矽肺患者血清转化生长因子-β1和肿瘤坏死因子-α的变化

目的 观察矽尘接触者和矽肺患者及观察对象血清转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,探讨TGF-β1、TNF-α在矽肺发生发展中的作用.方法 选择100名不接触粉尘的对照人群(对照组),200名接触矽尘1年以上的接尘工人(接尘组),32名矽尘作业观察对象(0+)(观察对照组)及130例矽肺患者(矽肺组),采用ELISA法检测其血清TGF-β1和TNF-α水平.结果 与对照组[(6.90±2.24)pg/ml]比较,接尘组、观察对象组和矽肺组TNF-α水平[(47.86±16.52)、(109.11±31.08)、(216.35±51.03)pg/ml]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);与接尘组比较,观察对象组和矽肺组TNF-α水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与对照组[(23.28±12.24)pg/ml]和接尘组[(29.31±14.52)pg/ml]比较,观察对象组和矽肺组TGF-β1水平[(46.16±17.35)、(58.36±31.94)pg/ml]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 TGF-β1和TNF-α在矽肺发生发展中有重要作用,检测外周血TGF-β1和TNF-α水平可应用于职业健康监护及矽肺的早期诊断.     

高迁移率族蛋白B-1和钙粒蛋白在矽肺发病中的作用

目的探讨高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)和钙粒蛋白(S100)在矽肺发病中的作用,为充分认识炎症在其中的地位提供新的理论依据。方法选C56BL/6小鼠48只,分为6组:对照组及3、7、14、21、42天实验组,每组8只。进行支气管染矽尘,染尘浓度为200 mg/kg。在不同的观察时间处死动物,收集支气管灌洗液,离心后沉淀用于细胞计数。上清液用于检测HMGB1、S100和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。分离肺组织,取右肺用Western blot检测RAGE。左肺做病理切片,光镜下观察肺组织的病理改变。结果 (1)支气管灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞在3 d和21 d时表现最高,与7、14、42 d比较差异有统计学意义(P0.05)。(2)HMGB1和S100在染尘3~21 d时逐渐增高且具有时间效应关系(P0.05),42 d时有所降低。(3)TNF-α在3~14 d染尘时逐渐降低,21 d又升高,42 d时明显下降,且各时段间差异有统计学意义(P0.05)。(4)RAGE表达水平随观察时间的延长明显降低,并具有时间效应关系(P0.05)。(5)随着观察时段的延长,肺泡壁增厚,结构明显破坏,肺泡腔逐渐融合,肺组织炎性病灶增多,在42 d时形成了大量的纤维化,几乎看不清肺泡结构。结论 HMGB1和钙粒蛋白可能参与矽肺晚期炎症的形成,其生物学效应的发挥不依赖RAGE受体。     

矽肺大鼠血清硅元素水平及Clara细胞蛋白的表达和意义

目的探讨不同染尘剂量大鼠矽肺模型血清硅元素水平的变化情况,并与反映肺内早期炎症变化的细胞因子血清克拉拉细胞蛋白(Clara cell protein,CC16)进行比较,以弄清它们在矽肺发病中的意义和价值。方法雄性Wistar大鼠分为28组,按不同染尘剂量(10 mg/ml、30 mg/ml、50 mg/ml、70 mg/ml)染尘,而后在不同时间点(染尘后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d和28 d)处死动物,采取血液及肺组织,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测血清中硅元素含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)测定大鼠血清中CC16含量。结果随着染尘剂量增加和染尘时间延长,大鼠血清硅元素的水平呈现逐渐增高的趋势;CC16含量于染尘后即开始降低,第7天开始与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。并随着染尘时间延长和剂量增加,其含量亦不断减少,但血清硅元素的变化不论是从时间上还是从剂量上比较,均早于CC16。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平在早期低剂量染尘时即明显升高,且早于CC16的变化,二者的变化具有剂量和时间依赖性,提示血清硅元素、CC16水平... 更多还原     

