血清脂蛋白-X的比浊测定

血清中脂蛋白-X(Lp-x)的出现是胆汁淤积的特异标志,因此Lp-x的定量测定对估计胆汁梗阻的程度有帮助。Lp-x还在极罕见的家族性卵磷脂:胆固醇酰基转移酶缺乏症中出现。测定步骤于小离心管中加血清0.2ml和0.2ml每升含1g肝素和9g氯化钠的溶液,混匀,40℃孵育10分钟。再加0.26md/L醋酸锌溶液0.04ml、混匀,40℃继续孵育1小时。自来水下冷却,3000-     

胆汁中酪氨酸的改良测定法

作者指出,胆汁中的酪氨酸含量与肝胆系统炎症的活动程度有关,检查胆汁中的酪氨酸,有助于诊断胆囊炎和胆管炎。作者观察39例患者发现,慢性非结石性胆囊炎病人和对照组病人比较,其胆汁中的酪氨酸明显减少。原理酪氨酸和α-亚硝基-β-萘酚相互作用,呈现不稳定淡黄色,在亚硝酸盐存在的条件下,加温使颜色稳定,进行光电比色。方法于离心管中加入胆汁2毫升、蒸馏水6毫升、30%三氯醋酸2毫升、充分混匀,离心3000转/分,15分钟,然后取出上清液加等量的氯仿,振摇试管5分钟,氯仿提取的色素沉到管低。将上层     

尿中草酸盐的气相色谱测定

正常人尿中草酸盐含量低,已有的测定方法均不够精确、灵敏,或过于繁琐费时。本文介绍一种精确、简便而快速测定尿中草酸盐的气相色谱法。原理用氯化钙沉淀尿中草酸盐,再将其转变为二甲基草酸酯后,用气相色谱仪测定。方法用塑料瓶收集并量出24小时尿量,取200毫升尿样酸化至pH1.0,置50～55℃水浴30分钟,以溶解其原有的草酸钙结晶,滤纸过滤。取上述已酸化的尿液40毫升置50毫升的圆底离心管中,加入含200毫微克(5.6×10~4cpm)~(14)C-草酸(98%放化纯)的溶液100微升和2毫克草酸,用4M氢氧化铵调溶液至pH8.0(用pH计),再用6M醋酸调至pH5.2(操作过程中连续用磁力搅拌)。加氯化钙溶液(100克/升)1毫升,使草酸钙沉淀,并置室温下过夜。1000     

补充对流免疫电泳测定甲胎蛋白

测定甲胎蛋白(AFP)有助于诊断肝癌,睾丸肿瘤和某些先天性缺陷。测定方法以放射免疫测定法(RIA)最敏感,但是价格昂贵。对流免疫电泳(CIE)测定价格虽便宜,但它的敏感度只达80毫微克/毫升。作者介绍了一种补充CIE试验,即在CIE开始十分钟后,在样品孔里补充80毫微克/毫升的AFP溶液5微升,再继续电泳60分钟。在初步检查沉淀线后,可以用氨基黑染色法进一步检查沉淀线。电泳是在1%琼脂糖中进行,电流是4毫安/厘米,孔直径是3毫米,孔间距为4毫米。原先加入的待测样品和抗血清的体积各为10微升。用各种不同浓度的AFP10微升对10微升抗AFP血清进行CIE测定,结果证明AFP的最低可     

耵聍内糖含量与糖尿病关系初探

作者采用萄萄糖氧化酶法测定耵聍内糖含量。取耵聍6～20mg溶解于0.5mmol/L NaOH液0.5ml中,加入5%硫酸锌溶液0.5ml,混匀5分钟后,离心,取上清液0.4ml加葡萄糖氧化酶试剂3ml,混匀后37℃水浴20分钟显色。同时作标准管(内含     

