浅谈抗生素微生物检定--管碟法操作注意要点

抗生素管碟测定法是利用抗生素在摊布特定实验菌的固体培养基内呈球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区,抑制了实验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈.根据抗生素在一定浓度范围内,对数剂量与抑菌圈直径(面积)呈线性关系,比较标准品与供试品两者对接种的实验菌产生抑菌圈的大小,计算出供试品的效价.本文根据实践工作经验,对抗生素效价检定操作过程中应注意的要点作一总结简述.     

抗生素微生物检定中试验菌的纯化

抗生素微生物检定法是目前国内外通用的抗生素含量测定方法 [1 ,2 ] 。随着新抗生素药物的不断问世 ,一些多组份及化学结构不十分明了的抗生素一般首先采用该法进行效价测评。该法是以抗生素抑制细菌生长的程度作为效价衡量标准 ,与临床疗效有平行的关系 ,且不需对检品作特殊处理。尽管经典的化学分析法及日新月异的现代仪器分析法有极大的便利性及优越性 ,微生物检定法仍然是抗生素含量测定中不可替代的一种重要方法。影响该法准确度的因素很多 ,笔者曾就抑菌圈的测量方法进行过研究 [3]。本文对试验菌的纯化进行了探讨 ,旨在增加抑菌圈的…     

氯霉素注射液含量测定方法的比较

目前氯霉素注射液含量测定方法按部颁［１］抗生素微生物检定法操作，但此法受培养基、菌种、温度、时间等的影响。笔者在实践过程中发现试验所致的抑菌圈易出现边缘模糊，造成卡尺测量上的误差，用抑菌圈测量仪测定，其结果的可信限率较高，同时，此法耗时耗力。本文采用...     

抗生素微生物检定法操作体会

<中国药典>抗生素微生物检定法测定抗生素含量,此方法经典成熟,能直接显示抗生素的抗菌效价,而且成本不高,还有相当一部分抗生素药品采用此法测定含量.相关药厂和地市级药检所都能开展此项检验方法.笔者采用二剂量法(中国药品生物制品检定所制培养基,ZY-300A多功能抑菌圈自动测试仪), 在做一批含量测定时发现同一剂量所产生的抑菌圈直径误差有时很大,特提出,与同行探讨.     

抗生素微生物检定二剂量管碟法常用菌种培养的研究

二剂量管碟法是目前抗生素微生物检定最常用的检验方法。其抗生素效价结果判定最主要的数据是抑菌圈的大小和清晰程度。实验中发现菌液的浓度、菌种的形态和活性、菌龄等对抑菌圈状态的影响很大,本文对常用实验菌种的培养进行了研究。     

绿茶及其提取物抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌作用研究

目的 研究绿茶及提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌作用并分析其主要抗菌成分.方法 采用琼脂稀释法测定各种茶叶的水浸出物及茶叶的主要成分对MRSA的MIC.纸片扩散法观察绿茶浸出物和茶叶主要成份与抗生素合用对MRSA的协同抗菌情况.结果 ①绿茶浸出物对MRSA的MIC范围为0.125-0.5%,青茶浸出物为0.125-0.5%,白茶浸出物为0.0625-0.25%,红茶浸出物为0.5%,黑茶浸出物为0.25-0.5%.②茶多酚对MRSA的MIC范围为128-256μg/mL,茶色素为256-512μg/mL,茶多糖为512-1024μg/mL,茶皂素和咖啡因则均大于1024μg/mL.③青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢他啶、头孢替唑、米诺环素、四环素与绿茶浸出物合用的抑菌圈明显大于单用抗生素的抑菌圈,红霉素和氯霉素单用/合用的抑菌圈相同,环丙沙星加入绿茶浸出物后抑菌圈反而减小.④茶多糖、茶皂素、茶色素、咖啡因与苯唑西林单用/合用的抑菌圈均相同,茶多酚与苯唑西林合用的抑菌圈明显大于单用苯唑西林的抑菌圈,表儿茶素没食子酸酯(ECg)/表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCg)与苯唑西林合用的抑菌圈明显大于各自单用的抑菌圈.结论 各种茶叶对MRSA均有一定的抗菌作用,其中绿茶和白茶的抗菌作用最强.绿茶抗MRSA的主要成分为茶多酚,并且茶多酚对β-内酰胺类抗生素和四环素抗MRSA有增效作用,但对其它类抗生素呈无关或拮抗作用.茶多酚中的2个单体ECg和EGCg能增强苯唑西林的抗MRSA作用.     

