西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较

目的 比较西罗莫司(SRL)和环孢素A(CsA)对体外诱导CD4+T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响.方法 使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体(简称抗CD3单抗和抗CD28单抗)刺激CD4+T淋巴细胞,并在培养体系中分别加入转化生长因子β(TGF-β);TGF-β+白细胞介素6(IL-6);TGF-β+IL-6+SRL;TGF-β+IL-6+CsA.72 h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平,观察CD4+T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4+T淋巴细胞体外分化的影响.结果 在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后,TGF-β可诱导Foxp3+细胞(调节性T淋巴细胞,Treg)的增殖与分化,而TGF-β+ID6可诱导Th17细胞的增殖与分化.在培养体系中加人SRL和CsA,均可使Th17细胞的增殖与分化减少;SRL可促进Treg的增殖与分化,而CsA抑制Treg的增殖与分化.结论 SRL可以促进CD4+T淋巴细胞向Treg增殖与分化,而抑制Th17细胞的增殖与分化;CsA既抑制Treg的增殖与分化,又抑制Th17细胞的增殖与分化.     

转化生长因子-β1差异性诱导CD4+和CD8+T细胞表达转录因子FOXP3的研究

目的 研究CD4+T细胞和CD8+T细胞被转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导表达转录因子FOXP3的差异性.方法 给予CD4+T细胞和CD8+T细胞抗T细胞受体(TCR)刺激的同时,加入TGF-β1培养4d后,通过胞内细胞因子染色,分析二者被诱导表达FOXP3的情况.同时通过CFSE标记实验检测被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞的增殖情况;通过annexin V流式染色检测TGF-β1对于T淋巴细胞凋亡的影响.结果 相对于CD8+T淋巴细胞,TGF-β1主要诱导CD4+T淋巴细胞阳性表达FOXP3[外周血单个核细胞(PBMC):29.66±3.624比7.430±0.643;癌旁组织浸润淋巴细胞(NIL):31.74±2.612比8.637±1.146].被TGF-β1诱导表达FOXP3的淋巴细胞增殖活跃(94.39±1.179),受到活化刺激后依旧能够有效分泌干扰素-γ(IFN-γ)效应细胞因子(39.58±1.611).TGF-β1能够有效降低CD8+T淋巴细胞活化后的细胞凋亡率(25.39±2.158比9.320±0.3219).结论 与肝癌患者FOXP3表达阳性的淋巴细胞＞95％(97.15±0.3807,n=10)集中在CD4+T淋巴细胞的结果一致,TGF-β1优先选择性诱导CD4+T细胞表达FOXP3.与天然Treg(调节性T细胞)低增殖活性和低细胞因子分泌活性不同,被TGF β1阳性诱导表达FOXP3的T细胞依旧具有活跃的细胞增殖和分泌IFN γ效应细胞因子的功能.CD8+T淋巴细胞相对于CD4+T淋巴细胞,更易发生活化后细胞凋亡,而TGF-β1能够有效降低这种细胞凋亡率.     

