丹参酮ⅡA对缺血性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响

目的 研究丹参酮ⅡA通过抑制Galectin-3表达对缺血性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响。方法 36只Wistar大鼠随机均分为3组：假手术组（Sham）,缺血性心力衰竭组（IHF）,丹参酮ⅡA组（TSA）,建立缺血性心力衰竭模型,其中丹参酮ⅡA组于结扎冠脉前1周每天给予TSA预处理,剂量为40mg/kg,通过心脏彩超观察手术后4周各组心功能情况,通过Masson染色观察各组大鼠心肌纤维化程度,蛋白免疫印迹法测定Galectin-3蛋白表达情况。结果 TSA组与IHF组相比,心功能参数均出现显著改善（P均<0.01）;Masson染色示,TSA组明显降低了缺血性心力衰竭所造成的大片胶原纤维增生,深蓝色显色较少,心肌纤维走形平整。Western blot法结果显示,与IHF组比较,TSA组显著降低了由缺血性心力衰竭所造成的Galectin-3的上升（0.52±0.09 vs 1.43±0.18,P<0.01）。结论 丹参酮ⅡA可有效抑制缺血性心力衰竭大鼠心肌纤维化,其作用可能与抑制Galectin-3表达相关。     

三种胶原纤维染色法评价宫腔粘连的比较

目的比较Masson染色、van Gieson染色、天狼猩红(Sirius red)染色三种胶原纤维染色方法在大鼠宫腔粘连模型中的评价效果。方法取24只成年雌性SD大鼠,暴露两侧子宫,左侧子宫剪开宫腔后使用机械性刮宫的方法损伤大鼠子宫内膜层,然后关腹,制作大鼠宫腔粘连模型。右侧子宫作为对照。术后14 d取材,行HE染色、Masson染色、van Gieson染色、天狼猩红染色,对子宫组织纤维化进行评估。结果刮宫后子宫组织HE染色显示子宫内膜上皮层消失,子宫内膜腺体数量显著减少(P0.01)。三种染色法均能清楚地染出胶原纤维。三种染色方法计算出的纤维化面积比,Masson染色(甲苯胺蓝)高于Masson染色(亮绿)、van Gieson染色和天狼猩红染色(P0.01)。天狼猩红染色法能够在偏振光显微镜下明确区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维,Masson及van Gieson染色法则不能区分。结论天狼猩红染色较Masson染色和van Gieson染色能够更好地显示宫腔粘连组织的纤维化程度,并能区分胶原纤维的类型。     

KATP通道Kir6.2亚基E23K多态性对阿霉素损伤大鼠心肌细胞结构及自噬的影响

目的 构建携带KATP通道Kir6.2亚基E23K多态性的大鼠模型,给予阿霉素损伤,探讨KATP通道Kir6.2亚基E23K多态性对于阿霉素损伤的心肌,心肌结构、功能及细胞自噬的影响。方法 利用定点突变的方法获得含有Kir6.2 KK基因型的大鼠并进行基因鉴定。将大鼠随机分为4组,即A组（WT+Saline组,SD大鼠+生理盐水）、B组（E23K+Saline组,Kir6.2 KK大鼠+生理盐水）、C组（WT+DOX组,SD大鼠+阿霉素）、D组（E23K+DOX组,Kir6.2 KK大鼠+阿霉素）。采用腹腔注射阿霉素的方法构建阿霉素损伤大鼠模型,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。应用心脏彩超进行阿霉素损伤心肌病模型的鉴定及心脏结构和功能的评价（每组8只）。分别通过HE染色及天狼星红染色心肌组织切片,测量心肌细胞面积及心肌纤维化比例,并通过PCR方法检测纤维化相关标志物CTGF、TGF-β mRNA的表达。通过Western blot法技术测定心肌细胞自噬水平。结果 超声结果显示,阿霉素损伤的大鼠相比于盐水组存在明显的心肌重构及功能损伤（P<0.01）,且E23K组变化较WT组更明显（P<0.01）。病理及纤维化相关标志物mRNA表达显示,阿霉素损伤的大鼠心肌纤维化程度明显加重（P<0.01）,且E23K组纤维化程度较WT组更严重（P<0.01）;自噬相关蛋白表达量检测显示,阿霉素损伤的大鼠,自噬相关蛋白表达量显著增加（P<0.01）,且E23K组明显高于WT组（P<0.01）。结论 在阿霉素损伤模型中,Kir6.2亚基E23K多态性对大鼠心脏结构、功能、纤维化程度及自噬表达均有显著影响。     

