从海洋生物中挖掘的良药——话说脱氧核苷酸钠

变废为宝 20世纪70年代，国内生化研究常用的一种基础材料——脱氧核苷酸在国内的生产是一片空白，都要从国外进口，文献提示小牛胸腺中含有极为丰富的脱氧核糖核酸（DNA），DNA的进一步分解产物即为脱氧核苷酸。牛奶公司的小公牛（除了极少数留做种牛）年年被大批廉价处理掉，小牛胸腺更是完全废弃不用。这是个极好的变废为宝的机会。一个个不眠之夜。一次次的试验，这几个年轻人终于成功地从小牛胸腺里提取出了具有一定纯度的DNA，并水解成脱氧核苷酸单体。自此，中国有了自己提取的脱氧核苷酸。     

不同方法同步检测乙型肝炎病毒结果分析

乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)由小分子、中分子、大分子三种蛋白分子组成 ,HBsAg存在于完整的病毒颗粒、球状空壳颗粒和棒状颗粒中 ,后二者由于不含DNA ,所以不具有传染性。乙肝病毒前S1(Pre S1)位于大分子蛋白的N末端 ,只存在于完整的病毒颗粒 (Dane颗粒 )上 ,其免疫原性比HBsAg强 ,作为HBV传染性标志Pre S1比HBsAg意义更大。HBV DNA阳性表明有HBV活动性复制 ,血循环中存在完整的病毒颗粒 ,传染性强。我们采用ELISA法和PCR法同步测定Pre S1、乙肝五项、HBV DNA ,并对结果进行分析。1　材料与方法1 1　标本来源　 2 0 0 2…     

核糖核酸酶解产物抗鸭乙型肝炎病毒作用的研究

研究了核糖核酸酶解产物的体内抗鸭乙肝病毒作用和体外对鸭乙型肝炎病毒DNA聚合酶(DHBV DNAP)和逆转录酶(DHBV RT)活性的抑制作用.通过给2日龄鸭接种鸭乙肝病毒阳性血清,造成鸭乙肝模型,采用3H标记方法测定药物对鸭乙型肝炎病毒DNA聚合酶和逆转录酶活性的抑制作用.结果发现,生理盐水对照组DHBV DNA滴度水平稳定,除2例自然转阴外,其余均保持较高的阳性水平.经混合核苷酸(150、300 mg/kg,po)、无环鸟苷(25 mg/kg)、拉米夫定(100mg/kg)治疗后7d、15d,DHBV DNA滴度水平明显下降(P＜0.05).300 mg/kg混合核苷酸组转阴率分别达50%和70%,停药后7d,DHBV DNA滴度水平明显回升,但仍保持较低水平,转阴率为60%.混合核苷酸抗DHBV作用略强于无环鸟苷,弱于拉米夫定,但两者之间无显著性差异.高剂量混合核苷酸(100 mg/L)对DHBV DNAP和DHBV RT的抑制百分率分别达78.2%、88.5%,对DHBV DNAP的抑制作用更强.     

基因突变的元间数学描述

本文应用元间数学及作者新提出的元间数第二减法规则,描述并分析了有序的DNA大分子的四种结构性突变。元间数学量由秩和序两部分构成。元间数学量与DNA大分子一级结构序列成一一对应关系。用传统的申农定义的信息量来度量DNA包含的线性信息量,丢掉了一大部分信息。申农信息熵只考虑了元间数学量秩部分含有的由核苷酸数目决定的信息量,丢掉了元间序中含有的关于核苷酸排列顺序的信息量。元间数学能较完好地描述和分析有序的DNA大分子,且易于用计算机处理。     

弱精子症病人精子线粒体DNA 4977-bp缺失分析

人线粒体DNA(mt DNA)为16569bp的闭环双链DNA分子。它的全部核苷酸序列已经清楚,其完整的限制酶谱及mt DNA的RFLP资料也已建立,但mtDNA突变与人类疾病的研究却远远落后于人们对核DNA异常引起的遗传病的认识。近年来,随着PCR技术的应用和发展,mtDNA的研究有了突破性进展,1988年Wallace等人首次     

CpG基序的免疫效果和作用机理

不同于脊椎动物的DNA,细菌DNA含有高得多的非甲基化CpG二核苷酸,具体说是称为"CpG基序"的碱基成分.脊椎动物的免疫系统看来可能有一种进化的将"CpG基序"视为外源物质的识别分子,能激发机体产生强烈偏向Th1型的保护性免疫应答.这些应答可以用合成的寡脱氧核糖核苷酸(ODN)来模拟,实验表明,ODN在疫苗佐剂和肿瘤及变态反应的免疫治疗方面有很大的应用潜力.     

