成对关联刺激对脑梗死大鼠突触可塑性和神经元凋亡及脑源性神经营养因子的影响

目的 观察成对关联刺激（PAS）对缺血性脑梗死大鼠缺血半暗带皮质突触超微结构、神经元凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。 方法 健康雄性Sprague-Dawley大鼠45只,随机分为三组：假手术组、手术对照组及PAS组,每组15只。手术对照组和PAS组采用线栓法行右侧MCAO造模,假手术组行同样操作,但不栓塞大脑中动脉。造模成功后24 h,PAS组给予0.05 Hz、共90对脉冲的PAS干预,持续30 min,每天1次,连续28 d（周围神经电刺激强度为6 mA,波宽200 μs;经颅磁刺激强度120%RMT）,手术对照组及假手术组大鼠正常饲养但不给予任何干预。术后28 d取大鼠脑组织,采用透射电镜观察缺血半暗带皮质突触超微结构的变化、TUNEL法检测缺血半暗带皮质神经元凋亡情况、实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测缺血半暗带皮质BDNF mRNA表达水平。 结果 ①术后28 d,与假手术组相比,手术对照组和PAS组突触界面曲率、突触活性区长度及突触后膜致密物质厚度减小（P<0.05）;与手术对照组相比,PAS组突触界面曲率、突触活性区长度及突触后膜致密物质厚度增加（P<0.05）。②术后28 d,与假手术组相比,手术对照组和PAS组皮质神经元凋亡比率明显增加（P<0.05）;PAS组皮质神经元凋亡比率明显低于手术对照组（P<0.05）。③术后28 d,PAS组BDNF mRNA表达水平明显高于假手术组及手术对照组（P<0.05）,手术对照组BDNF mRNA表达水平显著低于假手术组（P<0.05）。 结论 PAS可调节缺血性脑梗死大鼠神经可塑性、抑制神经元凋亡,而上调缺血半暗带皮质BDNF mRNA的表达水平可能是其作用机制之一。     

强化训练对局灶性脑缺血大鼠信号素3a及其受体神经纤毛蛋白-1 mRNA表达的影响

目的:观察不同强度的游泳训练对局灶性脑缺血大鼠Sema 3a及其受体神经纤毛蛋白(NRP-1)mRNA表达的影响;探讨强化游泳训练对局灶性脑缺血大鼠的神经保护机制.方法:采用线栓法建立左侧大脑中动脉阻塞2h再灌注动物模型.60只造模成功的雄性SD大鼠随机分为训练1组、训练2组、训练3组和对照组,每组15只.训练1组大鼠每天游泳1次,每次5min;训练2组大鼠每天游泳1次,每次10min;训练3组大鼠每天游泳2次,每次10min;对照组大鼠不做任何训练.另取15只大鼠为假手术组,不阻塞大脑中动脉血流,不做任何训练.以上5组大鼠又随机分为术后3d、7d、14d 3个时相点,每个时相点5只大鼠.采用Zausinger评分法评价神经功能缺损情况.应用RT-PCR测定缺血侧大脑皮质Sema 3a和NRP-1的mRNA表达量.结果:假手术组神经功能正常.对照组各时相点的神经功能评分与假手术组同时相点相比,差异均有显著性意义(P＜ 0.05);各训练组训练3d、7d、14d后的神经功能改善情况优于同时相点对照组(P＜0.05),训练3组受损神经功能改善最明显,其训练3、7、14d后Zausinger神经功能评分分别为(2.40±0.55)、(3.40±0.55)和(4.20±0.84).训练1、2、3组各时相点Sema 3a和NRP-1的mRNA表达量明显低于对照组同时相点(P＜0.05),且训练3组Sema 3a和NRP-1的mRNA表达量降低较其他各训练组更明显,其训练3、7、14d后,Sema 3a与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.62±0.06)、(0.53±0.10)和(0.42±0.06),NRP-1与GAPDH的mRNA表达水平之比分别为(0.64±0.13)、(0.53±0.08)和(0.38±0.10).结论:运动训练可以减少脑缺血再灌注大鼠Sema 3a和NRP-1的mRNA表达量,从而恢复受损神经功能;强化运动训练能够取得更好的效果.     

