应用骨髓基质干细胞修复骨缺损的研究进展

骨髓基质干细胞具有明确的成骨潜能，是骨愈合过程中骨化的重要细胞，它具有来源丰富，采集方便，容易在体外培养，诱导，扩增的特点，是组织工程化骨理想的种子细胞，该细胞在体外培养具有较强的传代增殖能力，外源目的基因易于导入，因此也是骨缺损基因治疗较为理想的靶细胞，本文就应用骨髓基质干细胞作为细胞工程化骨的种子细胞和基因治疗的靶细胞来修复骨缺损的进展作一综述。     

骨髓间质干细胞人工骨构建的实验研究

目的 本实验分析体外构建细胞性组织工程化人工骨的可能性。方法 采用兔骨髓间质干细胞，经体外扩增培养并诱导分化为具有成骨能力的种子细胞，再与生物可降解材料ε-己内酯与环氧乙烷共聚物复合培养，在体外构建人工骨。通过电镜观察和组织学切片观察来评价可降解材料与种子细胞的复合培养的效果。结果 骨髓间质干细胞可在体外扩增培养；骨髓间质干细胞在条件培养液的诱导下，可以定向分化为具有成骨能力的细胞类型。诱导分化后的骨髓间质干细胞可在生物可降解材料ε-己内酯与环氧乙烷共聚物上黏附和铺展。结论 骨髓间质干细胞可在体外传代扩增培养，并可在一定条件下向成骨类型细胞转化，可作为骨组织工程种子细胞。己内酯与环氧乙烷的共聚物与种子细胞相容性好，可作为组织工程用的细胞支架材料。在体外，生物可降解材料ε-己内酯与环氧乙烷共聚物与种子细胞复合培养后可以构建出具有活细胞成分的组织工程骨。     

兔骨髓基质干细胞自体嚼肌内移植异位成骨实验研究

目的：观察骨髓基质干细胞成骨向分化诱导后植入嚼肌内异位成骨的过程。方法：从兔髂骨分离骨髓基质干细胞,经体外诱导分化,与磷酸三钙／羟基磷灰石（tricalcium phosphate／hydroxyapatite,TCP／HA）支架复合,植入兔自体嚼肌内,形态学、免疫细胞化学、组织学观察其成骨特征。结果：体外培养的兔骨髓基质干细胞性状稳定,经矿化诱导培养的骨髓基质干细胞表现为成骨细胞分化,表达Ⅰ型胶原蛋白,与支架材料复合植入自体嚼肌内可见成熟骨组织形成。结论：利用骨髓基质干细胞为种子细胞植入嚼肌内开展功能性组织工程化颌骨移植方法可行。     

骨髓间充质干细胞与骨相关研究

骨髓间充质干细胞具有向成骨细胞分化的潜能。骨髓间充质干细胞可体外分离、培养和扩增,可作为骨组织工程的种子细胞治疗骨相关疾病及作为载体用于基因治疗。本文综述了骨髓间充质干细胞在骨相关研究中的应用。     

人骨形成蛋白4基因修饰的组织工程化骨的实验研究

目的　探讨基因治疗与组织工程方法相结合促进成骨的效果。方法　应用亚克隆法构建真核表达载体 pEGFP hBMP 4。贴壁法培养兔骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,bMSCs) ,体外转染pEGFP hBMP 4 ,pEGFP基因并留置空白对照 ,以天然型无机骨为支架材料 ,分别构建组织工程化骨 ,植入裸鼠皮下 (每组 6例 ) ,4周取材 ,进行组织学及新骨成骨面积定量分析。结果成功构建了序列完全正确的 pEGFP hBMP 4表达载体。bMSCs可以在天然型无机骨支架网孔内表面贴壁生长。裸鼠体内实验表明术后 4周转染pEGFP hBMP 4基因组支架材料中已大部由新骨充满 ,新骨面积大于对照组 (P <0 0 5 )。结论　应用hBMP 4基因转染的bMSCs作为种子细胞构建组织工程化骨 ,可望为骨缺损的修复提供一种更为理想的方法     

BMP2诱导骨骼肌成骨的研究进展

20世纪90年代以来，组织工程技术不断发展，在组织工程化骨领域取得了较大进展，然而，迄今为止，组织工程化骨修复缺损，离临床的要求还有较大距离。目前认为，主要问题是种子细胞在一定传代后发生衰老而不能继续增殖。骨组织工程种子细胞多集中在骨髓基质干细胞的研究上，实际上机体骨髓中所含的基质干细胞数量非常有限^[1]，     

骨髓间充质干细胞与骨相关研究

骨髓间充质干细胞具有向成骨细胞分化的潜能。骨髓间充质干细胞可体外分离、培养和扩增，可作为骨组织工程的种子细胞治疗骨相关疾病及作为载体用于基因治疗。本文综述了骨髓间充质干细胞在骨相关研究中的应用。     

