华枝睾吸虫和东方次睾吸虫囊蚴的形态同工酶及蛋白质等比较研究

本文对中华枝睾吸虫囊蚴和东方次睾吸虫囊蚴的形态鉴别进行了比较研究,同时用聚丙烯酰胺园盘电泳(PAGE)法对两种囊蚴的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和酯酶(Est)同工酶进行了比较研究,两种囊蚴的LDH第三带的Rf值有所不同,MDH有明显不同,Est明显不同,蛋白质染色相同,糖类染色相同,脂类染色区带的Rf值有所不同。     

肝片形吸虫和华枝睾吸虫的同工酶盘电泳研究

本文应用聚丙烯酰胺凝液盘电泳对肝片形吸虫和华枝睾吸虫成虫的苹果酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酯酶和过氧化物酶进行了分离和研究。两种吸虫4种酶的同工酶电泳型在区带数和/或迁移率、活性上均不相同,显示两个虫种之间有明显差异。但两种吸虫的苹果酸脱氢酶和酯酶存在着位置相同的同工酶带,说明两种吸虫在遗传上有一定的联系。本研究显示两种吸虫同工酶型的差异为从分子水平上区分和鉴定它们提供了证据。     

不同宿主来源的华支睾吸虫同工酶比较观察

目的:通过对不同宿主华支睾吸虫的同工酶研究,了解其在不同宿主中的变化情况.方法:应用浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶板状电泳(CG-PAGE)对50 d虫体的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)、过氧化物酶(PO)进行电泳观察,通过凝胶成像软件对酶(蛋白)带的迁移率、相对浓度分布、光密度等结果进行分析.结果:来自不同宿主(大鼠、犬、豚鼠、兔、猫)的虫体主要酶带特征基本相同,但次要酶带存在一定差异.结论:不同宿主的华支睾吸虫同工酶存在着一定的变化,实验结果为华支睾吸虫在不同宿主中的发育、生理、生化提供实验资料.     

四种肝脏吸虫蛋白质盘电泳和等电聚焦的比较分析

本文应用盘状电泳和等电聚焦分析了4种肝脏吸虫成虫的可溶性蛋白质。肝片吸虫、华枝睾吸虫、东方次睾吸虫、台湾次睾吸虫的盘状电泳结果区带数分别为20、18、18和15条,主带数分别为5、4、8和5条;等电聚焦结果区带数分别为28、22、24和24条,主带数分别为10、3、7和7条。蛋白电泳结果显示,东方次睾吸虫和台湾次睾吸虫为两个独立虫种。用数量分类学的相似率表示四种吸虫蛋白电泳谱的相似程度,结果显示东方次睾吸虫和台湾次睾吸虫最为相似,亲缘关系最近。     

人体5种小型吸虫病原形态观察

目的通过对东方次睾吸虫(Metorchisorientalis)、华支睾吸虫(Clonorchissinensis)、钩棘单睾吸虫(Haplorchispumilio)、扇棘单睾吸虫(Haplorchistaichui)和台湾棘带吸虫(Centrocestusformosanus)的形态观察,为鉴别这些人体寄生虫病病原提供科学依据。方法收集5种吸虫的成虫、虫卵、囊蚴,并进行形态、大小测量和寄生部位观察。结果东方次睾吸虫和华支睾吸虫成虫寄生部位完全相同,都是在胆管和胆囊内。其他3种则在小肠内。囊蚴寄生部位:除台湾棘带吸虫在鱼鳃外,其余4种均在鱼肉内。虫卵特征:5种吸虫除卵盖和外壳光洁度有些差别外,其余差别甚微。囊蚴特征:东方次睾吸虫囊壁很厚,而其他4种则很薄。其它特征:台湾棘带吸虫的排泄囊呈“工”字形,扇棘单睾吸虫生殖吸盘上的小棘呈杆状排列成葵扇状;而钩棘单睾吸虫则呈点状并围成一圈。成虫特征:华支睾吸虫最大,呈葵花仔状;东方次睾吸虫其次,呈叶片状;钩棘单睾吸虫和扇棘单睾吸虫居中,两者均呈鞋状;台湾棘带吸虫最小,呈酒瓶状。结论发现上述5种吸虫的成虫、虫卵及囊蚴时,必须根据各自形态、大小等特征,认真鉴别。     

东莞市淡水鱼华支睾吸虫感染情况调查

目的了解目前东莞地区淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况。方法在渔场和鱼塘采集鲩鱼110条和非洲鲫鱼217条,采用消化法检查淡水鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴。结果鲩鱼华支睾吸虫囊蚴感染率约为82．72％,非洲鲫鱼未检出囊蚴。结论东莞地区鲩鱼中存在华支睾吸虫囊蚴感染,且感染率较高。     

阳山县餐馆淡水鱼品肝吸虫感染状况的调查

目的 根据国家肝吸虫病综合防治示范区的要求,对辖区内餐馆的淡水鱼品进行卫生监测,了解华支睾吸虫感染情况,为国家制定餐馆经营淡水鱼卫生标准提供科学依据.方法 对辖区内大、中、小餐馆随机各抽取3～6间,采用压片法和全消化法检测淡水鱼品中华支睾吸虫的感染情况;检查炊具(刀、砧板)华支睾吸虫囊蚴污染情况.结果 2008-2009年共检查餐馆24间,7种淡水鱼共411条,发现有5种淡水鱼共61条有华支睾吸虫囊蚴,其中专供食鱼生的鲩鱼90条中有2条检出华支睾吸虫囊蚴,占2.22%,未发现炊具污染.结论 鲩鱼中的华支睾吸虫囊蚴是主要的感染来源,其感染状况可作为制定餐馆经营淡水鱼品卫生标准的指标.     