姜黄素联合电针治疗对脑缺血大鼠BDNF、NGF表达的影响

目的观察姜黄素联合电针治疗对大鼠缺血脑组织中脑源性神经营养因子（BDNF）及神经生长因子（NGF）表达的影响。 方法选取健康雄性Wistar大鼠,采用线栓法将其制成大脑中动脉栓塞大鼠模型,采用随机数字表法将制模成功大鼠分成4组,分别是对照组、电针组、姜黄素组及电针+姜黄素组（简称观察组）,每组15只。姜黄素组及电针组大鼠于制模后分别给予姜黄素腹腔注射或电针治疗,观察组大鼠于制模后则联合给予姜黄素腹腔注射及电针治疗,对照组大鼠制模后未给予特殊处理。于制模后14d时对各组大鼠进行神经功能评分,然后处死各组大鼠分别取脑梗死区脑组织制成标本,采用免疫组化染色技术检测各组大鼠脑梗死区BDNF及NGF阳性细胞表达情况。 结果制模后14d时发现观察组大鼠神经功能缺损评分［（1.37±0.59）分］明显低于电针组、姜黄素组及对照组评分［分别为（1.59±0.38）分、（1.68±1.06）分和（1.98±0.26）分］,组间差异均具有统计学意义（P<0.05）;另外观察组大鼠脑梗死区BDNF及NGF阳性细胞表达均较其他三组明显增强,组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。 结论姜黄素联合电针治疗可促进大脑中动脉栓塞大鼠脑缺血组织BDNF及NGF表达,并可能通过该机制发挥神经保护作用。     

丰富康复训练对脑缺血大鼠行为功能表现的影响

目的：研究丰富康复训练能否促进大鼠脑缺血再灌注后行为功能表现的改善.方法：雄性Wistar大鼠77只,体重160-200g,随机分为缺血丰富训练组（Ischemia＋Enriched,IE组,n=36）,缺血对照组（Ischemia＋Standard,IS组,n=8）,假手术丰富训练组（Sham＋Enriched,SE组,n=21）和假手术对照组（Sham＋Standard,SS组,n=12）,使用线栓模型造成右侧大脑中动脉阻断（MCAO）并再灌注,丰富训练组自术后2d至28d群居于丰富环境笼并按步骤给予跑笼、转棒及杂技训练,记录杂技时间,对照组则独居标准环境笼,不予任何训练.再灌注1d、7d、14d、21d和28d分别进行各项行为功能测试.结果：杂技运动时间日益缩短,14d以前IE组显著性劣于SE组（P＜0.05）,14d以后无显著性差异;训练前,缺血组间和假手术组间Bederson神经功能评分和感觉运动评分无显著性差异（P＞0.05）,缺血组则显著性劣于假手术对照组（P＜0.05）,训练后,28d时Bederson评分IE组显著性优于IS组（P＜0.05）,感觉运动评分中仅21d时斜笼测试IE组显著性优于IS组（P＜0.05）;肢体放置测试和足失误测试中IE组与IS组间始终无显著性差异（P＞0.05）,但IE组恢复趋势优于IS组,缺血组仍显著性劣于假手术对照组（P＜0.05）.结论：丰富康复训练可促进脑缺血大鼠行为功能表现的改善.     

