HPLC-MS/MS测定小鼠组织中氧化苦参碱和苦参碱含量

目的 建立HPLC-MS/MS测定小鼠肝、心、脾、肺、肾组织中氧化苦参碱和苦参碱浓度的方法.方法 利用肝脏组织进行了提取方法的研究,考察了提取溶剂、提取温度、匀浆配比等对氧化苦参碱提取回收率的影响;测定以非那雄胺为内标,用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测氧化苦参碱和苦参碱.结果 组织-水为1:10,在冰水浴中匀浆,以2%正丁醇氯仿混合溶剂的液-液萃取法处理样品;氧化苦参碱和苦参碱线性范围均为4～2 000 ng·ml~(-1);定量下限均为4 ng·ml~(-1);各组织方法回收率均在87.1%～110.3%;批内、批间精密度＜14%;提取回收率>58.6%.结论 该含量测定方法准确、灵敏、简便、省时,适用于小鼠各脏组织中氧化苦参碱和苦参碱的含量测定.     

苦参碱和氧化苦参碱体外对肿瘤细胞增殖的影响

目的:比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制多种肿瘤细胞增殖的效果并初步探讨其构效关系。方法:不同剂量苦参碱与氧化苦参碱处理细胞,MTT法观察细胞增殖抑制,计算半数抑制浓度(IC₅₀)。结果:氧化苦参碱对大多数肿瘤细胞的IC₅₀均低于苦参碱,推测其抗肿瘤活性要大于苦参碱,原因可能与二者的分子构象差异有关。     

苦参碱对小鼠免疫器官的影响

目的 观察苦参碱(MT) 对昆明小鼠免疫器官的影响.方法 将40只昆明小鼠分为苦参碱组、5-Fu组、苦参碱+5-Fu组和生理盐水(NS)阴性对照组.给药组小鼠分别按40,30,20+30 mg/kg腹腔注射给药.计算不同组别小鼠的胸腺指数,脾脏指数和肝脏指数,并进行病理组织学观察.结果 苦参碱组小鼠的胸腺、脾脏和肝脏指数均无显著变化(P>0.05);5-Fu组小鼠胸腺和脾脏指数均显著降低(P<0.01);苦参碱+5-Fu组小鼠的胸腺指数与对照组相比显著降低(P<0.01).病理组织学光镜观察结果显示,苦参碱组小鼠胸腺和脾脏没有明显的萎缩和破坏,肝脏组织无明显病理变化.结论 苦参碱可以拮抗5-Fu对脾脏的免疫抑制,使脾脏指数增加.     

氧化苦参碱对神经痛小鼠坐骨神经功能的修复作用研究

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对神经性疼痛小鼠坐骨神经功能的修护作用。方法:将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组(慢性坐骨神经结扎)和氧化苦参碱组;氧化苦参碱组小鼠腹腔注射OMT,150 mg/kg,给药7 d,假手术组和模型组小鼠腹腔注射生理盐水;Von Frey纤毛笔检测各组小鼠的机械缩足反射阈值;计算坐骨神经功能指数并测定其传导速度观测坐骨神经功能恢复情况;qRT-PCR法检测各组小鼠坐骨神经IL-1βmRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA的表达;ELISA法检测各组小鼠坐骨神经IL-1β、IL-6和TNF-α炎性因子的含量。结果:氧化苦参碱组小鼠机械缩足反射阈值、坐骨神经功能指数及其传导速度均明显高于模型组;氧化苦参碱组小鼠坐骨神经IL-1βmRNA、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA表达及蛋白含量均显著低于模型组。结论:氧化苦参碱对慢性坐骨神经结扎小鼠坐骨神经的功能损伤有一定的修护作用,其作用机制可能为减轻炎症反应所致坐骨神经损伤。     

苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用研究进展

苦参碱和氧化苦参碱具有多方面药理活性。目前国内外关于苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究表明,二者通过抑制肿瘤细胞DNA的合成、影响肿瘤细胞的正常周期来抑制肿瘤细胞的增殖;通过影响与肿瘤细胞相关基因的表达、抑制相关酶的活性等诱导肿瘤细胞发生凋亡。因此,苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究受到了极大的关注。就近年来对苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究进行简要概述,综述其对各种癌细胞的抗肿瘤作用机制。     

离子交换树脂分离纯化山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的实验研究

目的研究建立离子交换树脂柱纯化分离山豆根中苦参碱和氧化苦参碱方法。方法山豆根经醋酸溶液浸泡水提后,采用732型阳离子交换树脂柱分离纯化。以苦参碱和氧化苦参碱含量为指标,考察以乙醇溶液、盐酸溶液等不同洗脱剂的分离纯化效果。结果经过优选,分离纯化最佳条件为:样品过柱流速为0.7mL/min,水洗至中性后,以2倍柱体积12%盐酸溶液为洗脱剂洗脱杂质,再以100mL 20%盐酸溶液震荡解吸1h。结论优选建立的山豆根离子交换树脂纯化步骤简便实用、成本低,回收效率高,且对环境及操作者无伤害,为山豆根药材有效组分分离和含量检测奠定了基础。     

