广州地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的研究

目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla相似文献   

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法细菌药敏试验采用琼脂纸片扩散法(K-B法)、双纸片协同试验及纸片扩散确诊试验检测ESBLs。结果大肠埃希菌中产ESBLs占25.0%,肺炎克雷伯菌中占28.8%;产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药,而对亚胺培南敏感,产ESBLs菌株对抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株。结论ESBLs是细菌对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药的重要机制,及时监测产ESBLs菌的发生率及耐药趋势,对指导临床用药至关重要。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的：了解临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的情况以及对常用抗生素的耐药现状,为临床合理用药提供依据。方法：对从病人标本中分离的373株菌株用WITEK-60全自动微生物鉴定仪及配套的GNI＋鉴定卡进行菌种鉴定;药敏试验采用K-B法,按美国临床实验室标准化委员会制定的标准判定结果。结果：本组共分离出大肠埃希菌244株,其中产ESBL菌株106株,检出率为43.4%;肺炎克雷伯菌129株,其中产ESBL菌株58株,检出率为45.0%。检出产ESBL菌株标本位于前5位的分别为中段尿液、痰、分泌物、胆汁及血液。产ESBL菌株较非产ESBL菌株对抗生素的耐药率高,除头孢他啶外,对第二、三代头孢菌素的耐药率均〉70%,对其他抗生素均存在不同程度的耐药,两者对亚胺培南-西拉司丁钠、美洛培南均100%敏感。结论：产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率高,耐药性强,临床应合理应用抗生素,以避免产ESBL菌株感染的暴发流行。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性检测

【目的】了解临床分离肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）产生情况及耐药性。【方法】用VITEK32型全自动细菌鉴定分析系统对临床标本中分离的123株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行鉴定，ESBLs采用双纸片扩散法检测，采用KB纸片法选用13种抗菌药物进行药敏分析。【结果】产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率分别为46．2％和40．5％，以呼吸道感染为主占50％。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高，对β一内酰胺类喹诺酮类和青霉素类抗生素几乎全部耐药，但对亚胺培南的敏感性为100％，对头孢西丁的敏感率〉60％。【结论】治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌首选是碳青霉烯类和头霉素类；应重视ESBLs的检测，合理使用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和催产克雷伯菌的耐药性分析

随着第三代头孢菌素在临床上的大量使用 ,产超广谱β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的菌株已愈来愈多 ,给临床感染性疾病的治疗带来一定困难。为了解本地ＥＳＢＬｓ菌株的分布和耐药情况 ,作者对本院近一年来分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和催产克雷伯菌进行了ＥＳＢＬｓ的检测和药敏分析 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　菌株来源　 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 3月从本院门诊和病房患者标本中分离出来的 96株大肠埃希菌、5 9株肺炎克雷伯菌和 32株催产克雷伯菌。1.2　药敏分析　头孢他啶 (ＣＡＺ) 30 μｇ/片 ;ＣＡＺ30 μｇ/片 /克拉维酸 (ｃ…     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性研究

目的:超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性调查,更好的指导临床用药。方法:应用双纸片协同试验法检测38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌的体外抗生素耐药性。结果:ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率为10.3％,产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢噻肟、头孢曲松、头孢唑琳、耐药率高达93％,所有受试菌对亚胺培南均敏感。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌引起的感染,治疗应首选亚胺培南、头孢西汀,其次为β-内酰胺酶抑制剂复合制剂。     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测分析

目的 监测并分析该医院2004年1～12月间产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性变化,为临床合理使用抗菌药物提供指导。方法 对2004年1～12月从该院临床送检的各类标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片琼脂扩散法（K-B法）与Vitek-AMS的GNS卡Mic法相结合进行药敏试验,并严格按照CLSI／NCCLS（美国临床实验室标准化研究所／美国临床实验室标准化委员会）推荐的标准方法检测ESBLs菌株。结果 分离的498株大肠埃希菌中,产ESBLs的有196株,占39．4％;311株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs的有91株,占29．3％。产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类、单环β-内酰胺类、氨基糖甙类、氟喹诺酮类等抗菌药物产生多重耐药性;ESBLs菌株的耐药性显著高于非ESBLs菌株（P〈0．05）,但对亚胺培南都显示高度敏感性。结论 产ESBLs菌株的感染已成为临床抗感染治疗的难题,临床在抗感染治疗过程中,应严格掌握抗菌药物的应用指标,特别加强对产ESBLs菌株的耐药性监测,合理使用各种抗菌药物,以防止ESBLs菌株的增长、扩散与流行。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测

目的 选择和适用于检测产超广谱β－内酰安酶（ＥＳＢＬｓ）临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法 临床分离的１１０株大肠埃希菌和８４株肺炎克雷伯菌经初筛试验,用浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）、单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验,比较５种方法的检出率极度其差异。结果 Ｅｔｅｓｔ法对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异（Ｐ〈０．０１）,肺炎克雷伯菌的检出率（４／２０）有显低于大肠埃希菌（１６／２６）;单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高（１６／２６、１２／２０）。检测产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌时,除氨 苄西林双纸片协同法（８／２６）检出率低以外,其他４种方法的检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５）,５种方法有较好的一致性。检测产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌时,单纤片扩散法加克     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用纸片扩散法进行药敏试验并用WHONET5.3软件分析细菌分布和耐药性.结果 该院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌从2005年的38.6%和35.1%上升为2009年的59.2%和58.6...     