红细胞内腺瞟呤核苷酸的测定

原理用醋酸汞沉淀腺嘌呤核苷酸,然后在硫化氢的作用下,使腺嘌呤核苷酸呈可溶状态,进行低压电泳,用分光光度计测定各段核苷酸(ATP、ADP、AMP)的浓度。方法取静脉血7.0-8.0毫升,加入含有肝素的冷离心管中,在冷处(0+4℃)3000转/分离心15分钟,弃去红细胞上层血清和白细胞。向1.5毫升冷蒸馏水中加入2毫升红细胞,混和使血球溶解,再加20%三氯醋酸1.5毫升。此混悬液细心用玻棒混匀,置冷处10-15分钟,然后以6,000转/分,离     

天冬氨酸和丙氨酸氨基转移酶的放射性同位素分析法

小量生物性标本,如针刺活检标本,通过检查天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活力可了解这些组织中氨基酸及相应的α酮酸的代谢。为此,作者提供了一种测定血浆或组织浸液中AST 和ALT 的微量敏感的放射性同位素分析法。材料和方法肝素抗凝血液。40μl 血浆标本和40μl 试剂混合液混匀,37℃孵育30分钟。然后,加入2.0ml 冰蒸馏水以终止反应。生成的~(14)C 标记的谷氨酸通过离子交换层析法(Dowex50H~+柱)进行分离。用6ml 水冲洗后,再用2.0ml 乙酸铵(1.0mol/L)溶液洗脱,洗脱液经液闪计数仪测定其放射性活性。试剂混合液:用Tris-乙酸缓冲液(100mmol/     

血清高密度脂蛋白和低密度脂蛋白中胆固醇的高压液相层析快速测定

作者发现,通过高压液相层析(HPLC)分离后、再应用酶反应,就可直接分析少量血清中HDL_2、HDL_3、LDL、和VLDL等部分中的胆固醇,且无须预处理。HPLC省时且重复性好,故已广泛用于测定多种生物物质,但仍未用于血清脂蛋白测定。作者利用HPLC与凝胶柱(G5000PW,粒度17±2微米和G3000PW,粒度10±2微米)渗入层析法首先建立了分离血清脂蛋白的方法(层析柱为G5000PW+G3000PW×2)。然后籍酶反应进行胆固醇的定量,酶溶液以0.53毫升/分加到1.0毫升/分的洗脱液中,经过40℃     

测定血清或尿中木糖的一个简便方法:间苯三酚微量显色法

木糖吸收试验被广泛地用于小肠功能检查,以避免腹腔疾病中不必要的小肠活检。由于尿液木糖测定受肾功能等因素的影响,有种种缺点,近年来发展了多种血清木糖的测定方法。但是,这些方法在测定木糖之前需要去除血清中的葡萄糖,还得分离掉蛋白,操作时间很长,又很麻烦。作者提出了一个简单的直接微量显色法,测定血清或尿液中的木糖,除了能用于成年人的检查还特别适用于小儿科病人。显色试剂是由0.5克间苯三酚(Phloroglucinol).100毫升冰醋酸和10毫升浓盐酸组成,在室温下避光保存可以存放4天。标准液是D-木糖的饱和苯甲酸溶液。50微升血清(血浆)和标准液或5微升尿液中分别加入5毫升显色试剂,在100℃加热4分钟后冷水冷却,在554nm测光密度(OD)计     

简单的酶法测定胆汁中的胆固醇

测定胆汁中胆固醇对于了解胆石形成情况及一些肝胆功能很有帮助,但胆汁中胆红素对测定干扰较严重。胆汁经胆红素氧化酶作用,使440nm 处有最大吸收的胆红素转化为在320nm 有最大吸收的胆绿素,再与氧化酶偶联法胆固醇试剂反应,在505nm 处可准确测出胆汁中胆固醇含量。材料与方法:样品为猪胆汁,试剂有223ku/l 胆红素氧化酶水溶液、pH7.0,100mmol/l 磷酸盐缓冲液(含10mmol/l 月桂醇硫酸盐)及pH7.0维生素C溶液(在0.5mol/l NaCl 中)。测定时取30μL 胆汁于12×75mm 试管中,加20μl 磷酸盐缓冲液及30μl 胆红素氧化酶,涡旋混合后37℃10分钟。然后在空白管对照中加50μl 维生素C 溶液,各管均加1mL 胆固醇测定酶试剂,混合;37℃10分钟,以水调零,在505nm 处测定并求出样品的净吸光度值。     

