RP-HPLC法测定蛹虫草人工固体培养物中虫草素的含量

目的 建立RP-HPLC法测定蛹虫草人工固体培养菌皮中虫草素的含量.方法 采用pH6.5磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相,流速为1.0mVmin,检测波长为260nm.结果 蛹虫草人工固体培养物-菌皮中主要成分虫草素在4.03～100.8μg/ml范围内线性关系良好,回归方程为A=39.58C-0.0342.结论 人工固体培养菌皮中虫草素的含量随培养时间发生一定的变化,RP-HPLC法可用于蛹虫草的人工培养物中虫草素的定量测定,为控制人工培养蛹虫草质量提供了简便易行的方法.     

复方蛹虫草颗粒虫草素含量测定研究

目的 建立复方蛹虫草颗粒中虫草素含量测定方法 .方法 采用高效液相色谱法测定复方蛹虫草颗粒中虫草素的含量,流动相为水-甲醇(88:12),流速为1mL/min,检测波长为260nm.结果 进样量在0.02～1.00μg范围内虫草素量与峰面积响应值呈良好的线性关系,r=0.999 9;平均回收率为101.05%,RSD为1.588%(n=6).结论 本方法 简便、准确,可作为该制刺的质控方法 .     

高速逆流色谱法分离制备淡豆豉中大豆素和染料木素

淡豆豉是经大豆Glycine maa T（L．）Merr．发酵而来的传统中药，其中所含的大豆异黄酮是该药主要活性成分之一。近年来的研究结果表明，大豆异黄酮是一类重要的生理活性物质，具有预防心血管疾病、防癌抗癌、治疗骨质疏松、降低妇女更年期综合症等功效。经发酵处理后大豆异黄酮中游离型苷元的质量分数明显提高，如大豆素和染料木素，而游离型大豆异黄酮比结合型大豆异黄酮具有更强的生物活性。因此，如何简便、快速从淡豆豉中分离制备大豆异黄酮苷元对进一步进行药效与作用机制研究、     

高速逆流色谱法分离制备丹参药材中丹参酚酸B成分

目的 应用高速逆流色谱分离制备丹参酚酸B.方法 应用正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水为两相溶剂系统,主机转速800r/min,流速2.0ml/min,检测波长为280 nm,所得产物经高效液相色谱法检测纯度大于95%.结果 从1 g丹参粗提物中分离得到了35 mg丹参酚酸B.结论 应用高速逆流色谱方法分离丹参中水溶性成份丹参酚酸B具有简便、快速的优点.     

高速逆流色谱分离制备红霉素A的溶剂系统的选择及优化

改变溶剂系统中各组分的比例、体系的温度、pH,通过测定分配系数和分层时间选择适宜于高速逆流色谱（HSCCC）分离红霉素A的溶剂系统。结果表明：适宜于HSCCC分离红霉素A的溶剂系统组成为V（正己烷）∶V（乙酸乙酯）∶V（甲醇）∶V（水）分别为3∶5∶5∶5,3∶6∶5∶5,4∶7∶5∶5,6∶10∶6∶5,5∶5∶4∶5,体系温度为20-30℃,体系pH为7-10。实践证明当pH=7,T=298 K时,选取3∶6∶5∶5的溶剂系统用HSCCC分离红霉素A,其纯度为99.99%。     

高速逆流色谱法从棉花花提取物中分离制备异槲皮素

目的 应用高速逆流色谱法分离制备异槲皮素。方法 对棉花花提取物用高速逆流色谱法一步分离纯化,以醋酸乙酯–水（1∶1）为两相溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速为800 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长254 nm,采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,薄层色谱、高效液相色谱法测定产品的纯度。结果 在该条件下经一步分离可得到质量分数为99%的异槲皮素对照品。结论 该方法操作简便,适合于从棉花花提取物中分离制备异槲皮素对照品。     

高速逆流色谱法从多花蒿中分离制备阿格拉宾

目的 采用高速逆流色谱法分离制备多花蒿中阿格拉宾。方法 多花蒿乙醇提取物经硅胶柱色谱分离，所得组份Fr. 1用高速逆流色谱进一步分离，采用正己烷–醋酸乙酯–甲醇–水（1.2∶0.8∶1.5∶0.5）为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，主机转速850 r/min，体积流量2.0 mL/min，检测波长为254 nm。采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定，HPLC法测定产品的纯度。结果 从500 mg组分Fr. 1中得到260 mg质量分数为99.5%的阿格拉宾。结论 该方法操作简单，可用于阿格拉宾化学对照品的分离制备。     

