类风湿关节炎患者人类白细胞抗原-DR4/1表型与Ⅱ型胶原特异性T细胞增殖及血清Ⅱ型胶原抗体的关系

目的:探讨类风湿关节炎 (RA) 患者HLA-DR4/1表型与Ⅱ型胶原 (CⅡ) 263-272 多肽特异性T细胞增殖和血清CⅡ263-272抗体之间的关系. 方法:将CⅡ263-272多肽与70例RA患者外周血单个核细胞(PBMC)共孵育5天,用3H参入法测定T细胞增殖,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测患者血清CⅡ263-272抗体水平.以序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对上述患者进行HLA-DR分型.结果:在70例RA患者中,27例HLA-DR4/1表型阳性,43例HLA-DR4/1表型阴性.在HLA-DR4/1表型阳性的RA患者中,CⅡ263-272多肽可刺激T细胞增殖的有15例(55.6%),12例(44.4%)呈无反应性;18例(66.7%) 患者抗CⅡ263-272抗体阳性.而在HLA-DR4/1表型阴性的RA患者中,T细胞对CⅡ263-272多肽有反应性者13例(30.3%),无反应性者30例(69.7%);15例(34.8%) RA患者抗CⅡ263-272抗体阳性.HLA-DR4/1表型阳性组CⅡ263-272特异性细胞增殖和CⅡ263-272抗体生成均高于HLA-DR4/1表型阴性组.结论:RA 患者CⅡ263-272 特异性T细胞增殖和CⅡ263-272抗体生成与HLA-DR4/1表型有关.     

类风湿关节炎患者Ⅱ型胶原特异性T细胞增殖及抗体生成与HLA-DR4的关系

目的　探讨类风湿关节炎(RA)患者Ⅱ型胶原 (CⅡ)特异性T细胞增殖和CⅡ抗体生成,及与人类白细胞抗原(HLA)- DR_4亚型之间的关系。方法　将CⅡ263 -272十肽与 62例RA患者外周血单个核细胞(PBMC)共孵育 5d,应用四甲基偶氮唑盐法测定T细胞增殖。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定患者血清CⅡ抗体水平。提取 40例患者外周血基因组DNA,以 33种HLA- DR_4等位基因亚型的特异引物PCR扩增后测定患者HLA DR分型情况。结果　在 62例RA患者中, 38例(61 .3% )患者的T细胞在加入CⅡ263- 272后出现明显增殖,CⅡ263 -272抗体阳性率为 53. 2%。细胞增殖反应阳性的患者CⅡ263- 272抗体的阳性率为 66. 7%,增殖反应阴性的患者为 34 6%,两者比较P<0 .05。CⅡ263 -272抗体阳性的患者T细胞增殖反应率为 69 7%,阴性患者为 42 .1%, 两者比较P<0 .05。所有患者T细胞增殖刺激指数 (SI)与CⅡ263- 272抗体浓度呈显著正相关 (r=0 68,P<0. 01)。40例患者HLA分型中,有 16例携带HLA -DR_4等位基因,未发现HLA DR_4与CⅡ特异性T细胞增殖反应、CⅡ抗体阳性有显著相关性。结论　CⅡ抗体的生成可能与CⅡ特异性T细胞介导的B细胞活化有关。     

类风湿关节炎患者外周血T细胞抑制性多肽的研究

目的探讨HLADRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308317变构肽对类风湿关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的影响。方法选取27例HLADRB1阳性的RA患者,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。采用固相法合成HA308317变构肽,并检测RA患者外周血T细胞对这些多肽的反应性;及多肽对白细胞介素(IL)2、γ干扰素分泌及CD69表达的影响。同时进一步观察HA308317变构肽对CII263272或HA308317多肽介导的T细胞激活的抑制作用。结果变构肽刺激T细胞增殖的阳性率分别为7.4%(APL1)、3.7%(APL2)和3.7%(APL3),明显低于CII263272和HA308317原型肰(62.2%和52.9%),3条变构肽的刺激指数也明显低于原型肽(均P<0.01)。并且,其诱导IL2、γ干扰素分泌的水平及CD69的表达亦下降(P<0.05)。与单独加入CII263272或HA308317原型肽的对照组相比,加入HA308317变构肽的T细胞增殖的刺激指数明显下降(P<0.05)。结论替换HA308317多肽中T细胞受体的接触残基产生了弱或非T细胞刺激肽,它们可能有效地抑制RA的T细胞免疫反应。     

