伤后1 d相比,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　PXN-pY³¹、PXN-pY¹¹⁸在角膜损伤的病理机制中发挥作用,其表达变化与角膜新生血管的生长情况相关。     

蛹虫草提取物抑制大鼠角膜新生血管的实验研究

目的研究蛹虫草提取物(cordyceps militaris extract,CME)对碱烧伤所致大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用。方法采用碱烧伤法制作大鼠CNV模型,75只大鼠随机分为5组:A组为模型对照组,B组为阳性对照组,C组、D组、E组分别为高、中、低剂量CME治疗组,造模后每组均隔日给药,A组给予生理盐水结膜下注射,B组给予0.5g·L-1地塞米松结膜下注射,C组、D组、E组分别给予10.0mg、5.0mg、2.5mg CME结膜下注射。于造模后第4天、第8天、第14天测量CNV的生长面积,并检测角膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)蛋白及其mRNA的表达情况。结果造模后第4天,C组、D组、E组的CNV面积分别为(4.23±1.62)mm2、(6.15±3.52)mm2、(7.78±1.33)mm2,第8天分别为(6.89±1.93)mm2、(10.19±3.37)mm2、(11.51±3.70)mm2,第14天分别为(12.55±3.96)mm2、(17.14±2.71)mm2、(19.77±5.75)mm2,均较A组(12.03±2.09)mm2、(22.09±4.24)mm2、(25.19±2.22)mm2明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05);C组与B组表达水平相当,差异无统计学意义(P>0.05)。C组、D组、E组角膜组织中VEGF蛋白及其mRNA的表达较A组明显减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05);C组与B组表达水平相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CME能有效抑制碱烧伤所致大鼠CNV的形成,抑制角膜组织中VEGF的表达可能是其抑制CNV生长的机制之一。     

角膜碱烧伤后VEGF的表达与新生血管的关系

目的研究碱烧伤后角膜血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF）的表达与角膜新生血管化的关系。方法30只Sprague-Dawleg（SD）大鼠碱烧伤，诱导角膜新生血管模型。碱烧伤后不同时间形态学分析来评价角膜新生血管的情况，免疫组化及Westem blot评价角膜VEGF的表达。结果角膜碱烧伤后24hVEGF的表达开始增高，伤后4d达高峰，伤后7d VEGF的表达下降，14d后显著下降。碱烧伤后，角膜新生血管与VEGF的表达呈明显的平行关系。结论碱烧伤后大鼠角膜VEGF的表达水平与新生血管的形成有相关性，并在其中发挥重要作用。     

Bevacizumab (Avastin)抑制角膜新生血管的应用新进展

诱发角膜新生血管的因素涉及各种生长因子。研究表明:在角膜新生血管中广泛存在的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)起着主要作用。一种可行的治疗角膜新生血管策略是:通过特异性的中和抗VEGF抗体竞争性的结合VEGF,从而抑制VEGF活性。近年来,利用抗VEGF治疗策略,抑制脉络膜新生血管获得了很好的效果。靶向VEGF治疗药物的疗效和安全性已经证明。因此我们设想,局部应用新的抗VEGF药物,如贝伐单抗、兰尼单抗等可以有效地抑制角膜新生血管,恢复角膜透明和视力。     

医用几丁糖对角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用

目的观察医用几丁糖对角膜碱烧伤后新生血管的抑制作用。方法NaOH烧伤兔角膜制作角膜碱烧伤模型,随机分为碱烧伤组（碱烧伤）和几丁糖组（碱烧伤＋2％医用几丁糖滴眼）。分别于1、4．7、14d观察两组兔角膜新生血管生长情况,HE染色计算多形核粒细胞（PMN）数量,兔疫组化染色测定血管内皮生长因子（VEGF）的活性。结果几丁糖组新生血管较碱烧伤组生长缓慢,PMN计数及VEGF表达较碱烧伤组均明显减少。结论医用几丁糖可抑制碱烧伤后角膜新生血管的形成。     

血管内皮生长因子及其受体通道与角膜新生血管的关系研究进展

角膜新生血管(CNV)性疾病是目前致盲的主要原因之一,抑制CNV形成是挽救角膜盲患者视力,提高患者生活质量的重要途径之一.血管内皮生长因子(VEGF)及其受体通道是国内外新生血管性疾病的研究热点,是CNV形成的调节通道之一,是目前公认的较强的血管生长因子.对VEGF及其受体通道、其促血管生成机制、通过抑制VEGF及其受体通道来抑制CNV的研究现状及前景做一综述.     