接矽尘作业人员体内硅元素水平及与TGF-β1、TNF-α含量的关系

目的探讨接矽尘作业人员体内硅元素水平变化在矽肺发病机制、早期诊断中的意义。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测接矽尘作业工人、矽肺观察对象、矽肺患者及对照人群血清、尿液中硅元素含量,同时采用ELISA法检测其血清转化生长因子-β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果接矽尘组血清、尿液的硅元素水平明显高于对照组及矽肺组(P0.05);接矽尘组、观察对象组、矽肺组TGF-β1、TNF-α含量明显高于对照组(P0.05);接矽尘组接矽尘早期血清硅、尿硅含量即明显升高,随着接尘年限的增加,呈现降低的趋势;血清TGF-β1在接矽尘5年后明显升高,随着接尘年限的增长,呈现升高的趋势;血清TNF-α也呈现类似的变化趋势。结论接矽尘作业人员体内硅元素水平在接尘早期即明显升高且早于TGF-β1、TNF-α的改变,提示硅元素水平变化对矽肺发病机制研究及早期诊断具有重要意义。     

NF-κB和TGF-β1在阿霉素肾病模型中的检测与病理意义

目的观察阿霉素大鼠肾病模型中核因子-KB(NF-κB)和转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度与病理变化的意义,探讨其参与肾病综合征的发病机制。方法 40只大鼠随机分成两组:对照组、模型组,每组共20只。模型组采用尾静脉注射阿霉素方法建立阿霉素肾病模型。检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血清肾功能指标。观察各组大鼠肾组织病理学改变。采用免疫学方法(ELISA)检测NF-κB和TGFβ浓度的变化。结果①模型组于第2、4、6周尿蛋白定量均高于同期对照组,差异有统计学意义(p<0.01)。第2、4、6周时模型组血尿素氮及肌酐水平均高于同期对照组(p<0.01)。②肾组织病理学提示随时间延长,肾病病理进展。③模型组第2、4、6周NF-κB和TGF-β1浓度结果均高于同期对照组(p<0.01)。结论 NF-κB和TGF-β1浓度增高是肾小球硬化发生发展的重要因素,两者共同促进细胞外基质(ECM)的积聚,造成肾小球硬化。阻断NF-κB和TGF-β1可能成为延缓肾小球硬化的治疗手段。     

血清硅元素水平对矽肺早期诊断意义的探讨

目的探讨血清硅元素水平对矽肺早期诊断的意义。方法采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测矽肺模型大鼠血清中硅元素含量,同时采用免疫组织化学-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法观察转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在大鼠矽肺模型肺组织的表达。结果与对照组比较,大鼠染尘后血清硅元素水平在染尘第一天即见增高,峰值在16 h;其后的7 d、14 d、21 d和28 d,其含量水平亦显著高于对照组,差异有统计学意义。大鼠染尘后肺组织TGF-β1表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),表达高峰是染尘后的第7天;TNF-α表达也显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论矽肺模型大鼠血清硅元素水平在染尘早期即见明显升高,且早于TGF-β1、TNF-α的表达,提示此一指标在矽肺的早期诊断中具有一定的价值和意义。 更多还原     

CTGF和TGF-β1在实验性矽肺组织中的表达及其意义

[目的]研究结缔组织生长因子（CTGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）在二氧化硅所致矽肺大鼠肺组织中的表达。[方法]矽肺组大鼠20只气管灌注石英粉尘制作模型，对照组大鼠20只以灭菌生理盐水代替，45d后观察大鼠肺组织的病理改变，免疫组化方法观察肺组织中CTGF和TGF-β1的蛋白表达情况。[结果]CTGF和TGF-β1在矽肺组肺组织中的表达量均高于对照组大鼠，且差异有统计学意义（P〈0．05）；CTGF和TGF-β1表达量间无直线相关关系（P〉0．05）。[结论]CTGF和TGF-β1可能参与了矽肺的发生发展。     

