热应激和短暂心肌缺血对大鼠心肝组织热休克蛋白70表达的影响

目的探讨热应激及短暂心肌缺血对大鼠心、肝组织损伤及热休克蛋白（HSP70）表达的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为：对照组、假手术组、热休克组和短暂心肌缺血组,每组6只,应激后20h取心、肝组织,采用Western blotting、免疫组化及HE染色方法,观察大鼠心、肝组织的病理变化和HSP70的表达。结果（1）热应激及短暂心肌缺血后大鼠心、肝组织均有病理改变且HSP70表达与对照相比均显著增加（P〈0．05）;（2）短暂心肌缺血后心肌中HSP70表达量显著高于热应激后的表达量（P〈0．05）,而肝脏在两种刺激后HSP70表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论短暂心肌缺血对心脏组织中HSP70表达的影响强于热应激,而对肝脏的影响两者无显著差异,这可能与不同刺激引起心、肝组织中HSP70表达机制不同有关。     

前列腺素E_1预处理对缺血/再灌注心肌PKC及HSP70表达的影响

目的探讨前列腺素E1(PGE1)预处理对大鼠缺血/再灌组心肌PKC及HSP70表达的影响。方法 40只大鼠随机分成5组:正常对照组(C组)、缺血/再灌注组(I/R组)和PGE1 14,42,126μg.L-1预处理组。应用Langendorff装置制备大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)模型,以HE染色制备病理切片观察心肌纤维病理形态学变化,Western blot技术检测心肌细胞内PKC的表达,免疫组织化学法测定HSP70的表达。结果 PKC和HSP70在PGE1预处理组的表达量较I/R组明显增加(P<0.05),且各预处理组间比较差异有统计学意义(P<0.05);各PGE1预处理组大鼠缺血/再灌注损伤心肌纤维形态学变化得到不同程度的改善。结论 PGE1预处理可以改善大鼠缺血/再灌注损伤心肌纤维形态学变化,促进PKC及HSP70的表达,有效减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤。     

热休克蛋白70对幼鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪（TMP）诱导热休克蛋白（HSP）70对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其干预心肌缺血再灌注损伤的作用机制及合理用药途径,为临床使用提供理论依据。方法建立幼鼠在体心肌缺血再灌注模型。将96只体重60-75g SD幼鼠（〈21d）,随机分为3组：（1）假手术（SC）组,（2）缺血再灌注（IR）组,（3）TMP预处理后缺血再灌（TMP＋IR）组;每组再随机分为4个亚组：12h亚组、24h亚组、36h亚组、48h亚组,各亚组分别于腹腔药物注射[TMP＋IR组腹腔注射TMP（100mg／kg）,SC组与IR组腹腔注射等量0．9％氯化钠溶液]后12h、24h、36h、48h制作心肌缺血再灌注模型。测定血清中肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）两种酶的含量,测定幼鼠心肌内HSP70的含量．应用电镜观察幼鼠心肌细胞超微结构的病理改变。结果IR组和TMP＋IR组各时间点血清中CK-MB、LDH含量明显高于SC组（P〈0．01）;IR组心肌中HsP70表达量较SC组略增加,TMP＋IR组HSP70的表达明显增加;电镜心肌细胞超微结构观察：SC组心肌细胞结构基本正常,IR组损伤最严重,TMP＋IR组心肌细胞损伤较IR组有明显改善。结论HSP70的表达可以减轻未成熟心肌的缺血再灌注损伤,可以提高未成熟心肌对损伤性应激的耐受能力。     

急性黄磷及其化合物吸入致ALI/ARDS大鼠HSP70的表达及肺组织病理改变

目的了解大鼠热休克蛋白70（HSP70）的表达及肺组织病理改变与急性黄磷及其化合物吸入致急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）的关系。方法健康SD大鼠48只随机分为对照组以及造模后0、4、12、24、48h处死组,每组8只。采用自制的气体发生以及染毒装置,将大鼠置入染毒柜后,间歇染毒形成ALI/ARDS模型。观察ALI/ARDS大鼠动脉血气分析变化和肺系数,肺组织HSP70的表达以及肺组织病理改变。结果肺损伤后大鼠动脉血气以及肺组织病理改变明显恶化,肺系数较对照组明显增大,正常大鼠肺组织HSP70表达较弱,表达部位为肺泡上皮和部分支气管黏膜上皮细胞胞质 在ALI/ARDS条件下,大鼠肺组织HSP70表达逐渐增强,至成模后12h时相点,HSP70的表达最强,并呈现明显核表达 至成模后48h时相点,HSP70的表达逐渐减弱,核表达逐渐消失,主要在肺泡上皮和部分支气管黏膜上皮细胞胞质表达。结论急性黄磷及其化合物吸入致ALI/ARDS大鼠肺组织病理改变随造模后时相的延长越来越严重。ALI/ARDS条件下大鼠肺组织HSP70表达表现为：受到应激-高表达-表达减弱,并伴有HSP70的再分布。     

