人正常卵巢及卵巢癌腺苷酸环化酶活性研究

以人正常卵巢皮质层及手术切除的卵巢癌组织为材料,分别分离纯化细胞膜,测定膜蛋白的腺苷酸环化酶(AC)活性。结果:正常卵巢细胞膜AC活性为67±8U/mg蛋白;卵巢癌细胞膜AC活性明显高于正常,平均活性为234±86U/mg蛋白;卵巢癌中粘液性囊腺癌细胞膜AC活性高于浆液性囊腺癌者。     

组织匀浆腺苷酸环化酶活力测定条件的探讨

环磷酸腺苷(cAMP)是多种激素和神经介质发挥细胞内作用的第二信使,在环磷酸腺苷的研究中,其酶系统越来越受到人们的重视。腺苷环化酶(Adenylate Cyclase,简称AC),是激素通过cAMP调节细胞功能的关键环节之一,激素与靶细胞受体发生作用,使AC活性改变,从而使cAMP增加或减少。因此,AC活性的测定,对于cAMP调节细胞代谢和其它功能活动机制的研究,对于进一步阐明激素作用原理,提供了一个重要手段。这一测定     

ODC与肿瘤关系的研究

肿瘤发病率日渐增高，严重影响和威胁着人们生命。其死亡率在我国是各种疾病死亡率之冠。肿瘤发生原因，众说纷云，但有一点已清楚，组织中鸟氨酸脱按酶（ornithinede-carboxylase，ODC）活性升高。ODC广泛分布于人体组织内，其催化鸟氨酸脱羧生成腐胺，是合成多肢的限速酶。凡生长旺盛的组织（如胚胎，再生肝及肿瘤组织，尤其是恶性肿瘤）ODC的活性升高。组织正常人血清中ODC活性是一定的，只有在上述情况下，此酶活性才升高。因此，测定血清中ODC活性对肿瘤的早期诊断，尤其是对正常人进行健康普查有着十分重要的意义。测定原理：1…     

大鼠心肌环核苷酸系统的增龄变化

测定不同月龄大鼠心室肌中cAMP、cGMP和钙调素(CaM)含量,及腺苷酸环化酶(AC)基础活性、AC肾上腺素激活活性、cAMP磷酸二酯酶(cAMP-PDE)活性。结果:cAMP、AC基础活性和AC肾上腺素激活活性随大鼠月龄增长而明显降低,cAMP/cGMP比值和CaM含量24月龄鼠明显低于10月龄鼠,cGMP含量10月龄鼠明显低于2月龄鼠,cAMP-PDE活性10月龄鼠明显高于2月龄鼠。提示心肌环核苷酸系统随大鼠月龄的增加而变化。     

重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织腺苷酸环化酶活性的变化及银杏苦内酯B的影响

[目的]观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺组织腺苷酸环化酶（AC）活性的变化及银杏苦内酯BN52021）的影响。[方法]Wistar雄性大鼠随机分为阴性对照组（NC组）、SAP模型组（SAP）和BN52021治疗组（BN组）,每组按术后不同时相点（1、2、3、6、12、24h）分为6小组,用放射免疫的方法检测胰腺组织中AC活性的变化,同时对胰腺组织进行病理学观察和测定血清淀粉酶的变化。[结果]血清淀粉酶和病理学结果显示SAP大鼠制模成功,BN52021能降低SAP的血清淀粉酶和改善病理学变化;SAP组AC活性在2h,3h较Nc组显著升高（P〈0．05）;BN组AC活性在2、3、12h较NC组显著升高（P〈0．05）;在2h、3h较SAP组显著降低（P〈0．05）。[结论]SAP发生后,胰腺组织AC活性升高,可能通过第二信使途径完成细胞内信号转导,导致炎症反应延续并放大。BN52021通过降低SAP大鼠胰腺组织AC活性发挥治疗作用。     

三七总皂苷对烫伤大鼠心肌GsαmRNA表达的影响

目的研究三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对烫伤早期大鼠心肌Gsα mRNA表达的影响.方法通过30%体表面积皮肤Ⅲ度烫伤大鼠模型,应用dot blotting杂交、心肌组织原位杂交、放射免疫分析等技术观察三七总皂苷对严重体表烫伤大鼠心肌Gsα mRNA表达水平、cAMP产生量、腺苷酸环化酶(adenylylcyclase,AC)活性的影响.结果大鼠心肌组织中Gsα mRNA表达量、cAMP含量、AC活性在烫伤后3 h均明显降低.100,200 mg/kg PNS明显增加烫伤大鼠心肌组织Gsα mRNA的表达,增加量与PNS剂量呈显著正相关(r=0.95,P＜0.05).100,200 mg/kg使烫伤大鼠心肌组织cAMP含量分别增加21%,36%,AC活性分别增强40%,63%(P＜0.01).结论 PNS可增加烫伤大鼠心肌GsαmRNA表达,增强AC活性,增加cAMP生成.     