足部软组织感染脓液中分离出毗邻颗粒链菌1例

目的掌握毗邻颗粒链菌的生物学特性、鉴定及药敏试验。方法用VITEK2 Compact系统、MALDT TOF系统,分别对脓液中分离出的细菌进行鉴定。药敏试验根据CLSI M45-A2的抗生素选择药物,只有MIC解释标准,无KB抑菌圈直径标准。结果两种方法结果均显示为毗邻颗粒链菌。药敏试验:青霉素E-test 0.25μg/mL,红霉素12 mm、克林霉素6 mm、左旋氧氟沙星15 mm、万古霉素21 mm、利奈唑烷39 mm、头孢曲松28 mm。因无KB抑菌圈直径标准,只报抑菌圈直径,供临床参考。临床医师选择了头孢曲松予以治疗,患者病情有所好转。结论颗粒链菌属对营养要求挑剔,通常只能在含有L-半胱氨酸或毗哆醛的培养基上生长。故在日常工作中,血平板上生长不良的链球菌,要加做卫星试验以协助鉴定。另外此类菌易受营养成分和培养环境的影响,造成革兰染色易过度脱色,因此选择合适的鉴定卡上机也尤为重要。药敏试验根据CLSI M45-A2的抗生素选择药物,只有MIC解释标准,无KB抑菌圈直径标准。     

计算机辅助生物效价测定的一个新系统

抗生素效价的微生物检定法[1 ] 是抗生素类药物有效成分的主要检定法。该方法以抗生素的杀菌力作为衡量效价的标准 ,通过对抗生素抑菌圈的测量进行生物效价计算。常用的微生物管碟法和薄层色谱分析法的手工测量方法操作比较繁琐 ,还容易引入人为误差。为了解决这一 ,基于抗生素效价的微生物检定法开发了一个新的生物图像处理系统 ,对计算机辅助测量分析技术在抗生素生物效价测定中的应用做了有益的尝试。系统针对实验中获得的如图 1 (ａ)所示的抑菌圈图像 ,采用选取抑菌圈颜色及边缘探测的方法[2 ] 实现了抑菌圈面积的计算机自动测量和校正…     

Z82-A型抑菌圈测量仪的研制与应用

Z82-A型抑菌圈测量仪是采用测量电视摄象机的原理,把图象的光信号变成电信号,通过数字显示,自动记录等附件装配而成的仪器。它是以测量图象面积为指标,用于抗生素微生物管碟测定法中抑菌圈大小的测量,经试验它具有线性宽、精密度高、稳定性好、简便、反应客观实际、提高工作效率等优点。该仪器备有灰度调节装置可排除圈内较浅杂质的干扰;双圈也能准确测量,优于目前所用的测量工具。     

采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的研究

目的研究采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的方法.方法本文采用抗生素V号为培养基,PH为7.0的磷酸盐缓冲液为稀释液.结果其抑菌圈清晰,直径大小符合《中国药典》要求.结论采用抗生素V号培养基测定硫酸粘菌素效价的方法可靠.     

提高最后稀释液浓度测定硫酸链霉素含量

本文参照中国药典（１９９０年版）抗生素微生物检定法，应用Ｚ－８２型抗生素抑菌圈而积测量分析仪，测定硫酸链霉素抑菌圈面积与对数剂量的线性关系范围，结果表明，测定硫酸链霉素含量对，最后稀释液浓度范围在５．６～２０单位／ｍｌ内对数剂量与抑菌圈面积呈睦线关系，回收率，可信限率亦较好，抑菌圈有较好的清晰度，其面积所对应的直径在１８～２４ｍｍ，符合中国药典１９９０年版的规定，由此，建议在硫酸链霉素的含量测定中     

