羟丁酸钠对缺氧缺血后新生大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的：观察羟丁酸钠(GHB)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后海马CA1区神经元Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：生后 7 d SD大鼠采用Rice等法，制成HIBD动物模型。新生大鼠随机分成假手术（sham）组、缺氧缺血（HI）组、GHB组。其中GHB组包括GHB50（50 mg/kg）、GHB100（100 mg/kg）、GHB200（200 mg/kg）亚组。各组在缺氧完成后 1 h、3 h、24 h、72 h 和 168 h 时点取脑切片作HE染色，用免疫组化染色观察Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：①光镜下HE染色结果：HI组海马CA1区锥体细胞排列紊乱，锥体细胞减少，海马带宽窄不一，可见细胞肿胀和核碎裂。GHB50组和GHB100组可减轻锥体细胞层病理改变。②免疫组化染色结果：HI组缺血缺氧后1h海马CA1区 Bcl-2、Bax表达开始增强，24 h 时达到高峰，其后逐渐减弱。在GHB50组和GHB100组可使Bcl-2表达明显高于HI组（P<0.05，P<0.01），Bax表达明显低于HI组（P<0.05，P<0.05）。结论：GHB可通过对Bcl-2、Bax表达的调控抑制新生大鼠HIBD后海马CA1区神经元损伤。     

大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织中脑红蛋白基因表达的变化

20 0 0年 ,德国Ｂｕｒｍｅｓｔｅｒ等[1] 首次报道了人和小鼠脑内存在特异的功能上类似于肌红蛋白的携氧球蛋白———脑红蛋白 (ｎｅｕｒｏｇｌｏｂｉｎ) ,可特异性的为脑供氧 ,从而对脑缺氧的研究提供了全新思路[2 ] ,并已在国际范围内掀起重新认识和研究脑缺氧的热潮。我们实验室一直在关注脑缺氧损伤的分子机制研究 ,并获得了人脑红蛋白全长ｃＤＮＡ序列和大鼠脑红蛋白基因编码区的ｃＤＮＡ序列[3 ,4] ,随后根据此序列设计引物 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)技术对大鼠缺氧缺血性脑损伤时脑组织中脑红蛋白ｍＲＮＡ水平的变化进…     

Bcl-2、Bax蛋白在NRs抗体预处理后缺氧缺糖海马脑片CA_1区的表达变化

运用海马脑片培养技术、海马脑片缺氧缺糖方法、免疫组织化学染色和图像分析处理技术观察用 NMDA受体亚单位抗体预处理后再缺氧缺糖的海马脑片 CA1 区 Bcl-2和 Bax蛋白的表达变化 ,以探究其亚单位与海马脑片缺氧缺糖性损伤的关系。结果显示 ,各实验组海马脑片 CA1 区均有不同程度 Bcl-2、Bax蛋白表达和细胞缺失形成的空洞。 Bcl-2蛋白在 NR1+ OGD组、NR2 A+ OGD组和 NR2 A + NR2 B+ OGD组 CA1 区的表达均明显弱于 OGD组 (3组均 P<0 .0 5 ) ;其在 NR2 B+ OGD组和HOTC组的表达则强于 OGD组 (两者 P<0 .0 5 )。 Bax蛋白在 NR1+ OGD组、NR2 A+ OGD组和 NR2 A+ NR2 B+ OGD组的表达均强于 OGD组 (NR2 A+ OGD组 P<0 .0 5 ) ;在 NR2 B+ OGD组和 HOTC组其表达则明显弱于 OGD组 (后者 P<0 .0 5 )。结论 :单纯缺氧缺糖可引起海马脑片 CA1 区锥体细胞的迟发性损伤 ,同时引起 Bcl-2蛋白和 Bax蛋白的表达变化 ;预加 NMDA受体亚单位 NR1、NR2 A抗体和 NR2 A+ NR2 B抗体可以加重缺氧缺糖性海马脑片 CA1 区细胞损伤程度 ;预加 NR2 B抗体则可减轻其损伤程度。提示 NMDA受体亚单位成分的变化可以调节 Bcl-2和 Bax蛋白在缺氧缺糖性海马脑片 CA1 区的表达 ,从而调节CA1 区神经元的损伤程度     