广西壮族人群类风湿关节炎患者HLA-DR53、DR4基因及其与抗-CCP抗体的相关性研究

目的探讨广西壮族类风湿关节炎(RA)患者人类白细胞抗原(HLA)-DR53、DR4基因发生的频率数及其与抗-CCP抗体相关性。方法研究对象为49例RA患者及54例健康体检者,采用PCR-SSP法检测HLA-DR53、DR4基因;ELISA法检测抗-CCP抗体。结果 1DR4基因出现频率在RA患者与健康者相当(P>0.05)。2DR53基因出现频率在RA患者明显高于健康者(P<0.05)。3HLA-DR4基因阳性患者更易出现抗-CCP抗体阳性(P<0.05)。结论 1我区壮族人群DR4与RA的发病无相关。2DR4基因阳性RA患者更易出现抗-CCP抗体阳性。3DR53基因阳性RA者与抗-CCP抗体阳性无相关。     

类风湿关节炎患者瓜氨酸化Ⅱ型胶原的T细胞增殖反应和抗体生成

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者对瓜氨酸化Ⅱ型胶原(Cit-CⅡ)的T细胞增殖反应和抗体生成,探讨Cit-CⅡ在RA发病机制中的作用.方法 体外用肽基精氨酸脱亚胺酶(PAD)催化牛CⅡ中的精氨酸转变为瓜氨酸,生成Cit-CⅡ,用3H掺入法检测34例RA患者和18例对照者(包括6例骨关节炎患者和12名健康志愿者)的外周血单个核细胞(PBMC)对CⅡ和Cit-CⅡ的增殖反应,用酶联免疫吸附试验测定患者和对照者血清抗CⅡ抗体及抗Cit-CⅡ抗体水平.结果 RA患者的PBMC对CⅡ和Cit-CⅡ的增殖反应阳性率分别为35.3%(12/34)和32.4%(11/34),均分别高于对照组11.1%和0(均P<0.05).RA患者的PBMC对Cit-CⅡ增殖反应阳性率与对CⅡ增殖反应阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).RA患者抗Cit-CⅡ抗体阳性率(52.9%,18/34)高于抗CⅡ抗体阳性率(32.4%,11/34).CⅡ增殖反应阳性组抗CⅡ抗体的阳性率(58.3%,7/12)高于增殖反应阴性组(18.2%,4/22),Cit-CⅡ增殖反应阳性组抗Cit-CⅡ抗体的阳性率(72.7%,8/11)高于增殖反应阴性组(43.5%,10/23),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 抗Cit-CⅡ抗体在RA中有很高的特异性;RA患者抗CⅡ抗体的生成可能与CⅡ特异性T细胞介导的B细胞活化有关.但是Cit-CⅡ并没有比原型CⅡ引起RA患者更强的外周血T细胞增殖反应,Cit-CⅡ在RA细胞免疫发病中的作用仍需进一步研究.     

