当归补血汤对大鼠糖尿病足iNOS mRNA表达的影响

目的:探讨当归补血汤对糖尿病大鼠足部病变的保护作用及其机制。方法:SD雄性大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)并结合室温控制以建立糖尿病足模型,给予当归补血汤或西洛他唑治疗。实验第3周末时,观察各组肢端坏疽并测定血糖情况。腹主动脉取血,测定血甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、C反应蛋白(CRP)、C肽(CP)、糖化血红蛋白(GHb)。应用反转录多聚酶链反应技术(RT-PCR),观察各组大鼠小腿腓肠肌iNOSmRNA的表达情况。结果:STZ诱导的糖尿病大鼠存在明显的血糖、血脂及CRP、CP、GHb异常(P<0.01或<0.05),且出现不同程度的肢端坏疽。当归补血汤可以降低上述指标,减轻肢端坏疽(P<0.01或<0.05),而西洛他唑只改善了CRP和CP(P<0.01)。经给药处理3周后,当归补血汤组及西洛他唑组大鼠足部iNOSmRNA均有不同程度的下调(P<0.01)。结论:当归补血汤可改善血糖、血脂代谢紊乱,降低异常升高的GHb、CP、CRP水平,减轻肢端坏疽的症状,并能纠正升高的iNOSmRNA的表达,推测其能延缓高糖状态下的足部病变,对糖尿病足有一定的保护作用。     

当归补血汤对内皮细胞增殖和粘附分子表达的影响

目的　了解当归补血汤对内皮细胞增殖及分泌粘附分子 (ICAM- 1)的影响 ,探讨当归补血汤对造血调控的机理。方法　建立人脐静脉内皮细胞体外培养模型 ,将 HU VEC与当归补血汤不同剂量 (0、4、40、40 0和40 0 0 μg/ m l)一起培养 ,以流式细胞分析术测定内皮细胞增殖周期 ,同时对粘附分子进行测定。结果　当归补血汤能够促进内皮细胞分泌粘附分子 ,对照组 CD5 4(ICAM- 1)仅有少量表达 ,而实验组 CD5 4(ICAM- 1)表达明显较对照组增多 (P<0 .0 5 )。细胞周期分析结果表明 ,实验组与对照组相比 ,有更多的细胞处于 S期 (P<0 .0 5 )。提示当归补血汤能够促进细胞由静止期进入增殖期。结论　当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖以及细胞粘附分子的表达。     

当归补血汤对不同状态下血管内皮细胞增殖及超微结构影响的实验研究

目的:观察当归补血汤对正常、与肿瘤共培养、缺氧等不同状态下血管内皮细胞增殖及超微结构的影响.方法:应用Transwell建立与肿瘤共培养血管内皮细胞模型,连二亚硫酸钠建立缺氧血管内皮细胞模型,通过CCK-8法观察血管内皮细胞的增殖作用,电子显微镜观察细胞的超微结构变化.结果:当归补血汤(浓度3.75～15 g/L)能够促进正常血管内皮细胞及缺氧血管内皮细胞的增殖,其中高剂量和中剂量组促进缺氧血管内皮细胞增殖作用较促进正常血管内皮细胞增殖作用明显.当归补血汤(浓度3.75～15 g/L)能抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖,且与剂量呈正相关,抑制缺氧或与肿瘤共培养对血管内皮细胞超微结构的影响.结论:当归补血汤能够双向调节不同状态下血管内皮细胞的增殖作用,保护缺氧或与肿瘤共培养对血管内皮细胞超微结构改变的影响.     

当归补汤对内皮细胞增殖和粘附分子表达的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of Danggui Buxue Decoction (DBD) on proliferation and expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). METHODS: After treating HUVECs with various concentrations of DBD, we analyzed the proliferation phase of HUVECs and the expression of ICAM-1 using flow cytometry. RESULTS: It was found that DBD could promote the proliferation of HUVECs and the expression of ICAM-1. The expression of CD54 (ICAM-1) was significantly increased in the experiment groups as compared with that in the control group (P < 0.05). In addition, cell cycle analysis revealed more synthetic period cells in the experiment groups than in control group (P < 0.05). CONCLUSION: DBD can promote the proliferation of HUVECs and Increase the expression ICAM-1.     