高速逆流色谱分离制备龙胆中龙胆苷

目的：龙胆中龙胆苦苷的分离制备和含量测定。方法：采用HPLC测定龙胆中龙胆苦苷的含量和HSCCC分离制备龙胆苦苷;HPLC条件：以甲醇、0．1％磷酸溶液（甲醇：0．1％磷酸溶液＝24：76）为流动相;流速1mL/min;检测波长270nm;进样量10μL,柱温25oC。结果：经测定,龙胆草中龙胆苦苷的含量为0．5411％。选出正丁醇-水（1：1）为最佳溶剂体系,固定相保留率36．0％,分配系数0．714,上相作固定相,下相作流动相,转速为850r/min,主机正转,流速2mL/min,分离制备出的龙胆苦苷经HPLC检测,纯度可达98％以上。结论：HSCCC仪器性能可靠、分析成本低、易于操作,可分离制备出高纯度的龙胆苦苷。     

用高速逆流色谱技术分离纯化莪术中的姜黄素

摘以莪术粗提物为原料，应用高速逆流色谱（HSCCC）技术，通过对制备分离方法和溶剂系统的筛选，采用溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水和正己烷-乙醚-乙醇-水，转速880r／min，流速1.5mL／min，进样量30mg，检测波长254nm，记录仪衰减为200，分离得到姜黄素。通过外标物的对照，^1H-NMR进行结构鉴定，HPLC进行纯度分析，确定得到的物质为姜黄素，纯度为94.069%。     

高速逆流色谱法分离纯化龙胆碱性乙醇提取物中的龙胆碱

[目的]建立从龙胆碱性乙醇提取物中分离龙胆碱的高速逆流色谱(HSCCC)方法。[方法]采用高速逆流色谱仪分离纯化龙胆碱性乙醇提取物中的龙胆碱,通过优化溶剂系统,以正己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(5∶5∶4∶6)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,仪器转速为850 r/min,流速为1.5 m L/min,温度为25℃,检测波长为280 nm。[结果]龙胆碱性乙醇提取物经过D151弱酸性阳离子交换树脂富集(20%乙醇洗脱部分),再采用HSCCC技术进行分离纯化,制备得到的98.8%纯度的龙胆碱。[结论]该方法稳定、回收率高,可高效地从龙胆碱性乙醇提取物中分离龙胆碱。     

高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明

目的 建立高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法。方法 使用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水（5∶5∶7∶3）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速800 r/min,温度25 ℃,固定相的保留率为50%,检测波长300 nm,对草豆蔻粗提物进行分离。结果 从100 mg草豆蔻粗提物中一步分离纯化得到17.2 mg山姜素和25.1 mg 小豆蔻明。经HPLC分析,质量分数分别为98.1%、99.2%,其化学结构由¹H-NMR和¹³C-NMR鉴定。结论 与传统的、存在不可逆吸附现象的柱色谱法相比,高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法具有简单、高效、回收率高等优点。     

蛹虫草菌丝体多糖对小鼠乳腺增生模型的影响

目的 观察蛹虫草菌丝体多糖对乳腺增生模型小鼠雌激素水平、免疫功能及病理形态改变的影响。方法 实验设对照组、模型组、蛹虫草菌丝体多糖组和乳康丸阳性对照组。采用苯甲酸雌二醇联合黄体酮制备小鼠乳腺增生模型。以放射免疫法检测小鼠血清雌二醇水平,计算子宫指数,观察小鼠免疫功能和病理形态。结果 与模型组比较,蛹虫草菌丝体多糖能够显著降低乳腺增生小鼠血清雌二醇水平、子宫指数（P＜0.05）,明显增加单核-巨噬细胞廓清指数、吞噬指数及脾脏指数（P＜0.05）,乳腺腺泡和导管的增生在一定程度上减少。结论 蛹虫草菌丝体多糖能够调节乳腺增生小鼠雌激素分泌,增强机体免疫能力,且有效抑制小鼠乳腺腺泡和导管的扩张及增生。     

硅胶柱色谱-高速逆流色谱法分离纯化羌活中佛手柑内酯

目的 以羌活的根和根茎为原料,建立硅胶柱色谱-高速逆流色谱（HSCCC）法制备分离羌活中佛手柑内酯的方法。方法 羌活粗提物先经过硅胶柱色谱初步分离,富集目标化合物;组分Q₅再经过HSCCC分离,以正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水（5∶5∶4∶5）为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相;经气-质及核磁共振氢谱、碳谱鉴定化合物的结构。结果 经过HSCCC分离后,从300 mg Q₅样品中一次性分离得到佛手柑内酯37.6 mg,经HPLC检测其质量分数达到99.1%。结论     