电针刺激对脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复的影响

目的 观察电针刺激对脑缺血再灌注大鼠缺血侧脑梗死体积、脑细胞凋亡及大脑皮质蛋白激酶A（PKA）表达的影响,初步探讨电针刺激的脑保护作用机制。 方法 采用随机数字表法将120只健康成年雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、电针组及电针预刺激组。采用线栓法将模型组、电针组及电针预刺激组大鼠制成左侧大脑中动脉阻塞（MCAO）2 h再灌注模型。电针预刺激组大鼠于造模前采用电针连续刺激百会、大椎及右侧内关穴5 d,每日1次,每次30 min。电针组和电针预刺激组均于制模后继续电针刺激百会、大椎及右侧内关穴,每日1次,每次30 min。模型组及假手术组大鼠在相同时间内予以捆绑固定,不给予任何特殊处理。于电针刺激5 d、10 d时,分别采用Garcia评分法评价各组大鼠神经功能缺损情况,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察各组大鼠缺血侧脑梗死体积,通过流式细胞仪测定各组大鼠缺血侧皮质细胞凋亡率,采用免疫组织化学法测定各组大鼠缺血侧皮质PKA阳性细胞表达率。 结果 模型组大鼠神经功能严重受损,假手术组大鼠无神经功能缺陷。电针组、电针预刺激组在制模后5 d、10 d时其Garcia评分、脑梗死体积、脑细胞凋亡率及PKA阳性细胞表达率均明显优于模型组同时相点水平（P<0.05）;并且电针预刺激组上述时间点Garcia评分、脑梗死体积、脑细胞凋亡率及PKA阳性细胞表达率亦显著优于电针组同时相点水平（P<0.05）。 结论 电针刺激能促进脑缺血再灌注大鼠受损神经功能恢复,如辅以电针预刺激能进一步改善受损神经功能,其疗效明显优于单纯电针刺激;关于电针预刺激的脑保护作用机制可能与减小脑梗死体积、抑制脑细胞凋亡、促进PKA阳性细胞表达等因素有关。     

康复训练对脑梗死大鼠功能恢复及皮质梗死边缘区神经细胞超微结构的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠功能恢复及皮质梗死边缘区神经细胞超微结构的影响。方法：采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，将大鼠随机分成假手术组（n=8）、卒中训练组（n=20）、卒中对照组（n=20）。卒中训练组每天予以转棒、平衡木、滚筒等训练，假手术组与卒中对照组则置于普通笼内饲养，不予以任何针对性训练。脑梗死大鼠于造模后第3天、7天、21天及35天时进行运动功能评分，随后灌注固定取材，用普通光镜、透射电镜观察脑皮质梗死边缘区神经细胞的变化。结果：在造模后第7天、21天、35天时卒中训练组大鼠的平衡木及网屏测试评分分值均优于卒中对照组（P<0.05）；且于光镜、电镜观察下脑皮质梗死边缘区神经细胞的核膜较卒中对照组完整、核下凝集的染色质较为稀少，线粒体结构较为清晰，粗面内质网表面核糖体更为丰富。结论：康复训练能提高脑梗死大鼠的运动功能，促进皮质梗死边缘区神经细胞超微结构的恢复。     

运动训练对脑梗死大鼠梗死边缘区神经细胞自噬及凋亡的影响

目的:研究运动训练对脑梗死急性期大鼠神经功能恢复及梗死边缘区皮质神经细胞自噬及凋亡的影响。方法:建立大脑中动脉闭塞再灌注模型,并分成运动训练组、对照组和假手术组。运动训练组大鼠给予运动训练;对照组与假手术组则不予以任何针对性训练。造模术后第3、7、14d采用改良神经损伤程度评分(mNSS)对各组大鼠进行功能评估,同时以尼氏染色法测量脑梗死体积,免疫荧光方法观察梗死边缘区皮质自噬标志物LC3-Ⅱ及凋亡标志物TUNEL的表达情况。结果:造模术后14d运动训练组大鼠mNSS及脑梗死体积均优于对照组,差别具有显著性意义(P0.05)。运动训练组大鼠梗死边缘区皮质LC3-Ⅱ阳性细胞数在造模后14d少于对照组(P0.05)。相关性分析结果显示LC3-Ⅱ阳性细胞数与mNSS(r=0.901,P0.001)及梗死体积(r=0.832,P0.001)成正相关。TUNEL阳性细胞数在造模后7、14d均少于对照组(P0.001),且44.6%的LC3-Ⅱ与TUNEL存在共定位。结论:运动训练能够促进脑梗死急性期大鼠神经功能恢复,其机制可能与其减少梗死边缘区神经细胞自噬及凋亡有关。     