兔骨髓基质干细胞骨向诱导实验研究

目的:研究兔骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)的体外培养以及骨向诱导分化情况,进一步探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:无菌条件下抽取兔的股骨骨髓,然后进行骨髓基质干细胞的分离和体外培养,并向成骨细胞定向诱导分化。结果:体外分离的骨髓基质细胞呈贴壁生长,改良MTT法测定显示骨髓基质细胞于第7.8天左右可达到增殖高峰;诱导后BMSC可向成骨细胞分化,细胞呈成骨细胞形态为梭形和多角形并可形成钙化结节。改良钙钴染色法检测诱导细胞碱性磷酸活性呈强阳性。扫描电镜观察细胞呈较典型的成骨细胞状态,并可见钙盐沉积。结论:骨髓基质细胞具有来源充足,取材方便,创伤小无明显并发症。骨髓基质干细胞分化增殖能力较强,成骨能力确定。所以采用骨髓基质细胞作为种子细胞构建组织工程骨有比较可靠的依据。     

间充质干细胞分化成骨的研究

从骨髓中分离得到的间充质干细胞是具有多向分化潜能的原始骨髓细胞,在特定的条件下可以向骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和骨髓基质细胞等转化。其在体外培养扩增时具有稳定的表型和独特的细胞化学特性。在某些生长因子或细胞因子的作用下,间充质干细胞可定向诱导分化为成骨细胞,这为组织工程修复骨缺损提供了一种新的治疗模式。     

基因修饰的组织工程化骨研究进展

利用促进成骨的蛋白多肽基因转染体外培养扩增的种子细胞,构建基因修饰的组织工程化骨。通过种子细胞表达基因产物,可有效地促进新骨的形成,为骨缺损的修复提供一种理想的方法。本文就基因修饰组织工程化骨的构建及其促进成骨的研究作一综述。     

骨髓基质细胞与骨骼疾病的关系

骨髓基质细胞是指从骨髓中分离出来后,在体外长期的细胞培养中能够附着生长的、非造血系统源的细胞。它具有多种分化潜能,是一种基质干细胞。骨髓基质细胞与骨的形成密切相关,对其研究不但可以深入地了解骨代谢机制和骨内稳定的机理,并对骨疾病的基因治疗以及口腔疾病的防治均有裨益。     

基因修饰的组织工程化骨研究进展

利用促进成骨的蛋白多肽基因转染体外培养扩增的种子细胞，构建基因修饰的组织工程化骨，通过种子细胞表达基因产物，可有效地促进新骨的形成，为骨缺损的修复提供一种理想的方法。本文就基因修饰组织工程化骨的构建及其促进成骨的研究作一综述。     

骨髓基质细胞与骨骼疾病的关系

骨髓基质细胞是指从骨髓中分离出来后，在体外长期的细胞培养中能够附着生长的、非造血系统源的细胞。它具有多种分化潜能，是一种基质干细胞。骨髓基质细胞与骨的形成密切相关，对其研究不但可以深入地了解骨代谢机制和骨内稳定的机理，并对骨疾病的基因治疗以及口腔疾病的防治均有裨益。     

兔骨髓基质干细胞培养及鉴定

目的：对新西兰大白兔骨髓基质干细胞（BMSCs）进行体外培养及扩增,观察其原代及传代细胞的生长特点及生物学特点,获得足够量的细胞用于材料细胞相容性实验。方法：骨髓髓腔冲洗获得新西兰大白兔幼兔股骨骨髓,用全骨髓培养法进行体外培养获得BMSCs,胰酶消化传代,用条件培养基培养传代细胞。逐日倒置显微镜观察细胞生长情况,对传代细胞进行HE染色和碱性磷酸酶（ALP）染色。结果：幼兔骨髓基质干细胞体外培养生长良好,原代细胞约2周汇成单层,传代后1周左右长满瓶底。HE染色光镜下观察见兔骨髓基质干细胞为单核细胞,细胞呈梭形或不规则长多边形,传代细胞碱性磷酸酶染色呈强阳性。结论：兔骨髓基质干细胞的体外增殖能力强,可诱导为成骨细胞,可作为骨缺损材料细胞相容性研究的受试细胞。并且可以作为骨组织工程的种子细胞。     

大鼠骨髓基质细胞与胶原复合后修复牙槽骨缺损的研究

目的：探寻以大鼠骨髓基质细胞为种子细胞和胶原复合物为支架材料,构建组织工程骨的原理和方法修复齿槽骨缺损。方法：将SD大鼠骨髓基质细胞（Bone Marrows Stromal Cell,BMSc）进行体外培养并利用矿化液诱导为成骨样细胞,加入胶原（collagen）培养1d后,植入大鼠下颌骨缺损处,2周和4周后处死,取其下颌骨切片,观察成骨效应。结果：术后2周实验侧缺损区可见骨小梁形成,而对照侧无明显骨修复,4周后实验侧新骨形成量逐渐增加,而对照侧只有一些纤维组织修复。HE染色和mallory三色法染色结果也表明实验侧有新骨形成且逐渐增多。结论：应用胶原加体外诱导的成骨样细胞复合体移植可修复大鼠自体的牙槽骨缺损,为组织工程化骨在颌面外科及修复科领域的临床应用奠定了基础。     