CD4+CD25+调节性T细胞/辅助性T细胞17在脓毒症大鼠中的作用

目的 观察CD4+ CD25+调节T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)细胞在脓毒症大鼠炎性免疫反应中的作用.方法 110只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症(CLP)组,采用改良的盲肠结扎穿孔术(CLP)制作大鼠脓毒症模型.采用流式细胞术检测CD14+单核细胞表面人类白细胞抗原-DR基因(HLA-DR)表达率、Treg细胞及TH17细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-17炎性因子蛋白表达.结果 与假手术组比较:(1)伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制,CD14+单核细胞HLA-DR表达率＜30％,IL-10/TNF-α比值(27.41 ±7.04比6.63 ±2.60)明显增高(P＜0.01).(2)术后96 h脓毒症大鼠Treg细胞[(11.91±3.88)％比(6.57±2.60)％,P＜0.01]和Th17细胞[(5.14±0.29)％比(2.85±0.07)％,P＜0.01]表达明显增高.(3)术后96 h脓毒症组前炎性细胞因子IL-6[(42.31±15.89) ng/L比(6.32 ±3.18) ng/L,P＜0.01]、IL-10[(69.89 ±20.78) ng/L比(13.58±5.37) ng/L,P＜0.01]、TNF-α[(5.03±3.10) ng/L比(2.77±1.10) ng/L,P＜0.01]、TGF-β[(4.99±2.01) ng/L比(1.88±1.07) ng/L,P＜0.01]、IL-17[(92.77±11.64) ng/L比(7.58±2.30) ng/L,P＜0.01]表达明显增高.结论 伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制;在大鼠脓毒症的发生发展中,Treg细胞介导的免疫抑制及Th17细胞介导免疫激活反应同时存在;脓毒症细胞因子微环境变化可能是导致Treg细胞/Th17细胞失衡的原因之一.     

转化生长因子-β1联合白细胞介素-2体外诱导非肥胖糖尿病小鼠调节性T细胞的产生

目的 体外诱导非肥胖糖尿病(NOD)小鼠CD4+ CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的产生并检测其免疫抑制功能.探讨外源性白细胞介素(IL)-2在诱导方案中的作用.方法 分选NOD小鼠童贞T细胞(Naive T),利用Anti-CD3、Anti-CD28刺激,同时给予转化生长因子-β1(TGF-β1)和白细胞介素-2(IL-2),共同培养5 d,收获诱导性Treg(iTreg),经流式细胞仪检测其表型.利用体外T细胞增殖体系,对比NOD小鼠天然Treg(nTreg),评价iTreg的免疫抑制能力.将诱导方案中的IL-2撤除以观察其作用.结果 TGF-B1联合IL-2能诱导NOD小鼠Naive T转化为iTreg,较对照组有统计学意义[(41.33±3.21)%比(8.00±3.00)%,P《0.05].iTreg可有效抑制T细胞增殖,其能力与nTreg的差异元统计学意义[(40.33±1.03)%比(38.33±3.06),P》0.05].外源性IL-2有利于iTreg的产生[(41.33±3.21)%比(15.00±1.00)%,P《0.05].结论 TGF-β1联合IL-2可在体外诱导Naive T转化为具有免疫抑制功能的Treg.     

miRNA-155对调节性T细胞表型和功能的影响

目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)-155对调节性T细胞(Treg)的两种亚型诱导性Treg(iTreg)和天然性Treg(nTreg)的影响。 方法 采用健康成人外周血分离获取的外周血单个核细胞(PBMC),利用磁性细胞分选法分别获取幼稚T细胞和nTreg。培养阶段将细胞分为3组:对照组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2培养)、iTreg组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2和转化生长因子-β培养)和nTreg组(nTreg加入白细胞介素-2培养)。每组再分为3个亚组:未处理亚组、scramble亚组和miRNA-155拮抗剂亚组(每亚组3个孔)。采用低密度芯片分析方法检测3组中的未处理亚组细胞中miRNA-155的基因表达水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的表面标志物CD25、Foxp3、CD127水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的CD4⁺ CD25⁺Foxp3⁺SOCS1⁺ Treg比例;采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的Treg抑制功能。 结果 与对照组和iTreg组比较,nTreg组细胞的miRNA-155表达水平明显降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。加入miRNA-155拮抗剂后并未导致Foxp3、CD127和CD25等Treg重要表面标志物发生明显的变化。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。iTreg组中的未处理亚组细胞miRNA-155表达水平较低,而拮抗剂抑制其表达之后(miRNA-155拮抗剂亚组),能够使其SOCS1表达升高。iTreg组中,与未处理亚组比较,miRNA-155拮抗剂亚组的Treg抑制功能在1:8、1:16、1:32的比例时,显示出了更强的抑制功能(均为P<0.05)。 结论 体外拮抗miRNA-155对nTreg的抑制功能无明显影响,但是能够增加iTreg的SOCS1表达水平和体外抑制功能。     