安宫牛黄丸对大鼠缺血性脑损伤后HSP70表达的影响

目的：研究安宫牛黄丸对大鼠缺血性脑损伤的影响及机制。方法60只研究用大鼠进行随机分组,分为安宫牛黄丸治疗组（30只）和缺血对照组（30只）,再将两组各分为24、48、72 h三个亚组。构建大鼠局部脑缺血模型,缺血对照组给予等量生理盐水灌服,而治疗组给予安宫牛黄丸,1丸/次,1次/d,灌服,直至到各亚组的观测时间点。然后对缺血区脑组织进行病理形态学分析,并用免疫组化S-P的方法对半暗带热休克蛋白（HSP）70进行检测。结果使用安宫牛黄丸的大鼠个亚组HSP70的表达显著高于使用生理盐水的对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。且安宫牛黄丸治疗组的大鼠病理形态改变较缺血对照组明显,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 HSP70是调节脑损伤中重要的内源性保护因子,安宫牛黄丸可通过调节HSP70的表达进而起到保护缺血性脑组织的作用。     

热休克预处理对大鼠胰腺移植后缺血性再灌注损伤的抑制作用

摘要 目的：通过热休克预处理（HPC）,探讨减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤的发生机制。 方法：热休克预处理后动态检测大鼠胰腺组织热休克蛋白表达。建立大鼠胰腺移植缺血再灌注模型,选择表达热休克蛋白高峰时段供体大鼠胰腺移植作为实验组,未预处理的供体大鼠胰腺移植作为对照组。胰腺移植后6h,检测静脉血及移植胰腺。Western blot法检测胰腺组织中热休克蛋白70（HSP70）的表达,免疫组化法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。碘淀粉比色法检测血淀粉酶水平。光镜观察胰腺病理改变。 结果：HPC后供体大鼠胰腺中HSP70的表达在12h 达到高峰,与其它各时段比较具有显著差异（P<0.05）,与未预处理组比较差异也显著（P<0.01）,48h恢复到原来水平。对照组胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平明显升高,与假手术组相比差异显著（P<0.01）。实验组降低了胰腺组织中TNF-α、中性粒细胞、血淀粉酶的水平,与对照组比较差异具有统计学意义。（P<0.05）。实验组胰腺间质水肿及出血明显低于对照组。 结论：热休克预处理可以减轻大鼠胰腺移植后缺血再灌注损伤, 热休克预处理的延迟保护作用与HSP70的诱导生成有关。     

心肌缺血再灌注损伤HSP70表达与细胞凋亡动态观察及相关性研究

用结扎左冠状动脉前降支法建立大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型 ,用免疫组织化学方法检测 HSP70表达 ,用TUNEL 技术检测心肌细胞凋亡。结果显示 ,在急性心肌缺血再灌注损伤过程中 ,HSP70和细胞凋亡均呈现明显地动态性表达并有着明显的相关性 ;HSP70的代偿性增加可能抑制细胞凋亡的发生 ;细胞凋亡的发生可能是诱发 HSP70表达的一个重要机制。     

间歇性低氧诱导的心肌热休克蛋白70表达增加大鼠心脏对缺血损伤的耐受(英文)

目的:定量检测暴露于间歇性低氧不同时程后心肌热休克蛋白(HSP70)表达量并探讨HSP70与大鼠心脏对缺血再灌注损伤的耐受性之间的关系。方法:结扎冠脉左前降支造成心肌缺血及再灌注模型;并以逆转录PCR方法检测大鼠心肌HSP70 mRNA的表达量。结果:间歇性低氧暴露14,28,42天后HSP70表达量分别增加2.6,3.6,3.8倍;低氧训练28天后大鼠心脏对缺血-再灌注损伤的耐受性明显增加,缺血和再灌注心律失常诱发评分(AS)显著降低;大鼠脱离低氧环境后,上述作用能够维持2周。而且HSP70的表达量与心肌耐受性的增加存在明显相关(r=0.98,0.92;P<0.01)。结论:间歇性低氧暴露后心肌对缺血-再灌注损伤耐受性的增加与HSP70的表达量有关。     