广州市某医科院校学生华支睾吸虫感染情况调查

目的了解广州某医学院学生华支睾吸虫的感染状况。方法分别采用直接涂片法和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对学生的粪便和血清进行检查。结果粪便检查4438人,华支睾吸虫卵阳性5人,感染率约为0．11％;ELISA法检查415人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性10人,阳性率约为2．41％。结论广州市医科大学生华支睾吸虫感染率低于广州市平均水平,但仍需注意高校学生华支睾吸虫感染的防治工作。     

司前镇人体华支睾吸虫感染情况调查

目的了解和分析江门市新会区人体华支睾吸虫感染情况。方法抽取1989年曾经调查过的管理区,采用分层整群随机抽取3个自然村不同年龄、性别人群进行华支睾吸虫感染调查。采用改良加藤氏厚涂片法粪检查虫卵。结果华支睾吸虫感染率50.30%,明显高于13年前(X2=171.09,P<0.05),具有相当家庭聚集性,14岁以下感染率低于14岁以上(X2=21.559,P<0.05)。结论要加强对华支睾吸虫的防治,降低华支睾吸虫的感染率。     

深圳市南山区人群华支睾吸虫感染现状调查

目的了解深圳市南山区各类人群华支睾吸虫感染现状。方法采用整群抽样方法调查不同类型人群,使用“肝吸虫抗体检测试剂盒”,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清华支睾吸虫IgG抗体。结果共调查5185人,华支睾吸虫感染率5．77％。其中,机关事业单位工作人员感染率为6．47％,本地企业员工感染率为3．04％,外来务工人员感染率为1．59％,主动检测人员感染率为32．26％。男性感染率高于女性,40岁年龄组感染率最高。结论本地区属于华支睾吸虫感染的低流行区,机关事业单位工作人员是重点防治人群,应加强宣传教育,同时做好食品卫生整治工作,切断华支睾吸虫的感染来源。     

淮南地区发现东方次睾吸虫

目的:了解淮南地区东方次睾吸虫终宿主感染情况。方法:雌性家鸭60只,18月龄,体重(2.5±0.5)kg,分别购自于淮南地区窑河和高溏湖。剖杀家鸭,在其肝胆管内分离虫体,并计算家鸭的感染率。结果:家鸭肝胆管内检出东方次睾吸虫成虫,分离阳检率为18.3%(11/60)。结论:淮南地区沿岸居民饲养的家鸭中可检出东方次睾吸虫成虫。     

深圳市公务员华支睾吸虫感染情况调查

目的调查深圳市公务员华支睾吸虫感染情况。方法采用系统抽样方法抽取1918份公务员血清样本,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其华支睾吸虫IgG抗体。结果共调查1918人,血清华支睾吸虫IgG抗体阳性者为126人,感染率6.6%。其中男性感染率为6.8%,女性感染率为5.2%。在各年龄组中以50～59岁年龄组感染率最高。结论公务员华支睾吸虫感染率高于居民总体感染水平,应将公务员作为华支睾吸虫病防治的重点人群。     

肇庆市人群华支睾吸虫感染调查

目的了解肇庆市人群华支睾吸虫感染现状,为今后的防治工作提供依据。方法采用分层随机抽样法进行人群抽样,用改良加藤氏法粪检华支睾吸虫虫卵。结果全市共调查10386人,发现华支睾吸虫感染498人,感染率为4.79%。其中男性感染率为6.01%,女性感染率为3.51%;以50～59岁年龄组人群感染率最高;重点人群感染率远高于一般人群;高要市是全市感染最严重的地区,其感染率为19.53%,其次是鼎湖区,感染率为11.65%。结论肇庆市山区县属华支睾吸虫病低流行区,而淡水鱼养殖区的高要市及鼎湖区属华支睾吸虫高、中流行区,是我市华支睾吸虫防控的重点所在。建议加强政府领导,全社会共同参与,采取以行为干预及对重点地区、重点人群进行查治为主的综合防制措施,以降低人群华支睾吸虫感染率,控制华支睾吸虫病的流行。     

华枝睾吸虫胆道梗阻术后胆道引流特点分析

目的探讨华枝睾吸虫感染的胆道梗阻性疾病外科治疗后胆道引流的特点。方法2001年1月~2004年12月外科治疗华枝睾吸虫感染致胆道梗阻性疾病68例,调查手术后胆道引流管的放置时间、胆汁流量、闭管时间、拔管指征以及预后追踪等情况。结果68例胆道梗阻患者全部为华枝睾吸虫感染所致,2例伴有恶性病变,2例伴有重症胆管炎(ACST),急诊手术32例(47%)。手术后平均胆道引流管放置时间(26.3±3.1)d,3例结石复发2次手术。结论华枝睾吸虫感染引起的胆道梗阻性疾病,手术后胆道引流管放置时间相对要长,配合驱虫治疗十分必要,必须反复检测胆汁内无虫卵排出方可拔除引流管。     

