大鼠毛囊干细胞的体外培养及相关检测的实验研究

目的：建立体外分离培养、扩增、鉴定大鼠毛囊干细胞（rat hair follicle stem cells,rHFSCs）的方法,观察其生物学特性。方法：切取1周龄SD大鼠触须部皮肤,用、Dispase酶和IV型胶原酶混合液消化,显微镜下分离毛囊隆突部,用组织块法培养rHFSCs,培养基为DMEM／F12基础培养基,加不同浓度的KSR血清替代物、青链霉素混合液、L-谷氨酰胺、非必需氨基酸、EGF、bFGF、羟基乙醇和氢化可的松。用IV型胶原差速贴壁法纯化rHFSCs,再通过细胞免疫荧光染色及Q-PCR检测相关基因来联合鉴定,分别取不同代rHFSCs检测细胞增殖能力和活力。结果：以上方法分离、培养、纯化的HFSCs呈典型的铺路石状,贴壁较牢,克隆形成能力强。免疫细胞化学鉴定可见角蛋白15（Keratin-15,Krt15）、整合素a6（Integrin-a6,Itga6）和整合素β1（Integrin-131,Itgβ1）抗体表达呈阳性。纯化后的细胞最初2～3d细胞处于生长的潜伏期,5～6d时细胞处于对数生长期;从第7代开始,随着传代次数的增加,细胞活力也明显下降。O-PCR检测发现,经过全新的培养体系得到的干细胞活性大,拥有较强的增殖能力,几乎不舍有表皮角质形成细胞。结论：改进的显微镜联合组织块法分离培养rHFSCs,经IV型胶原差速贴壁法筛选后,可得到高纯度的rHFSCs,细胞增殖能力强,可以为干细胞组织工程学构建人工毛囊、血管及皮肤等提供良好的种子细胞。     

黄芪诱导表皮干细胞增殖构建组织工程皮肤治疗皮肤缺损

目的:观察黄芪对人表皮干细胞增殖的影响,并探讨采用表皮干细胞构建组织工程皮肤用于皮肤缺损修复治疗的可能性.方法:利用胶原快速贴附法分离纯化人表皮干细胞,以含黄芪、成纤维细胞条件培养液的表皮干细胞培养液进行体外培养,通过β1整合素和角蛋白19免疫组化染色、细胞克隆形成率测定,对培养细胞进行鉴定;并将表皮干细胞与真皮支架材料复合构建组织工程复合皮肤,移植于兔耳全层皮肤缺损创面,观察创面愈合情况及毛囊的组织学变化.结果:人表皮干细胞表达β1整合素和角蛋白19,呈明显克隆性生长,其克隆形成率明显高于角质细胞对照组;兔耳创面愈合后8周可见新生毛囊形成.结论:在本实验条件下,黄芪能诱导表皮干细胞增殖,表皮干细胞可参与创面新生毛囊结构的形成,具有构建组织工程皮肤完整修复皮肤结构和功能的应用前景.     

复叶耳蕨总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化的影响

目的研究复叶耳蕨总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化的影响。方法采用全骨髓差速贴壁法体外分离、纯化和培养大鼠骨髓间充质干细胞;取P3代细胞,分实验组和对照组,用流式细胞仪测定细胞表面标志物鉴定细胞,采用MTT法检测细胞生长曲线。显微镜下观察两组的细胞形态和组织化学染色的钙化结节;速率法测定碱性磷酸酶(ALP)活性和RT-PCR检测骨髓间充质干细胞诱导分化过程中骨桥蛋白和I型胶原的mRNA表达来鉴定成骨作用。结果体外培养的细胞表达表面标志;复叶耳蕨总黄酮对骨髓间充质干细胞内ALP活性增高并形成明显钙结节;PCR结果显示复叶耳蕨总黄酮上调骨桥蛋白和I型胶原的mRNA表达。结论 20μg/mL复叶耳蕨总黄酮可促进大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为成骨样细胞。     