CEPO调控新生大鼠缺氧缺血性脑损伤Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑组织Bcl-2、Bax基因表达变化及氨基甲酰化促红细胞生成素（CEPO）干预对其表达的影响,探讨CEPO发挥脑保护作用的可能机制.方法 将新生7日龄SD大鼠建立HIBD模型,利用RT-PCR检测缺氧缺血和CEPO干预后2h、12h、24 h、48 h、72 h凋亡基因Bcl-2、Bax的mRNA表达的改变.结果 与假手术组相比,缺氧缺组在2h、12h、24 h、48 h、72 h脑组织中Bcl-2、Bax的表达均增加（P＜0.05）,与缺氧缺血组相比,CEPO干预组在不同时间点Bcl-2表达增加（P＜0.05）,Bax表达下降（P＜0.05）.结论 在新生大鼠HIBD中Bcl-2、Bax mRNA的表达发生改变,调控二者的表达水平可能是CEPO发挥脑保护的作用机制之一.     

间歇性低压缺氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注海马CA1区Ngb和Bcl-2蛋白表达的影响

 目的：探讨间歇性低压缺氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注海马CA1区脑红蛋白（Ngb）和Bcl-2蛋白表达的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为假手术组、低压缺氧预处理对照组、全脑缺血/再灌注组、低压缺氧预处理+全脑缺血/再灌注组4组,将间歇暴露于低压缺氧环境的大鼠作为低压缺氧预处理对照组。采用Pulsinelli四血管闭塞法复制大鼠全脑缺血/再灌注模型,夹闭颈总动脉造成全脑缺血8 min后再灌注。用硫堇染色法和免疫组织化学方法分别观察大鼠海马组织学改变和海马组织Ngb、Bcl-2蛋白表达变化。结果：低压缺氧预处理+全脑缺血/再灌注组大鼠海马CA1区存活细胞数较全脑缺血/再灌注组明显增加,其海马组织Ngb和Bcl-2蛋白表达量较全脑缺血/再灌注组显著升高。结论：间歇性低压缺氧预处理可能通过上调海马组织Ngb和Bcl-2蛋白的表达,减少全脑缺血再灌注后海马神经元的死亡而发挥神经保护作用。     

缺氧缺血性脑损伤与凋亡的进展

Apoptosis is one of the most important causes, which results in the central neuronal system complication in hypoxic- ischemic brain damage (HIBD). Apoptosis occurs in the developing brain more than in the developed brain. Apoptosis can last several weeks and may be inverted its pathology by appropriate therapy. Caspase inhibitor, neurotrophic factors, anti-apoptosis gene Bcl-2, mild hypothermia, and early intervention play important roles in promoting neuronal cell survival and preventing from apoptosis through different mechanisms. It may be a new way for rehabilitation of HIBD.     

缺氧缺血新生大鼠脑组织水通道蛋白4的表达变化

目的研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的作用及其意义。方法120只7日龄新生Wistar大鼠按照完全随机化方法分为4部分,每部分(n=30)再分为对照组、HIBD后6h、24h、3d、5d和7d共6组,每组5只。分别测定脑组织含水量;原位杂交和免疫组化检测AQP-4表达;检测脑组织病理变化。结果HIBD组6h、24h、3d的脑组织含水量较对照组显著增加(P<0.05);且各组脑组织含水量随时间延长而增加,组间差异有统计学意义(P<0.05);HIBD5d、7d组脑组织含水量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白少量表达(吸光度A值为0.29±0.07和0.06±0.01)。与对照组相比,HIBD后6~24h,AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白表达显著增加。AQP-4 mRNA的A值由0.42±0.04上升到0.80±0.02(P<0.05);AQP-4蛋白A值由0.14±0.03上升到0.23±0.05(P<0.05),同时光镜下可见脑组织轻度水肿;3d时AQP-4 mRNA和蛋白表达达高峰,AQP-4 mRNA的A值为0.91±0.08,AQP-4蛋白A值为0.41±0.04,此时脑组织严重水肿,神经元、胶质细胞和内皮细胞明显肿胀;第5~7天AQP-4的表达已下降(尤其mRNA明显),但仍显著高于对照组(P<0.05),此时脑水肿已减轻。在整个HIBD脑水肿形成的过程中,AQP-4 mRNA和蛋白的表达呈正相关(rs>0.82,Ps<0.05)。结论AQP-4参与了HIBD的发生发展过程,AQP-4在HIBD脑水肿的形成过程中可能起重要作用。     

