基于TGF-β1/Smad3通路和AGEs/RAGE分子研究丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的 从转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3信号通路和晚期糖基化终末产物(AGEs)/AGEs受体(RAGE)分子水平研究丹蛭降糖胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其机制.方法 采用高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)方法 建立2型糖尿病大鼠模型,饲养6周后将造模成功30只大鼠随机分为二甲双胍...     

柚皮苷联合头穴针刺对脑缺血大鼠血管新生及Notch1/Akt/eNOS通路的影响

目的 观察柚皮苷联合头穴针刺对脑缺血大鼠脑组织血管新生及Notch1/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路的影响。方法 将120只SD大鼠随机分组为假手术组、模型组、尼莫地平组、柚皮苷组、头穴针刺组和柚皮苷+头穴针刺组,每组20只。除假手术组外,其余组大鼠采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。造模成功后,尼莫地平组给予尼莫地平混悬液12 mg/kg灌胃,柚皮苷组给予柚皮苷溶液80 mg/kg灌胃,头穴针刺组给予头穴针刺干预,柚皮苷+头穴针刺组给予柚皮苷溶液80 mg/kg灌胃和头穴针刺干预,假手术组及模型组给予等量生理盐水灌胃,各组均每天干预1次,连续干预7 d。干预结束后,记录各组大鼠神经功能评分,干/湿重法和TTC染色观察大鼠脑组织含水量及脑梗死体积,ELISA法检测大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)水平,免疫组化法检测海马组织中VEGF阳性表达情况,Western blot法检测海马组织中Notch1、Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、eNOS、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达情况,RT-P...     

姜黄素对肝纤维化模型肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1mRNA表达的影响

目的:观察姜黄素对肝脏Ⅳ型胶原和转化生长因子β1mRNA的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:采用二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,姜黄素灌胃给药,采用实时定量PCR技术检测各组大鼠肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1mRNA的表达水平。结果:姜黄素能明显降低肝纤维化大鼠肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1mRNA水平,与病理模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:姜黄素能够抑制肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1mRNA表达,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

针刺对自发性高血压大鼠肾脏形态结构及转化生长因子-β1mRNA表达的影响

目的:探讨针刺干预高血压大鼠肾间质纤维化的机制.方法:将24周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR) 24只随机分为模型组、培哚普利组、针刺组,每组8只.针刺组:捆绑大鼠后电针刺激大鼠双侧“曲池”“足三里”穴,强度以针柄微颤为度,刺激20 min,1次/d;培哚普利组:培哚普利(0.4 mg/kg)悬液每天灌胃1次;模型组每日捆绑束缚20 min,不予治疗;同龄同种系正常血压的京都大鼠(WKY)8只为空白对照组.空白对照组自由饮食,不予处理.实验疗程为6周.测量大鼠尾动脉收缩压;HE染色观察肾脏组织形态结构;免疫组织化学染色法观察肾Ⅰ、Ⅲ型胶原在肾脏沉积光密度;RT-PCR法检测转化生长因子-β1mRNA (TGF-β1 mRNA)在各组大鼠肾脏表达情况.结果:与模型组比较,针刺组血压显著下降(P＜0.01);肾脏形态结构损害程度较轻;肾I、Ⅲ型胶原蛋白沉积阳性面积明显减少(均P＜0.05);肾TGF-β1mRNA的半定量分析表达下降(P＜0.05),其作用和西药培哚普利相似.结论:针刺“曲池”“足三里”穴可能通过减少肾脏Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和抑制TGF-β1在肾脏表达而干预肾脏纤维化的进程.     

