补肾通络颗粒对膝骨关节炎大鼠血清细胞因子及关节软骨含水率的影响

目的:观察补肾通络颗粒高、中、低剂量对膝骨关节炎大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及关节软骨含水率的影响。方法:将60只大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,补肾通络颗粒高、中、低剂量组,美洛昔康组,每组10只。除空白对照组外,其余各组均予膝关节腔注射木瓜蛋白酶造模,并予药物干预后,用ELISA法测定大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,同时光镜下观察关节软骨并检测软骨含水率。结果:实验结束后,根据病理组织学检测发现模型对照组大鼠膝关节软骨退行性改变明显。与空白对照组比较,模型对照组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及关节软骨含水率均升高(P0.05)。与模型对照组比较,补肾通络颗粒高、中剂量组与美洛昔康组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均降低(P0.05),且补肾通络颗粒高、中剂量组关节软骨含水率亦较模型对照组降低(P0.05),而补肾通络颗粒低剂量组仅IL-1β、TNF-α水平低于模型对照组(P0.05)。与补肾通络颗粒低剂量组及美洛昔康组比较,补肾通络颗粒高剂量组膝骨关节炎大鼠血清IL-6水平及关节软骨含水率均降低(P0.05),补肾通络颗粒中剂量组仅关节软骨含水率降低(P0.05)。补肾通络颗粒高、中剂量组膝骨关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及关节软骨含水率差异均无统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络颗粒可能通过调节大鼠膝骨关节炎动物模型血清细胞因子水平及降低关节软骨含水率达到治疗作用,尤以中、高剂量组作用显著。     

降钙素对兔膝骨关节炎发病过程中细胞因子及关节软骨细胞凋亡的试验研究

目的探讨降钙素(CT)对兔膝骨关节炎发病过程中细胞因子及关节软骨细胞凋亡情况的影响。方法将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)和CT治疗组(C组),B、C两组采用改良Hulth法复制膝骨关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5u/kg,A、B组给与等量生理盐水皮下注射,连续注射20 d后处死动物。观察膝骨关节炎(KOA)发病过程中关节软骨病理组织学的变化,关节液中细胞因子IL-1、TNF-α、NO的变化。关节软骨Ⅱ型胶原及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的变化,以及CT对上述指标的影响。结果与A组相比,B组JP和Mankin’s评分明显升高,关节软骨损伤明显加重,关节液中IL-1、TNF-α、NO含量明显升高(P<0.05),关节软骨Ⅱ型胶原含量明显降低,MMP-1活性和软骨细胞凋亡百分数明显升高(P<0.05);与B组相比,C组关节液中IL-1、TNF-α、NO含量明显降低(P<0.05),关节软骨损伤减轻、Ⅱ型胶原含量明显升高,MMP-1活性和软骨细胞凋亡百分数明显降低(P<0.05)。结论 CT对KOA的治疗作用与细胞因子及细胞外基质合成与分解代谢失衡的恢复有关。     

硫酸镁与氯化钠溶液灌洗对创伤性关节炎软骨损伤修复的影响

目的通过股骨髁间钻孔构建兔创伤性关节炎(PTOA)模型,比较相同渗透压下(400 mOsm/L)硫酸镁与氯化钠溶液持续灌洗对PTOA软骨损伤修复的影响。方法对18只新西兰白兔采用股骨髁间钻孔构建PTOA模型,随机分为PTOA组、氯化钠组和硫酸镁组,每组6只。ELISA检测关节腔积液白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)的表达,qPCR检测滑膜组织IL-1β、TNF-α、金属蛋白酶-3(MMP-3)基因表达。行软骨切片染色组织学观察及骨关节炎(OA)评分。结果关节腔积液IL-1β、TNF-α、CollagenⅡ分泌硫酸镁组少于PTOA组和氯化钠组,滑膜组织IL-1β、TNF-α和MMP-3 mRNA水平硫酸镁组低于PTOA组和氯化钠组;软骨组织切片OA评分硫酸镁组低于PTOA组和氯化钠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与相同渗透压下氯化钠溶液相比,硫酸镁溶液有利于减轻关节内炎症,减少CollagenⅡ及蛋白聚糖丢失,对软骨退变起到保护作用,有利于延缓PTOA病情进展。     

