胎儿头皮毛囊内黑素细胞HMB-45和NKI/beteb的表达

目的：观察黑素细胞在胎儿头皮内的定位。方法：获取胎儿头皮（胎龄7月,畸形引产,死亡2h）,制备冰冻切片,分别用HMB-45和NKI/beteb抗体进行免疫荧光染色和免疫组化染色,激光共聚焦显微镜和倒置显微镜观察摄片。结果：NKI/beteb阳性细胞主要位于胎儿头皮的毛囊外根鞘隆突区,也见于毛球处、表皮基底部。HMB-45阳性细胞主要存在于毛球部、毛母质和表皮基底部,外根鞘区表达则阴性。结论：胎儿头皮毛囊内存在不同状态的黑素细胞,位于毛囊外根鞘隆突区的黑素细胞是黑素母细胞。     

白癜风毛囊无色素性黑素细胞c—kit的表达

目的探讨毛囊无色素性黑素细胞（amelanotic melanocytes,AMMC）和于细胞因子（stem cell factor,SCF）及其受体c—kit（SCF／c—kit）信号通路在白癜风发病机制中的作用。方法采用苏木精伊红（HE）染色和免疫组织化学方法对31例白癜风皮损头皮组织毛囊和30例正常人头皮组织毛囊进行HMB-45、NKI／beteb、c—kit3种特异性抗体染色,观察毛囊AMMC的形态分布特征及c—kit的表达,并以HPIAS-1000彩色病理图文分析系统半定量分析3种特异性标志物表达的强弱,观察两组之间有无差异。结果白癜风皮损头皮组毛囊AMMC的NKI／beteb染色的平均阳性细胞面积率和平均光密度值与正常头皮组织相比,差异无统计学意义（P〉0．05）;白癜风皮损头皮毛囊组AMMC的c—kit染色平均阳性面积率和平均光密度值明显低于正常头皮组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论白癜风头部皮损毛囊AMMCckit的表达异常,其可能参与了白癜风的发病过程。     

人毛囊无色素性黑素细胞及其治疗白癜风的研究进展

毛囊无色素性黑素细胞可以作为皮肤黑素细胞的储库，给白癜风的治疗提供黑素细胞来源。人黑素细胞（melanocyte，MC）起源于胚胎神经嵴，在胚胎发育2～5周开始向表皮和毛囊移行。向表皮移行的黑素细胞最终定居在基底膜上，形成连续产生黑素的成熟黑素细胞；而向毛囊移行的黑素细胞则分为两种类型：一种是位于生长期毛囊毛母质和漏斗部具有黑素合成活性的黑素细胞；另一种是分布于生长期毛发外毛根鞘（Outer Root Sheath，ORS）中，无黑素合成活性、未活化的无色素性黑素细胞（amelanotic melanocyte，AMMC）。     

紫外线照射对体外培养人表皮黑素细胞雌激素受体的影响

目的:为了了解紫外线照射对对体外培养人正常黑素细胞雌激素受体的影响.方法:采用MTT法测定UVR照射后黑素细胞增殖情况,Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性,PSA免疫组织化学方法和半定量RT-PCR法检测UVR照射后黑素细胞雌激素受体基因mRNA表达.结果:UVA照射后黑素细胞数量在低照射剂量时升高,高剂量时无明显变化,酪氨酸酶活性在低照射剂量时升高,高剂量时随着剂量加大而逐浙下降;UVB照射后黑素细胞数量在低照射剂量时升高,在熙射剂量到达某个临界点后随着照射剂量的增加而迅速降低,酪氨酸酶活性在低剂量时增加,在高剂量照射时继续保持高度活性,不随照射剂量增加而变化;UVA和URB照射后黑素细胞ER免疫组化均可产生棕黄色颗粒,主要定位于细胞核;雌激素受体基因mRNA表达也明显高于对照组.结论:不同剂量和不同类型的紫外线照射对体外培养人正常黑素细胞雌激素受体表达均可产生正性作用.     

NB-UVB对体外培养黑素细胞黑素合成及细胞内钙离子的影响

目的:研究NB-UVB对体外培养黑素细胞黑素合成及黑素细胞内钙离子的影响。方法:由青少年的包皮组织中分离黑素细胞,采用NaOH法测定NB-UVB辐射对黑素细胞黑素合成影响,采用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙。结果:相对于对照组,实验剂量下NB-UVB辐射后72h均能提高人黑素细胞的黑素合成能力及细胞内钙离子的水平。结论:NB-UVB可能通过诱导细胞内Ca2+升高,提高黑素细胞黑素合成能力,从而促进黑素细胞迁移,促进皮损复色。     

川芎嗪对体外培养的黑素细胞的抑制作用

目的观察川芎嗪(TMP)对体外培养的黑素细胞的抑制作用.方法采用MTT法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;Takahashi法测定酪氨酸酶含量;用透射电镜观察黑素小体的生成.结果川芎嗪对黑素细胞的增殖有抑制作用,能使细胞数明显减少(P＜0.05),并能使黑素合成显著下降(P＜0.01),使酪氨酸酶活性逐渐减弱(P＜0.01);透射电镜观察显示,加川芎嗪后黑素小体明显减少.结论川芎嗪能抑制黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性,这可能是临床应用中药川芎治疗皮肤色素性疾病的机制.     