测定血浆瓜氨酸的一种简易快速法

瓜氨酸和尿素都能与二乙酰一肟反应,生成有色产物。前者最大吸收峰在490nm,而后者最大吸收峰为480nm。作者利用这一特性,用尿素酶分解尿素后测定瓜氨酸浓度。将血标本收集于锂-肝素管中,立即离心分出血浆。取0.7ml 血浆,加入0.1ml 脲酶(30U/mg,15mg/ml)溶液,37℃孵育15分钟。再加0.2ml 三氯醋酸(200g/L),混匀。离心(1200×g)2分钟,取上清液,再按血尿素氮二乙酰一肟法测定。用本法测定26例正常人,均值±SD 为32.5±     

庆大霉素引起过敏性休克4例

例1、男,20岁。因患急性胃肠炎用庆大霉素20万单位加10％葡萄糖液500毫升静脉滴注,约3分钟后,患者感头昏、舌麻、心慌,心率146次/分,血压34/0毫米汞柱。当即肌注肾上腺素1毫克。5分钟后,患者觉全身发热作痒。检查见面部及咽喉水肿,全身有散在性瘀斑及大片荨麻疹,血压测不到。立即用地塞米松10毫克加入50％葡萄糖溶掖60毫升中静注。约10分钟后血压60/10毫米汞柱。又给氢化可的松100毫克加入50％葡萄糖溶掖60毫升中静注。15分钟后,患者血压回升至110/64毫米汞柱。例2、男,34岁。因肾炎,肌注庆大霉素8万单位,1分钟后,局部疼痛,头晕,恶心,呕吐,全身烧灼感,气短、寒颤,呼吸急迫,脉搏极弱,皮肤潮     

用肝素钠分离血清低密度脂蛋白胆固醇

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)用肝素柠檬酸钠沉淀,酶法直接测定LDL-C含量,效果满意。沉淀剂配制:柠檬酸钠(AR)18.8g、用800ml蒸馏水溶解,加肝索50 000 IU,用5mol/L盐酸调pH5.04±0.05,加蒸馏水至1L,冰箱保存。LDL-C分离方法是取血清10μl,加沉淀剂100μl,充分混匀,每分钟3000转离心10分钟,小心倾去上清液(含HDL与VLDL),倒置试管于滤纸上,10分钟后用棉棒擦去管口液体,此管为测定管。     

嗜血菌属细菌的选择性培养基

本文研究了在血琼脂培养基中加入油酸钠后对流感杆菌分离和培养的影响.血琼脂培养基成分为水解酪蛋白(70-75%),牛心浸膏(20-25%),脱纤维马血(5-7%)和酵母浸膏(0.5-0.7%).上述血液营养基待冷至40-50℃,加入油酸钠1克/升(5%油酸钠水溶液2毫升加入100毫升培养基中).油酸钠(C_(18)H_(33)O_2)溶液须高压灭菌后使用.油酸钠是不饱和脂肪酸衍生物,属于表面活性物质,它可使红细胞发生溶血,并释放X和V因子于培养基中;并且,它对链球菌和肺炎球菌可能有杀菌或抑菌作用.含有1克/升油酸钠的血液培养基,     