树突状细胞和CD4+CD25+调节性T细胞在免疫耐受中的作用及关系

诱导免疫耐受具有高效、低毒、经济等优点,在器官移植中有着极其重要的意义.在建立免疫耐受中,树突状细胞(DC)起到克隆清除、克隆无能、表达T细胞抑制因子、选择性激活辅助T细胞和诱导调节性T细胞尤其是CD4+CD25+调节性T细胞的产生等作用.而CD4+CD25+调节性T细胞主要以DC为作用靶点,影响其分化成熟,抑制DC向...     

肝移植术后潜在免疫耐受者外周血自然杀伤细胞、调节性T细胞和记忆性T细胞的表达及其临床意义

目的 探讨肝移植术后潜在免疫耐受者免疫状态,为临床指导抗排斥治疗提供依据.方法 纳入1999年1月至2007年12月在本中心行肝移植存活至今潜在免疫耐受者29例,分为3～5年组(3Y组)10例,5～11年组(5Y组)19例,另纳入肝移植术后反复排斥反应者(RJ)10例,年龄匹配健康对照组(HC)17例;流式检测外周血单个核细胞中自然杀伤(NK)细胞、记忆性T细胞、调节性T细胞(Treg)3个亚群的表达.结果 3Y、5Y组CD4+ CD25+T细胞(3Y:27.56±4.63;5Y:30.07±3.91)、静息性Treg占CD4+T细胞比例(3Y:0.22±0.05;5Y:0.17±0.03)比R J组明显升高(CD4+ CD25+ T:11.78±4.28;静息性Treg:0.05±0.02)(P＜0.05);5Y组NK细胞占淋巴细胞比例(29.11±3.31)比RJ组(13.92±3.11)明显升高(P＜0.05);效应性记忆性CD8+T细胞比例3Y组(12.92±2.05)比RJ组(8.74±1.69)明显升高(P＜0.05).结论 肝移植术后潜在免疫耐受者外周血NK细胞、静息性调节性T细胞和效应性记忆性CD8+T细胞比例相对排斥反应者明显升高,可作为潜在的耐受标志物.     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.     

甲状腺癌患者手术前后CD8+CD28-调节性T细胞的变化与临床意义

【摘要】〓目的〓探讨甲状腺癌患者手术前后CD8+CD28-调节性T细胞的变化与临床意义。方法〓收集接受手术治疗的双侧甲状腺癌患者30例作为观察组(A),分别收集良性甲状腺瘤患者(B)及健康体检者(C)各30例作为对照组;采用流式细胞术检测三组外周血CD8+CD28-调节T细胞百分含量及其胞内细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)的平均荧光强度;比较术后4周甲状腺癌患者上述指标的变化。结果〓与C组比较,A及B组CD8+CD28- T细胞及TGF-β1均升高,但B与C组无统计学差异,而A组两者均显著高于C组(P<0.05);与C组比较,A及B组IL-10均显著升高,且三组间两两比较均有统计学差异(P<0.05);手术后4周复查显示A组患者CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10三者与手术前比较均有显著性差异(P<0.05),其中以CD8+CD28-T细胞的回落最为明显,TGF-β1次之。结论〓CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10表达增加是甲状腺癌患者的一个重要免疫学特征;TGF-β1是相对特异的一个细胞因子,在评价术后疗效较IL-10敏感。     

T_H17型细胞在移植排斥反应中的研究进展

在不同细胞因子和转录因子作用下,初始CD4~+T淋巴细胞分化为效应性T淋巴细胞(T_H1型、T_H2型、T_H17型细胞)和调节性T淋巴细胞(Treg细胞).初始CD4~+T淋巴细胞在转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素6(IL-6)的共同诱导下分化为T_Hl7型细胞,分泌IL-17和IL-6等细胞因子,主要参与炎症反应和自身免疫性疾病等的发生.近年来发现,T_H17型细胞与移植排斥反应有关,现就其与排斥反应的关系综述如下.     