茶儿茶素防治放射性肺损伤的实验研究

目的探讨儿茶素对大鼠不同照射时期肺组织转化因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达,阐述其对急性放射性肺损伤的防治作用及作用机制。方法成年雌性Wistar大鼠40只,随机表法分为4组:A组10只为对照组,腹腔注射生理盐水20 ml/kg/d;B组10只为单纯儿茶素组,腹腔注射儿茶素注射液100 mg/kg/d;C组10只为单纯照射组,全肺单次照射15 Gy+腹腔注射生理盐水20 ml/kg/d;D组10只为照射+儿茶素组,全肺单次照射15 Gy+腹腔注射儿茶素注射液100 mg/kg/d;每组各5只大鼠于照射后2周及6周处死,取肺组织作组织学与免疫组化检测,观察各组大鼠肺组织中TGF-β1、TNF-α蛋白表达的动态变化。结果 C组大鼠2周和6周时肺组织出现明显炎性损伤,D组急性肺炎性改变较C组明显减轻;A组和B组大鼠肺组织免疫组化TGF-β1、TNF-α阳性细胞数相对较低,C组的TGF-β1、TNF-α阳性细胞数较上述两组明显增高(p<0.05),D组阳性细胞数则介于两者之间,也显著低于C组(p<0.05)。结论儿茶素具有抑制TGF-β1、TNF-α蛋白表达,减轻早期放射性肺损伤炎症反应,对急性肺损伤有防治作用,其机制与抑制TGF-β1、TNF-α表达有关。     

钝顶螺旋藻藻蓝蛋白抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的研究

目的 探讨钝顶螺旋藻(spirulina platensis)藻蓝蛋白(C-phycoeyanin,C-PC)对百草枯(paraquat,PQ)染毒诱导大鼠肺纤维化的治疗作用.方法 选取健康Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、模型组(PQ组)和藻蓝蛋白治疗组(C-PC组),每组30只.PQ组、C-PC组以PQ(50 mg/kg)一次灌胃染毒造模.造模后,正常对照组、PQ组大鼠每天给予生理盐水(1 ml/100 g)灌胃,C-PC组每天给予C-PC (50 mg/kg)灌胃,并在第1、3、7、14、28天各组随机取6只大鼠右肺下叶肺组织匀浆测羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力;取左肺部分组织行HE染色、Masson染色进行病理观察,并用免疫组化方法观察肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果 各观察时点C-PC组大鼠肺组织中HYP和14、28 d MDA含量明显低于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).1、7、14、28 d时C-PC组大鼠肺组织中SOD活力明显高于PQ组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).PQ组和C-PC组肺组织中TGF-β1的表达及NF-κB p65和TNF-α表达明显高于正常对照组,C-PC组肺组织的TGF-β1表达及NF-κB p65和TNF-α表达明显低于PQ组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).病理学观察显示C-PC能减轻PQ染毒大鼠肺泡炎和肺纤维化程度.结论 C-PC对PQ诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化有抑制作用.     

炎症因子表达基因及产物在矽肺早期作用的研究进展

矽肺是以肺部广泛结节性纤维化为主要特征的全身疾病,具有进展快、危害严重等特点,在我国属于法定职业病,研究表明矽肺纤维化进程与炎症因子的长期过度表达密切相关。本文综述了矽肺早期炎症因子表达及其产物的研究进展,探讨了解矽肺的发生发展,为治疗提供线索和依据。     

矽肺患者血清克拉拉细胞蛋白和表面活性蛋白D的改变

目的探讨矽肺患者血清克拉拉细胞蛋白(CC16)和表面活性蛋白D(SP-D)的改变。方法以无接尘史健康体检者为对照组,按接尘史及X线胸片改变确定矽尘接触组、0~ 组、Ⅰ期矽肺组,每组30人,采静脉血5 ml,以ELISA法检测血清中CC16和SP-D含量并进行分析比较。结果矽尘接触组、0~ 组、Ⅰ期矽肺组血清CC16含量分别为(4.54±2.10)、(3.81±1.87)和(4.04±1.87)ng/ml,明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);对照组内不吸烟人群的血清CC16含量高于吸烟人群,差异有统计学意义(P<0.05),矽尘接触组、0~ 组、Ⅰ期矽肺组之间血清CC16含量差异无统计学意义(P>0.05)。0~ 组、Ⅰ期矽肺组血清SP-D含量分别为(47.41±16.78)和(110.33±54.22)ng/ml,明显高于对照组和矽尘接触组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);Ⅰ期矽肺组血清SP-D含量高于0~ 组,差异有统计学意义(P<0.01)。以血清CC16和SP-D建立判别分析方程,对对照组、矽尘接触组、Ⅰ期矽肺组的正确判别率分别为86.7%、86.7%、76.7%,总体判别效率为84.2%。结论长期暴露于矽尘环境下的工人血清CC16含量降低,而SP-D量进行性升高。     