华支睾吸虫感染与肝胆疾病的关系

本文综述了华支睾吸虫病与其他肝胆疾病的误诊情况和华支睾吸虫感染与胆囊炎、胆管炎、胆石症、其他肝胆疾病及癌症的关系.临床医生若能提高对华支睾吸虫感染与其他肝胆疾病的鉴别水平,减少误诊;人群增强自我保健意识.改变不良的饮食习惯,将可有效控制华支睾吸虫感染.     

华支睾吸虫成虫特异性诊断抗原分析

目的:寻找诊断华支睾吸虫病的特异性抗原.方法:应用SDS-PAGE和Western blot对华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析,试验血清包括旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清,正常大鼠和小鼠血清,旋毛虫病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病、日本血吸虫病及囊虫病患者血清,斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和正常人血清.结果:华支睾吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示17条蛋白带,其中相对分子质量为65 000、54 000、31 000、25 000、13 000的为主带.Western blot结果显示,相对分子质量为108 000、94 000、71 000、65 000、56 000、53 000、43 000的蛋白带可被华支睾吸虫病患者血清识别,108 000、71 000、65 000、63 000、53 000的蛋白带可被并殖吸虫病患者血清识别,108 000、94 000、71 000可被日本血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别;56 000的蛋白组分只能被华支睾吸虫病患者血清识别,而不与其他试验血清发生交叉反应.结论:华支睾吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为56 000的蛋白组分为华支睾吸虫成虫的特异性抗原.     

华支睾吸虫模拟抗原表位的筛选和鉴定

目的从噬菌体12肽库中筛选华支睾吸虫模拟抗原表位。方法应用噬菌体随机12肽库亲和筛选华支睾吸虫病患者混合血清IgG,经过3轮的淘筛,随机挑取蓝色噬菌斑进行扩增,以ELISA检测其免疫活性,挑选免疫活性较高的克隆进行序列分析及免疫学鉴定。结果8个阳性克隆测得6个DNA序列,Western-bloting显示6个单克隆噬菌体均可与华支睾吸虫患者血清反应,斑点免疫金银染色法有3个克隆可被华支睾吸虫患者血清识别。结论应用噬菌体肽库筛选技术可以获得华支睾吸虫模拟抗原表位。     

华支睾吸虫LAP2基因的生物信息学分析及克隆表达、组织定位

目的利用生物信息学方法分析华支睾吸虫LAP2全长基因的结构和功能,并将该基因克隆至原核表达载体进行表达、纯化,为进一步研究LAP2功能奠定基础。方法利用生物信息学相关软件,分析华支睾吸虫LAP2基因及其蛋白的结构、生物学和免疫学功能特征。针对LAP2的EST序列的编码区设计引物,从华支睾吸虫囊蚴cDNA质粒中扩增目的基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,经PCR、双酶切及DNA测序鉴定的阳性克隆诱导目的蛋白表达、亲和层析纯化、免疫印迹鉴定及组化定位。结果华支睾吸虫LAP2基因全长为1761bp,其编码序列长度为1662bp,编码553个氨基酸,理论分子量是59696.5Da,与人的该基因氨基酸序列相似性为26.7%,一致性仅为15.4%。该基因在大肠杆菌中可被高效表达,纯化的重组蛋白能被感染华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该重组蛋白定位于华支睾吸虫成虫的肠支及表膜。结论华支睾吸虫LAP2在大肠杆菌中呈高效的可溶性表达,具有良好的抗原活性,可能为华支睾吸虫成虫分泌排泄抗原的组份之一。     

沙市市集贸市场淡水鱼华支睾吸虫囊蚴寄生情况调查

调查沙市集贸市场淡水鱼华支睾吸虫的感染情况,从麦穗鱼体内检出华支睾吸虫囊蚴,首次证实了该吸虫在本地淡水鱼中感染的存在。囊蚴土要分布在阳性鱼的背部肌肉内,经对兔、豚鼠、大白鼠及小白鼠的人工感染,以兔对该吸虫的敏感性最高。     

肇庆地区淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴情况调查

目的了解目前肇庆地区常见食用淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴的情况。方法从肇庆所辖的四会市和端州区两地采集鲩鱼和鳙鱼样本,用胃蛋白酶消化法检查鱼肉中的华支睾吸虫囊蚴。结果共检查鲩鱼328尾,其华支睾吸虫的平均感染率约为48.78%,阳性鱼平均感染度约为4.66。共检查鳙鱼331尾,其华支睾吸虫的平均感染率约为37.46%,阳性鱼平均感染度约为2.94。结论肇庆地区的淡水鱼中存在一定程度的华支睾吸虫感染,其中鲩鱼的感染情况较鳙鱼严重。