阿尔茨海默病患者外周血调节性T细胞稳定性的分析

目的:探讨阿尔茨海默病(AD)患者外周血调节性T细胞(Tregs)稳定性的特点.方法:分选AD患者外周血Tregs,通过流式细胞仪检测特征性标志物叉头转录因子(Foxp)-3和表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4及膜相关转化性生长因子(TGF)-β的表达水平,通过ELISA检测特征性细胞因子TGF-β和白细胞介素(IL)-10分泌水平,并进一步通过Transwell培养板培养方法,分析AD患者Tregs发挥免疫抑制功能的特点.结果:与对照组比较,AD组患者细微精神状态语言检查(MMSE)评分明显降低(P＜0.01);AD组外周血Tregs数目、特征性标志物Foxp-3及细胞表面标志物CTLA-4和膜相关TGF-β表达水平均均低于对照组,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01);特征性细胞因子TGF-β和IL-10分泌水平均无明显变化(P＞0.05);经Transwell培养板培养24h,能够降低AD组Tregs对CD4+ CD25-T细胞增殖功能的抑制作用,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:AD能够降低患者外周血Tregs稳定性,其机制主要是降低其以细胞接触途径介导的免疫调节作用.     

输注调节性T细胞延缓非肥胖糖尿病小鼠糖尿病的发生

目的 观察过继输注调节性T细胞(Treg)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠自发性糖尿病发生的影响.方法 分选NOD小鼠天然调节性T细胞(nTreg),并诱导Na(i)ve T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(iTreg),分别输注予4周龄的雌性NOD小鼠,观察糖尿病的发生情况,并确定细胞输注后Treg在体内的分布、检测血清中TGF-β1、IL-10及IL-4的表达以探讨Treg的作用机制.结果 对照组小鼠13周龄时即100%自发性发生糖尿病,而输注iTreg和nTreg分别能延缓糖尿病的发生时间至24周龄和25周龄,与对照组比较差异有统计学意义(P＞0.05).Treg细胞输注后主要分布在胸腺,iTreg在体内能促进TGF-β1、IL-10及IL-4表达的上调[血中浓度分别为(543.00±26.51)、(107.67±12.66)、(93.33±12.58)ng/L],与对照组比较差异有统计学意义[(60.67±15.82)、(20.67±6.03)、(30.67±5.51)ng/L,P＜0.05].结论 在体外诱导生成的调节性T细胞可延缓NOD小鼠糖尿病的发生,其机制与上调具有免疫抑制效应的细胞因子相关.     

T_H17型细胞的分化及调节在自身免疫性疾病和排斥反应中的作用

初始T淋巴细胞被树突状细胞活化后,在体内不同的微环境下可分化成为功能及表型不同的效应性T淋巴细胞和调节性T淋巴细胞(Treg细胞).当有白细胞介素12(IL-12)存在时,初始T淋巴细胞分化为T_H 1型细胞,主要分泌IL-12、γ干扰素(IFN-γ)及特异性表达转录因子T-bet;有IL-4存在时,初始T淋巴细胞分化为T_H2型细胞,主要分泌IL-4、IL-10,特异性表达转录因子GATA-3;在转化生长因子β(TGF-β)单独存在时,初始T淋巴细胞分化为Treg细胞,特异性表达Foxp3.     