核因子-κB在放射性心脏损伤中的表达

目的 核因子-κB在放射性心脏损伤中的表达及机制探讨。方法 共32只SD大鼠,随机将大鼠分为3组,1组不接受任何干预,其余2组分别用6Mv高能X线照射心脏,剂量分别为15Gy和18Gy。照射后饲养3个月后,以水合氯醛过量麻醉法处死大鼠,取其心脏组织。进行心肌组织HE染色及Masson染色,观察心肌变化,通过核因子-κB的免疫组化染色,显微镜下观察核因子-κB大致的表达情况并使用计算机测定其平均光密度值。结果 HE染色镜下观察照射组心肌细胞排列紊乱,部分细胞出现变性及坏死,细胞核排列不规则,对照组心肌细胞排列正常。Masson染色镜下可见照射组心肌内胶原组织明显增多,粗大胶原及纤维相互连接成网状,纤维化明显,对照组未见明显改变。免疫组化镜下观察可见对照组核因子-κB有少量表达,照射15Gy组、照射18Gy组的表达均增强（P值分别为0.002、0.000）。但两照射组之间比较差异无统计学意义（P=0.095）。结论 核因子-κB是放射性心脏疾病发生、发展的重要因素,其表达不随照射剂量增大而增强。     

丹参滴丸对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制

目的 观察丹参滴丸对CCl₄致大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法 除对照组外,其余各组大鼠用CCl₄复合因素法诱导肝纤维化大鼠模型,丹参滴丸各组同时ig给予丹参滴丸700、350、175 mg/kg,阳性对照组给予扶正化瘀胶囊1 500 mg/kg,每天给药1次,连续给药7周,正常大鼠给予蒸馏水作为对照组。测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性及总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、IV型胶原的水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和羟脯氨酸（Hyp）的量;HE和Masson染色观察肝组织病理形态学改变;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 丹参滴丸能明显抑制肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、NAG活性的升高,降低IV型胶原的量,增加TP和ALB的量;降低肝组织中Hyp和MDA的量,提高SOD的活性,抑制胶原纤维的增加,亦能降低α-SMA的表达。结论 丹参滴丸有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制与其抗脂质过氧化、抑制胶原纤维的增加及降低α-SMA的表达等密切相关。     

麝香保心丸对肝硬化大鼠心肌组织即早基因与结缔组织生长因子的影响

目的 研究麝香保心丸对肝硬化致心肌重构的抑制作用及其机制。方法 以sc体积分数40% CCl₄橄榄油溶液3 mL/kg,每周2次,共8周的方法制备大鼠肝纤维化模型,第2周末随机取5只大鼠肝组织作HE染色,观察肝纤维化程度,造模大鼠分别ig麝香保心丸22.5、45 mg/kg,共给药6周,第8周末分别取各组大鼠肝组织、左室心肌组织行组织病理学及透射电镜观察,观察各组大鼠肝脏、心肌组织病理及心肌组织超微结构改变;以RT-PCR和免疫组化染色分析心肌组织中c-fos和c-jun mRNA以及结缔组织生长因子（CTGF）、I型和III型胶原的表达变化。结果 造模大鼠均存在不同程度的肝纤维化及心肌损伤。与模型组比较,低剂量麝香保心丸组大鼠肝纤维化程度无明显差异（P＞0.05）,但心肌损伤程度减轻,心肌组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA、CTGF、I型和III型胶原表达明显降低（P＜0.05、0.01）。高剂量麝香保心丸组大鼠肝纤维化及心肌损伤程度较低剂量组减轻（P＜0.05）,心肌组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA、CTGF、I型和III型胶原表达均低于低剂量组（P＜0.05、0.01）。结论 肝硬化大鼠心肌组织心肌即早基因活化、诱导CTGF过度表达而致心肌重构,麝香保心丸可通过抑制心肌即早基因表达,降低心肌CTGF水平而发挥心肌保护作用,其效应呈剂量依赖性。     

