ELISA法检测HBsAg实验条件的优化

目的探讨温度、孵育时间、振荡对ELISA法检测HBsAg的影响,以期进一步优化检测条件。方法采用HBsAg含量约为1ng/mL的血清标本,在4种不同条件(37℃振荡、37℃不振荡、25℃室温震荡、25℃室温不振荡)下的3个不同反应时间(10、20、30min)测定HBsAg,记录吸光度值。结果除10min37℃不振荡和25℃不振荡差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组差异都有统计学意义(P<0.05)。结论 37℃振荡20min为ELISA检测HBsAg的较佳条件。     

HBsAg胶体金法与ELISA法对比分析

目的 比较胶体金免疫层析(GICA)法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBsAg结果的差异.方法 1 211例血清标本用GICA法和ELISA法测定.结果 1211例HBsAg测定GICA法阳性186例,阳性率15.4％;ELISA法阳性191例,阳性率15.8％;经x2检验,x2=2,P＞0.05,GICA法与ELISA法检测HBsAg无差别,1 211例血清标本GICA法漏检5例.结论 在HBsAg检测工作中酶标仪判读后有疑问的结果,再配合GICA法检测,以保证结果的准确性.     

RIA检测ELISA HBsAg灰区标本204例结果分析

目的探讨放射免疫法(RIA)对ELISA测定乙肝表面抗原灰区标本的乙肝标志物的检测结果。方法采用RIA方法对经ELISA检测HBsAg临界值以下的部分标本进行乙肝5项检测。结果 RIA方法 HBsAg阳性率为49.02%,有85.29%的标本检出了各类HBV的标志物;按照标志物组合模式计以HBsAg抗-HBe抗-HBc阳性(小三阳)最多(34.80%)。结论受方法学限制,ELISA测定乙肝表面抗原存在一定的漏检率,采用高灵敏度的RIA方法可在一定程度上减少漏检的机会。     

ELISA检测HBsAg洗板方法的探讨

目的探讨酶联免疫试验(ELISA)检测HBsAg的最佳洗板次数和方式,试图找到一种实用、可靠的ELISA洗板方法。方法选择50例HBsAg阴性体检者完全分离后的血清为检测对象,分别进行3～7次洗板,得到阴性数和假阳性数,得出最佳洗板机洗板次数;收集同一批号试剂盒的阴阳性标准品及质控品,将质控品平行检测31孔,共2板分别用手工和洗板机2种方法各洗板7次。结果不同洗板次数的结果差异有统计学意义,且洗板7次假阳性率最低;2种洗板方式测定值结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论洗板7次能达到理想的洗板效果;对标本量少或无洗板机的基层医院可采用标准化手工洗板的方式。     

ELISA法检测抗HAV-IgM假阳性合并HBsAg假阳性1例

<正>资料与方法患者男,63岁,以慢性腹泻一年多,加重十余天入住本院消化内科。入院时身高167cm,体重48kg,血压125/86mmHg(1mmHg=0.133kPa),心率96次/min。B超和CT检查提示肝硬化,门静脉高压,脾大,腹水。心电图提示窦性     

ELISA检测HBsAg影响因素探析

ELISA方法具有简便、灵敏度高、特异性强等特点而被广泛应用,成为目前检测HBsAg的常用方法。但ELISA进行HBsAg检测时易受试剂、标本、操作等诸多因素影响出现假阳性或假阴性结果,因此应从以下几方面加强监测,减少错误结果的产生。     

溶血标本对ELISA法检测HBsAg结果的影响及消除对策

ELISA法仍然是国内检测HBsAg的常用方法之一,但实验操作中各个环节对实验结果影响较大,特别是以辣根过氧化物酶（HRP）为标记的酶结合物的试剂检测HBsAg时,溶血标本可导致假阳性结果,从而影响临床诊断和治疗,给患者带来不必要的经济损失和精神负担。本组通过对大批量标本进行HBsAg的筛查也同样发现溶血标本对检测结果的影响较大,特别是对弱阳性结果影响更为明显。同时,其他因素（如采血过程、洗板不干净等）也可出现假阳性。通过对弱阳性结果标本的重新测试,探讨标本质量对ELISA结果的影响及消除假阳性的对策。     