芪蚣抗纤方中活血化瘀药对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1及Smad2/3的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)活血组对免疫损伤性肝纤维化大鼠转化生长因子(TGF-β1)及Smad2/3的影响.方法:猪血清腹腔注射法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组,模型组、活血低剂量组、活血高剂量组,用双抗夹心法(ELISA法)测定血清TGF-β1含量;免疫组化法检测肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3的表达.结果:①血清学指标:模型组血清TGF-1含量较其他组明显升高(P＜0.01).与模型组比较,活血组血清TGF-β1含量显著下降(P＜0.01),并具量效关系.②免疫组化检测:模型组肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显,活血组肝组织中TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显低于模型组(P＜0.01).结论:芪蚣抗纤方活血组通过降低TGF-β1,减少Smad2/3的激活,从而抑制肝纤维结缔组织增生,减轻肝损伤及肝纤维化程度.具有抑制肝纤维化的作用.     

荔枝核总黄酮对大鼠肝纤维化TGF-β/Smad信号通路的影响

目的:观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的肝纤维化大鼠肝脏组织转移生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路中关键信号传导分子TGF-β1,Smad3,Smad7表达水平的变化,探讨TFL抗纤维化的作用机制.方法:SD大鼠ip DMN 4周建立大鼠肝纤维化模型,以ig水飞蓟宾为阳性对照50 mg· kg-1组,用不同剂量的TFL(400,200,100 mg·kg-1·d-1)ig给药,造模当日开始分组给药,每日1次,共给药6周.于实验第6周末处死大鼠,抽取下腔静脉血检测天冬氨酸转氨酶(AST),丙氨酸转氨酶(ALT),留取肝脏同一部位行HE,Masson染色观察大鼠病理改变及肝纤维化程度,采用RT-PCR法检测TGF-β1,Smad3,Smad7 mRNA的表达.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的肝纤维化程度明显增加,血清AST,ALT均显著升高,肝组织TGF-β1,Smad3 mRNA的表达明显增强(P＜0.05),Smad7 mRNA的表达显著减弱(P＜0.05);与模型组比较,TFL各剂量组和水飞蓟宾组血清AST,ALT均明显低于模型组,肝脏TGF-β1,smad3的表达明显降低(P＜0.05),而smad7则有所升高.结论:荔枝核总黄酮可减轻实验性大鼠肝损伤及改善肝纤维化程度,其作用机制可能与抑制TGF-β1,Smad3 mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达有密切关系.     

黄芪汤对酒精性肝纤维化大鼠TNF-α及TGF-β_1的影响

目的:探讨黄芪汤防治酒精性肝纤维化的机制,为其临床运用提供依据。方法:将大鼠分为三组,其中黄芪汤组及模型组以乙醇灌胃制作大鼠酒精性肝纤维化模型,空白对照组不造模;观察各组大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)和转化生长因子(TGF-β1)水平。结果:与空白对照组比较,模型组血清及肝组织、肿瘤坏死因子和转化生长因子水平明显升高;与模型组比照,黄芪汤组血清及肝组织TNF-α、TGF-β1水平降低。结论:大鼠酒精肝纤维化可能在于TNF-α、TGF-β1水平升高;黄芪汤对肝纤维化保护作用显著。     

手针与电针对急性运动大鼠骨骼肌线粒体的影响

目的:研究手针和电针对急性游泳运动大鼠骨骼肌线粒体的抗氧化酶活性、Ca2 含量、Ca2 -ATP酶活性的影响,探讨针刺提高运动能力的作用机制.方法:将SD雄性大鼠随机分为4组.手针组和电针组在急性游泳运动前运用手捻针和电针两种不同的方法进行刺激,运动后处死取材;对照组在安静状态下、游泳组在急性游泳运动后处死取材,测定有关指标.结果:急性游泳运动后游泳组大鼠骨骼肌线粒体的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、Ca2 -ATP酶活性与对照组相比较有显著性下降(P<0.05),Ca2 含量明显上升(P<0.01).手针组可以明显提高急性游泳运动后大鼠骨骼肌线粒体超氧化物歧化酶活性(P<0.05);手针组与游泳组比较,GSH-Px活性、Ca2 -ATP酶活性有显著性升高(P<0.05).游泳组、电针组Ca2 含量均比对照组明显升高(P<0.01).结论:针刺可保护细胞免受急性运动所致的损伤,维持线粒体的某些功能,从而延缓疲劳,延长肌肉工作时间,预防骨骼肌损伤.而电针的作用似乎不明显.     