丹参酮II A影响大鼠急性脊髓损伤HSP70神经元的表达

目的：通过对Wistar大鼠给予尾静脉注射丹参酮ⅡA,影响大鼠急性脊髓损伤热休克蛋白质70（HSP70）神经元水平的表达。方法采用Allen’s打击法建立急性脊髓损伤（ASCI模型）,观察丹参酮ⅡA组（STS组）、甲基强的松龙组（MP组）、安慰剂对照组（NS组）、不给药对照组（NO组）,观察在伤后1、2、4、8 h时间点HSP70阳性表达。结果四组HSP70在ASCI后组织中显著存在,且各组HSP70表达趋势随着各个时段上升呈上升趋势。①急性脊髓损伤大鼠不做任何处理或给予生理盐水的情况下, HSP70表达差异无统计学意义（P〉0.05）。②当注射丹参酮ⅡA或甲基强的松龙时,脊髓组织中HSP70表达差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。组间比采取t检验,其结果显示：①给脊髓损伤模型注射生理盐水和不给药时,对脊髓组织中HSP70表达是一致的（P〉0.05）。②给强的松龙治疗脊髓损伤作用优于丹参酮ⅡA注射液（P〈0.05）。结论①急性脊髓损伤过程中神经元受到损伤致使HSP70表达增高是产生应激性保护的一种标志,该标志在HSP 70表达中对受损神经元起到保护作用,也使得HSP70在ASCI后表达增强。②脊髓损伤后各组的HSP70表达均呈增加趋势。STS组和MP组HSP70随时段上升阳性神经元细胞表达上升,亦呈连续性, STS组数值虽低于MP组数值,但具有可比性。所以二者在急性脊髓损伤后HSP70阳性神经元表达层面上具有相同作用。     

沙棘总黄酮对大鼠心肌再灌注损伤的保护作用

目的：观察沙棘总黄酮对大鼠心肌再灌注损伤时超微结构及对心肌组织ＳＯＤ活性和ＭＤＡ含量的影响。方法：预先ｉｇ沙棘总黄酮（ＴＦＨ）６ｄ后，用ＳＤ大鼠制作心肌缺血再灌注模型。结果：缺血４０ｍｉｎ，再灌３０ｍｉｎ后ＴＦＨ（７７ｍｇ·ｋｇ－１、２３１ｍｇ·ｋｇ－１）能明显减轻缺血再灌损伤区超微结构的病理改变，显著提高大鼠心肌组织ＳＯＤ活性并减少ＭＤＡ的生成。结论：ＴＦＨ对大鼠心肌缺血再灌损伤的保护作用可能与提高自由基清除酶活性及抑制脂质过氧化反应有关。     

黄芩苷对脑缺血-再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:研究黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后神经细胞凋亡以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、热休克蛋白(HSP)70表达的影响。方法:96只Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、黄芩苷组(50,100,200 mg·kg-1),以及尼莫地平(0．4 mg·kg-1)组。利用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,通过HE染色、流式细胞术、免疫组化以及RT- PCR等方法,观察黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后脑组织病理形态学改变、神经细胞凋亡率以及caspase-3、HSP70表达的影响。结果:黄芩苷可明显改善脑缺血-再灌注损伤所致的大鼠脑组织病理形态学改变,降低神经细胞凋亡率,抑制促凋亡基因caspase-3的表达,促进抑凋亡基因HSP70的表达。结论:黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与黄芩苷抑制caspase-3表达,促进HSP70表达,从而发挥抗凋亡作用有关。     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的观察δ阿片受体激动剂D-丙2,D-亮5脑啡肽（〔D-Ala2,D-Leu5〕-enkephali,DADLE）对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响,探讨DADLE对心肌组织保护的可能机理。方法采用盲肠结扎加穿孔（CLP）法制作大鼠脓毒症模型,SD大鼠54只（雌雄不拘）,利用随机数字表随机分为CLP组（n=18）、DADLE组（n=18）和假手术（SHAM）组（n=18）。在不同时间点（6h、12h、24h）处死大鼠,原位末端标记检测心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测心肌组织中Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的动态变化并比较心肌组织的病理改变。结果 CLP组大鼠心肌组织病理损害较SHAM组明显严重,DADLE组心肌组织的病理变化明显改善;CLP组大鼠心肌组织细胞凋亡指数较SHAM组明显升高（P〈0.01）,以12h组最明显（P〈0.01）,各DADLE组心肌细胞凋亡指数明显降低（P〈0.01）;CLP组大鼠心肌组织Caspase-3的表达比SHAM组明显增加（P〈0.01）、Bcl-2的表达明显降低（P〈0.05）;DADLE组心肌组织Caspase-3的表达较CLP组明显降低（P〈0.01）、Bcl-2的表达明显增加（P〈0.05）。心肌组织Caspase-3的表达与心肌细胞凋亡指数正相关（r=0.92,P〈0.01）,Bcl-2的表达与心肌细胞凋亡指数负相关（r=-0.94,P〈0.01）。结论 DADLE明显改善脓毒症大鼠心肌组织的病理变化,其作用机理可能与DADLE下调Caspase-3表达、上调Bcl-2表达,从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌中的表达及已酮可可碱的影响