当归补血汤对组胺引起的血管内皮细胞单层通透性增高的作用

从新生牛主动脉分离获得单个内皮细胞,培养于微孔滤膜上直至形成致密单层。通过灌流ｈａｎｋｓ液或含５ｇ／Ｌ白蛋白的ｈａｎｋｓ液后,测定经１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ组胺溶液处理或经１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ组胺溶液加１０＾－４ｇ／ｍＬ当归补血汤处理的液体滤过系数（Ｋｆ）、液体滤过流量（Ｊν）和蛋白质渗透压反射系数（σ）。结果表明内皮单层经组胺处理后,Ｋｆ和Ｊｖ降低,σ升高;而当日补血汤能够抑制因组胺造成的Ｋｆ和Ｊｖ     

当归补血汤对病毒性心肌炎小鼠心肌保护作用及对心肌组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响

目的探讨当归补血汤制剂对病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用及促进心肌组织血管内皮细胞再生的影响,并验证其效果。方法取黄芪30 g,当归6 g水煎成当归补血汤,将健康BALB/C小鼠60只,随机分为正常组和模型组、当归补血汤口服液低、中、高剂量组,每组12只。除正常组,各组小鼠均腹腔接种柯萨奇病毒B3病毒液为病毒性心肌炎(VMC)模型。正常对照组小鼠腹腔接种等量不含病毒的Eagle氏液。当归补血汤口服液组以灌胃方式连续给药12 d。正常对照组小鼠给予相同体积的蒸馏水。于感染后第13 d每组随机取小鼠6只,取血清测定LDH、AST、CK-MB活性,将小鼠处死,取部分心肌用于HE染色、免疫组织化学染色及Western印迹法检测,观察心肌组织病理学变化及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果模型组及各服用当归补血汤口服液组小鼠生存率与正常组差异有统计学意义;低、中、高剂量组内VEGF表达量呈现上升趋势;模型组小鼠在感染VMC病毒后,血清LDH、AST、CK-MB表达量上升。结论当归补血汤能降低病毒性心肌炎小鼠血清LDH、AST、CK-MB含量,并刺激病毒性心肌炎小鼠心肌分泌VEGF,从而促进血管增生,改善心肌供血供氧。     

AMPK在内皮细胞中对血管形成的影响

在真核细胞中,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是细胞及全身能量稳态的一个重要调节器,受体内AMP/ATP比率调节,通常被称为代谢敏感性激酶。新近的研究发现,AMPK的激活参与了许多细胞(如骨骼肌细胞、内皮细胞)的分化、迁移和管腔形成。该文就AMPK在血管生成这一生物效应中的显像和作用机制予以综述。     

当归补血汤在肿瘤化疗中增效减毒作用

通过文献整理,对当归补血汤在肿瘤化疗中增效减毒作用的研究进行了归纳总结,指出了当归补血汤对化疗的增效作用,对化疗中骨髓抑制的防护,对机体免疫功能的保护,对脏器功能的保护,减轻了化疗药对机体的毒性反应。     

当归补血汤对脾虚小鼠免疫功能的影响

研究了中药方剂当归补血汤对脾虚模型小鼠的免疫增强作用。结果显示，用药后脾虚小鼠的特异性和非特异性免疫功能有明显改善。     

当归补血汤对大鼠脑缺血再灌注后海马区一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用以及对海马区一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)表达的影响。方法采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,阻断血流2 h后再灌注。应用免疫组织化学染色法检测大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马区NOS免疫反应阳性细胞的表达情况,观察当归补血汤对其结果的影响。结果模型组大鼠海马各亚区及齿状回NOS阳性细胞分布稀疏,数目较假手术组和当归补血汤组显著减少,差异有统计意义(P<0.05)。结论大鼠脑缺血再灌注后海马区NOS免疫反应阳性细胞的表达降低,当归补血汤能增强脑缺血再灌注后海马区NOS阳性细胞的表达,对大鼠脑缺血再灌注后的神经组织具有一定的保护作用。     

不同剪切力对豚鼠微血管内皮细胞形态学的影响

目的 观察不同剪切力对体外培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞的影响.方法 用自制的流体力学装置在不同时相点、以不同剪切力对豚鼠脑、耳蜗微血管内皮细胞进行力学作用,获得形态学图像并进行形状参数Pyx的测定分析.结果 通过胶原酶消化法可获得单层培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞.对于耳蜗微血管内皮细胞,剪切力为0.883 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.184 dyn/cm2时,作用8 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化,随时间延长,变化趋势更明显.而脑微血管内皮细胞在剪切力0.267 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.069 dyn/cm2时,作用4 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化.结论 耳蜗、脑微血管内皮细胞在受到剪切力作用后其形态学不同于静态培养的内皮细胞.     

剪切力对大鼠肺微血管内皮细胞细胞骨架的影响

目的 观察不同的剪切力对体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)细胞骨架蛋白(F-actin)的影响,探讨高血流性肺动脉高压的早期发病机制。方法 用自制的多层流动腔对体外培养的大鼠PMVECs施加剪切力作用,以异硫氰酸荧光素-毒蕈肽标记F-actin,采用共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化并记录相应的荧光值。结果 剪切力引起PMVECs骨架内的微丝重排,向着剪切力的方向出现与细胞长轴一致的应力纤维,且剪切力越大、作用时间越长,这种现象越明显,直至细胞内几乎所有的微丝F-actin都沿着细胞长轴形成应力纤维。结论 PMVECs细胞骨架在受到剪切力作用后会形成应力纤维,该现象在剪切力作用早期即可发生,并且对作用时间及剪切力大小具有依赖性,这可能与高血流性肺动脉高压的早期发病机制密切相关。     

当归补血汤实验研究进展

当归补血汤出自金元时期李杲<内外伤辨惑论>,组成为炙黄芪一两、当归二钱,功效补气生血,为治疗血虚的名方,主治劳倦内伤,气血虚弱,以及妇人经行、产后血虚发热、头痛,或疮疡溃后久不愈合等症.近些年来,对其研究报道甚多,现简要评述如下.     

