利用微生物转化模型研究苯丙哌林的代谢产物

选用短刺小克银汉霉菌AS 3.15 3对苯丙哌林进行微生物转化研究 .根据液相色谱和质谱数据推测 ,转化产物分别为苯丙哌林单羟基化物 (约6 5 % ) ,苯丙哌林双羟基化物和苯丙哌林单羟基化物的硫酸酯结合物 .发现苯丙哌林的微生物转化与其在人体内的药物代谢有很多相似之处 ,转化菌株能产生人体Ⅰ相代谢产物和部分Ⅱ相代谢产物 .考察了影响单羟基转化产物形成的因素 ,发现以pH 6 .5 ,底物浓度 0 .0 5 % ,转化反应持续 72h等条件较为适宜 .通过半制备高效液相色谱法分离出两种主要转化产物 ,经核磁共振光谱分析确证其结构分别为 4 羟基苯丙哌林和 4′ 羟基苯丙哌林 .结果表明 ,微生物转化模型是研究苯丙哌林代谢适宜的体外模型     

小克银汉霉菌对萘普生的微生物转化

目的：通过分离和鉴定萘普生由真菌转化生成的代谢产物,研究微生物转化和哺乳动物体内药物代谢之间的相似性．方法：选用3种小克银汉霉菌对萘普生进行微生物转化研究．采用液相色谱—质谱联用法检测代谢产物,并通过半制备高效液相色谱法分离出主要代谢物,经质谱和核磁共振光谱确证其结构．结果：萘普生被转化成去甲萘普生和去甲萘普生硫酸结合物,这两种代谢产物都是已知的哺乳动物代谢产物．其中去甲萘普生硫酸结合物是首次在微生物转化样品中发现．结论：小克银汉霉菌对萘普生的转化结果与哺乳动物的体内代谢有某些相似性,有可能成为一种新的体外模型进行药物代谢研究,用于预测和制备可能的药物代谢产物．     

三重四级杆复合线性离子阱质谱对丹皮酚经大鼠肝微粒体体外代谢产物的分析

[摘要] 目的：以丹皮酚为研究对象,系统分析丹皮酚在体外经大鼠肝微粒体代谢的Ι相以及Ⅱ相代谢产物。方法：借助HPLC-DAD与三重四级杆复合线性离子阱高分辨质谱,采用LightSight软件辅助建立丹皮酚及2,4-二羟基苯乙酮经肝微粒体代谢产物的pMRM-IDA分析方法,分析了丹皮酚在体外经大鼠肝微粒体代谢的Ι相以及Ⅱ相代谢产物。结果：结果发现,丹皮酚在大鼠肝微粒体中经Ι相代谢后产物主要为的4位去甲基的2,4-二羟基苯乙酮和4种氧化代谢产物,而2,4-二羟基苯乙酮Ⅱ相代谢产物主要为4位葡萄糖醛酸化的糖苷化代谢产物。结论：建立了丹皮酚Ι相以及Ⅱ相代谢产物的分析方法,为丹皮酚进一步的代谢研究以及临床合理化用药提供新的方向。     

乙氧苯柳胺在家兔体内的主要代谢产物

采用高效液相色谱法对家兔口服乙氧苯柳胺（Ｎ－（４－乙氧苯基）－２－羟基苯甲酰胺）后在尿中的代谢物进行了分离与检测．用β－Ｄ－葡糖苷酸酶和该酶加专属性抑制剂葡糖二酸－１，４－内酯分别对尿样进行水解处理，发现该药的主要代谢物为β－Ｄ－葡糖醛酸结合物，其含量超过尿中代谢物总量的８０％．利用色谱保留值和紫外双波长吸收比对酶解后的主要生成物进行定性分析，证明该代谢物为乙氧苯柳胺葡糖醛酸结合物（Ｎ－（４－乙氧苯基）－苯甲酰胺－２－Ｏ－葡糖苷酸）．此外，在家兔给药后０～１２ｈ尿样中未检测出乙氧苯柳胺原形药物及其可能的代谢产物水杨酸．     

小克银汉霉属微生物模型在体外药物代谢研究中的应用

药物代谢在药效和安全性评价中是非常重要的,而利用微生物转化为药物体外代谢模型则具有很多优势。小克银汉霉属的许多菌株具有与人体类似的Ⅰ相和Ⅱ相药物代谢酶,其微生物模型能对多种底物进行高效转化。本文对其在药物代谢方面的应用进行综述,并对其未来的发展进行了展望。     