CpG基序的免疫效果和作用机理

不同于脊椎动的DNA,细胞DNA含有高得多的非甲基化CpG二核苷酸,具体说是称为“CpG基序”的碱基成分。脊椎动物的免疫系统看来可能有一种进化的将“CpG基序”视为外源物质的识别分子,能源发机体产物强烈偏向Th1型的保护性免疫应答。这些应答可以用合成的寡脱氧核糖核苷酸（ODN）来模拟,实验表明,ODN在疫苗佐剂和肿瘤及变态反应的免疫治疗方面有很大的应用潜力。     

037 基于HIV逆转录酶结构的新抑制剂设计和耐药机制的理解[英]／Ren JS／／Trend Pham Sci.

逆转录酶是一种多功能的异二聚体酶，除了RNA聚合酶H之外，它还通过催化依赖RNA和DNA的DNA聚合酶反应，将基因组HIV RNA转入前病毒DNA中。以HIV逆转录酶作为靶标的药物可分为两类，分别是核苷酸和核苷酸类似物逆转录酶抑制剂和非核苷酸逆转录酶抑制剂，     

脱氧核苷酸钠制剂的有关物质研究

目的建立HPLC法测定注射用脱氧核苷酸钠和脱氧核苷酸钠注射剂中的有关物质,并应用LC-MS/MS法推测有关物质结构。方法采用HPLC法测定2种脱氧核苷酸钠制剂中的有关物质。色谱柱为Agilent Zorbax SAX柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为浓度50 mmol·L-1的磷酸二氢钾溶液(取6.80 g磷酸二氢钾,加水800 m L,用磷酸调p H值至3.3,再加水稀释至1 000 m L),流速为0.6 m L·min-1,柱温为30℃,进样量为20μL,检测波长为258 nm。结果 2种脱氧核苷酸钠制剂中脱氧核糖胞嘧啶核苷酸钠(d CMP-Na)、脱氧核糖腺嘌呤核苷酸钠(d AMP-Na)、脱氧核糖胸腺嘧啶核苷酸钠(d TMP-Na)和脱氧核糖鸟嘌呤核苷酸钠(d GMP-Na)分别与其相邻色谱峰完全分离,测得的注射用脱氧核苷酸钠中最大单个有关物质百分含量均不大于2.0%,有关物质总量均不大于4.0%。脱氧核苷酸钠注射剂中最大单个有关物质百分含量平均大于30%,而有关物质总量更是达到79%以上。经质谱分析,推测注射用脱氧核苷酸钠有关物质为5-甲基胞嘧啶脱氧核糖核苷酸,脱氧核苷酸钠注射剂有关物质为胞嘧啶核糖核苷酸、尿嘧啶核糖核苷酸和鸟嘌呤核糖核苷酸。结论该方法简便,准确,专属性较好,适用于脱氧核苷酸钠制剂的质量分析,为脱氧核苷酸钠制剂临床用药的安全性改善提供参考。     

姊妹染色单体互换的方法学

姊妹染色单体互换(SCE)是在细胞培养过程中,加入一定量的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BUdR).在分裂细胞中,进行DNA复制时BUdR取替了胸腺嘧啶核苷,参入新复制DNA核苷酸链中.因此在处于第二分裂周期的细胞中,同一染色的两条姊妹染色单体,一条单股台BUdR的DNA链组成,另一条是由双股有BUdR的DNA链组成.由于双股都含有BudR     

新冠病毒变异比流感病毒慢

由于流感病毒经常变异,所以很难利用某一种疫苗进行永久性预防,也因此每年的流感疫苗都会不同。美国一项新研究显示,新冠病毒的变异速度远不如季节性流感病毒那么快。美国加州大学圣迭戈分校生物信息学及计算机科学与工程学副教授内埃玛·莫希里博士团队利用基因进化模型,尝试确定病毒最有可能的进化方向。DNA测序是探究DNA核苷酸序列结构单元的过程,主要用于疾病遗传学研究。新冠病毒是一种RNA(DNA的临时拷贝)病毒,这意味着利用DNA测序技术无法直接解码。     

输血相关病毒(TTV)研究的现状

在人类目前已认识的甲、乙、丙、丁、戊和庚型肝炎病毒(ＨＧＶ)之外 ,似存在其他的非甲～非庚型肝炎致病因子。1997年 12月 ,日本学者Ｎｉｓｈｉｚａｗａｅｔａｌ[1] 应用代表性区别分析 (ＲＤＡ)技术 ,从 1例输血后非甲～非庚型肝炎病人 (ＴＴ)血清中获得 1个新的ＤＮＡ病毒阳性克隆 (Ｎ2 2 ) ,将此病毒核苷酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ中已登记的序列比较 ,未发现相同的基因序列 ,分子流行病学的研究证实了Ｎ2 2 与输血后肝炎有一定的相关性 ,表明它有可能是一种新型的肝炎相关病毒 ,遂以病人名字命名为ＴＴ病毒 ,同时又与经输血传播病毒(Ｔｒ…     