T细胞疫苗诱导免疫耐受与外周血T细胞凋亡的关系探讨

目的　探讨T细胞疫苗诱导特异性免疫耐受与外周血T细胞凋亡的关系。方法　制备针对Wistar大鼠的SD大鼠T细胞疫苗 ,然后用该疫苗免疫健康SD大鼠 ,每周 1次 ,连续 3周 ,作为实验组 (n =6)。对照组 (n =6)用RPMI 164 0培养液替代T细胞疫苗。以被免疫的SD大鼠的脾细胞作为反应细胞 ,以Wistar大鼠的脾细胞作为刺激细胞 (经丝裂霉素处理 ) ,于接种前和每次接种后第 5天进行单向混合淋巴细胞反应 (3 H TDR掺入法 ) ,测定其cpm值 ;用流式细胞仪对外周血T细胞凋亡情况进行检测。结果　混合淋巴细胞反应结果显示 ,实验组SD大鼠脾细胞免疫应答能力于接种后受到显著抑制 ,其cpm值较接种前显著降低 (P<0 .0 1) ;对照组接种前后各时点比较 ,其差异无显著性(P>0 .0 5 ) ;接种后相同时点的cpm值组间比较 ,实验组显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;与接种前比较 ,接种后实验组外周血T细胞凋亡率显著增高 (P<0 .0 1) ,且随着疫苗接种次数的增加而升高 ,而对照组接种后各时点T细胞凋亡率与接种前比较差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论　T细胞疫苗可以诱导同种特异性免疫耐受 ,其机理可能是通过诱导外周血T细胞凋亡 ,清除抗原特异性反应性T细胞克隆来实现的。     

调节性T细胞及其细胞因子在慢性无菌性前列腺炎的表达及意义

目的 观察调节性T细胞(Tr)在慢性无菌性前列腺炎(CAP)发病机制的作用及意义.方法 使用流式细胞术检测20例CAP患者及10例健康志愿者外周血Tr的数量;用RTPCR法检测Tr的调节蛋白Foxp3mRNA的表达含量;用ELISA法两组前列腺按摩液细胞因子白介素-10(IL-10)及转化生长因子-β1(TGF-B1)...     

小鼠CD4T细胞转化的双阴性T细胞的效应分子研究

目的 研究小鼠CD4 T细胞转化的CD4-CD8-双阴性T细胞的功能特点,进一步明确双阴性T细胞的免疫抑制作用机制.方法 应用转录组测序和蛋白质质谱技术分析了小鼠转化的双阴性T细胞基因表达谱.应用流式细胞术等技术验证了细胞活化分子CD44、CD69和OX40的表达水平并应用CFSE染色法验证双阴性T细胞的杀伤功能.结果 小鼠转化的双阴性T细胞表达了与其他成熟CD4 T细胞不同的细胞表型.小鼠转化的双阴性T细胞明显高表达细胞表面活化分子CD44、CD69和OX40,以及颗粒酶、穿孔素等细胞杀伤相关基因.穿孔素基因敲除的双阴性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显降低.结论 小鼠CD4 T细胞转化的双阴性T细胞是与其他成熟CD4 T细胞不同的T细胞终末分化亚群.小鼠转化的双阴性T细胞高表达细胞活化分子和免疫杀伤类细胞因子,并主要通过穿孔素途径发挥免疫抑制功能.     

胰腺癌病人外周血CD4+T、CD8+T和调节性T细胞的分析

目的:分析3个T细胞亚群,CD4+T、CD8+T和调节性T(regulatory T,Treg)细胞在胰腺癌病人外周血中的变化,为胰腺癌免疫治疗中靶细胞的确认提供理论依据。方法:通过免疫荧光抗体标记和流式细胞检测外周血中CD4+T、CD8+T和Treg细胞,分析胰腺癌病人外周血中CD4+T、CD8+T和Treg细胞的水平与胰腺癌临床病理特征的相关性。结果:胰腺癌病人外周血中CD4+T、CD8+T的水平与对照组相比无统计学差异,而Treg细胞在CD4+T细胞中的比例较对照组显著升高;除了Treg的比例与胰腺癌的疾病分期密切相关外,3个细胞亚群的水平与胰腺癌病人临床病理特征无相关性。胰腺癌合并梗阻性黄疸行胆道支架引流术后,CD4+T、CD8+T细胞的水平无变化,但Treg细胞的比例显著下降。结论:在胰腺癌病人的免疫功能状态的变化中Treg细胞介导的免疫抑制可能占主导地位。合并梗阻性黄疸行胆道引流术可缓解Treg细胞介导的免疫抑制。     