当归补血汤Ⅰ号在非小细胞肺癌术前BAI化疗中的作用

目的:研究当归补血汤Ⅰ号在Ⅲ期非小细胞肺癌(NSCLC)术前BAI化疗中的作用。方法:将术前进行BAI化疗的80例Ⅲ期NSCLC患者随机分为试验对照组和试验观察组,另取40例健康者血液标本作正常健康对照。试验观察组配合当归补血汤Ⅰ号治疗,比较各组NK细胞活性、T淋巴细胞亚群、血清白细胞介素-2水平、红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)及表面免疫复合物(RBC-ICR)等细胞免疫指标的变化,并观察BAI化疗有效率及其副反应的发生情况。结果:NSCLC患者确实存在细胞免疫抑制,试验观察组BAI化疗后细胞免疫功能明显改善,与试验对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),同时化疗有效率高于试验对照组(P<0.05),而化疗副反应发生例数则少于试验对照组。结论:NSCLC患者术前BAI化疗同时应予免疫治疗。当归补血汤Ⅰ号扶正补气血,攻补兼施,对于NSCLC患者术前BAI化疗是较理想的辅助治疗药物,值得临床推广。     

当归补血汤及拆方对大鼠免疫性肝损伤的治疗作用

目的观察当归补血汤及拆方对免疫性肝损伤大鼠的肝功能、肝纤维化的影响。方法采用猪血清腹腔给药方法,造成免疫性肝损伤模型,检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)、透明质酸(HA)、IV型胶原、III型前胶原。结果黄芪/当归5∶1组可明显降低猪血清所致免疫性肝损伤大鼠的血清AST、ALT含量;黄芪组、当归组及黄芪当归不同配比组均能升高SOD水平,降低MDA的含量;黄芪组能明显降低HA、IV型胶原;当归补血汤5∶1组能明显降低III型前胶原水平,且优于10∶1组。结论当归补血汤对免疫性大鼠肝损伤模型具有一定保护作用,其作用机制可能与降低、抑制脂质过氧化反应以及抗自由基损伤有关。     

当归补血汤在风湿病中的应用

当归补血汤是补气生血的代表方,其药味少,配伍精,用于治疗气血两虚证,其效果已被临床证实。宋绍亮教授认为,风湿病多由脏腑内蕴湿热毒邪,每易耗伤气血,正气损伤复不能驱邪外出,临床常用当归补血汤以扶正补虚。     

Phosphorothioate oligonucleotide inhibits tissue factor expression in endothelial cells induced by blood flow shear stress in rats

Objective： To determine the effect of antiparallel phosphorothioate triplex-forming oligonucleotide （apsTFO）, which was designed according to shear stress response element （SSRE） in tissue factor （TF） gene promoter region, on the expression of endothelial TF in carotid artery stenosis rats. Methods： Rat model of severe carotid artery stenosis were inflicted by silica gel tube ligation. Half an hour before the model infliction, GT20-apsTFO, GT20-psTFO and GT21-apsTFO labeled with green fluorescence （FITC） were injected into the vena caudalis of rat at a dose of 0.5 mg/kg. Half an hour, 4 or 9 h after the ligation, the distribution of TFO in the common carotid artery, the liver and the kidney was detected with aid of fluorescence microscopy. And the mRNA and protein expressions of TF, Egr-1 and Spl in the above-mentioned organs were determined with in situ hybridization and immunohistochemical assay respectively in 6 h after the model establishment, and the results were analyzed with an image analysis system. Results： Only in 1 h after TFO injection, fluorescent granules appeared in the liver, the kidney and the vascular wall and lumen of carotid artery, and then in 4.5 h, they still deposited in above sites except the vascular lumen. GT20-apsTFO and GT21-apsTFO significant down-regulated the mRNA and protein expressions of TF compared to the rats without treatment （P〈0.05）, and the former apsTFO had a more stronger effect than the later （P〈0.05）. GT20-psTFO had no such effect （P〉0.05）. The 3 TFOs had no inhibition on the mRNA and protein expressions of Egr-1 and Spl. Conclusion： Pretreated apsTFO can partly come into the vascular endothelial cells, and inhibit TF expression induced by shear stress, but had no effect on Egr-1 and Spl gene expressions.