正常大鼠视网膜电图振荡电位的频谱特性分析

背景暗适应视网膜电图（ERG）的振荡电位（OPs）在多种视网膜疾病的视功能评价中发挥重要作用,但其波形的确切起源尚未完全明确。OPs波的时域和频域分析及其影响因素的研究对进一步研究OPs的发生和起源具有重要意义。目的观察正常大鼠的暗适应ERGOPs与刺激光强度和动物年龄的关系。方法选择出生后21、25、32、35、37、46、60及90d的RCS—rdy^＋-P^＋大鼠各3只,采用RETI—scan记录系统进行闪光视网膜电图（F—ERG）OPs波记录,记录电极为环形角膜电极,参考电极为不锈钢针状电极,刺激强度分别为-20、-10、-5、0、5dB,通过Matlab提取OPs成分,分析其频谱特性。结果上述各种刺激强度下不同年龄组大鼠OPs的最大能量振幅值对应的频率值（即主频）范围为80～120Hz。随着刺激光强度的增加,开始出现高频（200—250Hz）成分,对应的振幅值随着刺激光强度的增加而增加;低频成分,即主频随着刺激光强度的增加其对应振幅值出现先升高后下降的趋势;当刺激光强度达到0dB时,低频成分出现双峰现象。25日龄大鼠OPs主频振幅最小,60日龄大鼠OPs主频振幅最大;25日龄大鼠OPs主频的带宽最窄,60日龄大鼠OPs主频的带宽最宽。结论大鼠ERG的OPs频域特性分析说明,刺激光强度对大鼠OPs振幅产生正向的影响,而大鼠的年龄主要影响OPs的主频分布。     

正常大鼠暗适应视网膜电图b波的光强-振幅曲线的观察

目的观察正常SD大鼠暗适应视网膜电图b波光强-振幅曲线的特点。方法取完全暗适应状态SD大鼠12只。利用中性滤光片降低全视野刺激器固有光强度,按0.5个对数单位的间隔衰减得到7档（分别为-5.0、-4.5、-4.0、-3.5、-3.0、-2.5和-2.0log cd·s·m^-2）,采用RETI-scan系统,自制的银环角膜电极和不锈钢针状电极,记录暗适应系列光视网膜电图。采用Naka-Rushton方法分析b波的强度-反应函数。结果b波阈强度为-4.5log cd·s·m-2,饱和强度为-2.5log cd·s·m-2。当刺激强度在-5.0～-2.0log cd·s·m-2范围时,b波光强-振幅曲线呈＂S＂型,符合Naka-Rushton等式;其中有两个重要参数（Rmax,I50）分别代表b波饱和幅值和产生1/2该幅值的刺激强度,本实验中Rmax为（721.2±89.5）μV,I50为（-3.30±0.36）log cd·s·m^-2。上述参数与人类正常值相比差异明显。结论大鼠视网膜反应特性与人类存在较大差异,应用视网膜电图b波光强-反应函数来评价其杆体系统功能时选择合适的刺激参数非常重要。     

正常SD大鼠视网膜电图敏感度功能的发育

目的纵向研究正常SD大鼠视网膜电图（ERG）敏感度功能的发育。方法实验研究。SD大鼠22只（22眼）,分别在出生后16 d、18 d、（30±2）d和（64±2）d记录暗适应ERG。暗适应后用逐渐递增的白光刺激记录一系列的ERG。通过曲线拟合获得饱和a波波幅（Rmp3）和敏感度（S）。通过曲线回归获得最大b波波幅（Vmax）和敏感度（σ）。采用方差分析检验ERG参数在各时间点之间的差异。结果随着生长发育S和logσ逐渐增高。Rmp3在出生后18 d时最高,以后随着生长发育逐渐下降。Vmax在出生后（30±2）d时最高,以后随着生长发育逐渐下降。结论ERG的敏感度随着生长发育而增高,反映了SD大鼠视杆细胞功能的发育特点。     

