血管内皮生长因子-C促进淋巴管内皮细胞的增殖、迁移和F-肌动蛋白重组

目的 研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对于淋巴管内皮细胞增殖和迁移的作用，探讨VEGF-C促进淋巴管新生的机制。方法 从狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞。标记内皮细胞的VEGFR-3和F-肌动蛋白，在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察。用VEGF-C刺激后，计数增殖细胞和迁移细胞，测量细胞迁移距离，并与bFGF和VEGF的作用进行比较。结果 淋巴管内皮细胞表达VEGFR-3，静脉内皮细胞为阴性。bFGF和VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖，VEGF-C的作用比bFGF强。与对照组相比，bFGF、VEGF和VEGF-C组引起迁移细胞的数目增多和迁移距离增大，VEGF-C的作用最强。在VEGF-C组的迁移细胞，F-肌动蛋白和应力纤维明显增多。结论 淋巴管内皮细胞特异性表达VEGFR-3，VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖和迁移，引起F-肌动蛋白的重组和应力纤维形成。     

表皮生长因子、转化生长因子-α及其受体在人垂体腺瘤组织中的表达

目的探讨表皮生长因子 (EGF)、转化生长因子 α(TGF α)和表皮生长因子受体 (EGFR)在垂体腺瘤发生、发展过程中的作用。方法应用放射性原位分子杂交法 ,观察上述3种分子的表达。结果在检测的22例垂体腺瘤组织中 ,分别有17例 (77 % )、12例(55 %)和20例(91 %)显示有EGF ,TGF α和EGFRmRNA的过度表达 ,它们在正常垂体组织中的阳性率分别为42 % ,25 %和42 %。不同的垂体腺瘤组织中3种mRNA的表达强度有差异。结论垂体腺瘤中存在着EGF/EGFR或/和TGF α/EGFR自分泌系统 ,该系统在垂体腺瘤的分化及增殖过程中可能起着重要的作用。     

高糖对大鼠晚期内皮祖细胞增殖、迁移、黏附及分泌功能的影响

目的: 探讨不同浓度葡萄糖对骨髓来源的晚期内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附及分泌功能的影响。方法: 密度梯度法获取大鼠骨髓单个核细胞,体外培养EPCs并进行鉴定。以传至第3代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,分别给予不同浓度的葡萄糖(5、10、20、40 mmol/L)干预,采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验及ELISA检测高糖对EPCs增殖、迁移、黏附及分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-8(IL-8)的影响。结果: 与5 mmol/L葡萄糖组(正常浓度组)相比,10 mmol/L﹑20 mmol/L和40 mmol/L葡萄糖处理可浓度依赖性地降低晚期EPCs的增殖、迁移能力。40 mmol/L葡萄糖处理有效地抑制了晚期EPCs的黏附,促进MCP-1和IL-8的释放。结论: 高糖抑制晚期EPCs的增殖、迁移和黏附能力,促进EPCs释放炎症细胞因子。     

HGF/c-Met促进大鼠骨髓内皮祖细胞迁移能力

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)迁移能力的影响及其机制。方法提取、培养和鉴定大鼠骨髓EPCs;重组腺病毒载体介导c-Met基因转染EPCs,用real-time PCR、Western blot和CCK8分别检测c-Met的表达和细胞增殖;分别用0、5、10、20和50 ng/m L HGF处理Ad-c-Met-EPCs,并通过Transwell迁移系统检测Ad-c-Met-EPCs的迁移能力;选取适宜浓度的HGF处理EPCs、Ad-GFP-EPCs和Ad-c-MetEPCs,并设置PBS对照组和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002组(同时加入HGF和10 g/L的LY294002),通过Transwell迁移系统和Western blot分别检测各组细胞的迁移能力、Akt和P-Akt的表达。结果 1)Ad-c-Met-EPCs中c-Met基因与蛋白均为高表达(P0.05)。2)c-Met基因对EPCs的增殖无明显影响。3)HGF在0~50 ng/m L范围内呈浓度依赖性促进Ad-c-Met-EPCs迁移。4)HGF+Ad-c-Met-EPCs组的迁移能力和P-Akt的表达显著高于对照组、HGF+EPCs组、HGF+Ad-GFP-EPCs组和HGF+LY294002+Ad-c-Met-EPCs组(P0.05)。结论 HGF/c-Met能够显著提高EPCs的迁移能力;HGF/c-Met可能通过PI3K/Akt信号通路促进EPCs的迁移。     