模式生物斑马鱼用于5-羟基黄酮代谢的合理性研究

目的 采用模式生物斑马鱼研究5-羟基黄酮的代谢,探索斑马鱼用于药物Ⅱ相代谢的适用性。方法 将斑马鱼培养于5-羟基黄酮溶液中,定时取鱼体及药液,采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用检测,根据正、负离子模式准分子离子峰获得化合物分子量信息,通过与文献数据或对照品对照,结合碎片离子,推测可能的代谢产物。结果 在斑马鱼体内或体外药液检测到5-羟基黄酮原型及其2个单羟基葡萄糖醛酸结合物和1个单羟基硫酸结合物。结论 5-羟基黄酮在斑马鱼作用下的葡萄糖醛酸化反应与其在大鼠体内的Ⅱ相代谢机制高度一致,并首次在负离子模式下检测到5-羟基黄酮硫酸结合物。斑马鱼用于药物Ⅱ相代谢具合理性,且具有化合物用量少、成本低、方法简单、高效的优势,为建立斑马鱼体内药物代谢新模型提供重要参考。     

高效液相-电喷雾质谱分析7-羟基黄酮在大鼠体内的代谢产物

目的:研究7-羟基黄酮在大鼠体内的代谢。方法:应用高效液相-电喷雾质谱检测大鼠灌胃7-羟基黄酮后血浆、尿液、胆汁和粪便中的代谢产物。实验采用Zorbax C18色谱柱,二元线性梯度洗脱进行色谱分离,并与电喷雾质谱联用,根据负离子模式的分子离子峰获得化合物相对分子质量信息,推测化合物的可能结构。结果:在大鼠尿液、粪便、血浆、胆汁中检测到原形成分7-羟基黄酮和7-羟基黄酮葡萄糖醛酸结合物,在胆汁或尿中尚检测到7-羟基黄酮硫酸结合物。结论:7-羟基黄酮在大鼠体内主要以Ⅱ相代谢产物葡萄糖醛酸结合物和硫酸结合物的形式存在。     

短刺小克银汉霉AS3.153菌株对雷诺嗪的代谢转化

目的建立能够模拟雷诺嗪在哺乳动物体内代谢的微生物模型,并应用该模型制备代谢产物。方法采用液相色谱-质谱联用法测定雷诺嗪在4种小克银汉霉转化模型中的转化产物,选择其中转化能力最强的菌株,针对雷诺嗪3种主要代谢产物进行了培养基初始pH值、底物质量浓度、转化时间等转化条件的优化。结果短刺小克银汉霉AS 3.153对雷诺嗪的转化能力最强,将其转化为9种代谢产物,采用半制备液相色谱法制备分离得到3种主要代谢产物,确证其结构分别为羟基化雷诺嗪及雷诺嗪硫酸酯结合物。结论短刺小克银汉霉AS 3.153对雷诺嗪的转化与哺乳动物代谢结果类似,可作为模拟哺乳动物体内代谢的体外模型使用。     

短刺小克银汉霉菌对维拉帕米转化的能力

目的　研究微生物模型对药物维拉帕米的代谢转化能力 ,并与人体内药物代谢进行比较。方法通过菌株筛选 ,确定以短刺小克银汉霉菌AS 3.15 3为转化菌株 ,采用液相色谱 质谱联用技术对代谢产物进行检测 ,并考察了微生物转化体系中影响代谢物产率的主要因素。结果　该霉菌转化维拉帕米形成C -N键和C -O键断裂的 10种氧化代谢产物。发现以pH 6 .5 ,底物浓度 0 .0 75 % ,转化反应持续 96h等条件 ,代谢产物的总产率 >95 % ,其中 1种主要产物N 去短链烷基维拉帕米的产率 >6 5 %。结论短刺小克银汉霉菌AS 3.15 3对维拉帕米具有与人体类似而且广泛的代谢途径 ,是研究人体药物代谢适宜的体外模型     