左归丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化中碱性磷酸酶含量的影响

目的:研究左归丸含药血清对间充质干细胞骨向分化过程中碱性磷酸酶含量变化的影响。方法:采用全骨髓贴壁法培养间充质干细胞,连续进行3次差速贴壁法纯化间充质干细胞。常规诱导组以β-甘油磷酸钠、地塞米松、维生素C诱导间充质干细胞骨向分化,实验组在常规诱导组基础上加以左归丸含药血清。使用茜素红染色钙结节、碱性磷酸酶染色鉴定诱导成功。分别在0,7,14,21 d用比色法检测细胞中碱性磷酸酶含量。结果:全骨髓贴壁法和差速贴壁法联合使用可得到较为均一间充质干细胞。用比色法测得碱性磷酸酶含量随着诱导时间延长而增加。结论:大鼠间充质干细胞经药物诱导后可以分化为成骨细胞。左归丸含药血清能够促使诱导过程中碱性磷酸酶含量表达增加。     

补肾活血方诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的观察补肾活血方对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化的情况,从而为其治疗骨质疏松症提供细胞生物学研究依据。方法 SPF健康雌性SD大鼠,采用密度梯度离心法分离骨髓间质干细胞,差速贴壁法进行纯化,细胞培养至第3代(P3),应用流式细胞术鉴定BMSCs纯度并分选纯化细胞,纯化过的细胞经补肾活血方诱导1天,3天和7天,在不同时间点进行碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞,经茜素红染色鉴定钙结节。结果 P3含有CD44的细胞数占总数的96. 3%,CD29的细胞数占总数的77. 1%,说明培养的细胞中骨髓间充质干细胞的纯度较高,经补肾活血方诱导后可见细胞由梭型变成铺路石样,体积增大,细胞成簇状生长。经碱性磷酸酶鉴定可见胞浆着蓝色,有典型成骨细胞的表达。经茜素红染色,可见成簇的细胞呈红色钙结节样。结论补肾活血方的作用靶点可能是通过促进BMSCs向成骨的分化,从而起到防治骨质疏松的作用。     

电针血清与丹参注射液对骨髓间充质干细胞分化的影响

目的：研究电针血清与丹参注射液对骨髓间充质干细胞分化的影响。方法：通过贴壁法分离大鼠MSCs，体外扩增培养，MSCs用含10％健康大鼠电针血清、10％脑梗塞大鼠血清、10％脑梗塞大鼠电针血清和含10％丹参注射液的L-DMEM诱导MSCs，光镜下观察细胞形态，免疫细胞化学检测神经细胞特异性抗原标志。结果：大鼠骨髓间充质干细胞可以通过贴壁法成功分离，并可在体外大量扩增，健康大鼠电针血清、脑梗塞大鼠血清、脑梗塞大鼠电针血清诱导48小时之后未见神经元样细胞出现，免疫细胞化学染色NSE、Nestin阴性。丹参诱导4小时后，大部分MSCs转变为神经元样细胞，出现胞体和突起，免疫细胞化学染色NSE、Nestin染色呈阳性。结论：健康大鼠电针血清、脑梗塞大鼠血清、脑梗塞大鼠电针血清不能诱导MSCs体外分化；丹参注射液可以在体外诱导MSCs分化为神经元样细胞。     

鹿茸胶原促进大鼠成骨细胞生长的实验研究

目的：探讨鹿茸胶原促进大鼠成骨细胞的贴壁及增殖作用，为今后鹿茸的开发研究奠定基础。方法：采用醇提法提取鹿茸胶原，用鹿茸胶原包被培养板，MTT法检测细胞生长情况；实验数据使用Excel软件中的t检验进行统计学处理，所有数值均以（^-x±s）表示。结果：鹿茸胶原对大鼠成骨细胞具有明显的促贴壁和增殖作用。结论：鹿茸胶原具有促进大鼠成骨细胞贴壁和增殖作用。     

