雷公藤内酯醇对大鼠实验性结肠炎的治疗作用

背景:炎症性肠病(IBD)病程迁延,传统的药物治疗效果均不理想,寻找新型而有效的药物一直是该领域研究的热点.目的:观察不同剂量雷公藤内酯醇对大鼠实验性结肠炎的治疗作用和不良反应.方法:60只Sprague-Dawley大鼠随机分为6组:模型组、低剂量(0.1 mg/kg)雷公藤内酯醇组、中剂量(0.2 mg/kg)雷公藤内酯醇组、高剂量(0.4 mg/kg)雷公藤内酯醇组、丙二醇(20%,5 ml/kg)对照组和地塞米松(0.2 mg/kg)对照组.应用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溶液诱导产生大鼠结肠炎模型,以相应药物处理2周后处死大鼠.处死大鼠前1天行白细胞计数检查,处死后直接称取胸腺重量.计算结肠溃疡面积和湿干比;测定结肠黏膜超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MP0)活性;采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定结肠组织白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果:不同剂量雷公藤内酯醇治疗后,能显著减少大鼠结肠黏膜的溃疡面积,降低结肠湿干比;显著升高结肠黏膜SOD活性、降低MP0活性;显著降低IL-1和TNF-α的水平;使大鼠胸腺明显缩小,白细胞计数显著减少.结论:雷公藤内酯醇对TNBS/乙醇溶液诱导的大鼠实验性结肠炎具有显著的治疗作用,同时剂量大时亦有明显的不良反应.     

雷公藤内酯醇对内皮细胞血管内皮细胞生长因子活性的影响

目的研究雷公藤内酯醇对人内皮细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA表达及VEGF生成与分泌的影响,进一步探讨雷公藤内酯醇降低肾小球肾炎患者尿蛋白的作用机制。方法以人内皮细胞系ECV-304为研究对象,利用RT-PCR,流式细胞仪,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同剂量雷公藤内酯醇对佛波脂(PMA)诱导的内皮细胞VEGFmRNA表达及VEGF生成与分泌的影响。结果雷公藤内酯醇可以抑制PMA诱导的内皮细胞VEGFmRNA表达及VEGF生成与分泌,并呈剂量依赖性。结论雷公藤内酯醇抑制内皮细胞VEGFmRNA表达及VEGF生成与分泌可能是其雷公藤内酯醇降低肾小球肾炎患者尿蛋白的作用机制之一。     

雷公藤内酯醇对人树突状细胞体外发育及免疫学功能的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对人树突状细胞（dendritic cells,DC）体外发育及免疫学功能的影响。方法：人DC体外培养时,加入不同剂量（0、0.3、1.0、3.0、10、30、100μg/L）的雷公藤内酯醇处理,观察DC的生成情况,以流式细胞仪分析各处理组生成细胞的免疫表型及抗原内吞能力,体外混合淋巴细胞反应检测各组细胞的抗原呈递功能,TUNEL方法检测细胞凋亡。结果“体外培养7天后,10μg/L及以上剂量雷公藤内酯醇处理组细胞大部分破坏死亡。低剂量（0.3、1.0、3.0μg/L）雷公藤内酯醇处理对生成的DC的形态及数量、共刺激分子的表达、内吞蛋白质抗原OVA－FITC的能力、同种T细胞的免疫刺激活怀均无显著影响;但正常DC与同种T细胞混合培养时,雷公藤内酯醇以剂量依赖性方法抑制T细胞的增生;正常DC以30μg/L雷公藤内酯醇处理24h,有54％的细胞发生凋亡;结论：低剂量（0.3、1.0、3.0μg/L）的雷公藤酯醇处理对DC的体外发育及免疫功能均无显著影响,高剂量则阻止DC发育生成及诱导DC调亡。     

雷公藤内酯醇对AD模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TP)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经细胞凋亡及其相关蛋白表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及用药组。模型组给予双侧海马各一次性注射凝聚态Aβ1-40,Morris水迷宫实验判断模型成功与否。对照组大鼠双侧海马注射等量生理盐水。用药组大鼠在模型制作成功后每日腹腔注射TP0.4mg/kg,共15d。应用流式细胞仪、TUNEL染色、透射电镜技术检测各组大鼠海马神经细胞凋亡的变化,免疫组织化学法检测各组大鼠海马神经细胞细胞色素C和Bcl-2蛋白表达的变化。结果用药组大鼠海马神经细胞凋亡率较模型组明显降低(P0.01),TUNEL染色阳性细胞数较模型组明显减少(P0.01);用药组大鼠海马细胞色素C阳性产物数和平均光密度均较模型组明显减少(P0.01),Bcl-2阳性细胞数和平均光密度均较模型组明显增加(P0.01)。结论 TP对AD模型大鼠海马神经细胞凋亡有抑制作用,其机制可能与TP增加AD模型大鼠海马神经细胞Bcl-2蛋白表达、减少细胞色素C的释放有关。     