抗生素效价测定中试用菌应注意的问题

<正>抗生素微生物检定法是利用抗生素对细菌(或真菌)的杀死或抑制程度,作为客观指标来衡量抗生素中有效成分的效力的一种方法,抗生素微生物检定法中以管碟法为国际通用方法,中国药典微生物检定法也一直采用管碟法观察抑菌圈的面积或直径,从动力学方程可以看出,抑菌圈的大小受扩散系数、扩散时间、抗生素的总量、培养基的厚度及最低抑菌浓度     

抗菌活性(药效学)监察模式

根据临床分离致病菌药敏(K-B法)试验中测得抑菌圈面积均值与标准菌株(如金葡菌ATCC 25923、大肠杆菌ATCC 25922、绿脓杆菌ATCC 27853等临床检验质控菌株)测得抑菌圈面积之均值相比较,求算抗生素抗菌活性(药效学)的定量值F,从群体测得之数据评估药效。     

乙酰螺旋霉素片微生物检定条件的改进

乙酰螺旋霉素为大环内脂类抗生素,不良反应少,毒性低,在组织中药物浓度高[1],所以在临床上很受欢迎.其含量测定在现行版药典中采用微生物检定法[2],以枯草牙孢杆菌为检定菌,在实际工作中,常因高剂量抑菌圈直径较小,达不到中国药典[3]的要求,同时抑菌圈边缘较粗糙,致使可信限率大,重试率高.为解决上述问题,我们对检定条件进行了改进,以藤黄微球菌为检定菌,经过多次试验,取得了满意的结果.     

中国药典抗生素微生物检定上层培养基中加菌量的研究

首次对中国药典抗生素微生物检定法中试验菌为藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌所检定抗生素品种的上层培养基中的加菌量进行了较为系统的研究。实验表明以规定原菌液的透光率和稀释数即可直接获得符合药典规定的抑菌圈大小，方法简便可靠、易于规范化统一操作。     

庆大霉素与阿奇霉素联用方式的实验考察

目的:通过实验证实静止期杀菌剂和抑菌剂联用的效果及联用方式,以期降低细菌内毒素的释放量,改善临床感染症状.方法:采用微生物井式扩散法,在无菌条件下,用短小芽胞杆菌作菌悬液,庆大霉素、阿奇霉素标准品为模型药物,测定两者合用后的抑菌圈.结果:两种抗生素联用后的抑菌圈比庆大霉素单用的抑菌圈大(P<0.01).结论:静止期杀菌剂和抑菌剂联用可增强静止期杀菌剂的杀菌效果,先用抑菌剂后用静止期杀菌剂的效果优于两者同时应用.     

抗生素微生物检定中抑菌圈测量法的改进

为提高抗生素微生物检定中抑菌圈的测量精度，确保检验结果的准确性．对普通的游标卡尺进行改进，并特制了一种方便抑菌圈测量的效价台．     

浅析抗生素药品效价生物检定法的影响因素

抗生素的微生物检定法——管蝶法是目前抗生素效价测定的国际通用方法，我国药典也采用此法。该法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，采用量仅应平行线原理的设计，比较标准品与供试品两对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种方法。抗生素效价测定，是一门综合学科的应用科学技     

微生物法检测乌兰浩特地区动物源性食品的新霉素残留

目的:控制和减少动物源性食品的新霉素残留.方法:微生物法,利用抗生素类药物对微生物的抑制作用,利用抑菌圈与药物浓度的线性关系而做出的定量分析.结果:本次试验从乌兰浩特市几家市场选购了6种15个供试样品,其中药残呈阳性的有2例达到或超过我国规定的最低含量标准.如果按照欧盟2003年对动物性食品的进出口要求,仅有2例稍微低于该标准.结论:本方法可以有效检出动物源性食品的新霉素残留.     

提高稀释液浓度测定硫酸卡那霉素含量

目的：探讨按中国药典（2000年版）抗生素微生物检定法测定硫酸卡那霉素含量的最后稀释液浓度范围；方法：应用ZY－300IV型抗生素抑菌圈面积测量分析仪，测定硫酸卡那霉素抑菌圈面积与对数剂量的线性关系范围；结果：测定硫酸卡那霉素含量时，最后稀释液浓度范围在5.5-20.4IU/ml内对数剂量与抑菌圈面积呈直线关系。