mGluR5对大鼠视网膜对光反应的调控

目的探索代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）对大鼠暗适应视网膜电图（ERG）不同成分的贡献。方法实验研究。出生后30日龄大鼠（RCS-rdy+-p+）12只,暗适应大于12 h后,分别行视网膜下腔注射mGluR5激动剂CHPG[（R,S）-2-chloro-5-hydroxyphenylglycine] 200 µmol（6只,CHPG组）和抑制剂MPEP[2-methyl-6-（phenylethynyl）-pyridine] 200 µmol（6只,MPEP组）,对侧眼注射同等体积PBS作为对照。注射后2 d采用RETI-scan系统记录其系列刺激光强度下（-4.5、-2.5、-0.5、-0.02、0.5 1 logcd×m×s-2）的暗适应ERG。导出数据,采用配对t检验进行双眼间数据比较。结果CHPG组,a、b波幅值在不同光强下均显著降低（除最低光强）（-4.5＜t＜-2.3,P＜0.05）,进一步分析得出a、b波最大幅值（Rmax和Vmax）均明显降低（-4.5＜t＜-2.3,P＜0.05）,但其敏感度均未出现明显变化,且b/a未见明显变化。MPEP组,a、b波幅值在不同光强下均显著升高（除最低光强）（-3＜t＜-2,P＜0.05）,进一步分析得出a、b波Rmax和Vmax均明显升高（-3＜t＜-2,P＜0.05）,但其敏感度均未出现明显变化,且b/a未见明显变化。2组的振荡电位（OPs）与相应的对照眼比较未见明显差别。结论mGluR5激动后,ERG a、b波幅值明显降低,mGluR5主要调控外层视网膜的对光反应。     

视网膜色素上皮变性大鼠随生长发育的视网膜电图改变

背景RCS—rdy-P’大鼠随着生长发育会逐渐发生视网膜色素变性（RP）,记录其生长发育过程中的视网膜电图（ERG）改变可为该模型鼠的进一步研究奠定基础。目的观察RCS—rdy-P’大鼠视网膜发育过程中的ERG变化,研究ERG随发育的变化特点。方法采用RETI-port系统、环形角膜电极和不锈钢针状电极分别记录生后21、32、37、45、60d的RCS-rdy-P’大鼠的系列暗适应ERG,每个年龄组6只鼠。取相同时间点及数量的同种系正常的RCS-rdy-P’大鼠作为正常对照。暗适应不同时间的ERG对比采用RCS-rdy＋P’生后60d大鼠共9只,每组3只。结果在刺激光强、刺激频率、体温相同的情况下,RCS-rdy-P’大鼠ERGb波振幅与暗适应时间有关,随着暗适应时间的延长,b波振幅增加,当暗适应时间超过12h时,即使暗适应时间增加,b波振幅不再增长,说明暗适应超过12h可以得到RCS-rdy＋-P’大鼠一个较为稳定的ERG波形。与RCS—rdy＋一P’大鼠比较,RCS—rdy-P’大鼠在生后21d时ERG已出现a波、b波振幅的下降,同时隐含时明显延长,以a波改变为主。随着RCS—rdy-P’大鼠年龄增长及RP的进展,ERGa波、b波振幅进一步下降,隐含时延长,RCS—rdy-P’大鼠生后60d时,其ERG反应记录不到。对照组大鼠在21d时,ERG的a波、b波均振幅较低;生后32d时RCS—rdy-P’大鼠b波振幅增加,但隐含时缩短;到生后45d仅小幅增加,45～60d再次出现b波振幅显著增加,隐含时缩短。结论RCS—rdy一一P’大鼠随着年龄的增长发生视网膜功能的变化,其暗适应ERG改变符合RP的进展过程。     

人工泪液对大鼠视网膜电图的影响

目的 观察人工泪液对大鼠视网膜电图（ERG）的影响.方法 动物实验研究.SD大鼠充分暗适应后,记录单眼ERG.ERG记录采用自制银丝电极和不锈钢针状电极,其中银丝电极为记录电极,置于角巩膜缘,各组ERG记录眼人工泪液用量不同：第1组为未滴人工泪液组;第2组为适量组,滴少量人工泪液,使电极与角巩膜缘接触良好;第3组为过量组,滴入大量人工泪液,使之充满整个结膜囊.ERG a、b波幅值和峰时采用单因素方差分析比较组间差异,两两间差异采用LSDt法进行比较.结果 使用人工泪液的两组动物ERG基线平滑,干扰波不明显;然而人工泪液使用过量组a、b波振幅均明显降低,与其他两组相比差异均有统计学意义（t=4.112,P＜0.01;t=3.018,P＜0.05）.结论 视觉电生理实验室经屏蔽和有效接地后,动物ERG记录中使用人工泪液可以进一步降低干扰,但人工泪液使用过量会影响ERG振幅大小.     