免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞

目的探索利用磁性细胞分离(MACS)系统高效、快速地分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞.方法采用免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏内的CD4+CD25+调节性T细胞, 首先采用"鸡尾酒"抗体和抗IgG磁珠阴性分选CD4+ T细胞,再用抗CD25-PE抗体和抗PE磁珠阳性分选获得CD4+CD25+T 细胞.分离后的细胞经流式细胞仪检测分离纯度; 台盼蓝染色检测细胞存活率; 体外增殖实验检测其对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用.结果阴性分选获得的CD4+T细胞纯度为(83.6±2.5)%(79%～87%), 阳性分选后获得的CD4+CD25+T细胞纯度为(90.2±1.8)%(86%～93%), 细胞存活率为(92.8±3.4)%(92%～95%), 体外增殖实验表明,CD4+CD25+T细胞能明显抑制CD4+CD25-T 细胞的增殖(P＜0.01). 结论采用MACS系统阴性加阳性分选可以高效、快速地获得理想纯度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+调节性T细胞.     

嵌合T细胞受体的构建及其在T淋巴细胞表面的表达和体外抗肿瘤功能的检测

目的利用基因工程技术构建表达嵌合T细胞受体(ch-TCR)分子的逆转录病毒载体(由抗 erbB2的单链抗体和信号传导链CD3ζ组成),感染预先刺激的小鼠T细胞,使得T细胞能以MHC非限制性的方式在体外识别并杀伤肿瘤细胞,为肿瘤的过继性免疫治疗提供新思路。方法将抗erbB2的单链抗体、CD8分子绞链区、CD3ζ链的跨膜区和胞内段依次克隆入逆转录病毒载体pCMMP中,与另外两个辅助载体pHDM．G和pMD．MLVgag．pol共同转染293T细胞,包装获得病毒颗粒,感染NIH3T3细胞检测病毒滴度。取适量病毒液感染预先刺激的小鼠CD3+T细胞,流式细胞仪检测嵌合受体在细胞表面的表达,非放射性的细胞杀伤试剂盒和ELISA检测试剂盒分别检测T细胞的抗原特异性杀伤和细胞因子分泌的功能。结果成功构建抗erbB2嵌合T细胞受体基因的逆转录病毒载体,检测病毒滴度为(2．1±1．1)×108IP／ml。体外感染T淋巴细胞的效率为(45±5)％。体外能杀伤erbB2+的肿瘤细胞SK-BR-3、D2F2／E2,而对erbB2-的肿瘤细胞 MCF-7、D2F2无杀伤功能,并能分泌Th1型细胞因子GM-CSF和IFN-γ。结论表达抗erbB2嵌合T细胞受体的T淋巴细胞体外具有MHC非限制性的、erbB2抗原特异性的杀伤肿瘤细胞和分泌 Th1型细胞因子的功能,为下一步的体内实验打下基础。     

前列腺癌患者外周血中CD4~+CD25~(high)调节性T细胞及调节因子TGF-β1和COX-2的表达

目的:通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4+CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性。方法:应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后(其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例)及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达。对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4+CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性。结果:流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例为(18.32±7.49)%,高于健康志愿者对照组(7.77±1.86)%(P<0.05)。前列腺癌患者治疗后其比值为(17.34±5.87)%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异(P>0.05)。ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为(215.97±55.16)ng/ml和(6.88±5.14)ng/ml,对照组分别为(149.75±47.11)ng/ml和(5.65±2.69)ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组(P<0.05),COX-2的表达水平与对照组无显著差异(P>0.05)。通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关。前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关。