ELISA法测定HBsAg临床研究

为了解临床日常工作中 EL ISA法检测 HBs Ag误诊误报情况 ,笔者对 1998- 0 1～ 1999- 12河南周口部分地区无偿献血者、临床住院患者、中学生等 480 85份血清标本 ,在相同的实验条件下分别用两种不同厂家试剂平行检测 ,现将结果报道如下。1　对象和方法1.1　对象　血站无偿献血者血清 2 2 0 0 0例份 ,周口地区人民医院患者血清 3838例份 ,周口地区高考体检学生血清 2 2 2 47例份。1.2　试剂与仪器　 HBs Ag EL ISA试剂盒由河南理利生物技术公司、厦门新创科技公司和上海实业科华生物技术公司提供 ;试剂盒均经过国家批批检 ,并在有效期…     

维生素C对ELISA法HBsAg测定的影响

目前,测定HBsAg的方法大多采用ELISA法中的双抗夹心法双位点一步法,是基于待测抗原在固相抗体和酶标抗体间的桥接作用,在一个ELISA测定体系中,同时加入待测标本（含抗原）、酶标抗体,它们之间则会产生多种结合模式,只有固相抗体-待测抗原-酶标抗体是要测定的目的结合物,其中酶标抗体大多为辣根过氧化物酶,此酶具有很强的氧化性,与还原性强的维生素C可发生强烈的化学反应,使辣根过氧化物酶失去活性,使酶的媒介作用减弱,从而使方法的灵敏度降低.     

增加洗板次数对HBsAg ELISA检测结果的影响

酶联免疫试验因其操作简单、灵敏度和特异性较高，现已被广泛应用，但影响酶免试验结果的因素较多，如加样量、洗板、温度和温育时间，控制不严就会影响试验结果，特别是洗板因素，许多实验室设定洗板次数的随意性较大。通过比较由同一人使用同一洗板设备经不同洗板次数后的两种质控物的检测结果，发现增加洗板次数对HBsAg ELISA检测结果的影响较大，报告如下。     

乙型肝炎表面抗原ELISA检测假阴性样本的分析

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)测定乙型肝炎袁面抗原(HBsAg)为假阴性的样本,以微粒子酶免发光法(MEIA)来检测并进行确认,提供一个处理ELISA检测HBsAg产生假阴性的方法.方法 选定武汉亚洲心脏病医院2007年8月～2008年10月ELISA测定乙型肝炎血清学标志物的样本3 831例,收集其中单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性和/或乙型肝炎e抗体及抗-HBc同为阳性而HBsAg、乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎e抗原均为阴性的样本,符合条件的76例样本入选,所有入选的样本均用MEIA法进行HBsAg检测,并对检测为阳性的样本进行抗体中和确认试验确认.结果 76例样本中,经MEIA法检测HBsAg为阳性的样本49例,占64.5％;经抗体中和确认试验确认为阳性的样本3-3例,占43.4％.结论 ELISA检测HBsAg弱反应性样本的漏检率很高,需用更好的检测手段来确认.     

乙肝病毒抗原在离体全血中衰减引起假阴性

目的 探讨离体全血中的细胞成分对乙肝抗原HBsAg和HBeAg的免疫学检测影响.方法 收集80人份HBV携带者血样.每人血样分为3份,一份在离体后迅速离心祛除细胞成分,另一份在离体后3 h离心祛除细胞成分,还有一份在离体后12 h离心祛除细胞成分.分别以夹心ELISA试验及RIA试验定性、定量检测3份血样中的HBsAg和HBeAg水平,井进行成对资料的t检验分析.结果 HBsAg和HBeAg在较高浓度时,同一来源的36份血样中抗原含量无明显差异;而HBsAg和HBeAg处于较低浓度时,3份血样中抗原含量差异明显,细胞成分祛除较晚的血样中抗原水平明显较低.结论 作为外源性病原体抗原,HBsAg和HBeAg因抗原代谢作用而在离体全血中持续衰减,这种衰减可能导致一些乙肝携带者的假阴性检测.     