pH区带逆流色谱法分离制备荷叶中生物碱

目的 建立对荷叶生物碱进行分离的pH区带逆流色谱方法。方法 溶剂系统为叔丁基甲醚-甲醇-水（4∶1∶5）,上相添加三乙胺（10 mmol/L）作为固定相,下相添加盐酸（5 mmol/L）为流动相进行洗脱,在主机转速800 r/min、体积流量1.5 mL/min、检测波长254 nm条件下进行分离制备。结果 从2.18 g荷叶提取物中一次分离得到N-去甲荷叶碱110 mg、O-去甲荷叶碱420 mg、荷叶碱310 mg和莲碱190 mg 4种生物碱,质量分数均大于98%;各化合物通过HPLC、MS和¹H-NMR进行了化学结构鉴定。结论 pH区带逆流色谱法是一种快速高效的分离纯化荷叶生物碱的方法。     

硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法分离纯化丹参中丹参酮

目的 建立硅胶柱色谱结合高速逆流色谱（HSCCC）法分离纯化丹参中丹参酮的方法。方法 丹参粗提物经硅胶柱色谱分离,得到组分F1、F2,分别采用石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水（4∶3∶4∶2）、（8∶5∶8∶3）的溶剂系统进行HSCCC分离,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速850 r/min,检测波长254 nm,所得产物采用ESI-MS、NMR进行结构鉴定。结果 80 mg组分F1分离得到丹参酮I（14 mg）、二氢丹参酮I（22 mg）、丹参酮II_A（26 mg）;80 mg组分F2分离得到二氢丹参酮（11 mg）、三叶鼠尾酮B（15 mg）、隐丹参酮（30 mg）;6个化合物进行HPLC分析,质量分数均大于96%。结论 硅胶柱色谱结合HSCCC是一种有效的分离制备丹参酮的方法。     

基于rDNA ITS序列探讨我国冬虫夏草的遗传分化及分布格局

目的 探讨我国冬虫夏草的遗传分化及分布格局。方法 分析冬虫夏草rDNA ITS序列差异及构建分子系统树。结果 冬虫夏草ITS1-5.8S-ITS2序列在我国主要冬虫夏草产地21个居群间的差异较小,遗传距离仅为0～0.018。ITS1和ITS2序列中的GC的量与冬虫夏草居群的纬度呈极显著正相关,与居群的经度和海拔相关不显著。基于ITS序列的碱基变异将我国主要产地冬虫夏草分成4支,其地理位置与纬度有关,分别是环青海湖地区、青海中南部-甘肃-四川-西藏东北部区域、云南、西藏林芝米林地区。结论 基于rDNA ITS序列微小差异更能反映我国冬虫夏草资源在大尺度地理范围的分布格局,进一步证实了冬虫夏草的遗传分化主要发生于不同纬度间。     

制备液相色谱分离制备玉郎伞查尔酮类化合物

目的 对壮药玉郎伞查尔酮类化合物进行分离制备和结构鉴定。方法 利用制备液相色谱分离、制备查尔酮类化合物,经HPLC测定其质量分数、用UV,IR,MS,1D、2D-NMR,X射线单晶衍射等对其进行结构鉴定。结果 从玉郎伞中首次分离制备出两种查尔酮类化合物,其结构分别为cis-2, 6-二甲氧基查尔酮和cis-17-甲氧基-7-羟基-苯骈呋喃查尔酮。结论 该方法制备玉郎伞查尔酮类化合物质量分数很高,且简便、快速、可靠。     

鸡血藤中黄酮成分的高速逆流色谱分离及其抗肿瘤活性研究

目的 采用高速逆流色谱（HSCCC）技术分离纯化鸡血藤中的黄酮类抗肿瘤活性成分。方法 运用活性跟踪分离思路,优化制备型HSCCC分离条件,快速分离鸡血藤醋酸乙酯萃取物中的黄酮类单体化合物;根据理化性质和波谱方法（ESI-MS、UV、NMR等）鉴定化合物结构;采用MTT方法并结合细胞形态学观察评价化合物对人肺癌细胞A549的抗肿瘤活性。结果 利用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水四元两相溶剂体系,通过HSCCC法从鸡血藤醋酸乙酯萃取物中分离得到2个黄酮类成分,鉴定为甘草素（CS1）和刺芒柄花素（CS2）,HPLC峰面积归一化法分析二者的质量分数分别为93.6%和94.3%。MTT法抗肿瘤活性测定发现CS1对A549细胞显示增殖抑制活性,当质量浓度为200 μg/mL时对A549细胞的增殖抑制率为49.9%。结论 可以采用HSCCC技术分离纯化鸡血藤提取物中的黄酮类抗肿瘤活性成分,该方法快速、简便、经济,为鸡血藤活性成分研究提供了技术依据。