缺氧缺血新生大鼠脑组织水通道蛋白4的表达变化

目的 研究缺氧缺血性脑损伤(HIBD)病理过程中水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)的作用及其意义.方法 120只7日龄新生Wistar大鼠按照完全随机化方法分为4部分,每部分(n=30)再分为对照组、HIBD后6 h、24 h、3 d、5 d和7 d共6组,每组5只.分别测定脑组织含水量;原位杂交和免疫组化检测AQP-4表达;检测脑组织病理变化.结果 HIBD组6 h,24 h,3 d的脑组织含水量较对照组显著增加(P＜0.05);且各组脑组织含水量随时间延长而增加,组间差异有统计学意义(P＜0.05);HIBD 5 d,7 d组脑组织含水量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白少量表达(吸光度A值为0.29±0.07和0.06±0.01).与对照组相比,HIBD后6～24 h,AQP-4 mRNA和AQP-4蛋白表达显著增加.AQP-4 mRNA的A值由0.42±0.04上升到0.80±0.02(P＜0.05);AQP-4蛋白A值由0.14±0.03上升到0.23±0.05(P＜0.05),同时光镜下可见脑组织轻度水肿;3 d时AQP-4 mRNA和蛋白表达达高峰,AQP-4 mRNA的A值为0.91±0.08,AQP-4蛋白A值为0.41±0.04,此时脑组织严重水肿,神经元、胶质细胞和内皮细胞明显肿胀;第5～7天AQP-4的表达已下降(尤其mRNA明显),但仍显著高于对照组(P＜0.05),此时脑水肿已减轻.在整个HIBD脑水肿形成的过程中,AQP-4 mRNA和蛋白的表达呈正相关(rs＞0.82,Ps＜0.05).结论 AQP-4参与了HIBD的发生发展过程,AQP-4在HIBD脑水肿的形成过程中可能起重要作用.     

高脂血症对大鼠主动脉内皮细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨高脂血症SD大鼠主动脉内皮细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的变化及其诱导内皮细胞凋亡的可能机制。方法:清洁级大鼠17只,随机分为高脂血症模型组(8只)和对照组(9只),分别以高脂饲料和普通饲料喂养16周后,检测血脂水平,采用免疫组织化学方法检测两组大鼠主动脉内皮细胞Bax、Bcl-2的表达,同时用HE染色和电镜观察主动脉组织形态学改变。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平升高(P<0.01),主动脉内皮细胞Bax蛋白表达明显增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01);模型组主动脉内膜增厚和平滑肌细胞增殖,内皮组织部分脱落,内皮细胞胞膜破裂,胞质脱失,核膜不完整。结论:高脂血症可引起大鼠血管内皮细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2水平及比值改变,加重血管内皮损伤,促进细胞凋亡,加速动脉粥样硬化进程。     

宫内缺血缺氧性脑损伤的新生鼠脑发育过程中海马区MAP-2的表达变化

目的观察宫内缺血缺氧性脑损伤（hypoxia ischemia brain damage,HIBD）新生鼠脑组织中微管相关蛋白2（microtubule associated pmtein-2,MAP-2）表达的变化。方法通过孕鼠生活的氧气供应的改变造成胎鼠HIBD动物模型,用免疫荧光以及蛋白印记法来检测出生后不同年龄段海马组织MAP-2的表达变化。结果免疫荧光及蛋白印记法检测实验组出生第1天,第21天的子鼠MAP-1B表达较同龄对照组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）,出生14天组与对照组的MAP-1B表达无明显差异（p〉0.05）。结论宫内缺血缺氧性脑损伤可使其子鼠在脑发育过程中海马区MAP-1B的表达下降。     

Generation of lipid radicals in the hippocampus of neonatal rats after acute hypoxic-ischemic brain damage