ELISA检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因分析

乙肝病毒表面抗原(HBsAg)为乙肝病毒感染的最重要的病原标志和直接证据之一.ELISA即酶联免疫吸附试验,是以一种最常用的固相酶免疫测定方法.Engrall和 Perlmann年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为enzyme linked immunosorkent assay(ELISA).由于ELISA方法灵敏,特异性强,不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体的测定[1].但ELISA测定中影响因素较多,操作中的各个环节对试验的检测结果影响较大,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误的结果(即假阳性或阴性结果).对我院自2008-2010年检测的乙肝标志物156例乙肝病毒表面抗原阳性标本进行分析如下.     

HBsAg ELISA试剂对亚型检出能力的分析

目的考查HBsAg ELISA试剂对乙型肝炎病毒（HBV）亚型弱阳性标本的检出能力,减少血站HBsAg弱阳性标本的漏检,提高试剂对弱阳性标本检测结果的一致性。方法用国家参考品的HBV亚型定值血清对ELISA试剂进行考核。结果国产和进口试剂对HBV亚型最低检出量的检出能力均符合国家标准,进口试剂对HBV亚型最低检出量的检出能力强、灵敏度高。结论国产与进口HBsAg ELISA试剂的灵敏度存在差距。     

HBsAg两步法酶免国产试剂与进口试剂检测结果对比分析

目的 评价国产HBsAg两步法酶免试剂,为实验室选择优质可靠的试剂提供依据.方法 收集550份血清标本用美国伯乐超敏MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂检测HBsAg,分成MONOLISA检测阳性组(68例)和MONO-LISA检测阴性组(482例),分别用六种国产HBsAg两步法酶免试剂复检,分析六种国产试剂的灵敏度和特异度.再将2IU/ml HBsAg标准品按1∶2方法系列稀释成5个稀释度,用MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂和六种国产试剂检测,考核各试剂的分析灵敏度.结果 MONOLISA检测阳性组(68例)中,国产试剂A,B和E结果相吻合,国产试剂C和D有1例漏检(x2=0.015,P＞0.05);MONOLISA检测阴性组(482例)中,国产试剂A有1例假阳性(x2=0.002,P＞0.05),国产试剂B和E有3例假阳性(x2=0.002,P＞0.05),国产试剂C和D有4例假阳性(x2=0.002,P＞0.05);国产试剂F多次出现“花板”现象,实验失败,不作统计.检测2IU/ml HBsAg标准品系列稀释物,MONOLISA HBsAg ULTRA ELISA试剂分析灵敏度可达0.062 5 IU/ml,国产试剂A,C和D分析灵敏度可达0.25 IU/ml,国产试剂B和E可达到0.125 IU/ml.结论 大部分采用两步法的国产HBsAg酶免试剂灵敏度和特异度能满足临床需求,但仍不及进口试剂,个别小品牌试剂性能不佳.     