钝挫伤性脉络膜视网膜病变的视网膜电图分析

目的：利用视网膜电图（ERG）评价挫伤性脉络膜视网膜病变的损伤程度与皮质类固醇治疗效果。方法：回顾分析250例单眼钝挫伤性脉络膜视网膜病变的EGR资料。以伤眼视力分为＜0．01、0．1～0．5和＞0．53组。结果：暗适应ERGb波波幅是3组之间差异显著的指标。26例经大剂量皮质类固醇治疗2周，69．2％视力明显提高，ERGb波波幅回升。结论：暗适应ERGb波波幅对估计视力预后有重要价值，大剂量皮质类固醇对视力恢复有一定效果。     

球周局部麻醉对兔眼视网膜电图的影响

目的比较不同剂量局部麻醉药球周麻醉对视网膜电图（ERG）的影响。方法18只家兔随机分为3组：1．5、1．0、0．5mL组,每组右眼注射局部麻醉药物作为麻醉眼,左眼注射等量的生理盐水作为对照眼。采用RETIport32-scan系统和角膜接触镜电极分别记录注药前和注药后5、30、60、90、120min暗适应ERG及震荡电位。每观察点间行20min暗适应。结果麻醉眼ERGb波和OPS波OP2幅值均呈下降趋势;1．5mL组和1．0mL组b波幅值在90min时下降明显,与注药前相比差异有统计学意义（P=0．004、0．046）;1．5mL组OP2幅值在90min时下降明显,差异有统计学意义（P=0．042）。对照眼b波、OP2幅值初始呈轻微下降趋势,1．5mL组和1．0mL组30min下降明显,但差异均无统计学意义（P〉0．05）。麻醉眼注药剂量与ERGb波和OP,振幅的变化无明显线性相关（P〉0．05）。结论不同剂量局部麻醉药物球周麻醉后短时间内均可引起ERGb波和OPs波OP2幅值的变化。     

正常食蟹猴不同适应时间视网膜电图的 变化

目的：研究明/暗适应时间对正常成年食蟹猴闪光视网膜电图（ERG）结果的影响。方法：实验研究。 选取3只成年食蟹猴,分别于暗适应20、40、60 min后用国际临床视觉电生理会标准参数刺激,常 规程序记录暗适应ERG,在暗适应40 min后,分别明适应1、5、10 min记录明适应ERG。采用单因 素方差分析比较各时间段振幅与潜伏期变化。结果：不同暗适应时间,a、b波和震荡电位OPs的潜 伏期差异均无统计学意义（F=0.052,P=0.949）,暗适应时间小于40 min时,a、b波和OPs的振幅随暗 适应时间增加而显著增大（F=50.800,P<0.001）;暗适应40 min时,振幅达到最大,且不再随暗适应 时间增加而增大（F=0.016,P=0.899）。明适应a、b波的潜伏期同样不受明适应时间的影响（F=0.980, P=0.381）,a、b波的振幅在明适应5 min后达到最大（F=4.789,P=0.036）且随时间延长趋于平稳 （F=0.135,P=0.717）。结论：在一定时间内,明/暗适应时间对食蟹猴闪光ERG结果影响较大,故对 食蟹猴暗适应ERG记录的时间不宜少于40 min,而明适应ERG在5 min后即可记录。     

暗适应时间对SD大鼠视觉电生理的影响

目的 研究暗适应时间对SD大鼠视觉电生理检查结果的影响,用于制定标准化实验记录方案,便于比较不同实验室间的结果。方法 实验研究。42只SD大鼠（42眼）随机分为7组,分别于暗适应15 min、30 min、1 h、4~6 h、12~14 h、15~17 h、24~26 h后记录视觉电生理。采用单因素方差分析比较各组间差异,post hoc检验分析两两间差异。结果 暗适应时间对大鼠视觉电生理的影响主要发生于暗适应视网膜电图a波和b波的潜伏期,表现为15 min暗适应时间组较其余各组潜伏期长（P<0.05）;30 min以上暗适应时间,各组潜伏期差异无统计学意义。结论 暗适应时间影响视网膜电图（ERG）记录,对SD大鼠暗适应ERG记录的暗适应时间不宜少于30 min。     