转化生长因子α

转化生长因子α(TGFα)是一种主要由肿瘤细胞产生的小肽分子,其前体为160个氨基酸,成熟体为50个aa残基,各种形式的TGFα均具有生物活性。TGFα为分泌性蛋白,它与细胞表面的表皮生长因子受体结合,以自分泌和旁分泌的形式参与对细胞增殖和分化的调节,TGFα与肿瘤密切相关,大多数肿瘤中已发现有TGFα高表达,TGFα具有肿瘤诊断、预后以及治疗临床外伤等多方面的应用价值。     

高游离脂肪酸通过FOXO1途径抑制内皮祖细胞增殖并促进其凋亡

目的: 研究高游离脂肪酸(FFA)对糖尿病患者内皮祖细胞(EPCs)增殖及凋亡的影响,评价FFA在糖尿病血管并发症中的可能作用。方法: 分离培养2型糖尿病患者EPCs(DM组)和正常对照组EPCs(对照组),加入不同浓度(0、10和50 mmol/L)的FFA。MTT法检测EPCs增殖,Annexin-V/PI法检测其凋亡。RT-PCR法和Western blotting法检测核转录因子FOXO1的表达水平。结果: 随着FFA浓度的增加,DM组和对照组EPCs增殖率明显下降,而凋亡率明显增加,差异均显著(P＜0.05)。相同FFA浓度下,DM组增殖率低于对照组(P＜0.05)。随着FFA浓度的增加,DM组和对照组FOXO1的mRNA表达逐渐降低,差异显著(P＜0.05)。结论: 高FFA可能通过FOXO1途径抑制EPCs增殖并诱导其凋亡,可能在糖尿病血管并发症的发生中发挥作用。     

高糖对糖尿病患者内皮祖细胞增殖凋亡的影响及其机制探讨

目的：了解葡萄糖对糖尿病患者内皮祖细胞（EPCs）增殖及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：以不同浓度葡萄糖分别作用于25例正常人(对照组)和25例2型糖尿病患者(糖尿病组)EPCs，MTT法检测其增殖，Annexin-V/PI法检测其凋亡。RT-PCR法检测bcl-2和bax的表达水平。结果：33 mmol/L葡萄糖使糖尿病组和对照组EPCs增殖率均减低，凋亡率增高；且能使糖尿病组和对照组EPCs表达bax增强，bcl-2表达无明显改变。而5 mmol/L葡萄糖作用下糖尿病组和对照组EPCs增殖率、凋亡率及bax和bcl-2表达无明显改变。结论：高糖使EPCs增殖功能减弱，凋亡增加，bax表达增加可能是其机制之一。     

结缔组织生长因子siRNA对大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)siRNA对CTGF表达及对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。方法培养大鼠血管平滑肌细胞,用脂质体法将抗CTGF483siRNA进行转染,Western blot法检测转染效果,MTT法及划痕实验测定对VSMC增殖和迁移的影响。结果转染CTGF483siRNA组的CTGF表达明显低于未转染组,MTT法显示转染CTGF483siRNA后VSMCs增殖减慢,划痕试验证实转染CTGF483siRNA后VSMCs迁移受到抑制。结论CTGFsiRNA可以抑制VSMC增殖和迁移,有望为颈动脉粥样硬化性缺血性脑血管病的预防和治疗新靶点。     

表皮生长因子,转化生长因子—α及其受体在人垂体腺瘤 …

目的 探讨表皮生长因子（ＥＧ）,转化生长因子－α和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在垂体腺瘤发生,发展过程中的作用。方法 应用放射性原位分子杂交法、观察上述３种分子的表达。结果 在检测的２２例垂体腺瘤组织中,分别有１７例（７７％）,１２例（５５％）和２０例（９１％）显示有ＥＧＦ,ＴＧＦ－α和ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ的过度表达,它们在正常垂体组织中的阳性率分别为４２％,２５％和４２％。不同的垂体腺瘤组织中３种     