曲美他嗪对小鼠心肌损伤的保护研究

目的 研究盐酸曲美他嗪（TMZ）对异丙肾上腺素（ISO）所致小鼠心肌损伤的保护作用。方法 6~7周龄BALB/c小鼠36只,随机分为3组（每组12只）,生理盐水（NS）组、ISO组、TMZ组;NS组为空白对照组,ISO组为损伤组,TMZ组为治疗组,共喂养4周。计算心脏质量指数（HW/BW%）,微量酶标法测定血清乳酸脱氢酶（LDH）活性、硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛（MDA）含量、WST-1法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力、ELISA法检测血清Klotho浓度,心肌组织石蜡包埋行HE染色、Massion染色、caspase-3染色。结果 与NS组比较,ISO组HW/BW、乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量均显著增加（P<0.01）,SOD活力显著减低（P<0.01）;TMZ组的HW/BW、LDH活性、MDA含量均显著低ISO组（P<0.01）,SOD活力、Klotho浓度显著高于ISO组（P<0.01）,HE染色结果显示,ISO组小鼠心肌细胞横径明显大于NS对照组,伴随着肌纤维紊乱和心肌间质成纤维细胞增生。TMZ组小鼠心肌细胞横径明显小于ISO组;Masson染色结果显示,ISO组小鼠心肌间质及血管壁有大量胶原纤维分布,而TMZ组小鼠的心肌间质及血管壁胶原纤维数量较ISO组明显减少;caspase-3染色结果：TMZ组棕黄色染色颗粒分布较ISO组明显减少（染色阳性结果表现为胞质中有大量棕黄色染色颗粒分布）。结论 曲美他嗪可以防止心肌损伤,其机制可能与上调Klotho水平有关。     

骨内单次注射小剂量辛伐他汀对大鼠心梗后血管新生的影响

目的 研究骨内局部单次注射小剂量辛伐他汀对大鼠心梗后血管新生和心功能的影响。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、心肌梗死模型组和骨内注射辛伐他汀组（n=12）。冠状动脉左前降支结扎建立大鼠心肌梗死模型。24 h后实验组左胫骨内单次注射辛伐他汀0.5 mg,4周后分别通过小动物超声心动图评价左室功能,三苯基氯化四氮唑（TTC）染色计算心肌梗死面积,免疫荧光染色检测局部血管新生情况。结果 超声心动图结果表明心肌梗死4周后左心室收缩功能明显下降,骨内注射辛伐他汀对大鼠心肌梗死后左心室功能未见明显改善;TTC染色发现骨内注射辛伐他汀组心肌梗死面积未见明显减少;免疫荧光染色显示,骨内注射辛伐他汀组心肌血管密度没有显著增加。结论 大鼠心梗24 h后骨内单次注射小剂量辛伐他汀（0.5 mg）,心肌梗死面积、血管新生及心脏功能无显著改善。     

半乳糖凝聚素-3在心肌梗死后心力衰竭家兔心肌纤维化中的作用及其对心室重构的影响

目的 观察半乳糖凝聚素-3（galectin-3）在心肌梗死后心力衰竭家兔心肌中的表达模式及情况,探讨galectin-3在心力衰竭心肌纤维化的作用及其对心室重构影响,为心力衰竭中纤维化基础和临床研究提供新思路。方法 采用结扎冠状动脉前降支的方法制作家兔心肌梗死后心力衰竭模型。采用数字表法将20只家兔随机分为对照组、实验组。实验组给予开胸结扎冠状动脉前降支、对照组仅给予开胸对照处理。于术前及术后2、4、6周采用心脏超声仪测定实验组及对照组家兔心功能。ELISA法检测实验组与对照组术前及术后2、4、6周血清中galectin-3表达水平。RT-PCR法检测心肌组织galectin-3、胶原纤维Ⅰ及胶原纤维ⅢmRNA的表达并计算胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ比值。于术后6周取实验组及对照组心肌组织分析左心室（LV）重量并计算左心室重量/体重比值,即左心室肥厚指数;用Masson法胶原染色,分析心肌纤维化的表达情况。结果 与对照组相比,实验组造模术后2、4、6周EF、EDD、LVPWD差异有统计学意义（P<0.01）。术后2、4、6周实验组血清galectin-3浓度高于对照组及术前浓度（P<0.05）。相关性分析示,血清galectin-3浓度与EF呈负相关（r=-0.84,P=0.009）,与EDD呈正相关（r=0.905,P=0.020）。实验组galectin-3、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ的mRNA表达均明显增高（P<0.01）。实验组中梗死区galectin-3、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ的mRNA表达皆高于梗死边缘区（P<0.01）。病理学测实验组左心室质量及左心室肥厚指数均明显高于对照组（P<0.01）。光学显微镜下实验组可见心肌细胞排列紊乱,部分心肌细胞坏死、水肿、肥大,心肌纤维增粗。小血管壁增厚并可见周围有大量蓝绿色胶原纤维增生并包绕分割心肌细胞,心肌间质纤维增生、胶原大量沉积并伴有炎性细胞浸润。结论 galectin-3可反映心力衰竭心肌纤维化程度,且参与心室重构的病理生理过程,但其具体机制仍不清楚。     