Characterization of the rod photoresponse isolated from the dark-adapted primate ERG

The a-wave of the human dark-adapted ERG is thought to derive from activity of rod photoreceptors. However, other sources within the retina could potentially perturb this simple equation. We investigated the extent to which the short-latency dark-adapted rod a-wave of the primate ERG is dominated by the rod photoresponse and the applicability of the phototransduction model to fit the rod a-wave. Dark-adapted Ganzfeld ERGs were elicited over a 5-log-unit intensity range using short bright xenon flashes, and the light-adapted cone responses were subtracted to isolate the rod ERG a-wave. Intravitreal 4-phosphono-butyric acid (APB) and cis-2,3-piperidine-dicarboxylic acid (PDA) were applied to isolate the photoreceptor response. The Hood and Birch version of the phototransduction model, Rmax[1 - e(-I x S x (t-t(eff)))2], was fitted to the a-wave data while allowing Rmax and S to vary. Three principle observations were made: (1) At flash intensities > or =0.77 log sc-td-s the leading edge of the normalized rod ERG a-wave tracks the isolated photoreceptor response across the first 20 ms or up to the point of b-wave intrusion. The rod ERG a-wave was essentially identical to the isolated receptor response for all intensities that produce peak responses within 14 ms after the flash. (2) The best fit of sensitivity (S) was not affected by APB and/or PDA, suggesting that the inner retina contributes very little to the dark-adapted a-wave. (3) APB always reduced the maximum dark-adapted a-wave amplitude (by 15-30%), and PDA always increased it (by 7-15%). Using the phototransduction model, both events can be interpreted as a scaling of the photoreceptor dark current. This suggests that activity of postreceptor cells somehow influences the rod dark current, possibly by feedback through horizontal cells (although currently not demonstrated for the rod system), or by altering the ionic concentrations near the photoreceptors, or by neuromodulator effects mediated by dopamine or melatonin.     

Activation phase of cone phototransduction and the flicker electroretinogram in retinitis pigmentosa

This study examined the relationship between the activation phase of cone phototransduction and the flicker electroretinogram (ERG) in 15 patients with retinitis pigmentosa (RP) and 12 age-equivalent, visually normal control subjects. Values of Rmp3 (maximum amplitude of P3, the massed cone photoreceptor response) and S (sensitivity of cone phototransduction) were derived from a delayed Gaussian model applied to the leading edge of the ERG a-wave. Fundamental amplitude and phase of the flicker ERG were derived from responses to sinusoidal flicker presented at temporal frequencies ranging from 7.8 to 100 Hz. Patients with RP who had a reduced value of Rmp3 alone had an overall reduction in flicker ERG amplitude with a normal response phase across temporal frequency. Patients with RP who had a reduced value of S, whether or not Rmp3 was reduced, had the greatest amplitude reduction at temporal frequencies above 40 Hz and phase lags across a range of temporal frequencies. At high temporal frequencies, the amplitude reduction of the flicker ERG was predicted by the product of Rmp3 and S for all of the subjects except the three patients with RP who had the lowest fundamental amplitudes. The results indicate that there is a systematic relationship between the derived parameters of the activation phase of cone phototransduction and the characteristics of the flicker ERG in patients with RP, although the phase changes in the flicker ERG were generally greater than predicted by the derived parameters alone.     