嗅鞘细胞的原代培养

目的：探讨大鼠嗅鞘细（olfactory ensheathing cells，OECs）培养纯化方法并对其形态学进行研究。方法：取材后采用差速贴壁法和NGFRp75免疫吸附法相结合的纯化培养方法培养嗅鞘细胞，并分不同阶段进行观察和NGFRp75免疫组化染色鉴定。结果：成功培养出高纯度的嗅鞘细胞，胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形三种类型，突起细长编织成网状为其特点。结论：用差速贴壁法和NGFRp75免疫吸附法相结合的纯化培养方法得到的嗅鞘细胞纯度达95％以上，证实是一种简单经济而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。     

龟板对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化的影响

目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外向成骨分化的影响.方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化.应用形态学、碱性磷酸酶组织化学染色、Von Kossa 染色、骨钙素测定等方法观察细胞成骨活性.结果形态学表明,MSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞外观.龟板组碱性磷酸酶、钙化结节、骨钙素明显升高,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05).结论 MSCs受龟板诱导高效地向成骨细胞分化,可以为体内骨组织工程提供种子细胞.     

RNAi研究TrxR1在肝癌细胞增殖中的作用及不同中医治法的调节

目的观察不同中医治法对大鼠肝癌TrxR1表达的调控差异,以及TrxR1在人肝癌细胞增殖中的作用。方法将84只雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组以及实验组,除正常组外均采用DEN诱发大鼠肝癌,实验组分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗,检测各组大鼠肝癌组织(正常组取肝组织)TrxR1表达的差异;设计2个人TrxR1基因siRNA靶点,将重组质粒通过脂质体转染入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测转染前后细胞生长增殖情况、Real-time-PCR检测该基因的表达差异。结果芯片结果显示,TrxR1基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,益气健脾治法明显下调其表达;采用MTT法筛选到一个TrxR1基因RNA干扰有效靶序列,脂质体转染144 h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达量明显降低。结论肝癌细胞恶性增殖有赖于TrxR1基因的高表达,益气健脾方药能显著下调该基因表达。     

RPS20RNA干扰慢病毒的构建及其对CT26细胞生长的影响

目的 研究脾虚证差异表达基因——核糖体蛋白S20 (RPS20)RNA干扰慢病毒转染对小鼠结肠癌细胞(CT26)细胞指数的影响,验证前期筛选的RNA干扰序列的有效性,为后续在小鼠体内以RNA干扰进行RPS20的功能鉴定提供参考.方法 根据前期筛选的RPS20 RNA干扰有效序列,进行质粒载体的重组,包装RPS20干扰慢病毒并转染CT26细胞,采用xCELLigence细胞动态分析仪实时监测转染后细胞的细胞指数以反映细胞的生长情况.结果 测序图谱和Blast比对结果表明重组慢病毒包装载体构建成功,慢病毒滴度为1.2×105 TU/mL,RNA干扰慢病毒转染后CT26细胞指数的增长受到明显抑制,转染后30 h细胞指数抑制率达到82.24％.结论 前期筛选的RPS20 RNA干扰序列可成功构建包装干扰慢病毒,转染后能有效抑制CT26细胞的生长,可为后续研究提供参考.     

黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变关节软骨细胞基质金属蛋白酶-1及基质金属蛋白酶-3mRNA表达的影响