传统中医药补肾固筋方对膝骨关节炎中IL-1、TNF-α 表达的影响

目的 研究补肾固筋方对膝骨性关节炎实验兔IL-1、TNF-α 水平的影响。方法 选用8月龄左右健康雄性新西兰大白兔36只,随机分成 4 组：A组(正常组),B组(模型组),C组(西药组)、D组(中药组);每组9只,适应性饲养1周后用Hulth法造模,观察2周无感染情况根据动物与人之间药物剂量的换算灌药,连续给药8周后,取右后肢膝关节软骨面及滑液制作标本。肉眼观察形态、色泽、硬度、关节液量等变化;David.T关节X线分度法;用HE染色法光镜下观察组织细胞的改变,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)研究补肾固筋方对骨关节炎模型动物的关节液中IL-1、TNF-α的影响。结果 1 肉眼观察：C组和D组兔膝关节软骨外观呈蓝白色,滑膜炎性表现明显轻于B组。2 X线表现及HE染色光镜观察：B组与A组比较,B组膝关节内侧间隙明显变窄,关节面粗糙变形,明显有骨赘形成;光镜下B组存在软骨细胞成簇现象。C组与B组比较,D组膝关节内侧间隙变窄,关节面粗糙,关节边缘有轻微骨赘形成;光镜下软骨细胞增生显著,但成簇现象少。D组与B组比较,C组膝关节内侧间隙变窄,介于B组和D组之间;软骨表面不甚光滑。3 IL-1、TNF-α的含量测定：与A组比较,B组动物关节液IL-1、TNF-a的含量明显升高,有显著性差异(P<0.01);给药8周后,C组和D组动物滑膜液中IL-1、TNF-a的含量明显降低,与B组比较有明显差异(P<0.05),D组和C组之间无明显差异。结论 1 补肾固筋方增进软骨基质的合成,抑制软骨基质的降解,促进关节软骨的修复。2 补肾固筋方抑制关节液中IL-1、TNF-α的分泌,促进软骨的修复,延缓软骨的退变,抑制了滑膜炎症反应,提高机体免疫力。     

淫羊藿苷治疗小鼠骨关节炎后血清学及组织学改变的实验研究

目的通过早期和晚期应用淫羊藿苷(icariin,ICA)治疗小鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA),观察ICA对小鼠血清骨代谢标志物以及软骨和软骨下骨组织形态学的影响。方法取80只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为8组,每组10只,分别为假手术/早期生理盐水组(A组)、假手术/早期ICA组(B组)、前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction,ACLT)/早期生理盐水组(C组)、ACLT/早期ICA组(D组)、假手术/晚期生理盐水组(E组)、假手术/晚期ICA组(F组)、ACLT/晚期生理盐水组(G组)、ACLT/晚期ICA组(H组)。各组小鼠对应给予ACLT或单纯打开关节囊处理后,B、D组于术后第1天开始,F、H组于第4周开始,每天采用灌胃方式给予小鼠ICA(10 mg/kg)至第8周;A、C组及E、G组于对应相同时间点给予相同体积生理盐水。于术后第8周收集小鼠全血制备血清,采用ELISA法测定血清中骨代谢标志物及细胞因子的含量,包括Ⅰ型胶原C末端肽(C-telopeptide of typeⅠcollagen,CTX)、骨钙素(osteocalcin,OC)、IL-6、TNF-α、IL-1β。同时切取膝关节组织行阿辛蓝/苏木精-酸性橙G染色,观察软骨及软骨下骨形态改变,并进行骨关节炎国际研究学会(OARSI)评分。结果早期给药组(A、B、C、D组)间比较:与A、B组相比,C组CTX、OC含量显著降低(P0.05),IL-6、TNF-α、IL-1β含量升高(P0.05),OARSI评分显著升高(P0.05);与C组相比,D组CTX、OC含量升高(P0.05),IL-6含量显著降低(P0.05),TNF-α、IL-1β含量差异无统计学意义(P0.05),OARSI评分降低(P0.05),组织学观察显示胫骨软骨缺失程度明显改善。晚期给药组(E、F、G、H组)间比较:与E、F组比较,G组CTX、OC含量显著降低(P0.05),IL-6、TNF-α、IL-1β含量升高(P0.05),OARSI评分显著升高(P0.05);与G组比较,H组CTX含量升高(P0.05),OC、IL-6、TNF-α、IL-1β含量差异无统计学意义(P0.05),OARSI评分无明显变化(P0.05),组织学观察显示胫骨软骨缺失程度相似。结论 ICA对透明软骨、钙化软骨及软骨下骨均有保护作用,并且能在一定程度上改善OA软骨下骨的骨重建,且ICA对OA早期干预作用更明显。     

麻黄碱调控AMPK/NF-κB信号通路改善大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的 探讨麻黄碱(Ephedrine)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法 建立KOA大鼠模型，将大鼠分为Sham组、KOA组、Ephedrine组(40.0 mg/kg)、Ephedrine(40.0 mg/kg)+Compound C组(0.2 mg/kg),药物分组干预后，分别检测大鼠膝关节宽度与疼痛阈值，番红O-固绿染色观察软骨组织病理变化并进行Mankin评分，ELISA法检测关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平，免疫组化检测软骨组织IL-1β、MMP-13蛋白表达，Western blot检测AMPK/NF-κB通路相关蛋白水平。结果 与Sham组比较，KOA组软骨组织损伤严重，膝关节宽度、Mankin评分、关节液TNF-α、IL-1β、COX-2水平及软骨组织IL-1β、MMP-13、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平显著升高，疼痛阈值及软骨组织p-AMPK/AMPK水平显著降低(P<0.05);与KOA组比较，Ephedrine组软骨组织病理损伤减轻，膝关节宽度、Man...     