姜黄素兔眼玻璃体内注射后眼内毒副作用研究

目的研究不同剂量姜黄素兔眼玻璃体内注射后的眼内毒副作用。方法40只实验兔,随机分为4组，每组10只，一眼为实验眼，玻璃体内分别注射0．05mg／0．1ml、0．1mg，0．1ml、0．2mg，0．1ml姜黄素及0．5‰的DMSO 0．1ml；对侧眼为对照眼，在玻璃体内注射0．1ml生理盐水注射后于第1、第3、第7、第14天进行常规眼部检查和视网膜电图检查：在第3、第7、第14天分别摘取2只眼球做光学和透射电子显微镜检查。结果0．2mg组在注药后第3天和第7天，实验眼暗适应视网膜电图a波振幅分别为（129±9）μV和（131±11）μV，与对照眼的（145＋13）μV和（146＋11）μV相比显著降低（P〈0．01）；实验眼b渡振幅分别为（259±9）μV和（257±7）μV，与对照眼的（283±13）μ V和（276＋8）μV相比显著降低（P〈0．01）。第14天时a波和b波振幅又恢复正常，其余各组各时间段,实验眼a波和b波振幅与对照眼相比差异无统计学意义。各时间段常规眼部检查和视网膜组织学栓查正常。结论 姜黄素玻璃体内注射0．2mg以下剂量是安全可行的。     

不同浓度维拉帕米及不同光照形式对豚鼠RPE细胞Ca^2＋的影响

目的：探讨不同浓度维拉帕米（verapamil,Ver）对体外培养豚鼠视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞内Ca^2＋浓度的影响,并比较有无Ver作用下经不同形式光照后RPE细胞内Ca^2＋浓度的变化。方法：2周龄幼年健康豚鼠10只,体外培养RPE细胞,传代、鉴定后,将细胞分为Ver处理组和未处理组,Ver处理组加入80mg/L Ver作用12h。两组均进一步分为聚焦光组、离焦光组、平行光组和空白对照组,前三组分别接受聚焦光、离焦光（均为将平行光经透镜转化）和平行光照射,空白对照组不接受照射。于照射后立即采用激光扫描共焦显微镜（laser scanning confocal microscopy,LSCM）测定细胞内Ca^2＋荧光强度,分析不同光照形式与效应的关系。统计学方法采用单因素方差分析。结果：Ver作用于RPE细胞12h后,20,40,80mg/L组的细胞凋亡情况与空白对照组相比均无统计学意义（P〉0.05）,Ver可降低RPE细胞内Ca^2＋荧光强度,浓度为20,40,80mg/L时分别降低了10.36%,24.54%,58.05%,仅80mg/L组与无光照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。未加Ver对RPE细胞进行光照,聚焦光组的Ca^2＋荧光强度较其他各组明显升高,离焦光组的荧光强度也较高,组间比较有统计学差异（P〈0.05）。加入80mg/LVer对RPE细胞作用12h后再进行光照,光照各组Ca^2＋荧光强度没有明显提高,组间比较没有统计学差异（P〉0.05）。结论：超过一定浓度的Ver可诱导RPE细胞凋亡,80mg/L可在不引起RPE细胞凋亡的前提下有效降低细胞内Ca^2＋荧光强度;不同光照形式对豚鼠RPE细胞内Ca^2＋有明显刺激作用,聚焦光影响最大;不同光照形式对Ver处理的RPE细胞内的Ca^2＋荧光强度无明显作用。     

半导体激光对豚鼠视网膜电图的影响

目的通过早期的动物实验研究，为应用半导体激光治疗弱视提供能量强度的参考范围。方法取豚鼠90只，雌雄不限，随机分为正常对照组A，2mW激光处理组B，3mW处理组C，4mW处理组D和5mW处理组E，每个处理组根据照射次数的不同又分为每天一次组J，每天两次组K，加对照组共9组。每组实验动物暗适应12h后，进行处理前闪光视网膜电图（flash electroretinogram，fERG）检测。根据各组功率及照射次数的不同，用LL-300型半导体激光弱视治疗仪经瞳孔照射眼底视网膜。实验处理结束时，以同样方法再次进行伍RG，对比处理前后ERG的变化。结果与实验前相比，不同照射功率组间a波振幅变化有统计学意义（P〈0.05），其中C组实验处理后a波振幅值较处理前明显升高，而D纽和E组实验处理后a坡振幅略有降低：b波及N1-P1波振幅改变无统计学意义（P〉0.05）。结论豚鼠视觉感受器细胞对于不同功率照射会产生不同反应，实验前后3mW照射组a波幅值升高，4mW和5mW照射组下降。视网膜其他细胞层并未产生明显的电生理变化。