HLA-DR基因与类风湿关节炎关联性研究

目的: 探讨人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因中的HLA-DR1~HLA-DR10等位基因与皖北地区汉族人群类风湿关节炎(RA)的临床表现、关节X线片影像及有关实验室检查结果的关联性。方法: 选取RA患者80例与健康对照40名,采用特异性引物聚合酶链反应技术检测两组的HLA-DR1~HLA-DR10基因型,分析RA患者临床表现、X线片影像分期以及有关实验室检查结果与上述HLA-DR等位基因的关联性。结果: RA组HLA-DR4基因阳性率为35.0%,正常对照组为15.0%,两组差异有显著性(P<0.05)。血清类风湿因子(RF)阳性和并发肺部病变的RA患者HLA-DR4阳性率均显著增高(P<0.05和P<0.005)。HLA-DR4阳性组与阴性组相比RF滴度较高,血沉较快,抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体水平较高(P<0.05~P<0.01);HLA-DR4阳性组患者晨僵时间显著长于阴性组(P<0.001)。关节功能为Ⅲ或Ⅳ级和X线分期为Ⅲ或Ⅳ期者亦以HLA-DR4阳性组显著为多(P<0.01)。结论: 皖北地区汉族人群RA易感性与HLA-DR4基因有关联性。HLA-DR4基因与晨僵时间、血沉、RF、抗CCP抗体、骨质侵蚀有一定联系,HLA-DR4阳性患者可能更容易发生肺部病变。     

抗环瓜氨酸肽抗体检测与类风湿性关节炎早期诊断

目的 :探讨抗环瓜氨酸肽抗体 (抗CCP抗体 )对类风湿性关节炎 (RA)早期诊断的意义。方法 :采用酶联免疫吸附法 (ELISA) ,了解抗CCP抗体在诊断RA中的敏感性和特异性 ;以及抗CCP抗体在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎中阳性率的关系。结果 :5 6例RA患者 (RF >30 .0IU/ML) ,抗CCP抗体的阳性率为 5 0 .0 % ;6 8例RA患者 (RF2 0 .0～ 30 .0IU/ML) ,抗CCP抗体阳性率为 4 4 .1%。抗CCP抗体对RA的敏感性和特异性分别为 5 0 .0 %和 95 .8%。 30例系统性红斑狼疮 (SLE)且ANA阳性患者 ,抗CCP抗体的阳性率为 10 .0 % ,2 5例强直性脊柱炎 (AS)且HLA -B2 7阳性患者 ,抗CCP抗体的阳性率为 4 .0 %。结论 :抗CCP抗体对RA具有很好的敏感性和特异性 ,且在RF2 0 .0～ 30 .0IU/ML患者中抗CCP抗体的阳性率为4 4 .1% ,结合临床症状能早期诊断RA ,故抗CCP抗体可作为RA血清学早期诊断指标。     

类风湿关节炎患者HLA-DR4/1亚型与抗环瓜氨酸肽抗体的关系

[目的]探讨类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者HLA—DR4／1分子与血清抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗体之间的关系。[方法]收集118例RA患者，以序列特异性引物聚合酶链反应（PCR—SSP）技术对上述患者进行HLA—DR4／1分型，酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测患者血清抗CCP抗体水平。[结果]在118例RA患者中，35例患者HLA—DR4阳性，其中DRB1^＊0405阳性20例；5例患者HLA—DR1阳性。在118例RA患者中，抗CCP抗体阳性有90例。其中，在40例HLA—DR4／1 阳性的RA患者中，抗CCP抗体阳性的占82．5％（33／40）；在其余78例HIA—DR4／1阴性RA患者中，73．1％（57／78）抗CCP抗体阳性。HLA～DR4／1阳性患者与HLA—DR4／1阴性患者抗CCP抗体的阳性率差异无统计学意义（P=0．255）。而20例HLA—DRB1^＊0405阳性的RA患者抗CCP抗体阳性者19例，HLA—DRB1^＊0405阳性RA患者抗CCP抗体阳性率高于其他HLA—DR4／1亚型阳性的RA患者，也高于HLA—DR4／1阴性患者。[结论]RA中HIJA—DRB1^＊0405基因与抗CCP抗体具有一定的相关性。     