三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较

目的 比较3种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果,为选择合适的染色方法提供参考。方法 选取出生后第5、7、14、21天的ICR小鼠,制备小鼠下颌第一磨牙冠状切片,采用H-E染色、Masson染色法和Gomori染色法进行组织形态学研究,比较染色结果。结果 在小鼠出生后第5天（PN5）至PN7为牙根发育起始阶段,H-E染色显示： 成牙本质细胞、成釉细胞及上皮根鞘细胞形态最为清晰;Masson染色法显示： 图片色彩鲜艳,牙釉质、牙本质及前期牙本质间层次分明;Gomori染色方法显示： 细胞核呈单一的蓝黑色,但软、硬组织对比度不佳。从PN14小鼠牙齿开始萌出到PN21牙根发育基本完成阶段,H-E染色显示： 成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜成纤维细胞形态最为清晰;Masson染色法显示： 牙骨质与牙槽骨间的胶原纤维排列规则,牙槽骨形态清晰;而Gomori染色效果总体不佳。结论 在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期,3种染色方法各有优势。H-E染色适用于各类细胞形态的观察,Masson染色适用于牙体硬组织及骨组织的观察,Gomori染色法总体效果不佳。     

小肠Crohn's病患者肠黏膜中DLG1和DLG5表达的临床观察

目的 探讨小肠型克罗恩病(CD)肠黏膜中DLG1和DLG5的表达以及与临床关联分析.方法 收集CD患者小肠手术切除标本45例,另收集15例小肠肿瘤以及右半结肠肿瘤手术标本中正常小肠组织作为对照组,采用免疫组织化学方法研究DLG1和DLG5在CD组患者和对照组小肠黏膜上皮组织中的表达,并进行临床观察分析.结果 与对照组比较,CD患者小肠黏膜上皮细胞DLG1主要表达在细胞质中,两组患者DLG1表达部位有明显差别(P<0.01),表达量无明显差别.与对照组比较,CD组患者小肠黏膜上皮细胞DLG5均表达在细胞质中,CD组患者DLG5的表达量明显降低(P<0.01).DLG1表达部位和DLG5表达量与CD患者临床特征无明显关联.结论 DLG5表达降低可能参与CD的发病过程.     

卢戈氏碘活体染色对早期口腔癌及癌前病变的辅助诊断价值

目的研究卢戈氏碘活体染色对早期口腔癌及癌前病变的辅助诊断价值。方法对2013年7月~2016年7月就诊于我科高度可疑的口腔黏膜病变200例患者行2.5%卢戈氏碘染色后并在淡染或不染区行切取活检术,结果与常规病理检查结果比较。结果对200例患者的临床资料进行整理分析,发现早癌及癌前病变共174例,炎症6例,单纯上皮性增生20例。经染色后早癌及癌前病变主要表现为不染区和淡染区,卢戈氏碘活体染色对早期口腔癌及癌前病变辅助诊断的敏感度98.85%(172/174),特异度73.08%(19/26),差异有统计学意义(χ~2=116.99,P0.01);卢戈氏碘活体染色对斑纹类口腔病损辅助诊断的敏感度94.29%(66/70),特异度80.00%(8/10),差异有统计学意义(χ~2=32.27,P0.01);卢戈氏碘活体染色对溃疡口腔病损良恶性辅助诊断的敏感度96.67%(87/90),特异度6.67%(2/30),差异无统计学意义(χ~2=0.07,P0.05)。结论对高度可疑的口腔黏膜病变行卢戈氏碘染色对早期口腔癌及癌前病变有很好的辅助诊断价值,能很好指示病变部位,指导切取活检术。     

结核灶内抗酸菌L型检出方法的研究和意义

本文应用Ｉｔｅｎｆｉｓｅｄ ｋｉｎｙｏｕｎ（ＩＫ）改良抗酸染色，Ｚｉｅｈｌ－Ｎｅｅｌｓｅｎ（ＺＮ）经典抗酸染色和Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃａｌｍｅｔｔｅ Ｇｕｅｖｉｎ（ＢＣＧ）抗体免疫组化染色等方法对１８１例结核病组织切片进行了结核杆菌的检测。结果ＩＫ抗酸染色法Ｌ型结核菌检出率为６７．４％，ＺＮ法为２９．８％，两者差异有显著性。两种抗酸染色法均证明结核灶内主要（６７．４％、２９．８％）为抗酸菌Ｌ型；杆菌     