中国部分地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶基因型研究

目的了解中国产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布。方法收集北京、浙江、新疆及郑州等共400株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，采用接合试验，聚合酶链反应，克隆测序等方法明确ESBLs基因型。结果400株细菌中356株细菌ESBLs的基因型明确。其中328株细菌产1种ESBLs，主要为CTX-M型，包括CTX-M-14型ESBLs占52．25％，CTX-M-3型占14、25％，CTX-M-24型占7．25％，CTX-M-22型占2％，CTX-M-28和CTX-M-9型分别占0．75％，CTX-M-13、CTX-M-27和CTX-M-29型各占0．25％；其次为SHV型，其中SHV-12占2．5％(10／400)，SHV-5占1．00％，SHV-2占0．5％。28株细菌同时携带2种或3种ESBLs，占7．00％(28／400)，其中以同时产CTX-M-14和CTX-M-3最常见。结论中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX-M-14型为主；其次为CTX-M-3型，部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs。     

2010年CLSI三代头孢菌素折点改变对我国大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌药物敏感性结果解释的评估

目的评估2010年CLSI M100-S20(S20)及2009年CLSI M100-S19(S19)文件中CAZ、CTX、CRO新旧折点变化对我国如何解释产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌体外药物敏感性试验结果的影响.方法收集2005-2007年中国15家医院SEANIR监测项目中3种细菌琼脂稀释法药敏结果,用PCR-基因序列分析法和(或)药敏表型分析法去除产AmpC酶的菌株.用CLSI琼脂稀释法确定ESBL表型.3种抗菌药物对2 733株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的敏感性用WHONET5.4软件分别按S19和S20折点进行回顾性分析.对北京协和医院同时有琼脂稀释法和纸片扩散法药敏结果的207株3种肠杆菌科细菌用WHONET5.4软件进行散点图和回归性分析,观察S19和S20折点下3种抗菌药物两种方法的相关性.结果产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对CTX的耐药率分别由S19折点(64μg/m1)下的65.2%、55.5%和14.6%上升为S20折点(4 μg/ml)下的99.7%、96.2%和93.8%,敏感率则由S19折点(8 μg/ml)下的6.0%、11.5%和33.3%下降至S20折点(1μg/ml)下的0%、0.2%和0%.CRO的结果与CTX相近.虽然在我国产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对CAZ的敏感率比CTX和CRO高,它们的耐药率也由S19折点(32μg/ml)下的30.3%和43.2%升为S20折点(16μg/ml)下的41.9%和55.9%,敏感率则由S19折点(8μg/ml)下的58.1%和44.1%降至S20折点(4 μg/m1)下的44.7%和28.0%.不产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌在CTX、CRO和CAZ新旧折点下的敏感率为99.2%～100.0%,耐药率为0%～0.4%.琼脂稀释法CTX和CRO S20折点与ESBL表型分布具有良好的对应关系;琼脂稀释法和纸片扩散法回归性分析得CAZ、CTX和CRO的r值分别为0.67、0.79和0.77,P均＜0.01,S20与S19相比,纸片扩散法药敏正确分类均在可接受范围内.结论应用S20 CTX和CRO的新折点,药敏结果与ESBL检测结果一致性大大提高,临床医生可根据药敏结果结合临床情况合理选择抗菌药物,细菌室可不报告ESBL表型情况.S20 CAZ新折点与我国临床治疗结局相关性还有待进一步评估.     