Free radical-mediated lipid peroxidation has been strongly suggested to be the main cause of neuronal toxicity in the rat brain, including neonatal brain damage. The primary objective of this experiment was to see if the generation of free radicals occurred in the acute phase of ischemic-hypoxic insult in neonatal rats, by electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy and in vivo brain microdialysis. A spin trap agent, α-(4-pyridyl-N-oxide)-N-tert-butylnitrone was perfused through a probe in the hippocampus before and after hypoxia and then an analysis was performed by EPR. From the EPR analysis of spin adduct in the dialysates, we obtained the EPR spectrum of six line spectra for which the hyperfine coupling constants corresponded to those of the EPR signal from the lipoxygenase/linoleic acid (LPX/LA), a lipid radical generating system, increased transiently just after hypoxia. The results of our in vivo study show the lipid peroxidation of the neuronal membrane to progress during neonatal ischemic-hypoxic insult. We hypothesize that an increased formation of lipid radicals may participate in the cascade of reactions leading to neuronal damage in the hippocampus following ischemic-hypoxic insult in neonatal rats.     

Bax inhibiting peptide reduces apoptosis in neonatal rat hypoxic-ischemic brain damage

Neonatal hypoxic ischemic encephalopathy (HIE) has been reported to induce apoptosis in neonates. We, therefore, analyzed the ability of Bax-inhibiting peptide (BIP) to provide neuroprotective effects during hypoxic-ischemic brain damage (HIBD). Seven-day-old wistar rat pups (n = 198) were randomly divided into a sham-operated group (Group S, n = 18), saline group (Group C, n = 90) and BIP group (Group B, n = 90). Pathological changes in the cerebral tissues of rat pups were analyzed using hematoxylin and eosin stain, TUNEL and Western blot. The expression of cytochrome c and caspase-3 was determined using western blot technique. Rat pups demonstrated neurobehavioral alteration in Groups C and B. TUNEL-positive cells in the left hippocampus were significantly increased in Group C and Group B after HIBD (P < 0.01) when compared with Group S. There was a marked reduction in TUNEL positive cells in subgroups B1 through B4 when compared with the respective subgroups C1 through C5. Compared with Group S, the expression of caspase-3 and cytochrome c was significantly increased in Groups C and B (P < 0.01). The difference in expression of caspase-3 and cytochrome c between subgroups B1 through B4 and C1 through C4 was significant (P < 0.01). In conclusions, the neuro-protective effect of BIP was due to a reduction of nerve cell apoptosis in our neonatal HIE rat model. We propose that BIP has potential as a neuro-protective drug in neonatal HIE cases.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤tPA、PAI-1表达的动态变化

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达变化的规律,探讨纤溶系统在缺氧缺血性脑损伤中的作用。方法:7日龄SD新生大鼠96只,随机分为2组:缺氧缺血性脑损伤组和假手术组。两组动物模型制备成功后3、6、12、24、36、48、72、96小时断头取脑,应用免疫组织化学及原位杂交方法检测缺氧缺血性脑损伤不同时间点t-PA、PAI-1表达的变化。结果:假手术组新生大鼠各脑区均有tPA、PAI-1蛋白及mRNA的弱表达,缺氧缺血性脑损伤组不同时间点t-PA、PAI-1二者表达呈不同的动态变化:tPA蛋白及mRNA 3小时开始表达增强,主要见于皮质和海马,神经元表达明显,血管表达较弱,48小时神经元及微血管内皮表达明显增强,72小时神经元表达明显减弱,微血管内皮见有明显阳性表达,之后表达减弱,3～96小时各时间点阳性着色神经元数目显著高于假手术组;PAI-1蛋白及mRNA 12小时表达有所增强,神经元和微血管内皮表达增多,72小时达高峰,12～96小时各时间点阳性着色神经元数目显著高于假手术组。结论:tPA和PAI-1参与HIBD的发病机制。     