氨甲酰促红细胞生成素促进脑缺血后神经再生的实验研究

目的观察氨甲酰促红细胞生成素（CEPO）对实验大鼠脑缺血后LINGO-1、生长相关蛋白(GAP-43)表达及脑梗死体积的影响,探讨CEPO对脑缺血后神经再生的促进作用。 方法将48只SD大鼠分为假手术组、缺血对照组及氨甲酰促红细胞生成素治疗组（简称CEPO治疗组）,采用线栓法将缺血对照组、CEPO治疗组大鼠制成大脑中动脉闭塞（MCAO）模型。各组大鼠于脑缺血90min后拔出线栓,CEPO治疗组同时注射0.5ml CEPO,缺血对照组及假手术组均注射0.5ml生理盐水。于缺血再灌注第7天时处死各组大鼠,采用免疫印迹技术检测LINGO-1和活化型caspase-3表达;采用免疫组化染色技术检测GAP-43表达;采用甲酚紫染色法检测各组大鼠脑梗死体积及脑水肿情况。 结果假手术组、缺血对照组及CEPO治疗组LINGO-1表达值分别为（0.25±0.02）、（1.22±0.06）和（0.66±0.05）,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。假手术组大鼠脑皮质未见活化型caspase-3表达,缺血对照组缺血脑皮质活化型caspase-3表达值上升至（86.6±10.2）%,CEPO治疗组则下降至（40.3±8.7）%,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。假手术组、缺血对照组及CEPO治疗组GAP-43阳性表达值分别为0、（55.02±1.62）个/HP和（72.11±3.23）个/HP,各组间差异均具有统计学意义（P<0.05）。另外CEPO治疗组脑梗死体积及脑水肿程度均显著小于缺血对照组（P<0.05）。 结论脑缺血后给予CEPO干预能抑制实验大鼠脑梗死部位LINGO-1及活化型caspase-3表达、促进GAP-43蛋白表达、减小脑梗死体积及脑水肿程度,从而发挥促神经再生作用。     

头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠病理学及神经生长因子和转化生长因子的影响

目的探讨头穴丛刺对急性脑梗死大鼠病理学及神经生长因子（NGF）和转化生长因子（TGF）的影响。方法将30只大鼠随机分为3组：假手术组（A组）、造模组（B组）、头穴丛刺组（C组）,每组10只。采用线栓法制备急性脑梗死动物模型,观察头穴丛刺法对急性脑梗死大鼠病理学的影响及脑组织皮质及海马区NGF和TGF表达的变化。结果造模后第7天,B组大鼠缺血区脑组织明显水肿,周围区神经细胞数明显减少;与B组比较,C组大鼠脑缺血区脑组织水肿减轻,神经细胞数增多;术后7d,A组与B组大鼠皮质及海马区均有少量NGF及TGF表达,两组比较差异无显著性意义（P〉0.05）,C组大鼠皮质及海马区NGF及TGF表达明显升高,与B组比较差异有显著性意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论头穴丛刺能减轻大鼠脑缺血区组织水肿,改善缺血半影区神经细胞功能状态,促进神经胶质细胞增生,并可诱导皮质及海马区NGF和TGF的表达,减轻缺血造成的神经元损伤。     

丰富康复训练对脑缺血再灌注大鼠微管相关蛋白2和突触素表达的影响

目的研究丰富康复训练能否促进大鼠脑缺血再灌注后微管相关蛋白2（MAP2）和突触素（SYN）的表达，探寻其与神经系统可塑性的联系。 方法雄性Wistar大鼠77只，体重160~200 g，随机分为缺血丰富训练组（n=36），缺血对照组（n=8），假手术丰富训练组（n=21）和假手术对照组（n=12），使用线栓模型造成右侧大脑中动脉阻断（MCAO）并再灌注，丰富训练组自术后2 d至28 d给予丰富康复训练，对照组则独居标准环境笼，不予任何训练。再灌注1 d、7 d、14 d、21 d和28 d分别进行各项行为功能测试，并用免疫组化SP法染色观测MAP2和SYN的表达。 结果训练后，28 d时Bederson评分缺血丰富训练组（0.910±0.302）优于缺血对照组（1.330±0.577），差异有统计学意义（P<0.05）；足失误测试中缺血丰富训练组与缺血对照组间差异始终无统计学意义（P&rt;0.05），但缺血丰富训练组恢复趋势优于缺血对照组；免疫组化结果示梗塞周边区及海马的MAP2和SYN的表达早期下降，明显低于假手术组（P<0.05），后不断恢复，缺血丰富训练组在晚期（MAP2-21 d为0.2055±0.0124，MAP2-28 d为0.2406±0.0419；SYN-28 d为0.2931±0.2407）优于缺血对照组（MAP2-21 d为0.1681±0.0124，MAP2-28 d为0.2064±0.0301；SYN-28 d为0.2407±0.0565），差异有统计学意义（P<0.05）。 结论丰富康复训练可促进脑缺血再灌注大鼠MAP-2和SYN的表达，促进功能表现的改善和大脑可塑性的改变。     