钾通道阻滞剂对多发性硬化患者CD4+T细胞CCR7及CD45RA表达的影响

目的 研究Kv1.3钾通道阻滞剂海葵毒素(SHK)阻滞多发性硬化(Ms)患者急性期髓鞘反应性CIM+T淋巴细胞上的Kv1.3钾通道后,细胞表型CCR7、CD45RA表达的变化与疾病的关系.方法 对15例急性期MS患者、15例INF-B-1b治疗缓解期MS患者和15名健康对照的不同状态下的CD4+T淋巴细胞进行CD3、CIM、CCR7、CD45RA的荧光抗体及同型对照标记,用四标流式细胞仪检测3组不同状态下细胞表型CCR7、CD45RA表达的变化.结果 MS急性期组CIM+T细胞以CCR7-CIM5RA-(TEM)表型为主,其变化与病情有明显相关性,髓鞘抗原刺激后此型所占比例明显增高(P＜0.05),初始细胞表型CCR7+CD45RA+减少(P＜0.05),钾通道阻滞剂SHK对Ms急件期患者髓鞘反应性CD4+TEM表型有明显抑制作用(P＜0.05).结论 检测CI4+TEM细胞表型可能对判断病情有一定临床意义,Kv1.3钾通道可能成为治疗MS的新靶点.     

肽酰基精氨酸脱亚氨酶4与类风湿关节炎

肽酰基精氨酸脱亚氨酶(peptidylarginine deiminases,PADIs)是产生瓜氨酸蛋白酶的一个亚型,它能够催化蛋白质中精氨酸残基转化为瓜氨酸残基,形成瓜氨酸肽.类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种病因尚未明了的自身免疫病,以慢性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现,致残率高,目前RA仍无十分有效的针对性治疗手段.RA发病有明显遗传倾向.在遗传因素中,约有30%～50%与人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)系统有关,其余50%～70%属于非HLA基因,但分布未明,PADI4基因是其中的研究热点之一.研究发现[1,2]RA患者血液中含有高度特异性的瓜氨酸肽抗体,并且在RA患者滑膜中也发现了分泌抗瓜氨酸肽抗体的细胞.由此推测作为这些特异性抗体识别位点的瓜氨酸肽在RA的发病机制中扮演重要角色.由于瓜氨酸肽的形成有赖于PADIs的存在,特别是PADI4,本文就PADI4自身的特点以及PADI4与RA关系等方面的研究进展作一综述.     

类风湿关节炎患者血清中抗环瓜氨酸肽抗体不同亚型的临床意义

目的检测类风湿关节炎（RA）患者血清中不同亚型的抗环瓜氦酸肽（CCP）抗体,探讨其在RA中的相关临床意义。方法采用ELISA法检测135例RA患者、53例非RA的其他结缔组织病（CTD）患者和45例健康体检者血清中抗CCP抗体－IgA、IgG和IgM,并用比浊法检测类风湿因子（RF）－IgM。结果RA患者血清中的抗CCP抗体－IgA、IgG、IgM的检出率分别为57．8％、73．3％、30．4％,均高于CTD组和健康对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。RA患者的RF－IgM阳性者中的抗CCP抗体－IgA、IgG、IgM的阳性检出率均高于RF－IgM阴性者（P〈0．05）。抗CCP抗体一IgA、IgG亚型在≥24个月、7～23个月病程组中的阳性率高于≤6个月组（P〈005）,但≥24个月与7～23个月阳性率的比较差异无统计学意义（P〉005）。抗CCP抗体一IgM在≥24个月的阳性率低于≤6个月组（P〈005）,但7～23个月与≥24个月、≤6个月病程组间的阳性率比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。抗CCP抗体一IgA、IgM对RA的诊断敏感度均低于抗CCP抗体－IgG,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;而抗CCP抗体－IgA、IgM的诊断特异度分别与抗CCP抗体－IgG的比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论RA患者血清中存在不同亚型的抗CCP抗体,抗CCP抗体－IgA、IgM在RA诊断中与IgG亚型有相似的诊断特异度。     