ELISA法检测HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认结果分析

目的 探讨ELISA法检测HBsAg结果判定灰区设置的必要性,以及中和试验对HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认情况.方法 采用两个不同厂家生产的ELISA HBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,对检测结果在0.7≤S/CO＜1或单试剂为反应性的标本,再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1孔结果仍在灰区内或仍为反应性,留取标本做HBsAg中和试验确证.结果 136例灰区标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本10例,阳性率为7.35％,结果异常标本14例;159例单试剂反应性标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本19例,阳性率为11.95％,结果异常标本16例.灰区与单试剂反应性样本阳性率的差异没有统计学意义;S/CO值在0.70～0.79区间、0.80～0.89区间、0.90～0.99区间的阳性率有逐渐升高的趋势,但差异无显著性;双试剂灰区的阳性率高于单试剂灰区的阳性率,但差异无统计学意义.结论 对HBsAg灰区和单试剂反应性标本,ELISA检测漏检率较高,应结合自己实验室实际设置合适的灰区,最大限度地检出这些可疑标本,并进行确认实验,进一步减少HBsAg漏检和误检率,以提高输血安全,同时避免血源的浪费.     

乙型肝炎表面抗原酶联免疫法检测试剂的性能评价

目的对我室使用国产乙型肝炎表面抗原酶联免疫法（ELISA）检测试剂进行性能评价。方法用ELISA法使用国产试剂检测国家参考品（n=33）、临床科研血清盘（n=40）及临床标本（n=270）,判断其是否符合国家检定标准,并分析其真实性、可靠性和收益指标。结果检测国家参考品的阴性符合率为100%（20/20）,阳性符合率为100%（3/3）,三种亚型的最低检出量均为0.5ng/mL;其真实性指标：灵敏度、特异性、粗一致性和约登指数（Youden）分别为96.88%、99.45%、98.39%和0.96;可靠性指标：变异系数（CV）和Kappa值分别为5.2%和0.96;收益指标：阳性预测值与阴性预测值分别为99.20%和97.84%。结论国产试剂性能评价结果优质,适用于临床标本检测。     

46例平板运动试验假阳性假阴性原因分析

探讨平板运动试验 (TET)假阳性 ,假阴性的原因。方法　选择本院 1997～ 1999临床拟诊冠心病均行TET及冠状动脉造影 (CAG)的住院患者 2 78例。结果　假阳性 (TET阳性而CAG阴性 ) 32例 ,其中植物神经功能紊乱、11例 ,高血压病 9例 ,糖尿病 6例 ,其它疾病 6例。假阴性 (TET阴性而CAG阳性 ) 14例。其中冠脉单支病变 12例 ,双支和三支病变各 1例。结论　TET如能排除植物神经功能紊乱 ,高血压病、糖尿病等因素的影响 ,对提高诊断冠心病的准确性有较高的价值。     

低水平HBsAg 3种方法检测结果比较

目的探讨同一公司国产一步法和二步法酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂的敏感性。方法使用同一公司国产一步法和二步法ELISA试剂检测HBsAg,并与化学发光微粒子免疫分析(CMIA)法检测结果进行对比。结果 90例CMIA法检测结果为阴性的样本,一步法和二步法ELISA检测HB-sAg结果均为阴性;61例CMIA法检测结果为低水平HBsAg样本,一步法ELISA检测阳性15例,二步法ELISA检测阳性46例,二步法ELISA HBsAg试剂比一步法ELISA敏感性明显提高(P<0.01);一步法ELISA在CMIA法检测数值在2.50U/mL以上的检出率与CMIA法保持一致;二步法ELISA在CMIA法检测数值在0.50U/mL以上的检出率与CMIA法保持一致;二步法ELISA检出率在CMIA法检测数值小于或等于0.50U/mL时明显低于CMIA法(P<0.01)。结论二步法ELISA试剂比一步法ELISA试剂检测HBsAg的敏感性明显提高,但在低水平HBsAg检测时敏感性低于CMIA法。     

酶联免疫技术检测乙肝表面抗原的分析性能评价

目的 评价ALISIE 和 BEPⅢ两台仪器检测乙肝表面抗原(HBsAg)的分析性能和结果的一致性,探讨已知诊断定性实验的性能评价方法.方法 参照临床实验室标准化协会(CLSI)发布的EP12-A2文件对定性试验酶联免疫吸附测定(ELISA)HBsAg的检测进行性能评价,临界值分析物±20%范围的重复性和灵敏度、特异度...