毛囊的体外培养及相关生长因子研究进展

毛发是人体非常重要的组织器官。毛发的生长部位、密度、质地、缺失等都有其重要的生理和美容方面的价值 ,有些分化的毛发 ,如眉毛、胡须、睫毛等还具有特殊的功能。因此 ,毛发在美容医学领域是相当重要的研究课题。近年来 ,有关毛发的基础研究取得了很大进展 ,现就毛囊的体外培养及相关生长因子的研究进展作以下综述。1　毛囊的体外培养与重建毛囊是控制毛发周期性生长的有意义结构 ,它是由上皮成分和真皮成分组成的。上皮成分包括内皮根鞘 (IRS)和外皮根鞘 (ORS) ;真皮成分包括毛乳头 (DP)和真皮鞘(DS)。毛囊的发育是由表皮细胞及其下…     

特定序列寡核苷酸对人骨髓间充质干细胞体外扩增及成骨分化的影响

目的探讨特定序列人工合成的寡核苷酸（Oligodeoxynucleotide,ODN）MT01对人骨髓间充质干细胞（Human bone marrow mesenehymal stem cells．hBMSCs）增殖及成骨分化的影响。方法采用Ficoll梯度密度离心法分离培养hBMSCs并进行鉴定。以1μg／mL的ODN MT01处理hBMSCs,细胞计数试剂盒检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶试剂盒检测成骨分化情况。结果经1μg／mL的ODN MT01处理的hBMSCs体外培养,第3、4、5、6、7天hBMSCs增殖明显;成骨诱导的第4、14、21天．碱性磷酸酶表达明显增加。结论特定浓度人工合成ODN MT01能够在体外促进hBMSCs的扩增及成骨分化。     

含己烯雌酚血清对体外培养正常人黑素细胞的作用

目的:观察不同浓度含己烯雌酚(DES)血清对体外培养人黑素细胞的增殖和酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况;参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性;NaOH溶解法测定黑素含量。结果:己烯雌酚血清不同剂量对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性,对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。     

含己烯雌酚血清对体外培养正常人黑素细胞的作用

目的:观察不同浓度含己烯雌酚(DES)血清对体外培养人黑素细胞的增殖和酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况;参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性;NaOH溶解法测定黑素含量。结果:己烯雌酚血清不同剂量对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性,对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。     

离体培养条件下氟与硒对毛囊影响的初步研究

目的:观察氟与硒对离体培养条件下的人头皮毛囊生长的影响。方法:在离体人头皮毛囊培养模型中,加入不同浓度的氟化钠和亚硒酸钠,目镜测微器测量毛囊长度的变化;连续观察毛囊形态学改变并做电镜切片检查。结果:1mmol/L和10mmol/L的氟化钠能不同程度的抑制离体毛囊的生长(P<0.05)。0.01mmol/L的亚硒酸钠对1mmol/L氟化钠毒性有拮抗作用(P<0.05)。0.1mmol/L氟化钠单独作用对毛囊生长无影响(P>0.05),0.1mmol/L氟化钠及0.01mmol/L亚硒酸钠共同作用对毛囊生长无影响(P>0.05)。电镜观察发现10mmol/L氟化钠作用的毛囊在培养5天时即可见较为严重的凋亡前改变及凋亡现象,10mmol/L氟化钠加0.01mmol/L亚硒酸钠组毛囊也可见到类似的改变,培养9天时还可见到细胞内有空泡,连接紊乱,桥粒连接破坏等现象。结论:不同浓度的氟化钠对游离的人头皮毛囊的生长有不同作用,一定浓度的亚硒酸钠能拮抗氟化钠对毛囊的毒性作用。     