大鼠骨髓基质干细胞体外培养及成骨作用的实验研究

目的研究大鼠骨髓基质干细胞在体外条件培养下的成骨能力，为骨组织工程选择理想的种子细胞来源。方法取大鼠骨髓基质干细胞进行体外培养，用倒置相差显微镜、钙染色、扫描电镜和X线能谱等手段观察细胞的生长情况和矿化能力。结果细胞呈贴壁型生长，形态为梭形或多角形，在条件培养液中这些细胞间不发生接触抑制，而是相互重叠成多层，形成钙化结节，与成骨细胞的特点相符合。碱性磷酸酶染色呈强阳性，结节钙染色阳性，X线能谱分析显示结节的主要组成元素为钙和磷。结论体外培养的大鼠骨髓基质干细胞具有与成骨细胞相似的形态特征，并能在体外形成钙化的新骨结节。     

骨髓基质干细胞及其在骨组织工程中的应用研究进展

<正>随着骨组织工程研究的不断深入，其应用前景越来越广阔，而种子细胞的研究作为骨组织工程的一个重要方面也越来越受到重视。种子细胞的种类很多，主要有骨髓基质干细胞、成骨细胞、成纤维细胞、胚胎干细胞等，骨髓基质干细胞因其具有取材方便，对机体损伤小，体外培养增殖力强，易于向成骨细胞分化，且成骨性能稳定等特点而逐渐成为研究的热点。 1 概述 早在一个多世纪前Cohnheim就提出骨髓基质中存在有向非造血系统多向化的干细胞，以维持基质系统的代谢平衡。但这一设想直到20世纪六七     

口腔组织病理学

rhBMP-2诱导成肌细胞表达成骨表型的研究，应用牙龈角质细胞构建组织工程化牙龈的实验研究，苯丙芘诱导口腔上皮细胞癌变过程的差异基因表达谱分析，口腔鳞癌细胞FasL表达对肿瘤浸润淋巴细胞及癌细胞凋亡的影响，人乳牙牙髓干细胞的体外培养观察，氯化镧对体外培养的犬骨髓基质细胞增殖的影响.[编者按]     

颌骨骨髓基质细胞与牙周膜细胞的生物学特性比较

目的:比较颌骨骨髓基质细胞与牙周膜细胞的基本生物学特性。方法:分离颌骨来源骨髓基质细胞和牙周膜细胞,进行改良体外原代培养。倒置显微镜观察细胞生长及克隆形成情况;CCK-8检测细胞生长曲线;免疫荧光染色检测STR0-1表达;成脂诱导后检测脂滴形成,矿化诱导后检测碱性磷酸酶的变化并用RT-PCR检测7、14 d成骨相关基因OCN的表达水平。结果:两种细胞体外培养均呈成纤维样细胞外形,能克隆生长,均具有活跃的增殖能力;两种细胞STR0-1表达阳性;成脂诱导后可见脂滴形成;矿化诱导后骨髓基质细胞的碱性磷酸酶活性较强,而且OCN基因表达较早且较强。结论:颌骨来源骨髓基质细胞具有较强的增殖及成骨分化能力,具有干细胞特性,可能是有较大临床应用潜力的组织工程种子细胞。     

组织工程骨修复9例颅骨缺损畸形初步报道

目的：探讨利用自体骨髓间充质干细胞（BMSC）作为种子细胞的组织工程骨修复外伤后颅骨缺损畸形的可行性。方法：运用自体BMSC组织工程骨技术,对9例外伤术后颅骨缺损患者行颅骨修复手术。抽取患者自体骨髓,密度梯度离心法分离BMSC,经体外扩增和成骨诱导后,接种部分脱钙骨支架材料,构建组织工程骨。细胞材料复合物体外共培养1周后,手术植入颅骨缺损区。分别于术后1周和3、6、12个月进行临床外形和三维CT检查,随访治疗效果。结果：术后1周三维CT显示,颅骨缺损区被所植入的组织工程骨填充,头颅外形明显改善。术后3至12个月CT显示,组织工程骨形成并修复颅骨缺损,新生骨与骨缺损断端融合。9例患者中2例术后失访,2例高龄患者及大面积骨缺损患者发生不同程度的组织工程骨吸收现象,其余均良好地修复了颅骨缺损。结论：通过选择适宜的病例,以自体BMSC作为种子细胞,运用组织工程技术可以在人体内形成稳定的组织工程化骨并修复颅骨缺损。