雷公藤内酯醇对人近端肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子合成的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对炎症因子刺激下人肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子（ＭＣＰ－１）产生的影响。方法：以ＩＦＮ－γ（２００μｇ／Ｌ）及ＴＮＦα（２０μｇ／Ｌ）联合刺激人近端小管上皮细胞,细胞ＭＣＰ－１蛋白含量以流式细胞仪检测,培养上清中ＭＣＰ－１的分泌量以双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定,细胞ＭＣＰ－１ ｍＲＮＡ含量采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ法进行测定。结果：普通培养人近端肾小管上皮细胞及培养上清中有少量ＭＣＰ－１分泌,ＩＦＮ－γ（２００μｇ／Ｌ）及ＴＦＮα（２０μｇ／Ｌ）联合刺激２４ｈ,人近端小管上皮细胞合成ＭＣＰ－１明显增加。雷公藤内酯醇可以抑制肾小管上皮细胞ＭＣＰ－１分泌,并使细胞ＭＣＰ－１ ｍＲＮＡ含量明显降低,该抑制效应呈剂量依赖性。结论：雷公藤内酯醇可以抑制炎症刺激下人近端肾小管上皮细胞合成ＭＣＰ－１,这可能     

雷公藤氯内酯醇对阿尔茨海默病大鼠学习记忆障碍的影响

目的 研究雷公藤氯内酯醇(T4)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆障碍的影响.方法 通过大鼠海马注射Aβ1-40建立AD大鼠模型,通过Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,并进行大鼠血常规、肝肾功能检测.结果 Aβ组大鼠较假手术组逃避潜伏期延长而跨越原平台位置次数明显减少;T4组大鼠较Aβ组第2～5天平均逃避潜伏期明显缩短,跨越原平台位置次数明显增多.3组大鼠血常规、肝肾功能无明显差异.结论 T4可以有效安全地改善AD大鼠的学习记忆障碍.     

雷公藤内酯醇洗脱支架对冠状动脉支架内再狭窄的影响

目的研究雷公藤内酯醇洗脱支架预防冠状动脉支架植入术后再狭窄的有效性及安全性。方法杂种幼猪20只,分别植入雷公藤内酯醇洗脱支架和普通裸金属支架各10枚。术后28d比较两组的冠状动脉造影形态、组织病理及血生化结果。结果支架部位血管腔面积裸支架组小于雷公藤内酯醇组(P<0.05)、支架内增生内膜面积及内膜增生程度裸支架组大于雷公藤内酯醇组(P<0.05)。未发现明显毒副作用。结论雷公藤内酯醇洗脱支架能抑制新生内膜的形成,在支架植入后4周能预防再狭窄的形成。     

雷公藤内酯醇对大鼠血管平滑肌细胞的增殖及DNA合成的影响

目的：探讨中药制剂雷公藤内酯醇对培养血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖及DNA合成的影响。方法：体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞，用^3H-TdR掺入率观察该药对细胞增殖和DNA合成的影响，采用流式细胞技术观察该药对细胞增殖周期的影响。结果：雷公藤内酯醇以剂量依赖性方式，抑制VSMCs的DNA合成；阻断细胞周期的中G0/G1期向DNA合成的S期转化。结论：雷公藤内酯醇能够有效地抑制VSMC的增殖，具有潜在的预防再狭窄价值。     

雷公藤内酯醇对Tca 8113细胞增殖周期进程的影响

目的 观察雷公藤内酯醇(TL)对体外培养的人舌癌细胞系Tca8113细胞诱导分化机制,为人舌癌治疗提供理论依据.方法 应用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的TL对Tca8113细胞的增殖抑制率,相差显微镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测Tca8113细胞周期进程改变及凋亡率,电子显微镜观察经TL作用后的Tca8113细胞超微结构改变.结果 TL对Tca8113细胞的增殖抑制率呈明显的剂量依赖性,相差显微镜下实验组细胞贴壁不佳,并且数目减少,细胞圆缩.流式细胞仪结果显示G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞增多,细胞凋亡率升高.电子显微镜下可见细胞高度空化,线粒体肿胀,细胞核染色质趋边,可见凋亡小体.结论 TL对Tca8113细胞有显著的增殖抑制作用,阻止Tca8113细胞G1期向S期转化进程,诱导Tca8113细胞凋亡及亚细胞结构改变.     