新生大鼠缺氧缺血损伤后心肌细胞GAP-43的表达

目的研究生长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)在新生鼠缺氧缺血损伤后心肌细胞中的差异表达及其临床意义。方法取42只7日龄Wistar大鼠随机分为正常对照组和缺氧缺血组。大鼠分别于缺氧缺血后2d,3d,7d断头处死取心肌,应用免疫组化法检测心肌细胞上GAP-43的表达。结果缺氧缺血组GAP-43的表达较对照组明显增加,在缺氧缺血后2d至7d差异有显著意义(P<0.05)。结论缺氧缺血大鼠心肌GAP-43表达呈时间依赖性变化,与心肌细胞损害密切相关。     

丙酮酸乙酯对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的保护作用

 目的： 探讨丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate, EP）对缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage, HIBD）新生大鼠脑组织的作用及其可能机制。方法：165只7日龄SD大鼠随机分为3组:假手术组（n=43）、HIBD模型组（n=61）和HIBD+EP处理组（n=61）,造模前30 min腹腔注射EP（50 mg/kg）1次,此后每天1次,3 d后测定脑组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量以及脑组织含水量,TUNEL法检测脑组织凋亡细胞数;14 d后检测缺血侧和非缺血侧脑重量以判别脑萎缩程度。结果：HIBD+EP组脑组织SOD活性为(125.78±18.35)×103 U/(g protein),较HIBD模型组［(97.84±15.50)×103 U/(g protein)］明显增强（P<0.05）;MDA含量为(4.42±1.04) μmol/(g protein),较HIBD模型组［(6.02±0.89) μmol/(g protein)］明显降低（P<0.05）。此外,HIBD模型组缺血侧（左侧）的脑组织含水量高于非缺血侧（右侧）（P<0.05）,EP治疗后两侧的脑组织含水量无显著差异（P>0.05）,提示EP减轻了缺血侧的脑水肿。同时HIBD+EP组缺血侧脑皮质和海马每个视野的凋亡细胞数目分别为96.63±10.08和41.91±9.96,较模型组（111.54±1.64和51.73±1.77）明显减少,但仍多于假手术组（P<0.05）。HIBD+EP组左脑萎缩程度为(13.25±5.19)%,较HIBD模型组［(20.32±5.10)%］明显减轻（P<0.05）。结论：EP具有抗氧化功能,能减轻脑水肿,减少脑细胞凋亡,减轻脑萎缩,对HIBD新生大鼠脑组织具有保护作用。     

消栓颗粒对缺氧缺血性新生大鼠脑组织Caspase-3蛋白的影响

目的探讨消栓颗粒对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠Caspase-3蛋白的影响。方法 7日龄SD新生大鼠36只,随机分为假手术组、HIBD模型组和消栓颗粒治疗组,每组各12只。HIBD模型组和消栓治疗组参照Yager法建立HIBD模型,消栓颗粒治疗组灌服消栓颗粒（8g/kg,qd）,HIBD模型组及假手术组灌服等量9g/L氯化钠注射液。造模后第14d断头取出脑组织,观察3组大鼠左侧大脑半球病理形态学的变化,比较3组的病理学评分;免疫组化法检测3组大鼠海马及皮质区Caspase-3蛋白的表达情况。结果 HE染色结果显示,假手术组未见明显病变,HIBD模型组大鼠脑组织变性、坏死显著,消栓颗粒治疗组仅表现为局灶性神经细胞变性,病理学评分假手术组显著低于HIBD模型组及消栓颗粒治疗组（P〈0.01）,消栓颗粒组低于HIBD模型组（P〈0.01）。免疫组化结果显示,假手术组海马及皮质区有少量Caspase-3蛋白表达,HIBD模型组Caspase-3蛋白的表达较假手术组明显增多,消栓颗粒治疗组Caspase-3蛋白的表达较HIBD模型组明显减少,3组间两两比较均具有显著性差异（P〈0.01）。结论消栓颗粒可减轻HIBD新生大鼠的脑损伤,机制可能为抑制Caspase-3蛋白的表达。     

Effect of ephedrine on neuronal plasticity of hypoxic-ischemic brain damage in neonatal rats