Clara细胞分泌蛋白、白介素-18在哮喘儿童外周血清中检测的意义

目的探讨哮喘患儿血清Clara细胞分泌蛋白（CCSP）、白介素-18（IL-18）的变化和临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测40例哮喘急性发作期儿童血清CCSP、IL-18水平,经治疗后于缓解期采血复查,并与28例健康儿童作对照。结果哮喘急性发作期、缓解期儿童血清CCSP水平均较健康对照组儿童低（P〈0．01）。哮喘急性发作期儿童血清IL-18明显高于对照组和缓解组（P〈0．01）。无论是急性发作期还是缓解期血清CCSP与IL-18无相关性（P〉0．05）,发作期IL-18与IgE呈正相关（r=0．947,P〈0．01）。结论CCSP具有抗炎作用,CCSP的减少可诱导或加重哮喘儿童的呼吸道炎症。IL-18在哮喘发病过程中起重要作用。     

矽肺早期诊断的生物标志物CC16和SP-D

矽肺是由于在生产过程中长期吸入含有游离二氧化硅粉尘而引起以肺组织纤维化为主的全身性疾病,是尘肺中危害最严重的职业病之一。其病理演化过程为与炎性有关的纤维化反应。近几年一些学者在研究矽肺的致病机制过程中发现CC16、SP-D的抗炎及抗纤维化等作用在矽肺发生发展过程中起到重要作用,并可能成为矽肺早期诊断的生物标志物。本文就它们在矽肺诊断中的价值作一简单介绍。     

正己烷慢性吸入致小鼠肺损伤Clara细胞分泌蛋白的表达及意义

目的 观察正己烷慢性吸入致昆明种小鼠肺损伤中Clara细胞分泌蛋白(clara cell secretory protein,CCSP)的表达情况,探讨Clara细胞在正己烷慢性吸入致肺损伤中的作用.方法 24只昆明种小鼠随机分为4组(正常对照组及染毒4周、8周、12周组),初始正已烷染毒浓度为17.6g/m3,每天8 h,每周染毒6 d.染毒结束后即刻处死,气相色谱-质谱联用仪测全血中正己烷浓度.对肺组织进行HE染色,观察光学显微镜下肺组织形态学变化,免疫组织化学法观察细支气管内CCSP阳性反应的Clara细胞比例及肺组织内溶菌酶阳性反应的巨噬细胞数量变化.结果 各染毒组小鼠血中正己烷平均浓度均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).各染毒组小鼠肺脏出现进行性的间质性炎症反应.染毒4周、8周和12周组Clara细胞在终末性细支气管和呼吸性细支气管上皮细胞中比例分别为(73.33±4.21)%、(60.98±4.94)%、(34.04±2.33)%和(75.44±7.91)%、(58.54±4.86)%、(33.35±2.67)%,较对照组[(80.26±6.43)%和(81.74±7.75)%]明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),各染毒组肺组织内巨噬细胞数量分别为(21.39±7.41)、(28.54±10.73)、(48.97±19.55)个/视野,较对照组[(7.84±3.12)个/视野]明显增多,且随染毒时间延长,巨噬细胞数量呈增加的趋势,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 慢性吸入正已烷可致昆明种小鼠细支气管上皮内Clara细胞持续受损,进而引起肺脏慢性炎症.     