基于TGFβ1/Smad7通路观察麻黄碱对肺心病大鼠血管内皮结构及功能的影响

目的:基于转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)/信号转导分子7(signal transduction molecule 7,Smad7)通路观察麻黄碱对肺心病大鼠血管内皮结构及功能的影响.方法:选择12～13周龄的SD大鼠60只,采用随机数字表法分为正常组、模型组、...     

中药复方对DMN诱导的肝纤维化大鼠Ⅳ型胶原和TGF-β1蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方对二甲基亚硝胺(DNM)诱导大鼠肝纤维化后Ⅳ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达的影响,以了解其对肝纤维化的治疗作用和分子机制.方法:采用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,实验分为正常组、模型组和治疗组,观察肝组织羟脯氨酸含量,肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平及肝组织病理变化.结果:补肾柔肝方对肝纤维化有明显的治疗作用,治疗组羟脯氨酸含量要显著低于模型组,同时能使肝组织Ⅳ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平下调.结论:补肾柔肝方可用于治疗肝纤维化.其机制可能与下调TGF-β1表达,抑制Ⅳ型胶原表达有关.     

针刺足三里通过调控ROCK1/AKT信号通路防治脓毒症致肌萎缩的作用机制

目的 探讨针刺足三里通过Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)/蛋白激酶B(AKT)信号通路防治脓毒症后肌萎缩的作用及机制。方法 8周龄SPF级雄性小鼠45只,随机分为3组,分别为对照(Sham)组、脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)组、针刺(LPS+acupuncture)组,其中LPS组和针刺组分别给予腹腔注射LPS诱导脓毒症模型,对照组腹腔注射等体积生理盐水。苏木素-依红染色法检测小鼠肌肉组织结构变化;酶联免疫吸附剂测定法(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定促炎因子白细胞介素1β(Interleukin1β,IL-1β)、白细胞介素(Interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),抗炎因子白细胞介素10(Interleukin 10,IL-10)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β),以及骨骼肌损伤相关指标肌红蛋白(Myoglobin, MYO)、肌酸激酶MB同工酶(Creat...     

毫针刺“肾俞”穴对慢性肾衰模型大鼠干预作用探究

目的:观察毫针刺"肾俞"穴对慢性肾衰模型大鼠的肾功能及肾间质纤维化相关指标的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型对照组和针刺组,正常组10只,其余两组各15只。采用腺嘌呤混悬液灌胃法制作慢性肾衰模型,针刺组在造模的同时采用毫针刺"肾俞"穴进行治疗,造模及治疗为期4周。造模及治疗结束后,检测各组大鼠的肾脏指数、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及转化生长因子(TGF-β1)的表达。结果:针刺组的肾脏指数较模型组显著降低(P 0. 05),Scr和BUN显著降低(P 0. 05),肾组织TGF-β1的表达显著降低(P 0. 05)。结论:针刺"肾俞"穴能够有效提高大鼠肾脏功能,减轻肾间质纤维化,提示传统针刺疗法通过刺激"肾俞"穴发挥了经穴脏腑的直接调理效应。     

芍药苷通过抑制TGF-β1/Smad3通路对急性心肌梗死后心室重塑的作用研究

目的 基于抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3通路探讨芍药苷对急性心肌梗死后心室重塑的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪组和芍药苷高、低剂量组,每组8只.除假手术组外,其余各组通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死大鼠模型.曲美他嗪组大鼠灌胃10 mg/(kg·d)曲美他...     