雷公藤内酯醇对内皮细胞血管内皮细胞生长因子活？…

目的：研究雷公藤内酯醇对人内皮细胞血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）ｍＮＲＡ表达及ＶＥＧＦ生成与分泌的影响,进一步探讨雷公藤内酯醇降低肾小球肾炎患者尿蛋白的作用机制。方法：对人内皮细胞系ＥＣＶ－３０４为研究对象,利用ＲＴ－ＰＣＲ,流式细胞仪,酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测不同剂量雷公藤内酯醇对佛波脂（ＰＭＡ）诱导的内皮细胞ＶＥＧＦ ｍＲＮＡ表达及ＶＥＧＦ生成与分泌的影响。结果：雷公藤内酯醇可以抑制     

大黄素与雷公藤内酯醇联合治疗大鼠抗肾小球基底？…

目的：观察联合应用大黄素及雷公藤内酯醇治疗大鼠抗肾小球基底膜（ＧＢＭ）肾炎的疗效,方法：建立大鼠自相期抗ＧＢＭ肾炎模型。实验分五组：大黄素组,雷公藤内酯醇 加大黄素组,雷公藤内酯醇组,肾炎未治疗组及正常对照组。大鼠注射肾毒血清后６ｈ内开始灌胃给药对照组仅给量的水,定期观察一般情况,并测定尿蛋白水平,４周后宰杀大鼠,观察肾组织病理改变。结果：（１）大鼠肾炎模型：大鼠注射抗血清后２４ｈ内即出现大鼠的尿     

雷公藤内酯醇对HL60细胞增殖周期调控的实验研究

目的：探讨雷公藤内酯醇对HL60细胞体外抗癌作用及其机制。方法：选用HL60细胞株，运用细胞培养、MTT法、流式细胞仪研究不同浓度雷公藤内酯醇对其增殖及细胞DNA含量分布的影响。结果：雷公藤内酯醇对HL60细胞具有明显的增殖抑制作用，呈时间与剂量依赖性，且细胞周期被阻滞于G1／S期，具有上调细胞G1／S检测点的能力。结论：雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力，能干扰HL60细胞G1／S检测点的转换。     

雷公藤内酯醇对T细胞功能的影响与cAMP／PKA的关系

目的：观察雷公藤内酯醇是否能够影响淋巴细胞内环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）水平及依赖ｃＡＭＰ蛋白激酶（ＰＫＡ），探讨雷公藤内酯醇影响了Ｔ细胞功能的作用机制。 方法：以人外周血Ｔ细胞为研究对象，分别采用放射免疫法和酶底物显色法测定细胞内ｃＡＭＰ水平及ＰＫＡ酶活性。 结果：（１）雷公藤内酯醇能够明显增加Ｔ细胞内ｃＡＭＰ水平，同时细胞内ＰＫＡ酶活性也明显增强，并且与雷公藤内酯醇的浓度密切相关；（２）应用腺苷酸环     

雷公藤内酯醇对5-LOX代谢通路和胰腺癌细胞凋亡的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TL)通过抑制5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)代谢通路对胰腺癌细胞生长增殖及凋亡的影响.方法:台盼蓝染色检测TL对胰腺癌细胞PANC-1、ASPC-1和SW1990的杀伤作用;流式细胞术分析凋亡率;Real-time PCR和Western blot检测TL对5-LOX表达的影响;ELISA检测5-LOX下游产物LTB4的含量.构建5-LOX表达质粒,筛选稳定转染的Sw1990细胞株(SW1990/5-LoX),western blot检测野生型、转染空质粒、转染5-LOX基因的SW1990细胞5-LOX蛋白表达水平,并检测胰腺癌细胞高表达5-LOX对TL诱导凋亡的影响.结果:TL能诱导胰腺癌细胞凋亡,TL 50 μg/L作用24 h后活细胞比例为PANC-1 70.5%±6.8%,ASPC-1 61.2%±5.6%,SW1990 52.8%±5.3%,比对照组显著减少(P<0.05);凋亡细胞数12 h组与对照组相比,有差异(24.2±3.23vs 9.5±2.18,P<0.05).TL能显著抑制5-LOX表达及LTB4生成.稳定转染后,细胞内5-LOX蛋白表达量是Wt组的4倍左右,培养上清中LTB4表达水平也显著高于Wt组(P<0.01).过表达5-LOX使SW1990细胞增强了对TL诱导凋亡的抵抗作用,细胞死亡和凋亡率均明显低于对照组(P<0.01或0.05).结论:TL可以在体外诱导胰腺癌细胞增殖抑制和细胞凋亡,该效应与TL抑制5-LOX代谢通路的活性可能有直接关系,提示TL可能开发成临床治疗胰腺癌的有效药物.     