电刺激小脑顶核对脑梗死大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43的影响

目的观察电刺激小脑顶核（FNS）对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。 方法选用随机数字表法将60只健康成年雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、FNS组及模型组，采用线栓法将FNS组及模型组大鼠制成左侧大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/R）模型。FNS组大鼠于制模3h后给予FNS治疗，模型组仅将针电极置于大鼠小脑顶核部位，但不给予电刺激。分别于制模1d、3d及7d时采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力，并于上述时间点采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脑梗死部位GAP-43 mRNA表达。 结果制模后1d、3d及7d时模型组与FNS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期均较正常组及假手术组明显延长（均P<0.05）；FNS组大鼠上述时间点逃避潜伏期［分别为（25.72±0.42）s，（24.27±0.55）s和（23.82±0.63）s］则较模型组显著缩短（均P<0.05）。在制模后1d、3d及7d时正常组与假手术组大鼠脑组织中仅存在少量GAP-43 mRNA表达；模型组及FNS组GAP-43 mRNA表达在上述时间点均较正常组及假手术组显著增多（均P<0.05）；并且上述时间点FNS组GAP-43 mRNA表达［分别为（1.54±0.34），（2.03±0.56）和（2.78±0.81）］亦显著强于模型组（均P<0.05）。 结论FNS干预有助于改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力，其治疗机制可能与上调脑梗死部位神经元GAP-43 mRNA表达、从而促进脑梗死灶周围神经轴突再生及修复有关。     

水中平板步行训练对脊髓损伤大鼠运动功能及脑源性神经营养因子、神经营养素-3表达的影响

目的探讨水中平板步行训练在脊髓损伤（SCI）大鼠康复中的作用及其与脊髓可塑性的关系。 方法将40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假模组、模型对照组、水疗训练组、减重平板训练组及水中平板训练组,每组8只。建立大鼠脊髓挫伤模型,各训练组于术后1周开始进行8周的康复训练。采用BBB评分、爬网格试验评定大鼠后肢功能的恢复,采用免疫组织化学方法检测大鼠脊髓中脑源性神经营养因子（BDNF）、神经营养素-3（NT-3）的表达。 结果水中平板训练组大鼠后肢运动功能较其他组明显改善（P<0.05）。3个训练组大鼠脊髓前角神经元BDNF及NT-3的表达与模型对照组相比均显著增加（P<0.05）。BDNF的表达在3个训练组之间两两比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。水中平板训练组NT-3的表达明显高于减重平板训练组（P<0.05）;而水中平板训练组与水疗训练组相比,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论水中平板训练可能通过影响BDNF及NT-3的表达增强脊髓损伤大鼠脊髓可塑性,促进后肢运动功能的恢复。     

运动训练对大鼠脑梗死灶周突触素mRNA及生长相关蛋白mRNA水平的影响

目的研究运动训练对大鼠梗死灶周突触素mRNA和生长相关蛋白(GAP-43)mRNA的表达水平和大鼠运动功能的影响。 方法将肾性高血压后的大脑中动脉闭塞脑梗死模型大鼠100只分成训练组和对照组（n＝50）,训练组大鼠进行运动训练,对照组大鼠常规饲养。2组大鼠均于制模成功后第3,7,14天采用横木行走实验评定各亚组大鼠运动功能,在制模成功后第1,3,7,14,28天时用半定量逆转录-多聚酶链式反应法检测各组大鼠脑梗死灶周边区突触素mRNA、GAP-43 mRNA水平。 结果造模后第7,14天,2组大鼠运动功能得分与本组造模后第3天比较,差异有统计学意义(P<0.01); 制模后第7,14天时,训练组运动功能得分［分别为(3.2±0.3)分和（5.8±0.9)分］显著高于对照组［分别为 (1.6±0.4)分和（2.6±0.8)分］,差异有统计学意义(P<0.01)。2组大鼠脑梗死灶周突触素mRNA和GAP-43 mRNA水平均在造模后第1,3,7天时逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.01)。训练组突触素mRNA水平在造模后第3,7,14和28天时均高于对照组, 差异有统计学意义(P<0.01); 训练组GAP-43 mRNA水平仅在造模后第3和第7天时(0.295±0.03、0.512±0.045) 高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。 结论运动训练可使大鼠脑梗死灶周突触素mRNA和GAP-43 mRNA水平增高,促进运动功能恢复。     