红芪总黄酮对离心运动大鼠骨骼肌的抗氧化作用

目的:研究红芪总黄酮对大鼠离心运动后骨骼肌抗氧化能力的影响。方法:72只Wistar大鼠随机分为安静对照组(Control group,CG)、离心运动组(Eccentric Group,EG)和离心运动+药物预处理组(Drug pretreatment group,DPR)。依据运动后时间点不同再次分为运动前1 h和运动后1,24,48 h 4个亚组,每组6只。离心运动前3天,药物预处理组大鼠每日定时给予0.2mg/kg红芪总黄酮灌胃,其余各组大鼠给予等量生理盐水灌胃。力竭运动后,取各组大鼠腓肠肌,分别检测乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:离心运动后,大鼠骨骼肌组织中LDH,ROS和MDA含量与运动后明显升高,而SOD活性下降(P0.01~0.05)。红芪总黄酮可延缓离心运动后大鼠骨骼肌ROS、MDA及LDH含量的积累并提高SOD活性,与相应对照组比较,差异具有显著性(P0.05)。结论:红芪总黄酮可有效防止高强度运动后氧化应激所导致的骨骼肌损伤。     

血必净联合前列腺素E_1对肺纤维化大鼠转化生长因子β-_1的影响

目的:探讨血必净注射液联合前列腺素E1对急性肺间质纤维化大鼠转化生长因子β-1表达的影响。方法:采用一次性气管内注射博来霉素的方法复制大鼠肺间质纤维化模型。将108只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、激素治疗组、血必净治疗组、前列腺素E1治疗组、中西医结合治疗组6组(每组n=18),各组动物分别于给药后第7天、14天、28天分批处死,分离肺组织并称重,观察肺组织病理切片、转化生长因子β-1(TGF-β1)免疫组化染色及定量观察。结果:1各组肺损伤程度以中西医结合组程度最轻。2中西医结合组较其余组显著抑制TGF-β1的表达。结论:血必净注射液联合前列腺素E1的中西结合治疗能有效改善实验性肺纤维化大鼠的病理改变,并延缓其恶化进程。其机制可能是通过抑制TGF-β1的表达,减轻早期炎症反应并减少胶原蛋白的产生,使炎症及纤维化病变减轻。     

八味柔肝颗粒对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1, α-SMA及TIMP-1表达的影响

目的:探讨八味柔肝颗粒对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用。方法:以四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型。将大鼠随机分为八味柔肝颗粒治疗组(0.75,1.5,3 g·kg-1)、模型组、秋水仙咸碱组(0.5 mg·kg-1)和空白对照组。均连续ig 6周,观察各组肝组织中转移生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)蛋白表达情况。结果:八味柔肝颗粒组TGF-β1,α-SMA,TIMP-1表达明显低于模型组(P<0.01)。结论:八味柔肝颗粒能抑制CCl4诱导实验性肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1,α-SMA,TIMP-1的表达,可能是其抗肝纤维化的主要作用机制。     

抗纤灵方对肾纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路表达的影响

目的:研究抗纤灵方对5/6肾切除所致肾纤维化大鼠的治疗效果,并探讨其分子作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组(n=10),假手术组(n=10),5/6肾切除肾纤维化造模组(n=30)。将造模成功的大鼠随机分为模型组、抗纤灵组、氯沙坦钾组。氯沙坦钾组、抗纤灵方组每日分别给予氯沙坦钾(33. 3 g·kg-1)及抗纤灵方(21 g·kg-1)灌胃治疗,其余组都用等体积的生理盐水。持续8周灌胃后处死,检测各组大鼠血肌酐(SCr),尿素氮(BUN),24 h尿蛋白(24 h-Pro);苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学改变;马松(Masson)染色观察肾脏纤维化程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad2,Smad3,Smad7蛋白和mRNA在肾脏组织中的表达。结果:与正常组和假手术组比较,模型组大鼠的SCr,BUN,24 h-Pro上升,纤维化面积和肾脏损伤评分增加,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白表达升高,Smad7 mRNA与蛋白表达显著下降(P 0. 01)。与模型组相比,氯沙坦钾组、抗纤灵方组可减少纤维化面积,降低肾脏损伤评分,SCr,BUN,24 h-Pro,TGF-β_1,Smad2,Smad3 mRNA与蛋白的表达水平,Smad7mRNA与蛋白表达显著上调(P 0. 01),但低于正常组与假手术组的水平。结论:中药抗纤灵方可通过抑制TGF-β_1/Smad通路来延缓肾纤维化。     