目的：研究黄芪甲苷对人膝骨关节炎退变关节软骨细胞基质金属蛋白酶-1及基质金属蛋白酶-3mRNA表达的影响。方法：取膝骨关节炎患者膝关节软骨进行细胞培养,将培养的软骨细胞分离传代后取第3代细胞,通过HE染色、甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行软骨细胞鉴定,并进行基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-3免疫荧光染色。观察软骨细胞退变情况后将其分为6组,A组不进行干预;B组加入25 mmol.L-1黄芪甲苷;C组加入50 mmol.L-1黄芪甲苷;D组加入75 mmol.L-1黄芪甲苷;E组加入100 mmol.L-1黄芪甲苷;F组加入500 mmol.L-1黄芪甲苷。分别于培养开始后4 h、8 h、24 h、48 h、72 h 5个时间点,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组退变软骨细胞内基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-3mRNA表达的情况。结果：①形态观察。原代细胞中梭形细胞和多角形细胞并存,细胞核偏于细胞的一侧而贴近细胞膜,细胞纤丝较长。HE染色细胞质为红色,胞膜呈蓝色;甲苯胺蓝染色细胞质和胞膜均呈深蓝色;Ⅱ型胶原染色阳性为绿色荧光,细胞核采用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚复染,在不同波段荧光激发下,胞浆和胞膜可见清晰绿色荧光,细胞核区域未见明显绿色荧光,证明培养细胞表达特征性基因Ⅱ型胶原,主要分布在胞浆和细胞膜上,证明所培养的细胞为软骨细胞。基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-3免疫荧光染色可见清晰绿色荧光,软骨细胞以多角形多见。②基质金属蛋白酶-1mRNA表达。不同时间点间软骨细胞基质金属蛋白酶-1mRNA表达水平有差异（F=11.027,P=0.000）;不同组间软骨细胞基质金属蛋白酶-1mRNA表达水平有差异（F=102.345,P=0.000）,A组高于B组、C组、D组、E组（P=0.000;P=0.000;P=0.000;P=0.000）,F组高于A组、B组、C组、D组、E组（P=0.009;P=0.000;P=0.000;P=0.000;P=0.000）;时间因素和组间因素存在交互效应（F=8.258,P=0.000）。③基质金属蛋白酶-3mRNA表达。不同时间点间软骨细胞基质金属蛋白酶-3mRNA表达水平有差异（F=12.316,P=0.000）;不同组间软骨细胞基质金属蛋白酶-3mRNA表达水平有差异（F=66.112,P=0.000）,A组高于B组、C组、D组、E组（P=0.008;P=0.000;P=0.000;P=0.000）,F组高于A组、B组、C组、D组、E组（P=0.000;P=0.000;P=0.000;P=0.000;P=0.000）;时间因素和组间因素存在交互效应（F=14.846,P=0.000）。结论：低浓度的黄芪甲苷能通过抑制退变软骨细胞合成基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-3,延缓软骨细胞退变;浓度过高则会促进退变软骨细胞合成基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-3,加速软骨细胞退变。     

IgA肾病患儿尿中CTGF和Ⅳ型胶原水平的变化和临床意义

目的：检测IgA肾病（IgAN）患儿尿中结缔组织生长因子（CTGF）和Ⅳ型胶原水平的变化,并评价其临床意义。方法：将70例IgA肾病患儿按照临床特点分成3组：单纯血尿组（a组,n=18）、血尿和蛋白尿组（b组,n=32）、肾病综合征组（c组,n=20）。按照其病理分级也可以分为3组：Lee氏Ⅰ＋Ⅱ级33个,Ⅲ级20个,Ⅳ级17个。检测各组尿CTGF和Ⅳ型胶原水平,并与25例健康对照组进行比较。结果：各组尿CTGF和Ⅳ型胶原水平均高于健康对照组,且IgA肾病患儿尿CTGF和Ⅳ型胶原水平与病理分级、尿白蛋白排泄率（UAER）均呈正相关。结论：CTGF在IgA肾病的发生和发展中具有重要作用,尿CTGF的水平可作为判断IgA肾病活动和进展程度的早期生物学指标。     

玄参活性部位对冠状动脉结扎致心室重构大鼠心肌纤维化的影响

目的：探讨玄参活性部位对冠状动脉结扎所致心室重构大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法：冠状动脉结扎法制备大鼠心室重构模型。14周药物干预后,测定大鼠左心室及全心肥厚指数,病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积,天狼星红染色观察心肌间质及血管周围胶原沉积情况,并分析Ⅰ型、Ⅲ型胶原的分布和含量,荧光RT-PCR测定心肌组织Ⅲ型胶原基因表达水平。结果：玄参活性部位能降低心肌肥厚指数,减小左心室心肌细胞的横断面面积,改善心肌纤维化和胶原沉积,显著降低Ⅲ型胶原mRNA表达水平。结论：玄参活性部位对心肌细胞和间质胶原沉积两方面都有显著的抑制作用,抗心室重构的作用机制可能与抑制Ⅲ型胶原mRNA表达有关。     