Inhibition of corneal neovascularization by topical application of nintedanib in rabbit models

AIM: To evaluate the potential efficacy and mechanisms of nintedanib in corneal neovascularization (NV) in rabbit models. METHODS: Corneal NV was induced using 1 mol/L NaOH. Rabbits (n=21) were randomized to 3 groups: Group 1 were treated with 0.9% NaCl, Group 2 with Avastin (5 mg/mL), and Group 3 with nintedanib (1 mg/mL). All treatments started 1d after alkaline burns and were topically performed 3 times a day for 2wk. Photographs were taken on a slit lamp microscope on day 7 and 14. The NV area, the length of the vascularization and angiogenesis index (AI) were used to evaluate the corneal NV. On day 14, the immunohistochemical (IHC) studies of the cornea were examined. Western blot was performed to test the expression levels of vascular endothelial growth factor (VEGF), Akt, p-Akt, P38, p-P38, MMP-2 and MMP-9. RESULTS: The corneal NV area, vessel length and AI in Group 3 were significantly lower than Group 2, with both being lower than Group 1. IHC staining showed that VEGF was significantly overexpressed in the epithelium and stroma of cornea following alkaline burns. In contrast, the level of VEGF was significantly suppressed in both Group 2 and Group 3. Western blot results further confirmed that, compared with Group 1, Group 3 had significantly reduced expressions of VEGF, Akt, p-Akt, p-P38, MMP-2, and MMP-9 in corneal tissues. Trends of lower levels of MMP-2, AKT, and p-AKT in Group 3 than Group 2 were identified. CONCLUSION: Nintedanib and Avastin can effectively inhibit corneal NV, with P38 MAPK and AKT signaling pathways being possibly involved. Nintedanib seems more effective than Avastin and has the potential to be a novel therapy for preventing corneal NV.     

大鼠角膜化学伤后PEDF和VEGF的不平衡表达

目的比较硝酸银化学伤后大鼠角膜和正常角膜色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达水平，揭示两者与角膜新生血管的相关性。方法10只大鼠左眼角膜硝酸银化学伤后为实验组，右眼为正常对照组，伤后15d行免疫组织化学法定位及Western blot定量检测样本角膜PEDF、VEGF等的表达。结果免疫组织化学检查：实验组角膜VEGF、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）强表达，PEDF未见表达或弱表达。正常组角膜PEDF高表达，VEGF弱表达，bFGF几乎不表达。Western Blot分析：实验组角膜PEDF表达明显下降（t=8．0049，P〈0．01），VEGF表达显著升高（t=48．3637，P〈0．01）。结论角膜严重化学伤后新生血管抑制因子PEDF破坏，刺激因子VEGF产生增加，PEDF／VEGF比值降低，角膜血管新生。     

维替泊芬介导的光动力疗法治疗兔眼角膜新生血管

目的:旨在探讨和评估光敏剂维替泊芬(vertporfin)介导的光动力疗法(PDT)对角膜新生血管(CoNV)治疗的效果。方法:新西兰白兔随机分为2组:两组采用角膜基质层缝线的方法诱导CoNV形成。Ⅰ组行vertporfin-PDT治疗CoNV,verteporfin以1.5mg/kg静注。Ⅱ组不治疗,为阳性对照。治疗后裂隙灯显微镜观察CoNV变化并记录面积,取处理组及对照组的角膜、虹膜睫状体组织,行组织病理学检查,免疫组织化学(SABC法)检测血管内皮生长因子(VEGF)在角膜组织中的表达。结果:治疗后3d;1,2wk,Ⅰ组CoNV面积均明显小于Ⅱ组(P<0.01)。组织病理学检查显示,Ⅰ组CoNV管壁破坏,形成血栓。VEGF的表达Ⅰ组明显低于Ⅱ组(P<0.01)。结论:Vertporfin-PDT对兔模型眼CoNV有明显的抑制作用,不损伤邻近的正常血管及组织。     

血管内皮生长因子与角膜碱烧伤后血管新生

目的　探讨血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管形成中的作用。方法　利用氢氧化钠烧灼大鼠角膜表面,建立大鼠角膜新生血管(CNV)模型,每日裂隙灯下观察角膜新生血管的发展,并分别于烧伤后1、4、7、14、2 1d处死大鼠,摘除角膜作病理切片,多形核白细胞(PMN)计数;免疫组化法检测VEGF的表达;图像分析系统测定该因子的蛋白表达。结果　光镜下显示正常组PMN记数为0 . 5 0 0±0 . 62 9,烧伤后1d角膜缘处的PMN开始增多,7d时增加最明显,此后逐渐减少;免疫组化显示:VEGF在CNV中阳性表达逐渐增加,于7d组表达最明显,2 1d后几乎无表达;图像分析与免疫组化结果一致。结论　碱烧伤后CNV形成中,VEGF的表达增加,并与角膜的炎性反应程度平行,PMN浸润可能是CNV形成的关键因素。