甲乙煎对肝纤维化大鼠肝组织MMP2及TGFβ1表达的影响

目的:观察中药甲乙煎对实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP2)及转化生长因子1(TGFβ1)的影响。方法:雄性清洁级Wister大鼠60只,随机分为正常对照组和肝纤维化模型组,运用DMN(二甲基亚硝胺)对模型组大鼠诱导肝纤维化,四周后将模型组大鼠随机分为模型对照组、甲乙煎高浓度组和低浓度组。对甲乙煎高浓度组和低浓度组给与中药甲乙煎灌胃,共治疗四周,处死全部大鼠。对肝组织进行HE染色观察,并采用免疫组化法检测大鼠肝组织MMP2和TGFβ1的表达。结果:经中药甲乙煎高、低浓度治疗后,大鼠肝组织TGFβ1的表达较模型对照组明显降低(P<0.05),甲乙煎高浓度组较低浓度组TGFβ1的表达亦明显降低(P<0.05),而甲乙煎高、低浓度组MMP2的表达较模型对照组无明显差异(P>0.05)。结论:甲乙煎能下调实验性肝纤维化大鼠肝组织TGFβ1的表达,这是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

肝乐颗粒对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用

目的:明确肝乐颗粒对转化生长因子(TGF)-β_1/Smad信号通路的干预作用,探讨其防治肝纤维化的分子学机制。方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,肝乐颗粒(1.5,3.0,6.0 g·kg~(-1))和秋水仙碱(1.0×10~(-4)g·kg~(-1))。采用50%四氯化碳每周2次,连续12周皮下注射的方法,诱导肝纤维化大鼠模型。造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应剂量的肝乐颗粒和秋水仙碱,每天1次,连续6周。末次给药8 h后,处置大鼠,取固定部位肝脏组织,苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察肝脏病理组织学损伤程度,免疫组化和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ),Smad2,TGF-β_1或TGF-βI型受体(TβRⅠ)蛋白的表达,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测肝组织中CollagenⅠ,Smad2,TGF-β_1mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝纤维化损伤程度,肝组织中CollagenⅠ,TGF-β_1,Smad2,TβRⅠ蛋白及mRNA的表达明显增加(P0.01);与模型组比较,肝乐颗粒中、高剂量组不仅可减轻肝组织病理损伤程度,减少胶原沉积,还可显著降低CollagenⅠ,TGF-β_1,Smad2,TβRⅠ蛋白及mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:肝乐颗粒对肝纤维化大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调控TGF-β_1/Smad信号通路,从而抑制HSC活化,减少细胞外基质过度沉积有关。     

黄芪葛根汤对糖尿病大鼠心肌TGF-β_1/Smad3通路的影响

目的:研究黄芪葛根汤对实验性糖尿病心肌病变的干预作用及机制。方法:采用高脂饲料喂养和链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠心肌病变模型,观察黄芪葛根汤对血糖、胰岛素、心肌纤维化、转化生长因子-β1(TGF-β1)及其信号蛋白Smad3表达的影响;mRNA表达采用RT-PCR方法检测,蛋白表达采用免疫组化方法。结果:黄芪葛根汤可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素,改善胰岛素抵抗,减少心肌羟脯氨酸含量抑制胶原增生,降低心脏指数,并显著抑制心肌TGF-β1/Smad3 mRNA和蛋白的强表达。结论:黄芪葛根汤可以通过调控TGF-β1/Smad3通路显著干预实验性糖尿病心肌纤维化病变。