苦参碱和氧化苦参碱的转化对苦参提取工艺的影响

目的考察苦参不同提取工艺过程中苦参碱和氧化苦参碱相互转化的影响。方法采用RE-HPLC测定不同提取工艺中的苦参碱和氧化苦参碱的含量。结果在选择的几种提取工艺中,氧化苦参碱有向苦参碱转变的趋势。结论在苦参的提取过程中,苦参碱和氧化苦参碱的转化对苦参提取工艺造成了影响。     

氧化苦参碱对病毒性心肌炎小鼠的作用研究

目的:观察氧化苦参碱对病毒性心肌炎(EMCV)小鼠的作用。方法:60只4周龄Balb/c小鼠完全随机分为空白、对照组及高、低OMT剂量组(n=15),空白组予以腹腔接种病毒原培养液,余组腹腔接种CVB3制成病毒性心肌炎模型,7d后予以高、低剂量组给于OMT灌胃10d,期间观察小鼠的生存率,并留取心脏组织,观察病理改变。结果:氧化苦参碱治疗使小鼠的17d生存率明显改善(P0.05);小鼠心脏/体重比值显著改善(P0.05);小鼠左心室坏死和炎症细胞浸润面积明显减少(P0.05)。结论:氧化苦参碱具有明显的减轻心肌炎症和损伤的作用。     

高效毛细管电泳法测定苦参碱和氧化苦参碱

建立了测定苦参碱和氧化苦参碱含量的高效毛细管电泳法。２０ｍｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲液为电泳电解质,电压为３０ｋＶ（运动电充为１００－１１０μＡ）,检测波长为２１４ｎｍ,内标氨茶碱。苦参碱０．１２６－１．２６ｍｇ／ｍＬ,氧化苦参碱０．１０－１．０ｍｇ／ｍＬ其浓度与峰面积之比呈良好的线性关系,ｒ均为０．９９９８,日内,日间变异系数均小于５．７％,常用２２种药物除地塞米松外其余的对其无干扰。     

苦参碱和氧化苦参碱致HL7702细胞毒性研究

目的:探讨苦参碱和氧化苦参碱在体外对人正常肝细胞(HL7702)的影响。方法:①采用MTT法检测苦参碱和氧化苦参碱对肝细胞活力的影响;②采用光镜对给药后的细胞形态进行观察;③检测给予苦参碱和氧化苦参碱后,肝细胞培养上清液中的肝功能指标(ALT、AST、ALP、LDH)。结果:①MTT法显示,2.5~5mg/mL的苦参碱对HL7702细胞有明显的抑制作用(P<0.01),5mg/mL的氧化苦参碱能够显著性降低肝细胞活力(P<0.05);②光镜结果显示,给予苦参碱和氧化苦参碱后,细胞出现皱缩,变圆,体积变小,亮度增加,且药物浓度越大,呈现此状态的数目越多,苦参碱对HL7702细胞形态的影响大于氧化苦参碱;③5mg/mL的苦参碱和氧化苦参碱均能明显升高细胞上清液中的AST、ALP、LDH水平(P<0.01或P<0.05),相同剂量苦参碱的上清液中AST、ALP、LDH水平的升高程度大于氧化苦参碱。结论:苦参碱和氧化苦参碱对肝脏可能具有毒性作用,且苦参碱的肝毒性作用大于氧化苦参碱。     

苦参碱及氧化苦参碱抗肝纤维化研究进展

苦参碱类生物碱是从中蒙药苦参Sophora flavescens Ait.干燥根中提取的一类活性物质,包括苦参碱(matrine,MAT)、氧化苦参碱(Oxymatrine,OXY)等多种成分〔1〕。其中对苦参碱、氧化苦参碱的研究最为深入广泛,其化学式分别为C15H24N2O及C15H24N2O2,属于四环的喹嗪啶类,分子骨架可看作2个喹嗪啶环的杂体。所谓苦参素是从中蒙药苦参提取得到的生物碱类,其主要成分为氧化苦参碱〔2〕。苦参碱类作为一种传统的中蒙药成分在抗炎、抗心律失常、抗肿瘤方面有重要应用价值,但在最近的研究结果表明其对于肝纤维化的防治也有明显的作用。有关苦参…     

HPLC同时测定云香精中苦参碱和氧化苦参碱含量

目的建立同时测定云香精中苦参碱和氧化苦参碱含量的方法。方法高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX-NH2（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为无水乙醇-乙腈-3%磷酸溶液（9∶82∶9）,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm。结果苦参碱和氧化苦参碱线性范围分别为0.08～0.60、0.30～2.25μg,平均加样回收率分别为100.09%、100.10%,RSD分别为1.50%、1.55%。结论本方法准确、可靠、重复性好,能同时测定云香精中苦参碱和氧化苦参碱的含量,可用于云香精的质量控制。     