血管内皮生长因子、细胞间黏附分子1在糖尿病大鼠肾小球的表达

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和细胞间黏附分子1(1CAM-1)在糖尿病肾病(DN)发生机理中的作用。方法 采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠模型，观察大鼠肾小球肥大、肾功能和24h尿蛋白改变以及用免疫组织化学和计算机图像分析技术定位、半定量检测VEGF和ICAM—1在DM大鼠肾小球的表达。结果 VEGF和ICAM—1在糖尿病大鼠肾小球中均有不同程度表达，VEGF主要分布于肾小球脏层上皮细胞的脑浆之中，ICAM—1主要分布于肾小球内皮细胞和系膜细胞的脑浆中。VEGF、ICAM-1水平与蛋白尿和肾小球肥大呈正相关关系。结论 DM大鼠肾小球VEGF和ICAM-1的升高可能参与了DN的疾病发展过程，估计是糖尿病肾病发生机理之一。     

血管内皮生长因子D和血管内皮生长因子E

血管内皮生长因子是一种分泌型糖蛋白 ,是调节血管生成最重要的细胞因子。近年又发现了几种新的与之结构和功能类似的因子 ,它们组成了血管内皮生长因子家族 ,通过与其受体组成的复杂的网络信号传导系统 ,调节生物体内脉管系统的发生和发展 ,参与多种生理病理过程。     

供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用

目的:探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞(EPCs)对血管平滑肌细胞(SMCs)表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法:脱臼处死1~2月龄、19~26月龄SD大鼠,应用含15%FBS的DMEM/F12培养基(含内皮细胞生长添加剂100 mg/L、肝素100 mg/L、青霉素、链霉素各1×105U/L)培养EPCs,取1~2月龄大鼠腹主动脉,组织块法培养血管SMCs,应用Di I-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系,上室为融合生长状态的EPCs,下室为SMCs,实验分4组:(1)第3代SMCs(P3)组;(2)第4代SMCs(P4)组;(3)第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养(P4YE)组;(4)第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养(P4AE)组。Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达;[3H]-TdR掺入法检测SMCs增殖;细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果:与P3组相比,P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调,而osteopontin表达显著增强;P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别;与P4组相比,年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达,抑制第4代SMCs的增殖和迁移;与老龄大鼠来源的EPCs相比,年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换,抑制SMCs增殖和迁移。结论:共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移,年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换,并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。     

高压氧预处理超长皮瓣组织血管内皮生长因子、转化生长因子β的表达

BACKGROUND: Hyperbaric oxygen (HBO) therapy can alleviate the skin flap congestion by improving the angiogenesis and increasing the oxygen content of blood in skin flaps. Although the HBO therapy ability to increase flap survival has been well described, the research on the application of HBO pretreatment in skin flap transplantation does not arouse adequate concern. OBJECTIVE: To investigate the effect of HBO pretreatment on early-stage flap congestion in the rat model of over-length dorsal random skin flaps. METHODS: Thirty-six SD rats were randomly divided into control group (n=12), HBO pretreatment group (n=12) and HBO treatment group (n=12). Rats in the HBO pretreatment group received 4 days of HBO therapy prior to transplantation, once a day. Rats in the HBO treatment group received 4 days of HBO therapy after transplantation. Rats in the control group were raised in the normal conditions after flap transplantation. At postoperative days 3 and 5, rats were sacrificed and the samples were collected. The inflammation of flap tissues was detected using hematoxylin-eosin staining. The expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β was analyzed by immunohistochemistry staining. The flap survival rate was calculated at postoperative day 5. RESULTS AND CONCLUSION: The flap survival area of the HBO pretreatment group and HBO treatment group was larger than that of the control group (P < 0.05). At postoperative days 3 and 5, the expression levels of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β in the flap tissue were higher in the HBO pretreatment group and HBO treatment group than the control group (P < 0.05). However, there was no significant difference in the flap survival area and the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β between HBO pretreatment and HBO treatment groups  (P > 0.05). HBO pretreatment can increase the expression of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-β and promotes angiogenesis in random pattern flaps, thereby improving skin flap survival.      