游泳及转笼训练对脑缺血再灌注大鼠神经功能及梗死灶Nogo-A、NgR表达的影响

目的:观察不同强度游泳及转笼训练对脑缺血再灌注大鼠神经轴突生长抑制剂-A(neurite outgrowth inhibitor-A,Nogo-A)、神经轴突生长抑制剂(Nogo receptor,Ng R)表达的影响。方法:将105只Wistar雄性大鼠随机均分为假手术组、对照组和游泳及转笼训练1、2、3组,后4组采用线栓法建立大脑中动脉闭塞实验动物模型,假手术组方法同上,但不阻塞大脑中动脉血流。在造模成功后24h进行游泳及转笼训练,游泳及转笼训练1、2、3组分别于训练后第3天、第7天、第14天行神经功能评分,后处死大鼠取脑免疫组化测定Nogo-A、Ng R阳性蛋白的表达。假手术组、对照组不进行训练。结果:游泳及转笼训练组Bederson行为学评分分别于训练后第3天、第7天、第14天较对照组降低(P0.05或P0.01),游泳及转笼训练1、2、3组行为学评分组间比较有显著性差异(P0.05或P0.01)。对照组脑梗死体积与假手术组比较明显增大(P0.01),游泳及转笼训练1、2、3组大鼠与对照组比较,脑梗死体积明显减小(P0.01)。对照组脑梗死组织中Nogo-A表达均明显高于假手术组(P0.05)。训练后第3天,游泳及转笼训练3组Nogo-A表达明显低于对照组(P0.05);第7天,游泳及转笼训练1、2、3组Nogo-A表达均明显低于对照组(P0.05),游泳及转笼训练3组Nogo-A表达明显低于游泳及转笼训练2组(P0.05);训练后第3天、第7天,游泳及转笼训练2、3组Ng R表达均明显低于对照组(P0.05),游泳及转笼训练3组Ng R表达明显低于游泳及转笼训练2组(P0.05);第14天,游泳及转笼训练3组Ng R表达明显低于对照组(P0.05)及游泳和转笼训练2组(P0.05)。结论:游泳及转笼训练能促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复,且神经功能恢复与康复训练强度呈正相关,其对脑功能的保护作用可能与降低Nogo-A、Ng R表达有关。     

运动训练对脑缺血大鼠神经功能及梗死边缘区细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨运动训练对急性脑缺血大鼠神经功能及脑皮质梗死边缘区细胞增殖与凋亡的影响.方法:采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,将大鼠随机分成运动训练组(n=15)、对照组(n=15)和假手术组(n=9).运动训练组大鼠从术后1d开始每天予以跑笼运动训练;对照组和假手术组大鼠置于普通笼内饲养,不予以任何针对性训练.3组大鼠在造模术后1d、8d和15d分别进行神经功能评分(mMSS),并采用Ki67免疫荧光、TUNEL法分别观察脑皮质梗死边缘区细胞增殖、凋亡,以Western印迹法检测Bcl-2与Bax蛋白表达的情况.结果:在造模术后8d和15d,训练组大鼠的神经功能评分(mNSS)均明显优于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05);免疫荧光结果显示,训练组大鼠脑皮质梗死边缘区Ki67阳性细胞增加,且以造模术后8d最明显,与对照组相比,差异有显著性意义(P＜0.05);在造模术后8d和15d,训练组TUNEL阳性细胞数较对照组明显减少,同时,训练组梗死边缘区Bcl-2的表达高于对照组,Bax的表达低于对照组.结论:运动训练能够促进急性脑梗死大鼠神经功能的恢复,其机制可能与促进皮质梗死边缘区细胞增殖、减少细胞凋亡有关.     