苦参碱及氧化苦参碱抗肿瘤作用的研究进展

苦参是豆科植物苦参的干燥根,作为其主要成分的苦参碱和氧化苦参碱具有抗炎、抗心律失常及抗病毒的功效.其还具有肿瘤杀伤作用,其抗肿瘤活性主要表现在抑制肿瘤细胞的增殖转移、诱导肿瘤细胞的分化与凋亡,抑制端粒酶的活性、抑制肿瘤新生血管的形成、抑制肿瘤耐药性及促进宿主抗肿瘤免疫反应等.此外研究证实,苦参碱和氧化苦参碱在临床上能明显改善患者的恶病质状态,提高患者生活质量.通过对苦参碱及氧化苦参碱的对比研究发现,两者由于分子构象差异使得氧化苦参碱的药理活性要大于苦参碱,因而加强对氧化苦参碱的研究是有必要的.苦参碱及氧化苦参碱为天然植物药物,疗效切实,进一步的研究将会为新药的研发及应用提供有价值的方向.     

HPLC测定湿疹康喷剂中苦参碱与氧化苦参碱的含量

目的：采用不同纯化方式和优化色谱条件建立湿疹康喷剂中苦参碱与氧化苦参碱的测定方法。方法：分别采用浓氨水碱化后三氯甲烷萃取方法、AB-8大孔树脂方法、中性氧化铝吸附方法纯化样品,通过HPLC进行含量测定,确定最佳纯化工艺;采用氨基硅烷键合硅胶柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相分别为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（80∶10∶10）、乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（80∶12∶8）;检测波长为220 nm。结果：苦参碱的线性范围为Y=646567X＋8332.1（r=0.999 9）;氧化苦参碱的线性范围为Y=501 596X-414 182（r=0.9994）。结论：三种不同纯化方式中,浓氨水碱化后三氯甲烷萃取方法中苦参碱与氧化苦参碱测定含量最好,流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（80∶10∶10）时苦参碱与氧化苦参碱峰形最佳,保留时间合适。     

HPLC测定丹黄祛瘀片中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的:建立丹黄祛瘀片中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定方法.方法:采用HPLC,色谱柱为Agilent NH2柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-无水乙醇-3％磷酸(82∶ 10∶8),检测波长220 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1.结果:苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为0.385 ～2.31(r =0.999 6)和0.021 8 ～0.239 8(r =0.999 2) μg;平均加样回收率分别为99.0％ (RSD 0.85％,n=6),97.2％(RSD 1.0％,n=6).结论:该法简便,快速,结果准确,重复性好,可用于控制丹黄祛瘀片的质量.     

HPLC测定妇炎膜中苦参碱及氧化苦参碱的含量

目的建立高效液相色谱法测定妇炎膜中苦参碱及氧化苦参碱的含量。方法采用Hypersil NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(85:7.5:7.5)为流动相,柱温30℃,检测波长为220 nm,流速1.0 mL/min,理论塔板数按氧化苦参碱计算,不低于5 000。结果苦参碱在0.632 4μg~3.4620μg范围内线性关系良好,r=0.999 7,平均加样回收率为101.29%,RSD=1.41%:氧化苦参碱在0.070 8μg~0.354 0μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均加样回收率为96.38%,RSD=0.87%。结论该方法简便准确,灵敏可靠,专属性好,重现性好,可以作为妇炎膜中苦参碱及氧化苦参碱的含量测定的方法。     

不同生长年限山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量比较

目的：探讨不同生长年限山豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量,为建立和完善中药材山豆根的质量控制体系和适宜采收时间提供实验依据。方法：采用HPLC测定,色谱柱welch materials XB-C₁₈,流动相乙腈-0.08%三乙胺水溶液（12：88）,流速0.8 mL·min^-1,检测波长220 nm,检测温度25 ℃。结果：不同生长年限的山豆根中生物碱的含量差异明显。1,2年生山豆根中生物碱的含量较低,3年生的药材含量明显升高,3~6年的药材含量变化不大。结论：苦参碱和氧化苦参碱的含量变化规律可为确定山豆根的采收年限提供参考依据。     

HPLC测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量

目的：建立用HPLC同时测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定方法。方法：用氨基键合柱，以乙腈-3％磷酸溶液-无水乙醇（80：10：10）为流动相，检测波长：220nm。结果：苦参碱在0．050-0．61μg范围内有良好的线性关系，氧化苦参碱在0．372-4．464μg范围内有良好的线性关系。结论：山西黎城、山西左权、山西临汾和陕西太白苦参药材中氧化苦参碱含量较高，均大于3．0％，各地药材的苦参碱含量差异不大。