OBJECTIVE: Study the effect of ephedrine on neural plasticity of hypoxic ischemic brain damaged (HIBD) in neonatal rats, and explore the underlying molecular mechanism. METHODS: 60 Sprats suffered from HIBD (7 days old) were randomly divided into ephedrine group, D-amphetamine (D-AMPH) group, cytidine triphosphate (CTP) group, ganglioside (GM1) group, and spontaneous recovery group. Using immunohistochemical method to test the expression of growth-associated protein-43(GAP-43) and synaptophysin (SYP) on one side of hippocampal CA3 area, then, 4 weeks later, Morris Water Maze test was performed for five days. RESULTS: (1) The expression levels of GAP-43 and SYP on hippocampal CA3 area in ephedrine group were higher than that in spontaneous recovery group (P<0.05). However, there was no statistical difference in ephedrine groups, CTP group, and D-AMPH group. (2) The average time of escape latency was significantly shorter in treating groups than that in spontaneous recovery group (P<0.05), and the frequency of original platform passing was higher than that in spontaneous recovery group (P<0.01). The average time of escape latency was longer in ephedrine group than that in GM1 group. The frequency of original platform passing was significantly less in ephedrine group than that in GM1 group, No statistical difference found in ephedrine groups, CTP group, and D-AMPH group. CONCLUSIONS: Ephedrine may enhance memory, the abilities of spatial orientation and learning in HIBD rats. This protective effect may be associated with increasing synaptic connectivity, as assessed by increased expression of GAP-43 and SYP after HIBD. Ephedrine triggered similar protection against HIBD as treatment of D-AMPH and CTP. However, the amelioration of ability of spatial orientation, learning and memory by ephedrine on HIBD rats in later stage is slightly weaker than that by GM1, which may be related with ephedrine dosage.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP4表达及bFGF治疗效果的研究

目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)后脑组织水通道蛋白-4(AQP4)的表达变化及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对其治疗效果的影响.方法结扎阻断左侧颈总动脉,仓内N2浓度95%、O2浓度9±1%,缺氧持续20min,建立脑缺氧缺血模型,用RT-PCR方法检测出脑缺氧缺血后不同时间段AQP4 mRNA基因的表达.并对7日龄HIBD后新生大鼠进行bFGF治疗(4μ/g体重,腹腔注射,连续15d).观察治疗后5h、3d、7d、15d、17d后AQP4 mRNA表达的变化.结果 HIBD后5h,脑组织AQP4 mRNA表达增加;HIBD后7日达到高峰(1.93±0.11),15d后仍高于正常组织(1.41±0.23);HIBD后腹腔注射bFGF,3d脑组织AQP4 mRNA有明显变化(0.79±0.15),15d明显降低(0.47±0.06).结论 AQP4与HIBD的形成密切相关;bFGF对HIBD后有明显的改善作用,可能与其保护作用有关.     

人参皂苷Rg1调控癫痫大鼠海马Bcl-2和Bax的表达

目的:本研究通过建立氯化锂-匹罗卡品诱导大鼠癫痫模型,用人参皂苷Rg1(Rg1)进行干预,检测癫痫大鼠海马中的Bax、Bcl-2的表达及Rg1对其的调控作用,初步探讨Rg1对癫痫可能的神经保护机制。方法:健康成年雄性SD大鼠随机分为5组,即空白对照组,模型组,低、中、高剂量Rg1治疗组,每组20只,观察行为学变化,并于点燃后72 h取脑,分别通过免疫荧光显色、免疫印迹和RT-PCR检测Bax和Bcl-2的蛋白和RNA表达情况。结果:空白组未出现癫痫发作及死亡,不同剂量的Rg1预处理组与模型组相比,大发作潜伏期时间延长。匹罗卡品诱导大鼠癫痫发作后,海马神经元的胞质内凋亡因子Bax免疫阳性反应增强,蛋白产物表达增多,抗凋亡因子Bcl-2表达减少。Rgl预处理组促凋亡因子Bax及其mRNA表达减少,抗凋亡因子Bcl-2及其mRNA表达增加。结论:癫痫发作后可引起凋亡因子的表达变化,而人参皂苷Rg1可以通过下调促凋亡因子Bax的表达,上调抗凋亡因子Bcl-2的表达,从而发挥抗癫痫的神经保护作用。