不同穴组电针对局灶性脑梗死大鼠神经行为学及Neurocan表达的影响

目的比较电针不同经络穴组对局灶性脑梗死大鼠神经行为学及neurocan表达的干预效果。方法将健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠85只随机分为5组:假手术组(n=5)、模型组(n=20)、水沟-百会组(n=20)、肝俞-肾俞组(n=20)和足三里-曲池组(n=20);模型组和各电针组线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,随机再分为脑缺血1 d、3 d、7 d、14 d和21 d共5个亚组。神经行为学采用Longa评分,RT-PCR及免疫组化测定缺血侧皮质neurocan mRNA和蛋白表达。结果假手术组无神经功能障碍;各电针组大鼠在缺血3 d后神经行为学评分逐渐恢复,7~21 d时较模型组明显改善(P<0.05)。模型组neurocan mRNA和蛋白表达在缺血1 d后逐渐增强,14 d达到峰值,21 d时有所下降,但仍维持高水平表达(P<0.01);各电针组在缺血3 d后neurocan mRNA和蛋白表达均较模型组低(P<0.05),其中水沟-百会和肝俞-肾俞组在缺血14 d时neurocan mRNA和蛋白表达较足三里-曲池组低(P<0.05)。结论局灶性脑梗死大鼠缺血侧皮质neurocan mRNA和蛋白表达明显上调。急性期给予电针刺激能下调其表达水平,改善神经行为学评分;其中电针水沟-百会穴和肝俞-肾俞穴较足三里-曲池穴治疗效果更好。     

超早期和早期运动训练对脑梗死大鼠神经功能恢复的影响及机制

目的:探讨超早期和早期运动训练对脑梗死急性期大鼠神经功能恢复的影响及梗死边缘区皮质神经细胞坏死及凋亡在其中的作用。方法:将成年雄性SD大鼠104只,采用改良Zea-Longa线栓法制作左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型,随机分为5组:超早期训练组(31只)、早期训练组(22只)、超早期对照组(23只)、早期对照组(23只)、假手术组(5只)。训练组大鼠分别于术后24h、48h开始每天予以跑笼运动训练;对照组和假手术组大鼠置于普通笼内饲养,不予以任何针对性训练。各组大鼠在造模术后24h、运动训练前和运动训练第14d分别进行神经功能评分。训练3d后检测脑组织含水量,训练14d后检测梗死体积并采用尼氏染色、TUNEL法分别观察脑皮质梗死边缘区细胞坏死、凋亡的情况。结果:随机分组后,超早期训练组的死亡率高于早期训练组的死亡率(41.94%vs 18.18%)。训练第14d,早期训练组的mNSS评分均明显优于其对照组(P0.05);早期组(训练组-对照组)mNSS评分差值与超早期组mNSS评分差值之间比较有显著性差异(P0.05)。训练3d后,超早期训练组的脑组织含水量较其对照组明显增加(P0.05);早期训练组的脑组织含水量较其对照组无明显差异(P0.05)。训练14d后,超早期训练组的脑梗死体积与其对照组比较无明显差异(P0.05);早期训练组的脑梗死体积均明显小于其对照组(P0.05);各训练组与相应的对照组梗死体积的比值示早期组小于超早期组(P0.05)。超早期训练组梗死边缘区的神经细胞数量、TUNEL阳性细胞数与其对照组相比无明显差异(P0.05);早期训练组梗死边缘区的神经细胞数量明显多于其对照组(P0.05),TUNEL阳性细胞数较其对照组明显减少(P0.05)。结论:早期运动训练与超早期运动训练相比,可以显著改善急性脑梗死大鼠的神经功能,其机制可能与减少梗死边缘区神经细胞的坏死与凋亡有关。     