转化生长因子β受体Ⅱ对微卫星不稳定结肠癌细胞凋亡和迁移的影响

目的 研究转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβ RⅡ)表达对微卫星不稳定(MSI)结肠癌细胞凋亡和迁移的影响.方法 选择野生型PIK3CA HCT116细胞(HCT116 wt)作为MSI结肠癌细胞模型.将TGFβRⅡ转染HCT116 wt细胞获得HCT116 wt-RⅡ细胞,并以HCT116 wt空质粒细胞作为对照.通过生长因子缺失应激(GFDS)诱导细胞凋亡.采用Western印迹检测磷酸化Smad2(TGFβ信号通路关键因子)、磷酸化AKT (PI3K/AKT信号通路关键因子)、Bim (TGFβ信号通路下游因子)和Ecadherin(诱导上皮向间质转化的标志物)表达.采用DNA碎片ELISA分析检测HCT116 wt-RⅡ细胞凋亡情况.通过Transwell实验检测HCT116 wt-RⅡ细胞迁移活力.结果 加入TGFβ后,HCT116 wt-RⅡ细胞的TGFβ信号通路得以启动,GFDS诱导的HCT116 wt-RⅡ细胞凋亡受到显著抑制(DNA碎片值:0.69±0.02比0.41±0.04,P＜0.01);细胞迁移活力明显增强(2.10±0.15比4.03±0.48,P＜0.01).PI3K抑制剂(LY294002)可以逆转TGFβ对HCT116 wt-RⅡ细胞的凋亡抑制和迁移活力增强作用.TGFβ作用于HCT116 wt-RⅡ细胞后,Bim和E-cadherin表达明显减少.结论 TGFβRⅡ在MSI结肠癌细胞中的再表达可以增加MSI结肠癌细胞的存活能力和迁移活力,该作用依赖PI3K/AKT途径,从而为MSI结肠癌患者的良好预后提供了一个分子水平的解释.     

流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响

目的 研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）体外及体内生物学功能的影响。 方法 密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs,即晚期EPCs为靶细胞,对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β 半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RT PCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。结果1.2 Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力（P＜0.01）,上调VEGF的基因表达,抑制晚期EPCs的衰老及凋亡（P＜0.01）;移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复,减缓内膜的增生。结论 流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性,提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力, 这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。     

肝细胞生长因子对冠心病患者外周血内皮祖细胞迁移、粘附功能的影响

目的 观察肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）对体外培养的冠心病（coronary heart disease,CHD）患者外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）生物学功能的影响,为CHD患者应用HGF治疗提供基础.方法 选择CHD患者（CHD组）和非CHD患者（对照组）各30例,每组再随机分为重组人HGF（rhHGF）干预组和非rhHGF干预组,ELISA法检测血浆中HGF含量.收集CHD患者外周血单个核细胞,流式细胞仪检测EPCs数量,并体外选择培养EPCs,分别用MTT法、Transwell小室、黏附测定实验检测rhHGF对EPCs增殖、迁移和粘附能力的影响.结果 与对照组相比,CHD组患者外周血EPCs数量显著减少,血浆HGF含量显著升高（P＜0.01）;CHD组患者EPCs增殖、黏附和迁移能力明显下降（P＜0.05）.rhHGF干预组能明显促进CHD患者EPCs增殖、黏附和迁移能力;在非CHD组,rhHGF仅促进非CHD患者EPCs增殖,对黏附和迁移虽有改善,但差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 CHD患者EPCs的增殖、迁移和粘附等生物学功能在HGF的刺激下可明显增强,有望将HGF应用于CHD的治疗.     

SDF-1/CXCR4轴活化诱导内皮祖细胞增殖、迁移及管型形成

目的观察趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成的作用。方法用免疫细胞化学检测内皮祖细胞SDF-1和CXCR4表达;用MTT法、Millicell趋化法及Matrigel体外三维成型法分别检测不同浓度的趋化因子SDF-1促内皮祖细胞增殖、迁移和管型形成。并应用CXCR4受体抑制剂AMD3100观察上述指标的变化。结果免疫细胞化学显示内皮祖细胞表达SDF-1和CXCR4蛋白。SDF-1可促进内皮祖细胞的增殖、迁移和体外小管样结构的形成。AMD3100可抑制SDF-1的诱导作用。结论SDF-1/CXCR4轴在内皮祖细胞参与血管新生中可能发挥重要作用。     

血管内皮生长因子受体研究进展

血管内皮生长因子受体ＫＤＲ和ｆｌｔ－１表达于血管内皮细胞（ＥＣ）和造血干细胞，ＫＤＲ似乎与ＥＣ增殖、分化有关，ｆｌｔ－１主要与ＥＣ的粘附、维持血管通透性有关，ＫＤＲ和ｆｌｔ－１表达有助于造血干细胞抗凋亡。     

转化生长因子β和病理妊娠

转化生长因子是一类多功能的细胞调节多肽，通过对细胞增殖、分化和凋亡等方面的调控，在许多组织的发育中发挥重要作用。近年人们研究发现转化生长因子β（transforming growth factor-beta，TGFβ）可能与一系列病理妊娠有关，现综述如下。