特殊染色在电流斑鉴定中的应用

目的通过对生前电击、死后电击及正常的皮肤组织运用Mowory(ABPAS)法和Alcian blue染色来鉴别生前电击与死后电击电流斑的不同。方法自行设计电击系统一套,雄性Wistar大鼠18只,分为:生前电击死组、死后电击组和非电击对照组,每组各6只。生前电击死组及死后电击组均于电击后即刻取电击处皮肤组织;非电击对照组脱颈处死后即刻取对应部位皮肤组织。三组皮肤组织均行中性甲醛固定,制成石蜡切片后分别进行Mowory(ABPAS)法、Alcian blue-核固红、HE染色。结果生前电击死组、死后电击组与非电击对照组皮肤网织层采用Mowory(ABPAS)法和Alcian blue-核固红法染色均有明显区别;生前电击死组与死后电击组大鼠皮肤网织层采用Mowory(ABPAS)法染色无明显区别,而采用Alcian blue-核固红法染色时生前电击死组网织层染色呈红色,死后电击组网织层染色呈蓝色,存在明显差异。结论 Alcian blue-核固红法较Mowory(ABPAS)法不仅对生前与死后电流斑的鉴定有重要的价值,而且有助于不典型电流斑的认定。     

血管免疫母细胞淋巴结病的免疫组织化学研究

作者对6例血管免疫母细胞淋巴结病患者的淋巴结HE染色病理切片进行观察,发现其基本病理特征为小血管显著增生,以免疫母细胞为主的多种免疫细胞浸润,伴有细胞间及小血管壁有无定型嗜酸性物质沉积。其组织化学染色PAS及派若宁均阳性。免疫组织化学染色:4例免疫母细胞内IgG、IgM阳性,5例Kappa、Lambda染色阳性。这说明本病是一种活跃的免疫反应,而不是真正的肿瘤。有3例其细胞内风疹病毒抗原阳性,表明某些血管免疫母细胞淋巴结病与风疹病毒有密切关系。     

不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。     

刚果红染色在临床病理诊断中的应用价值

目的 探讨刚果红染色在临床病理诊断中的应用价值. 方法 对30例HE染色下呈现均质粉染区域的声带息肉、甲状腺髓样癌、淀粉样变肾小球肾炎的标本进行刚果红染色,从而判定其变性的性质是淀粉样变性还是玻璃样变性,进而辅助诊断疾病. 结果 其中21例有淀粉样变性的区域经刚果红染色颜色呈现为红色或砖红色,而9例具有玻璃样变的病例无此颜色变化. 结论 刚果红染色可用于鉴别淀粉样变性与玻璃样变性,为某些疾病的诊断提供线索,从而有助于疾病的诊断与鉴别诊断.     

疟原虫感染组织切片吉姆萨染色法的建立及优化

目的探讨使用吉姆萨(Giemsa)染色法对伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.b.)ANKA株感染小鼠肝、脾组织标本进行染色的可行性及效果。方法小鼠肝、脾组织用10%福尔马林固定后石蜡包埋,4μm厚切片,60℃烤箱30min烘烤,二甲苯脱蜡,常规乙醇水化至水,用2、3、4倍稀释的吉姆萨工作液分别染色3min、5min、10min;同时做常规苏木精-伊红(Haematoxylin-eosin,HE)染色。结果 3倍稀释Giemsa工作液染色5min的染色效果最佳。镜下观察,疟原虫染色鲜明、虫体胞浆蓝色,胞核粉红、疟色素染为棕褐色,清晰易辨,明显优于HE染色法。结论使用Giemsa染色法对P.b.感染小鼠肝、脾组织标本的染色简单易行,需时短,效果良好,在临床及科研领域中具有应用价值。     

胃粘膜肠上皮化生的组织化学特点及其癌前意义(粘液和嗜银,亲银染色观察)

本文对101例胃癌和胃溃疡切除标本进行了粘液和嗜银、亲银组织化学研究。胃粘膜肠上皮化生(肠化)分为五种亚型,其中结肠型,尤其是不完全结肠型肠化与胃癌关系密切。五种肠化上皮中均可检出嗜银和亲银细胞,但小肠型肠化中嗜银和亲银细胞的数量比结肠型肠化为多。作者认为,研究肠化上皮中包括嗜银和亲银细胞在内的内分泌细胞可能有助于对小肠型和结肠型肠化的分类。