头孢米诺等抗菌药物对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及拟杆菌属的体外抗菌活性

目的 比较头孢米诺等抗菌药物对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、拟杆菌属的体外抗菌活性.方法 琼脂稀释法测定16种抗菌药物对来自全国15家教学医院的945株大肠埃希菌和588株肺炎克雷伯菌的MIC值以及4种抗菌药物对50株拟杆菌属的MIC值.WHONET 5.4软件进行药敏数据统计分析.结果 1 533株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,不产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamases,ESBLs)和AmpC 628株,837株仅产ESBLs,68株产AmpC.头孢米诺对不产ESBLs或单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌敏感率均高于90%,其MIC_(50)较头孢美唑低2～4倍,较头孢西丁低8～16倍;MIC90较头孢美唑低2～8倍,较头孢西丁低8～16倍.对单产ESBLs的菌株,头孢米诺体外抗菌活性优于第三、四代头孢菌素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、左氧氟沙星和阿米卡星,劣于碳青霉烯类药物,活性与哌拉丙林/三唑巴坦相仿.但对产AmpC的菌株,头孢米诺的敏感率低于20%.头孢米诺对拟杆菌属的敏感率为90%,高于头孢美唑(50%～70%)和青霉素(0%),活性与甲硝唑相仿.结论 头孢米诺对产ESBLs及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌以及拟杆菌属有良好的体外抗菌活性,提示头孢米诺可为临床治疗此类菌株感染提供一种选择.     

皖江地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型及耐药性分析凌华志简

目的 研究安徽省芜湖及宿州两地临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率、基因型分布及对抗菌药物的耐药性.方法 收集两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs确证试验;采用PCR法对产ESBLs株进行β内酰胺酶基因的扩增;微量稀释法测定产ESBLs株对13种抗菌药物的耐药率.结果 两地大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率的差异均无统计学意义（P＞0.05）,但基因型存在一定差异.bla（TEM）＋bla（CTX-M-13）是最常见的基因检出模式.两地产ESBLs株对抗菌药物表现出不同的耐药率,但对亚胺培南和美洛培南均100％敏感.结论 芜湖和宿州地区产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌存在较严重的抗菌药物选择性压力;酶抑制剂复合制剂及碳青酶烯类是治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的理想药物.     

联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的影响

目的 探讨联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应,寻找有效的组合方案.方法 收集2008 -2009年分离自浙江大学医学院附属第一医院,宁波李惠利医院、浙江省人民医院、杭州市第三医院、绍兴市第二医院、杭州市第一医院、复旦大学附属华山医院、南京军区总医院等8家医院确证产KPC-2酶的24株肺炎克雷伯菌,采用MLST技术分型,琼脂稀释法测定阿米卡星、米诺环素、亚胺培南、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶、美罗培南、庆大霉素、头孢西丁、头孢吡肟、利福平、多黏菌素B、环丙沙星对24株菌株的MIC值,Etest测定替加环素、哌拉西林/三唑巴坦的MIC值.采用棋盘琼脂稀释法测定头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟联合阿米卡星、环丙沙星联合阿米卡星、环丙沙星联合头孢吡肟、亚胺培南联合阿米卡星、亚胺培南联合环丙沙星、亚胺培南联合多黏菌素B、亚胺培南联合米诺环素、多黏菌素B联合利福平、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸对菌株的抑菌效果.结果 24株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌分为5个ST型,其中ST11型是最主要的克隆群(15株).菌株对多黏菌素B、替加环素均敏感,对米诺环素耐药率为4.2％.最佳组合方案为头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用有19株;其次为亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用均为13株.结论 产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对替加环素、多黏菌素B、米诺环素较敏感,头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸在体外以协同作用为主,其疗效值得临床进一步观察.     

2005年中国CHINET大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解我国主要地区医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法国内8所较有代表性的综合性医院按统一方案、统一方法(Kirby-Bauer法)和判断标准(CLSI2005版)进行细菌耐药性监测。结果临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为38.9%(20%～57%)、40.5%(13%～70%),各所医院检出率有较大差异。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,耐药率为0～3%,有4所医院出现了对碳青霉烯类抗生素耐药株。大肠埃希菌产ESBLs株对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星耐药率<20%,而肺炎克雷伯菌产ESBLs株对其耐药率>50%。大肠埃希菌ESBLs阴性株对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、庆大霉素和复方磺胺甲噁唑耐药率>50%,肺炎克雷伯菌非产ESBLs株对氨苄西林高度耐药。不同医院产ESBLs细菌对同一药物的耐药率有较大差异。结论不同医院耐药性各具特点。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素仍最敏感,但已出现少数耐药株,应重视对其耐药机制的研究。     

VITEK-2 AST-GN13药敏卡检测产超广谱β-内酰胺酶菌的可靠性研究

目的评价VITEK-2 AST-GN13药敏卡检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的可靠性。方法用VITEK-2 AST-GN13测定376株肠杆菌科菌(包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌),同时用美国临床实验室标准化委员会(2009年第19版)推荐的双纸片确证法进行对照。结果检出产ESBLs菌160株,仪器法和双纸片确证法检测ESBLs菌株阳性率分别为42.6%和39.4%,两种方法对产ESBLs株的检测结果经χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05)。结论提高产ESBLs菌株的阳性检出率及准确性具有重要意义,VITEK-2 AST-GN13药敏卡检测产ESBLs菌株结果可靠。