基于“疾病-证候-症状关联”的2型糖尿病肾病中医证候学研究

目的:探析2型糖尿病肾病Ⅲ、Ⅳ期患者中医证候及症状的分布规律及差异。方法:收集215例糖尿病肾病Ⅲ、Ⅳ期患者的中医证候学资料,进行辨证,并对不同分期证候及症状的分布进行统计分析。结果:1在2型糖尿病肾病Ⅲ期患者中,本虚证以气虚、阳虚、阴虚为主,Ⅳ期患者以气虚、阳虚为主,标实证中均以血瘀证分布最广。2在相关证候研究中,随疾病由Ⅲ向Ⅳ期进展,阳虚证、血瘀证、血虚证有增多的趋势,而阴虚证、痰湿证有减少的趋势,其中只有阳虚证具有统计学意义(χ2=6.54,P=0.01)。3在相关症状研究中,Ⅲ、Ⅳ期患者在阳虚、血瘀、痰湿类症状中的差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:2型糖尿病肾病Ⅲ、Ⅳ期患者以气虚证、血瘀证最为多见,证候演变基本符合"阴虚-气虚-阳虚"的趋势。本研究旨在探讨糖尿病肾病Ⅲ、Ⅳ期证候及症状的特征,为其辨证治疗提供依据。     

葡聚糖-寡胺纳米粒基因载体的制备及表征

 目的制备聚阳离子纳米粒非病毒基因载体:葡聚糖-寡胺化合物。方法以葡聚糖、过碘酸钠、精胺等为反应物,经多步化学合成制备了该载体;并以红外光谱测定仪、激光纳米粒度测定仪、透射电子显微镜对其进行了理化表征;以绿色荧光蛋白基因为报告基因考察所制备载体的基因转染效能。结果葡聚糖与寡胺间以共价键连接成稳定的纳米粒基因载体,载体平均粒径为9.0 nm,Zeta电位为+31.1 mV、形状为类圆形;载体具有较高的基因转染率。结论实验结果表明,文中方法可以合成出优良的聚阳离子纳米粒非病毒基因载体。     

端粒酶逆转录酶小干扰RNA对胰腺癌Capan-2细胞抑制作用的实验研究

目的探讨RNA干扰（RNAi）对胰腺癌Capan-2细胞人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因的抑制效应。方法化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA（siRNA）序列,用阳离子脂质体为载体转染Capan-2细胞,分为siRNAl～SinRNA4、siRNA阴性对照和空白对照6组。通过RT—PCR和蛋白质印迹法分别检测胰腺癌细胞转染后细胞hTERTmRNA和蛋白水平,并用MTS法检测细胞生长增殖。结果siRNA1—siRNA4组hTERTmRNA相对表达量分别为0．51±0．22,0．56±0．19,0．44±0．13和0．89±0．21,端粒酶相对活性分别为0．60±0．15,0．63±0．16,0．17±0．12和0．72±0．16,hTERT蛋白相对表达量分别为0．47±0．21,0．52±0．19,0．10±0．11和0．84±0．15,其中siRNA1～siRNA33组的hTERTmRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组比较有显著性差异（P均〈0．05）。siRNA1～siRNA44组Capan-2细胞在转染后48h时的细胞增长平均抑制率分别为50％,54％,63％和18％。不同siRNA序列对capan-2的转染效率不同,其中siRNA3组能显著下调hTERTmRNA和蛋白的表达水平,并能抑制端粒酶活性和促进Capan-2细胞凋亡,与空白对照组比较均有显著性差异（P均〈0．01）。结论靶向hTERT的RNAi能明显抑制capan-2细胞的增殖,hTERT可作为胰腺癌基因治疗的靶点。     