雷公藤内酯醇对人肾小管上皮细胞补体C3的抑制

近年的研究表明[1,2 ] ,肾脏局部固有细胞尤其是肾小管上皮细胞 ,在病理因素诱导下过度产生和激活的补体 ,在肾免疫损伤中发挥重要作用 ,阻断这一作用将对保护肾功能、延缓肾病恶化具有重要意义。雷公藤内酯醇 (T4)是雷公藤二萜化合物中免疫抑制活性最强的单体 ,本研究通过观察其对肿瘤坏死因子 (TNF)α诱导人近端肾小管上皮细胞补体C3 mRNA和蛋白的影响 ,探讨雷公藤在分子水平治疗肾病的免疫抑制机制 ,并与免疫抑制剂环孢素A(CsA)和FK5 0 6比较 ,进一步探讨雷公藤的临床应用意义。一、材料和方法1 肾小管上皮细胞培养和TNFα对肾小…     

雷公藤内酯醇治疗类风湿关节炎分子机制的研究进展

雷公藤内酯醇（triptolide）,又称雷公藤内酯、雷公藤甲素,是从卫矛科雷公藤属雷公藤（tripterygium wilfordii Hook.F）、昆明山海棠[T.Hypoglaucum（Levl）Hukeda,名黑麦]等物质中提取得到的二萜内酯化合物.     

雷公藤内酯醇对人肾小管上皮细胞抗原呈递功能的影响

目的：观察雷公藤内酯醇对炎症因子刺激下人肾近端小管上皮细胞（HKC细胞）抗原呈递能力和共刺激分子表达的影响。方法：以IFN－γ（200μg/L)和TNF－α（20μg/L)联合刺激HKC细胞或同时加入不同浓度的雷公藤内酯醇,采用流式细胞仪检测细胞表面主要组织相容性二类复合体（MHC－Ⅱ）,共刺激分子B7－1,B7－2及细胞间粘附分子1（ICAM－1）表达情况,细胞内ICAM－1mRNA 表达量采用半定量逆转录PCR法检测。结果：普能培养时HKC细胞低度表达MHC－II分子,大量表达ICAM－1分子,不表达B7－1和B7－2分子,IFN－γ（200μg/L)和TNF－α（20μg/L)联合刺激24h后,小管细胞表面MHC－Ⅱ,ICAM－1,B7分子表达均显著增强,其中MHC－Ⅱ变化最大,RTPCR显示ICAM－1 mRNA表达也明显增加,雷公藤内酯醇可以剂理依赖性地抑制炎症因子引起的细胞MHC－Ⅱ,B7－1以及B7－2分子表达上调,但对刺激引起的ICAM－1蛋白及mRNA表达上调无明显影响。结论：雷公藤内酯醇可以抑制炎症因子刺激下人肾近端小管上皮细胞MHC－Ⅱ及B7分子表达上调,减弱肾小管上皮细胞作为抗原呈递细胞活化T细胞的能力。     

雷公藤内酯醇降低T淋巴细胞核因子—kB的活性

目的：研究雷公藤内酯醇对Ｔ淋巴细胞核因子－ｋＢ（ＮＦ－ｋＢ）活力的影响，进一步研究雷公藤内酯醇免疫抑制作用的机制。方法：和凝胶迁移率实验（ＥＭＳＡ）检测不同浓度的雷公藤内酯醇对于普通培养状态下和同时使用佛波脂／植物血凝素（ＰＭＡ／ＰＨＡ）激活的Ｊｕｒｋａｒ细胞中ＮＦ－ｋＢ活力的影响。结果：在普通培养状态下和同时使用ＰＭＡ／ＰＨＡ激活的Ｊｕｒｋａｔ细胞中均存在一定活力的ＮＦ－ｋＢ，使用ＰＭＡ／ＰＨＡ     

雷公藤内酯醇通过细胞凋亡阻人T细胞增殖

通过观察雷公藤内酯醇是否能导致人外周血Ｔ细胞发生细胞凋亡，探讨该化合物阻止淋巴细胞增殖的作用机理。方法：选择被ＰＨＡ－Ｐ，佛波脂，及白介素－２（ＩＬ－２）等丝分裂原刺激的人Ｔ细胞为研究对象，以吖啶橙染色细胞的形态，ＤＮＡ片断的测定，和ＤＮＡ凝胶电泳作为判断细胞出现细胞凋亡的标准。结果：（１）未发现雷公藤内酯醇能使处于静止状态的Ｔ细胞出现细胞凋亡；（２）雷公藤内酯醇与有丝分裂原同时作用于Ｔ细胞后，其