~(60)Co-γ射线对小鼠十二指肠—空肠前列腺素含量的影响

前报已证实小鼠~(60)Co-γ射线照射后小肠中cAMP含量升高和cGMP含量降低,而且cAMP含量升高与DNA合成抑制关系密切。cAMP水平保持稳定是受两种酶控制的:腺苷环化酶(AC)和环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)。一般认为电离辐射使敏感组织中的AC活性增高而对PDE活性影响不大。至于AC活性增高的原因文献报导     

高压液相色谱法测定血小板腺苷酸环化酶活力

测定腺苷酸环化酶(AC)活力一般用同位素标记底物 ATP,测定反应生成的标记 cAMP量。为建立简便、高效、无放射性的 AC 活     

小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性的昼夜变化

目的 观察小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性的昼夜变化。方法 采用放射免疫和酶学方法。结果 小鼠海马组织中cAMP含量和AC活性具有昼夜节律性，cAMP含量高峰在CT10和CT22，低谷在CT4和CT16，AC活性高峰在CT13和CT1，低谷在CT7和CT19。结论 小鼠海马组织cAMP含量和AC活性的昼夜节律可能提示海马功能的昼夜节律性。     

小鼠肝组织中腺苷酸环化酶和环腺苷酸磷酸二酯酶比活力的研究

本文介绍腺苷酸环化酶(AC)和环腺替酸磷酸二酯酶(PDE)比活力的一种简单、快速测定法。以腺苷三磷酸(ATP)或环磷酸腺苷(cAMP)作为底物,同肝匀浆孵育时生成的或未消耗的 cAMP,用氧化铝柱层析法分离,以 Tris-HCl 缓冲液(pH7.4)洗脱,用分光光度法测定洗脱液中的 cAMP。根据 cAMP 的生成量和 cAMP 的消耗量分别表示 AC 和 PDE 活力。测定了小白鼠肝组织中 AC 和 PDE 比活力。上清液和沉淀中 AC 比活力分别为0.96和1.64单位/mg 蛋白质、PDE 比活力分别为2.06和0.50单位/mg 蛋白质,上清中 AC/PDE 比值为0.47,沉淀中比值为3.30。     

家兔发热时不同脑区组织腺苷酸环化酶和丘脑下部磷酸二醋酶活性的变化

用封闭群大耳白家兔16只,随机分为对照组和发热组。对照组测量动物的基础体温,不注射内毒素(ET),发热组动物I.V.ET后80min体温明显升高。给ET后80min处死动物。动物发热时丘脑下部组织AC和PDE的活性均增强,与对照组动物比较差异均非常显著(P<0.001),发热组动物脑干AC活性虽有增强趋势但统计学意义,发热组动物脑皮质AC活性减弱与对照组动物比较差异非常显著(P<0.01),作者推论:家兔ET性发热是由于丘脑下部AC活性增强使cAMP产生增加所致。     

SSAO抑制剂的研究进展

胺基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）是体内具有重要生理功能的胺氧化酶，能催化胺类物质进行氧化脱氨反应生成相应的醛类，并伴随产生H2O2和氨水。SSAO抑制剂能降低体内SSAO的活性，影响各种代谢产物的生成，对SSAO结构性质、生理功能和病理变化的研究具有重要意义。SSAO抑制剂多能同时抑制单胺氧化酶（MAO），目前发现2-溴乙胺（2-BEA）能选择性地高效抑制SSAO。     

跑台运动对D-半乳糖致阿尔茨海默病模型大鼠干预的实验研究

目的:探讨8周跑台运动对D-半乳糖致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠空间学习记忆能力的影响及其相关机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、运动对照(EC)组、AD模型对照(AC)组、AD模型训练(AE)组,每组10只。AC组与AE组每日腹腔注射1次D-半乳糖(150mg/kg),共8周。同时AE组和EC组进行连续8周、每周6d的中等强度的跑台训练。8周后,采用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,HE染色检测海马CA1区神经元形态,化学比色法测定海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH)活性。结果:与AC组相比,AE组大鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期明显缩短,120s内在平台所放置的目标象限停留时间和穿越平台区域次数明显增多(P<0.01);AE组海马神经元病理损伤形态明显改善;AE组海马组织SOD活性明显提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),但GSH活性表达无明显差异(P>0.05)。结论:8周跑台训练可以改善AD大鼠的学习记忆能力,减少海马神经元凋亡,其机制可能是上调海马组织的SOD活性,降低MDA含量,进而促进神经元存活。     