探索学习对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围皮质巢蛋白及神经生长因子表达的影响

目的：观察探索学习对局灶性脑梗死大鼠巢蛋白（nestin）及神经生长因子(NGF)表达的影响。方法：健康雄性SD大鼠70只,其中60只以电凝法造成右侧大脑中动脉阻断（MCAO）模型后,随机分为探索学习组（n=30）居于探索笼,对照组（n=30）每5只一组群居于标准笼,假手术组（n=10）仅开颅不电凝大脑中动脉,居于标准笼。探索学习组和对照组分别于术后第1天、第1周、第2周、第4周各组随机选取5只大鼠处死,假手术组分别于MCAO第1周、第4周时随机选取5只大鼠处死,即进行巢蛋白及NGF免疫组化染色,测定其在脑梗死灶周围皮质巢蛋白及NGF的表达情况。结果：探索学习组巢蛋白及NGF阳性神经元数在MCAO术后第7天、第14天明显多于手术对照组（P<0.05）。结论：探索学习能促进梗死灶周围皮质巢蛋白及NGF的表达。     

强化训练对脑卒中后抑郁大鼠抑郁程度及海马区Kalirin-7表达的影响

目的 观察强化训练对脑卒中后抑郁大鼠抑郁程度及海马区Kalirin-7表达的影响,探讨强化训练改善卒中后抑郁大鼠抑郁程度可能的机制。 方法 取40只雄性Wistar,采用随机数字法将大鼠分为假手术组、脑卒中后抑郁（PSD）组、普通训练组、强化训练组,每组10只。PSD组、普通训练组、强化训练组采用线栓法建立左侧大脑中动脉（MCAO）模型,并给予慢性不可预知性应激刺激(CMS),假手术组仅分离颈总、颈内、颈外动脉,不做插线处理,也不给予CMS。造模成功后,假手术组与PSD组不进行跑台训练,普通训练组、强化训练组分别进行普通和强化跑台训练。4组大鼠分别于训练前和训练14d、28d后进行行为学实验［糖水消耗实验（SPT）、旷场试验（OFT）、强迫游泳实验（FST）］,然后采用western blot法检测其左侧海马区Kalirin-7蛋白的表达情况。 结果 训练14d后,PSD组、普通训练组、强化训练组各项行为学实验结果与假手术组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）,普通训练组的OFT和FST结果分别为（55.71±3.94）s和（67.42±3.64）s,与PSD组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）,强化训练组各项行为学实验结果与PSD组和普通训练组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;训练28d后,PSD组、普通训练组各项行为学实验结果与假手术组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）,普通训练组和强化训练组各项行为学实验结果与PSD组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）,且强化训练组各项行为学实验结果与普通训练组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）。Western Blot检测显示,普通训练组、强化训练组海马区Kalirin-7的表达均显著高于PSD组同时间点（P<0.05）;强化训练组海马区Kalirin-7表达显著高于普通训练组同时间点（P<0.05）。 结论 强化训练可改善脑卒中后抑郁大鼠的抑郁程度,增加海马区Kalirin-7的表达,促进其神经功能的恢复,并且强化训练的效果优于普通训练。     

运动训练对缺血再灌注大鼠纹状体中代谢型谷氨酸Ⅰ组受体基因表达的影响

目的研究运动训练对缺血再灌注大鼠纹状体处Ⅰ组代谢型谷氨酸受体（mGluRⅠ）水平变化的影响，以探讨运动训练对缺血性脑梗死的保护机制。 方法将2～3月龄雄性成年SD大鼠18只随机分为假手术组、缺血再灌注模型组（缺血再灌注组）和缺血再灌注后运动训练2周组（运动训练组），每组6只大鼠。于运动训练组运动训练2周后，3组大鼠同时断头取脑，采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析大鼠缺血部纹状体脑组织内的代谢型谷氨酸受体1型（mGluR1）和代谢型谷氨酸受体5型（mGluR5）的信使核糖核酸（mRNA）表达水平。 结果缺血再灌注组大鼠纹状体mGluR1和mGluR5的mRNA升高明显（P＜0.01），运动训练组大鼠纹状体mGluR1和mGluR5的mRNA较缺血再灌注组有明显下调（P＜0.01）。 结论运动训练可以使缺血再灌注大鼠Ⅰ组代谢型谷氨酸受体（mGluRⅠ）水平下调，这可能是抑制兴奋毒性谷氨酸的产生的重要机制之一。