氟对游离毛囊凋亡影响的实验研究

目的观察离体培养条件下氟对人头皮毛囊各部位凋亡的影响及硒对氟影响的拮抗作用。方法构建人头皮游离毛囊培养模型,在模型中,加入不同浓度的氟化钠和亚硒酸钠,筛选浓度后,分为不同组;制作冰冻切片,利用TUNEL法原位检测各组毛囊不同位置的凋亡数量并做统计分析;用透射电镜进行观察照相。结果原位凋亡染色发现,1mmol/L和10mmol/L的氟化钠能使游离培养5d的人头皮毛囊中外根鞘、真皮鞘和毛乳头,及毛球下部的凋亡细胞显著增多,0.01mmol/L的亚硒酸钠能拮抗1mmol/L氟化钠对外根鞘、毛球部的促凋亡作用(P<0.05)。结论不同浓度的氟化钠对游离培养的第5天的人头皮毛囊的凋亡具有不同作用,一定浓度的氟化钠能促进游离毛囊一定部位的细胞凋亡。0.01mmol/L的亚硒酸钠对一定浓度的氟化钠的促凋亡作用具有拮抗性。     

局部应用他克莫司对异种毛囊移植的影响

目的 探讨建立人-大鼠异种毛囊移植的可行性及局部辅助应用他克莫司的效果.方法 以人头皮毛囊为供体,Wistar大鼠为受体,将黑色人头皮毛囊种植于白色Wistar大鼠背部,进行异种毛囊移植.实验分两组：局部外用他克莫司组（A组）,空白对照组（B组）.观察毛囊存活时间及形态学变化.结果 A组异种移植毛囊平均存活（49.9±7.1）d,而B组异种移植毛囊平均存活（13.1±1.2）d.A组异种移植毛囊最长存活可达65 d,而B组异种移植毛囊最长存活仅为15 d.通过对比可以看出,局部用药可以显著延长异种移植毛囊的存活时间,但是仅靠局部用药仍无法避免排斥反应的发生.结论 依赖生长期毛囊的自身免疫赦免功能及辅助外用他克莫司抑制免疫排斥反应,可明显延长人-鼠异种毛囊移植的存活时间.     

自体单株毛囊种植修复眉毛部分缺损

目的:探索应用自体单株毛囊种植修复眉毛部分缺损的效果。方法:对35例女性患者,采用枕后安全区头皮,制成毛干长1cm的单株移植物,利用针头穿刺打孔将毛发移植到缺损处以修复形态,为了使形态协调一致,每侧眉毛中部种植30～40根毛发。结果:植入毛发生长良好,方向形态满意,移植毛发成活率在90%以上。结论:自体单株毛囊移植修复眉毛部分缺损是一个适宜的方法。     

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对小鼠脱发模型毛发生长的影响

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对C57BL6小鼠脱发模型毛发生长及毛发周期的影响。方法：采用松香、蜡脱毛法诱导小鼠体毛由休止期进入生长期。脱毛次日分组,各组小鼠每日分别以8%EGCG乙醇制剂、5%米诺地尔溶液、乙醇涂擦脱毛区,连续21天,记录小鼠皮肤颜色变化过程及新生毛发生长状况,并通过HE切片观察EGCG对皮肤、毛囊形态,毛囊数目的影响。结果：与阴性对照组相比,实验组和阳性对照组提前24h由粉红变为红色、推迟48h由黑色变为灰色,而基质组与阴性对照组无明显差别;实验组和阳性对照组小鼠毛囊数目在统计学上均与阴性对照组小鼠具有显著性差异。结论：EGCG可诱导小鼠毛囊进入生长期,延长生长期时间,推迟进入退行期,并刺激小鼠毛囊数目增多。     

自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植在脱发治疗中的应用

目的:观察自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植治疗脱发的疗效。方法:自体脂肪颗粒分离纯化后,加毛囊干细胞第一代培养细胞,对头顶脱发部位进行注射治疗。结果:36例患者,经过多次注射干细胞移植,均获得了明显改善,可见新生头发,效果满意,没有出现特殊并发症。结论:对于大面积脱发患者,应用自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植是一种安全、有效的方法,值得临床推广应用。     

男性雄激素源性脱发患者毛囊干细胞增殖和凋亡的初步研究

目的:了解男性雄激素源性脱发(androgenetic alopecia,AGA)患者毛囊干细胞增殖和凋亡情况.方法:对来自15例男性AGA患者和3例正常人的头皮,采用双重免疫荧光的的方法检测毛囊干细胞增殖和凋亡.结果:CK15标记的毛囊干细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性细胞率由高到低依次为:正常对照组、患者枕部、脱发过渡区和脱发区,除脱发过渡区与脱发区间比较无显著性差异(P＞0.05)外,其它各组间比较,均有显著性差异(P＜0.05).各组毛囊中CK15阳性的细胞中均无TUNEL阳性细胞,TUNEL阳性细胞主要分布于内毛根鞘,总的TUNEL阳性细胞率在各组间无明显差异(P均＞0.05).结论:毛囊干细胞增殖活性下降可能参与男性AGA的脱发过程.