目的：探讨热休克蛋白70在内毒素血症大鼠心肌组织中的表达及已酮可可碱的影响。方法：采用直接注射内毒素的方法建立大鼠急性内毒素血症模型。18只Wistar大鼠随机分成3组，假手术组，内毒素组和PTX组。分别采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白。结果：内毒素组免疫组织化学法与免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与假手术组比较都明显增强（P〈0．01）；予PTX干预后，免疫组织化学法与免疫印迹法检测心肌组织HSP70蛋白水平与内毒素组比较也都明显增强（P〈0．01）。结论：内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达可明显增高，PTX干预可以进一步增高内毒素血症大鼠心肌组织内的HSP70蛋白表达，从而进一步加强对心肌的保护作用。     

美洛昔康对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

目的研究美洛昔康对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用以及环氧化酶-2(COX-2)的表达。方法雄性SD大鼠30只,体质量(300±20g),随机分为A组(美洛昔康组)、B组(缺血再灌注组)、C组(手术对照组),其中A、B组建立70%肝缺血再灌注损伤模型。A组于缺血前30min经腹腔注射美洛昔康(3mg/kg);B组于缺血前30 min经静脉注射等量生理盐水;C组仅作麻醉、开腹、不阻断血流。术后6h,分别采用采用全自动生化分析仪、HE染色、westernblot法、生物酶法分别测定血肝功能酶(ALT,AST),肝组织病理改变,肝内COX-2的表达、肝组织内超氧歧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果 A组应用美洛昔康后血ALT、AST以及肝组织SOD、MDA显著低于B组(P<0.01),肝脏的明显降低,肝组织形态学无显著改变。结论美洛昔康能抑制肝脏内COX-2表达,缓解肝功能下降,保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤。     

苦荬黄酮对大鼠急性实验性心肌缺血的影响

目的观察苦荬黄酮对结扎大鼠冠状动脉引起急性心肌缺血的影响。方法采用结扎大鼠冠状动脉建立急性实验性心肌缺血。取成功建立急性实验性心肌缺血大鼠50只,随机为5个试验组,分别为模型对照组、苦荬黄酮大、中、小剂量组[18.0、9.0、4.5(按生药计)g·kg-1]及阳性对照复方丹参片组(2.0 g·kg-1),每组10只。均为一次性灌胃给药,给药体积10 mL·kg-1,模型对照组给予等体积溶媒,用生理信号采集分析系统记录给药后4、5、6 h的胸前多导联心电图,分别取血测定血清肌酸激酶(CPK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,试验结束时取大鼠心脏切片、染色、测量心肌缺血面积,观察苦荬黄酮对结扎大鼠冠状动脉引起急性心肌缺血的保护作用。结果与模型组比较,苦荬黄酮18.0、9.0 g·kg-1能明显降低大鼠血清肌酸激酶(CPK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性(P<0.01),可使大鼠心肌缺血面积明显缩小(P<0.05),使升高的∑ST明显降低(P<0.05),限制心肌梗死范围。结论苦荬黄酮对大鼠急性心肌缺血损伤具有明显的保护作用。     

丹参多酚酸盐对2型糖尿病大鼠心脏保护作用

目的探讨丹参多酚酸盐对2型糖尿病大鼠心脏保护作用。方法选择30只健康雄性Wistar大鼠中的20只,以高糖高脂饲料喂养6周后腹腔注射链脲佐菌素30mg／kg,3d后测血糖≥17．8mmol／L（n=17）入选糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病组（n=9）、丹参多酚酸盐（15mg／kg）治疗组（n=8）,另外10只大鼠为对照组（n=10）。治疗组给予丹参多酚酸盐治疗8周,彩色多普勒超声检测大鼠心功能,光镜及透射电镜观察心肌病理学改变,转移酶介导的缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡,荧光定量聚合酶链反应检测心肌细胞Bcl-2及半胱氨酸天冬酶3（Caspase-3）基因的表达情况。结果与对照组相比．糖尿病组凋亡心肌细胞明显增多[（14．57±0．56）比（0．87±0．13）]（P〈0．05）;心肌中Bcl-2基因表达减弱[（0．57±0．05）比（1．06±0．09）]（P〈0．05）;Caspase-3基因表达增强[（1．94±0．15）比（1．02±0．08）]（P〈0．05）;与糖尿病组相比,丹参多酚酸治疗组凋亡心肌细胞减少[（6．16±0．64）]（P〈0．05）;心肌Bcl-2基因表达增多[（0．84±0．09）]（P〈0．05）;Caspase-3基因表达减少[（1．37±0．13）]（P〈0．05）。结论应用丹参多酚酸盐治疗后,可延缓2型糖尿病心肌病变发展,保护心脏。