人正常软骨细胞和骨性关节炎软骨细胞体外培养对照研究

目的:对人正常软骨细胞和骨关节炎软骨细胞进行体外培养,并就其2组在传代过程中生物学特性变化进行比较和评价。方法:酶两步顺序消化法消化关节软骨分离细胞;体外传代培养观察细胞形态、生长,MTT法测定增殖,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色,从蛋白和基因水平检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的变化,以及用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:①骨性关节炎软骨细胞形态似成纤维细胞,生长速度明显较正常软骨细胞慢。②MTT检测骨关节炎组2、4、6代软骨细胞增殖均低于正常组(P0.05),Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝O染色均较弱,传至第4代软骨细胞生物学特性基本消失。③2、4代骨关节炎软骨细胞凋亡率明显高于正常软骨细胞(P0.05)④各代骨性关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达量都不如正常软骨细胞。结论:体外培养的人骨性关节炎软骨细胞符合软骨细胞退变的表现,能很好的为骨关节炎细胞水平的研究提供最佳实验对象。     

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??OBJECTIVE To clone target gene by RT-PCR method, construct VEGF₁₆₅ lentivirus vectors, transfect adipose tissue derived stem cells (ADSCs) and verify the expression of VEGF₁₆₅ in vitro and in vivo. METHODS RT-PCR technology was employed to clone VEGF₁₆₅ gene, and this gene was cloned to lentivirus vector pLVX-EF1??-IRES2-AcGFP1 to construct a lentiviral vector pLVX-EF1??-VEGF₁₆₅-IRES2-AcGFP1. Bacterial colonies PCR and sequencing analysis were used for identification. Then, Lenti-X 293T cells were transfected with main vector pLVX-EF1??-VEGF₁₆₅-IRES2-AcGFP1, packaging plasmid gag-pro, vpr-pol, Tet-Off^TM, tat-IRES-rev and coating plasmid env(VSV-G). Lentiviral vectors were packaged and the titer was determined. ADSCs were isolated by collagenase digestion method, then cultured, and identificated by morphology, immunofluorescence and multi-directional differentiation. ADSCs was transfected with packaged VEGF₁₆₅ lentivirus. Immunofluorescence and ELISA were used to detect the expression of VEGF₁₆₅ in vitro. ADSCs transfected with VEGF₁₆₅ lentivirus were injected into nude mice. ELISA was used to detect the expression of VEGF₁₆₅. RESULTS The VEGF₁₆₅ gene fragment was cloned successfully, and the lentiviral vector plasmid pLVX-EF1??-HVEGF₁₆₅-IRES2-AcGFP1 was confirmed to contain VEGF₁₆₅ gene fragment as shown by bacterial colonies PCR. DNA sequencing analysis confirmed that VEGF₁₆₅ gene sequencing was exactly the same with that reported by Genbank. After transfection, a large number of Lenti-X 293T cells with green fluorescence were observed by fluorescent microscopy. The concentration of the virus titer was 1??10⁸ TU??mL^-1. ADSCs were identified by morphology, immunofluorescence and multi-directional differentiation methods, in line with the literature reported ADSCs characteristics. There were about 90% of ADSCs which could express VEGF₁₆₅ after being transfected with the viruses by immunofluorescence detection, also, VEGF₁₆₅ protein was proved by ELISA to express stably and efficiently in vitro and in vivo. CONCLUSION Lentiviral vectors expressing VEGF₁₆₅ are successfully constructed by cloning target gene with RT-PCR method. After transfection, ADSCs expressing VEGF165 protein stably in vitro and in vivo can be obtained.
     

功能矫治器前伸下颌后SD大鼠咀嚼肌中Ⅳ型胶原mRNA表达水平的改变

目的：通过检测大鼠下颌前伸后咀嚼肌中Ⅳ型胶原的表达水平的改变，研究颌骨矫形过程中咀嚼肌适应性变化及其规律，并初步探讨其适应性变化机制，为矫形治疗提供新的理论依据。方法：选用40只4周龄雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠为实验对象，用自制的功能矫治器斜导导下颌向前。采用RT-PCR法对Ⅳ型胶原mRNA进行测定。结果：实验组Ⅳ型胶原的表达随着时间的变化出现先增加后减少再增加的表现，实验组Ⅳ型胶原的表达较实验组整体减少。结论：Ⅳ型胶原介导了组织重构过程，为MMPs、TIMPs的平衡理论提供了新的依据，即MMPs／TIMPs处于一个平衡-改变-平衡这样一个动态的平衡当中。