TNF-α 基因多态性与湖南汉族人群类风湿关节炎风险的关系(英文)

目的：研究TNF-α-308基因多态性对湖南汉族人群类风湿关节炎(RA)风险的影响。方法：标本来源于112例 湖南汉族RA患者以及129例健康献血者。TNF-α-308(rs1800629)基因多态性采用限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法 分析。血清TNF-α水平检测采用ELISA方法。结果：湖南汉族人群中RA患者TNF-α-308 A等位基因携带率为3.6%,健康 对照为10.5%(P=0.004);男性RA人群TNF-α-308 A等位基因携带率显著低于男性健康对照(2.8% vs 15.6%,OR=0.179,P= 0.007)。无论男女,同时携带HLA-DRB1*04及TNF-α-308 GG基因型人群RA风险显著增高(OR=6.107),其中女性RA患者 起病更早、血清TNF-α水平更高。结论：湖南汉族人群中,TNF-α-308 G等位基因与RA易感性增高相关,尤其是女性 人群。TNF-α-308 A等位基因可减少男性人群RA风险。     

HLA-DRB1 ALLELES GENOTYPING IN PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS IN CHINESE

ＨＬＡ－ＤＲＢ１ＡＬＬＥＬＥＳＧＥＮＯＴＹＰＩＮＧＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＲＨＥＵＭＡＴＯＩＤＡＲＴＨＲＩＴＩＳＩＮＣＨＩＮＥＳＥＺｈａｏＹａｎ（赵岩）；ＤｏｎｇＹｉ（董怡）；ＺｈｕＸｉｌｉｎ（朱席林）ａｎｄＱｉｕＣｈａｎｇｃｈｕｎ（邱长春）（Ｎ...     

抗瓜氨酸化葡萄糖-6-磷酸异构酶多肽抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义

目的：检测类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者血清中抗瓜氨酸化葡萄糖-6-磷酸异构酶（citrullinated glucose-6-phosphate isomerase,C-GPI）70~88肽抗体（抗C-GPI70~88抗体）和抗C-GPI 435~453肽抗体（抗C-GPI435~453抗体）的水平,同时检测其原型多肽抗体水平,评价抗C-GPI多肽抗体在RA诊断中的价值。方法： 应用酶联免疫吸附法检测191例RA患者、129例其他风湿免疫疾病患者和74例健康对照组血清中抗C-GPI70~88抗体、抗C-GPI435~453抗体、抗GPI70~88抗体和抗GPI435~453抗体的水平,并收集RA患者临床和实验室检查数据,分析抗C-GPI多肽抗体在RA诊断中的价值以及与临床和实验室指标的相关性。结果： （1）RA组抗C-GPI70~88抗体和抗C-GPI435~453抗体的滴度（68.71±4.20和51.78±3.13）显著高于疾病对照组和健康对照组（P<0.05）,而抗GPI70~88抗体和抗GPI435~453抗体的滴度在各组中差异无统计学意义。（2）抗C-GPI70~88抗体在RA诊断中的敏感性为41.88%,特异性为84.50%;抗C-GPI435~453抗体在RA诊断中的敏感性为46.05%,特异性为86.05%;联合检测两种抗瓜氨酸化多肽抗体的敏感性为50.79%,特异性为86.05%。（3）抗C-GPI70~88抗体和抗C-GPI435~453抗体在类风湿因子、抗角蛋白抗体、抗环瓜氨酸肽抗体均阴性的RA患者中的阳性率分别为35.00%和45.00%。（4）RA患者抗C-GPI70~88抗体和抗C-GPI435~453抗体阳性组和阴性组之间临床和实验室指标差异无统计学意义。结论： RA患者体内可以检测到抗C-GPI多肽抗体,C-GPI可能参与了RA的发病,对于血清阴性的RA患者有较好的诊断价值。