改装100型色谱仪进行Ni/Al_2O_3对苯加氢催化活性评价试验

1 基本原理和方法对催化剂活性的测定,是表面化学研究的重要内容之一。本文测定了苯在Ni/Al_2O_3催化剂上加氢反应的转化率和选择性,进而评价了Ni/Al_2O_3催化剂对苯加氢的活性以及温度等条件对活性的影响。反应原理为:     

人canstatin基因的克隆、表达、纯化及其生物活性测定

目的:克隆人Canstatin cDNA,在E.coli中融合表达和纯化,并测定表达产物抑制新生血管生成活性.方法:从中国人胎盘组织提取总RNA,RT-PCR扩增出Canstatin cDNA,克隆入pTYB1载体中并测序,构建原核表达载体pTYB1-hCAN,IPTG诱导表达,几丁质亲和纯化,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成实验进行活性测定.结果:RT-PCR产物约为700bp,测序结果与文献报道序列一致.构建了人Canstatin原核表达载体vTYB1-hCAN,在大肠杆菌中表达.纯化的融合蛋白在CAM实验中能明显抑制血管生成.结论:克隆、表达了具有生物学活性的人canstatin蛋白.     

Mg~(2+)和Ca~(2+)对兔心脏腺苷酸环化酶的调节作用

本文用氧化铝层析分离、纯化cAMP测定腺苷酸环化酶(AC)活性的方法,观察了Mg~(2+)和Ca~(2+)对兔心肌质膜AC的影响。结果Mg~(2+)激活AC,其Ka为2.5mM。Ca~(2+)抑制AC,其Ki为30μM。Ca~(2+)和Mg~(2+)对兔心肌质膜AC的调节是兢争的。     

AC900型血细胞分析仪故障检修1例

AC900型血细胞分析仪是瑞典SWELAB公司生产的一款三分类全自动血细胞分析仪.其测试原理为:稀释后的细胞用阻抗法计数,HGB用比色法测定.在使用过程中出现测量故障.     

谷胱甘肽还原酶活性系数测定条件的比较

谷胱甘肽还原酶活性系数测定条件的比较李良晨，陈廷华，杨予安，油书恒河南医科大学生物化学教研室郑州４５００５２关键词谷胱甘肽还原酶，活性系数，测定红细胞谷胱甘肽还原酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎＲｅｄｕｃｔａｓｅ）在人类红细胞中具有极重要的生理功能，它是维持...     

人MUC5AC基因启动子荧光素酶报告 基因载体的构建及其转录活性分析

目的：克隆人黏蛋白/黏液素5AC(MUC5AC)基因启动子并构建该启动子的荧光素酶报告系统,探讨该启动子的活性及转录靶向性。方法：运用Vector NT1软件包对MUC5AC基因5′端1 348 bp进行启动子特征分析;以人A549细胞基因组DNA为模板分离出人MUC5AC基因5′端非翻译区大小为1 348 bp的片段并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板对启动子进行5′端删除分析,分别扩增737 bp(-689/+48),372 bp(-324/+48),112 bp(-64/+48)的片段,与荧光素酶报告基因载体重组构建,通过双荧光素酶活性进行转录活性分析。应用定点突变技术,在重组质粒的基础上建立MUC5AC启动子区SP-l结合位点和核因子（NF）-κB结合位点单独突变体,并测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的转染细胞荧光素酶的相对活性。结果：序列分析发现人MUC5AC基因5′端1 348 bp的区域内存在多个顺式作用元件,成功构建了4个不同长度的MUC5AC启动子报告基因载体。双荧光素酶活性分析372 bp片段为有活性的最小片段。NE可诱导含有MUC5AC启动子区NF-кB结合位点单独突变体（pGL3E-MUC5AC-NF-кB-MU）荧光素酶相对光强度增加,而NE不能诱导SP-l结合位点单独突变体（pGL3E-MUC5AC-SP-1-MU）荧光素酶表达增加。结论：上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究MUC5AC基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。MUC5AC 5′上游序列中-324/-64位点存在参与NE诱导MUC5AC基因表达的重要调控元件,位于此区域的顺式作用元件SP-1位点在NE诱导MUC5AC基因表达机制中起重要作用。     

血小板内环磷酸腺苷测定方法的改进

3′、5′,环—磷酸腺苷(简称cAMP)是调节机体多种生理功能的重要物质。许多疾病的发生与cAMP有关,特别是血小板内cAMP含量,它不仅影响血小板本身的聚集、释放以及形态的改变,而且还与动脉粥样硬化和血栓形成有着密切联系。因此测定血小板内cAMP水平是了解血小板的生理功能、病理变化和某些药物作用原理的一个重要手段。我们在国内现行测定方法的基础上,对血小板内cAMP的提取进行了较大的玫进。测定结果比较满意。现介绍于下。