大鼠Clara细胞分泌蛋白CC16基因的克隆和原核表达及纯化

目的 克隆大鼠Clara细胞分泌蛋白(CC16)基因,原核表达并纯化重组的CC16蛋白,为进一步研究CC16蛋白的功能及对炎症性气道疾病的治疗作用奠定基础.方法 制备大鼠肺组织总RNA,根据大鼠CC16基因全长编码序列(GenBank登录号:NM_013051)的开放阅读框设计引物并进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增,扩增产物经双酶切后连接入pET30a(+)载体,重组质粒转化大肠埃希菌(E.coli DH5α),阳性菌落经PCR和双酶切鉴定并测序.将重组质粒pET30a(+)-rCC16转化至E coli Rosetta(DE3)并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物,重组融合蛋白经Ni2+琼脂糖凝胶亲和纯化.分别以抗His标签抗体和山羊抗CC16抗体进行免疫印迹(Western blotting)分析并鉴定重组蛋白.结果 RT-PCR扩增产物约为290 bp.菌落PCR、双酶切及测序结果显示,重组质粒pET30a(+)-rCC16构建成功.SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导获得相对分子质量约16 kDa的可溶性重组蛋白.Western blotting结果表明,诱导表达的蛋白质为带His标签的重组融合蛋白,且能被山羊抗CC16抗体识别.结论 成功构建基因重组体pET30a(+)-rCC16,并制备出可溶性大鼠重组CC16蛋白.     

早产儿脐血Clara细胞分泌蛋白水平与支气管肺发育不良的相关性研究

目的 探讨早产儿脐血血清中Clara细胞分泌蛋白(CCSP)水平与支气管肺发育不良(BPD)的关系, 以期为BPD的早期预测提供依据。方法 收集2019年1-5月山东省妇幼保健院新生儿重症监护室收治的早产儿105例, 出院后根据出院诊断将其分为3组: NRDS组22例, BPD组20例, 对照组63例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测脐血血清中CCSP水平。比较3组患儿脐血血清中CCSP水平, 分析CCSP在早产儿BPD的诊断效能及与胎龄、体重的相关性。采用方差分析及χ²检验、相关性分析等进行统计分析。结果 BPD组患儿脐血中CCSP水平(20.332±8.066)ng/ml, 与对照组(46.237±19.991)ng/ml和NRDS组(33.132±10.132)ng/ml比较差异有统计学意义(F=19.926, P<0.001), LSD检验两两比较, 对照组与NRDS组的CCSP水平均高于BPD组, 差异有统计学意义(P<0.05)。胎龄、出生体重与早产儿脐血中CCSP水平成正相关(r=0.533、0.550, P<0.01)。截断值为31.560 ng/ml时诊断效能最大, 约登指数为0.582, 灵敏度90.0％, 特异度68.2％。受试者工作特征曲线(ROC)下面积0.886(95%CI: 0.814~0.957, P<0.01)。结论 早产儿脐血CCSP低浓度可能反应早期肺损伤, 与BPD的发生有关, 可以作为预测BPD的潜在标志物。     

急性有机磷农药中毒患者血清视黄醇结合蛋白的变化及意义

用ELISA法检测急性有机磷农药中毒患者中毒第1、3、5、7天血清视黄醇结合蛋白含量,结果中毒第3、5、7天均低于正常对照,且中毒愈重,其含量愈低。血清视黄醇结合蛋白检测有助于了解有机磷农药对患者肝、肾的损伤情况及机体营养状况等。     

矽肺患者血清中甲状腺激素和白细胞介素-6的检测及其意义

目的 探讨矽肺患者血清中甲状腺激素、白细胞介素-6水平的变化及其相互关系.方法 48例矽肺患者分别采用放射免疫法测定血清中总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、促甲状腺激素(TSH)及酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素-6(IL-6)水平,并以25例无任何疾病的健康检查者作对照.结果 矽肺患者血清中TT3、TT4水平均显著低于对照组(P＜0.01),血清中TSH水平均高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).矽肺Ⅱ期患者血清中TT3、TT4低于矽肺Ⅰ期,两者差异有统计学意义(P＜0.05);矽肺Ⅲ期患者血清中TT3、TT4低于矽肺Ⅰ期,两者差异有统计学意义(P＜0.01);而IL-6水平均显著高于对照组(P＜0.01),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间比较,血清中IL-6水平有随矽肺期别升高而升高的趋势,但差异无统计学意义.TT3、TT4与IL-6水平呈负相关(P＜0.01).结论 血清TT3、TT4和IL-6水平反映了矽肺患者病情的严重性,检测血清中TT3、TT4和IL-6的浓度对判断病情及预后有一定意义.