白陶土吸附法作尿隐血试验

方法:取5ml 尿放入试管中,加绿豆大小体积的白陶土(约20mg),混匀;以3500r/min 离心3分钟,白陶土几乎都沉底;弃去上清液,加入3%双氧水磺柳酸水溶液3滴和1g/dl 联苯胺冰乙酸溶液6至8滴,轻摇混匀试剂,观察结果。     

血清脂蛋白(a)对用Friedwald公式计算低密度脂蛋白胆固醇的影响

用传统Friedwald计算LDL-c公式为LDL-c=TC-(HDL-c+VLDL-c),作者认为此公式未考虑到脂蛋白(a)所含胆固醇的影响,为此测定了23例血脂正常妇女(50—60岁)的血清脂蛋白(a),其它血脂和脂蛋白,并提出对传统Triedwald公式进行修正。受检对象23例受检者,年龄50～6O岁。抽取空腹静脉血,置室温30min使其凝固,1000g离心10min.取血清贮于-70℃。     

一种敏感的红细胞内G6PD活性染色法

本文作者对以往的红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(GsPD)活性的细胞化学染色法作了若干改进,使其更加敏感、优越。方法:全血(肝素抗凝)1ml,加入9ml 新鲜的亚硝酸钠(180mM)生理盐水溶液;混匀,置宣温孵育8分钟,使所有HbO_2转变成MetHb,以防产生非特异的甲(月替)。在室温中1000rpm 离心16分钟,取75μl 压积细胞,加入125μl 20mMNADP+磷酸盐浸冲液(100mM,pH7.0)置室温10分钟,再以1000rpm 离心15分钟,加入2000μl0.025%(V/V)戊二醛磷酸盐缓冲液,在温室中用搅拌器持续旋转30分钟,以尽可能地固定,防止G6PD 丧失活性。然后在4℃环境中用磷酸盐缓冲液洗三次,每     

人血浆载脂蛋白和脂蛋白

血浆中的脂质(包括甘油三酯,乳糜、胆固醇和磷脂)是通过与载脂蛋白结合所形成的脂蛋白形式而运输的.关于脂蛋白代谢中载脂蛋白、酯及受体的作用有文献报告.本文详尽地介绍了正常人和脂蛋白代谢紊乱病人的脂蛋白代谢的生理、生化作用的新概念.脂蛋白分类在临床医学研究中主要根据电泳迁移率和密度对脂蛋白进行分类.通过电泳可分离为在原点和分别迁移到β(β-脂蛋白),α_2(前-β-脂蛋白)和α_1(α-脂蛋白)这四个区带.根据密度又可分为乳糜(CM),极低密度(VLDL),中密度(IDL),低密度(LDL)和高密度(HDL)五种脂蛋白.在原点的脂蛋白是乳糜、前β-脂蛋白     

心肌金属浓度与缺血性心脏病死亡率及水硬度的关系

本文对英国两个不同水质的城镇中的正常人心肌标本的水份和金属含量,以及同期内缺血性心脏病人的死亡率作了对比研究,以图找出可能影响缺血性心脏病死亡率的因素。Hull城为硬水区,水中含钙(Ca~(++))114ppm(2800×10~(-8)克分子/升),含镁(Mg~(++))2-10ppm(80-400×10~(-6)克分子/升),1972     

缺血性心脏病患者血清中载脂蛋白A和高密度脂蛋白-胆固醇的浓度

为研究抗动脉粥样硬化因子—血清高密度脂蛋白(HDL)的特性,作者测定了23例缺血性心脏病病人(心肌梗塞14例,心绞痛9例)和79例正常人血清中载脂蛋白(Apo)A和HDL-胆固醇的含量.用肝素—氯化锰沉淀法测定HDL-胆固醇,用Leurall氏火箭免疫电泳法测定Apo A,结果发现,心肌梗塞和心绞痛组病人血清Apo A和HDL-胆固醇浓度显著降低.对照组的HDL-胆固醇54±17.2mg/dl,Apo A127.7±27mg/dl,HDL-胆固醇/