硝克柳胺在大鼠和人肝脏的体外代谢研究

研究硝克柳胺在大鼠肝微粒体和胞浆中的代谢动力学，鉴定硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体中的主要代谢产物及参与代谢的药物代谢酶。采用高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)方法测定大鼠肝微粒体和胞浆中硝克柳胺浓度，应用选择性抑制剂鉴定参与硝克柳胺代谢的药物代谢酶类型，采用液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)法分离鉴定硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体中的主要代谢产物。硝克柳胺在大鼠和人肝微粒体的主要代谢产物(M₁)为硝基还原产物［3-(3′-羧基-4′-羟基苯胺羰基)-6-氨基-7-羟基-8-甲基香豆素］，大鼠体内(血浆、尿液、胆汁及肝组织)主要代谢产物与M₁一致。硝克柳胺的体外代谢是依赖多个药物代谢酶参与的酶促反应，包括微粒体CYP450还原酶、细胞色素b₅还原酶和CYP2C6以及胞浆NAD(P)H脱氢酶和黄嘌呤氧化酶。     

联苯双酯代谢产物的分离和鉴定

给大鼠灌胃联苯双酯后,用TLC法分离尿中代谢产物。发现尿中的主要代谢物为葡萄糖醛酸结合物,将此结合物水解后,用TLC法分离到一种极性较葡萄糖醛酸结合物为弱的代谢物,经光谱分析测定其结构为4-羟基-4′-甲氧基-5,6,5′,6′-二次甲二氧基-2,2′-二甲氧羰基联苯(简称4-去甲联苯双酯)。此外还证实,大鼠灌胃后在肝、肾组织中均以葡萄糖醛酸结合物为主,仪有少量非结合形代谢物和原形药物。     

短刺小克银汉霉菌对马兜铃酸A的代谢转化

选取短刺小克银汉霉菌（Cunninghamella blakesleana AS3．910）用微生物转化的方法对马兜铃酸A（Aristolochic acid）进行了代谢转化研究并比较，微生物转化产物和哺乳动物体内的代谢产物的异同。考察了影响微生物转化产物形成的各种因素，并对该转化体系进行了优化，采用高效液相色谱、质谱对代谢产物进行了检测和分析。多种因素条件会对微生物的转化产生影响，发酵液中主要的转化产物是马兜铃酸A的O去甲基化物，该产物和报道的NSL动物在摄入马兜铃酸A后尿中发现的一种代谢产物结构相同。利用小克银汉霉菌的转化可以方便地制备马兜铃酸A在哺乳动物体内的某些代谢产物，它可以作为研究马兜铃酸A代谢物的一个体外模型进行探索。     

部分黄酮类化合物的Ⅱ相代谢产物及其药理活性研究进展

黄酮类化合物为一大类广泛存在于食物和药物中的天然产物,具有多种药理作用。近来研究表明黄酮类化合物在体内主要以苷元的Ⅱ相代谢产物形式存在,包括不同取代位点的一系列苷元的葡糖醛酸苷、硫酸酯及混合结合物。其中一些Ⅱ相代谢产物已被证明具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、影响代谢酶和转运体等方面的药理活性。文中对文献报道的黄酮、异黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、黄烷-3-醇和花色素等黄酮类化合物的Ⅱ相代谢产物及其药理作用进行了综述。     

染料木素在乳腺癌MCF-7细胞内的代谢研究

目的研究染料木素在乳腺癌细胞中的代谢行为。方法将10μmol.L-1染料木素与乳腺癌MCF-7细胞在37℃下孵化一定时间后终止反应。采用UPLC-MS-MS法测定孵化液中染料木素及II相代谢产物的浓度。结果染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中可迅速代谢为7或4′-葡萄糖醛酸结合物以及7或4′-硫酸结合物。孵化24、48和72 h后,每100μg孵化样品蛋白中,7-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为2.9、5.2和8.9μg.h-1,4′-葡萄糖醛酸结合物的生成率分别为1.1、1.9和3.0μg.h-1,7-硫酸结合物的生成率分别为20.3、32.9和47.3μg.h-1,4′-硫酸结合物的生成率分别为1.7、3.1和4.5μg.h-1。结论染料木素在乳腺癌MCF-7细胞中的主要代谢产物是7-硫酸结合物。     