骨炎康颗粒对膝骨性关节炎大鼠血清 II 型胶原、TGF-β1、IL-lβ作用的实验研究

目的：通过对膝骨性关节炎（ KOA）模型大鼠的实验,观察复方中药骨炎康颗粒对膝骨性关节炎的作用机制。方法选用SD大鼠,随机分为正常对照组（A组）、模型组（B组）、骨炎康颗粒治疗组（C组）、西药对照组（D组）。通过左膝关节腔内注入木瓜蛋白酶,造成骨性关节炎病变模型。木瓜蛋白酶注射结束后2周,开始对C、D组分别予以药物骨炎康颗粒、布洛芬灌胃,8周后处死全部大鼠,取A组双侧膝关节及B、C、D组造模侧膝关节制作病理标本,分别行免疫组化（ TGF-β1、IL-lβ）染色,观察血清II型胶原、关节软骨及白介素l（1L-lβ）、转移生长因子（TGF-β1）的改变。结果（1）血清II型胶原结果：骨炎康颗粒能提高血清II型胶原含量;（2）TGF-β1、IL-lβ改变结果：各治疗组均能提高TGF-β1含量,并降低1L-lβ,其中以骨痹颗粒组效果最佳,布洛芬相对较弱。结论骨炎康颗粒可增进软骨基质的合成,抑制软骨基质的分解,促进受损关节软骨的修复。骨炎康颗粒的疗效机理可能在于通过对机体的细胞因子调节,提高血清II型胶原、关节软骨的TGF-β1含量,降低IL-lβ含量,从而直接或间接促进了损伤关节软骨的修复。     

血必净联合维拉帕米对大鼠小肠缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨血必净联合维拉帕米对大鼠小肠缺血再灌注（I／R）损伤的保护作用及其可能机制。方法制作小肠缺血再灌注模型,SD大鼠50只随机分为假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）、血必净组（c组）、维拉帕米组（D组）及血必净和维拉帕米联合治疗组（E组）,各10只。分别检测各组大鼠小肠缺血45min再灌注0h、2h时血清中肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素1β（IL-1β）、丙二醛（MDA）的含量;同时观察小肠黏膜组织病理学变化。结果缺血再灌注组小肠组织病理学改变较其他组明显;在再灌注0h、2h时B、C、D、E组血清中TNF—α、IL-1β、MDA含量均较A组显著升高（P〈0．05）;再灌注2h时C、D、E组血清中TNF—α、IL-1β、MDA含量均较B组明显降低（P〈0．05）,但C、D两组间差异无统计学意义;C、D组血清中TNF—α、IL-1β、MDA含量均较E组明显升高（P〈0．05）。结论血必净、维拉帕米能减轻大鼠小肠缺血再灌注损伤,二者联合用药有协同保护作用,效果更明昴。     

TNF-α、iNOS在中药补肾固筋方治疗羊膝骨性关节炎中的表达及修复意义

目的 研究补肾固筋方对骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）TNF-α、iNOS的作用调节机制。方法 0.3岁雄性山羊72只,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组18只,改良Hulth造模,取血清及股骨内髁关节软骨滑膜及软骨下骨,ELISA法检测TNF-α、iNOS。结果 西药组关节间隙狭窄,介于模型组和中药组之间,关节软骨面外观粗糙骨赘增生;中药组关节间隙稍窄,关节面稍粗糙伴轻微骨赘;镜下模型组软骨细胞呈成簇现象增生,中药组软骨细胞大小均匀且排列整齐;TNF-α、iNOS含量模型组中比正常组增高 (P<0.01)。两个给药组比模型组明显降低 (P<0.01),两给药组之间无差异统计学意义（P>0.05）。结论 补肾固筋方有效降低骨关节炎TNF-α、iNOS含量,促进软骨修复,提供实验依据。     

针刺对膝骨关节炎大鼠软骨白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的：探讨针刺对骨关节炎（OA）软骨中炎性细胞因子的影响作用。方法：选用SD雌性大鼠40只,采用随机数字表,随机分为正常组、模型组、针刺组和对照组,各10只。采用单侧后肢跟腱切除法建立OA动物模型,切除左后肢跟腱,分别采用电针和扶他林乳剂对针刺组和对照组非手术侧（右后肢）进行治疗。采用免疫组化技术,观察各组关节软骨中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的特点,并比较各组间的差异。结果：模型组IL-1β和TNF-α的表达都较正常组上调（P〈0.01）;模型组、针刺组和对照组3组比较,IL-1β和TNF-α的表达差异有统计学意义,针刺组和对照组的表达均较模型组下调（P〈0.01）,两者在针刺组与对照组的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：针刺能下调OA软骨细胞IL-1β、TNF-α的表达,与扶他林乳剂作用相当,说明针刺对OA软骨具有一定的保护作用。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。