聚合酶链反应实验室污染原因分析及排除方法

聚合酶链反应（PCR）技术可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或每10万个细胞中仅含有1个靶DNA分子的样品。因优势明显,PCR技术很快在人类疾病研究和诊断中得到广泛应用,但也由于这一方法具有极大的扩增能力、高度的特异性和检测的灵敏性,使得极微量的污染即可导致假阳性结果,     

药物小分子与DNA相互作用分析方法概述

DNA是生命活动中最基本的遗传物质,是基因表达和遗传变异的物质基础。DNA由平行堆积的碱基,聚合的阴离子磷酸骨架以及两条由核苷酸链形成的大沟、小沟共同组成了药物分子和蛋白质相互识别的位点。药物小分子与DNA相互作用的方式主要有三种：非共价结合、共价结合和剪切作用。非共价结合又以3种不同的方式进行：     

乙型肝炎病毒表面大蛋白检测结果临床分析

乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒,它的基因组较小,仅有3 200个核苷酸,负链DNA含有4个开放读码框(ORF),其中S基因编码3种外膜蛋白,包括主蛋白[即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)],中蛋白(即HBsAg和前S2蛋白)和大蛋白(HBSAg)、前S1蛋白和前S2蛋     

聚合酶链反应实验室污染原因分析及排除方法

聚合酶链反应(PCR)技术可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或每10万个细胞中仅含有1个靶DNA分子的样品[1]34-42.因优势明显,PCR技术很快在人类疾病研究和诊断中得到广泛应用,但也由于这一方法具有极大的扩增能力、高度的特异性和检测的灵敏性,使得极微量的污染即可导致假阳性结果[2,3],一旦发生污染极难消除干净.我院PCR实验室也曾遭遇气溶胶污染,经处理最终将污染清除.本文重点分析污染原因,并介绍排除方法.     

盐酸吉西他滨联合顺铂不同间隔用药的不良反应比较

盐酸吉西他滨(gemcitabine hydrochloride)商品名健择(Gemzar),化学名2'-脱氧-2',2'-盐酸二氟脱氧胞苷,是细胞周期特异性抗代谢类药物,主要作用于DNA合成期的肿瘤细胞,即S期细胞,在一定条件下,可以阻止G1期向S期的进展.吉西他滨作为一种前药在细胞内是脱氧胸苷激酶磷酸化的良好底物,在酶的作用下转化成下列代谢物:吉西他滨一磷酸盐(dFdCMP)、吉西他滨二磷酸盐(dFdCDP)和吉西他滨三磷酸盐(dFdCTP),其中dFdCDP和dFdCTP为活性产物.dFdCDP抑制核糖核苷酸还原酶,从而减少了DNA合成和修复所需要的脱氧核苷酸的量,尤其是三磷酸脱氧胞苷(dCTP)的量.     

注射用盐酸吉西他滨

【通用名】盐酸吉西他滨Gemcitabine【商品名】泽菲【规格】0·2 g/瓶;1·0 g/瓶。【作用机理】吉西他滨是一种脱氧胞苷的类似物,须在体内经脱氧胞苷激酶作用,在细胞内磷酸化形成二磷酸盐和三磷酸盐两种活性产物后,才能发挥细胞毒作用,主要的药理作用是细胞毒作用、自增强作用和掩蔽链终止。能使病人轻松渡过化疗期,无症状生存期延长。细胞毒作用:①减少DNA合成和修复所需的脱氧核苷酸的量。②与脱氧核苷酸竞争结合进入DNA链。引起DNA断裂、细胞死亡。自增强作用:①本品的二磷酸盐抑制了核苷酸还原酶,减少DNA合成所需的脱氧核苷酸的量…     

慢性粒细胞白血病——急性淋巴细胞变时出现TdT阳性病例报导

末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxyncleotidyl transferase 简称TdT)是一种不需模板的DNA聚合酶。正常条件下主要存在在胸腺组织的小淋巴细胞,其活性随着淋巴细胞的成熟分化而消失。近年来国内外     

抗病毒药物研究进展

人工合成的抗病毒药有小肽、反义核酸、核酶和脱氧核酶等，特别是脱氧核酶能裂解不同的靶RNA和DNA，可在体外作为特有的RNA序列核酸内切酶和在体内用作灭活靶细胞RNA。另一种是广谱抗病毒分子存在于自然界由特有的复合细菌菌株产生的，能特异性地裂解不同靶分子的广谱抗病毒分子生物药，如蛋白酶和DNA酶等的小分子物质。这种名为LPD酶的细菌代谢产物已经发现具有多靶位的选择性抗病毒功能。