高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法研究大鼠尿内毛果芸香碱代谢产物

首次应用高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法鉴定了大鼠灌胃给予毛果芸香碱0.2mg后0-8小时内尿中的代谢物。4只大鼠给药毛果芸香碱盐酸盐,收集给药后尿液,固相萃取柱富集、然后应用高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法在线进行多反应监测,进而对尿中微量的代谢物进行了质谱解析。分别定性为毛果芸香碱的葡萄糖醛酸结合物、毛果芸香酸和毛果芸香酸的葡萄糖醛酸结合物。而且发现了各种代谢产物及原形药物在大鼠体内均有构型变化。     

萘普生的微生物转化

目的研究微生物对萘普生的转化能力。方法以雅致小克银汉霉菌AS 3 1 5 6为转化菌株 ,并对转化条件进行优化 ,利用液相色谱 质谱联用法检测转化液中萘普生的代谢产物。结果根据液相色谱和质谱数据推测 ,主要转化产物为O 去甲基萘普生。对影响O 去甲基萘普生形成因素的考察发现 ,以pH 6 0 ,底物浓度 0 0 2 5 % ,转化反应持续 72h等条件较为适宜 ,其产率大于 95 %。结论雅致小克银汉霉菌AS 3 1 5 6能够高度专一性地对萘普生进行O 去甲基转化反应 ,可以作为药物代谢研究新的体外模型。     

LC/MSn鉴定咖啡酸在大鼠体内的代谢产物

目的 研究咖啡酸（CA）在大鼠体内的代谢产物。方法 大鼠灌胃（50 mg·kg-1）给予CA后采集0 ~ 4 h尿样,用电喷雾离子阱多级质谱法对CA在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果 大鼠灌胃给予CA后,在体内可测到2个原形药的甲基化代谢物、2个原形药的单葡萄糖醛酸结合物、1个原形药的双葡萄糖醛酸结合物、2个原形药的单硫酸结合物、2个甲基化物的葡萄糖醛酸结合物和2个甲基化物的硫酸结合物。结论 CA在大鼠体内广泛代谢,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。     

LC/MSn鉴定咖啡酸在大鼠体内的代谢产物

目的研究咖啡酸（CA）在大鼠体内的代谢产物。方法大鼠灌胃（50mg·kg^-1）给予CA后采集0～4h尿样,用电喷雾离子阱多级质谱法对CA在大鼠体内的代谢产物进行分析。结果大鼠灌胃给予CA后,在体内可测到2个原形药的甲基化代谢物、2个原形药的单葡萄糖醛酸结合物、1个原形药的双葡萄糖醛酸结合物、2个原形药的单硫酸结合物、2个甲基化物的葡萄糖醛酸结合物和2个甲基化物的硫酸结合物。结论CA在大鼠体内广泛代谢,其代谢物的结构有待于进一步分析后确证。     

雷公藤甲素和雷公藤红素在大鼠体内的代谢产物分析

大鼠灌胃给予雷公藤甲素与雷公藤红素混合液.采用液相色谱-串联质谱法,在负离子模式下,以一级、二级全扫描方式检测大鼠血清、尿与粪中的代谢产物.在大鼠血清中仅发现原形药物.在尿样中检测到了雷公藤甲素的3种代谢产物,推测分别为其单羟基化代谢产物、环氧化物水解开环代谢产物及谷胱甘肽结合物.在粪中则检测到1种代谢产物,推测为雷公藤甲素的另一单羟基化代谢产物.在尿样中检测到雷公藤红素的1种代谢产物,推测为葡萄糖醛酸结合物;在粪中检测到硫酸结合物.     

叔丁基对苯二酚在大鼠体内的代谢研究

目的利用液相色谱/质谱联用仪(LC/MS)分析叔丁基对苯二酚(TBHQ)在大鼠血清中的代谢物,探讨了TBHQ在大鼠体内的代谢途径。方法通过一级质谱分析,对大鼠血清中TBHQ的代谢物进行鉴别;通过多级质谱分析,对大鼠血清中的TBHQ及其代谢物进行鉴定。结果在大鼠血清中检测到TBHQ(3.5%),TBHQ的代谢物包括硫酸型结合物(93.2%)、葡萄糖醛酸型结合物(1.5%)和一种极性不明代谢物(推测为TBHQ二羟基化物的谷氨酸结合物,1.8%)。结论TBHQ在大鼠血清中主要经Ⅱ相反应(与硫酸或葡萄糖醛酸结合)代谢,此外少量TBHQ会发生Ⅰ相反应,推测为氧化反应,生成的二羟基化物与谷氨酸结合。