脱氢表雄酮抗动脉粥样硬化机制的研究进展

随衰老而降低的脱氢表雄酮具有抗动脉粥样硬化作用。它可能具有调脂作用、抑制血管平滑肌细胞增殖作用、抗血小板聚集、抑制胶原和胶原基因表达、抑制从单核细胞分泌的白细胞介素6、对抗高胰岛素血症、提高细胞钙离子反应和血管松弛性而起抗动脉粥样硬化作用。     

脱氢表雄酮抗动脉粥样硬化机制的研究进展

随衰老而降低的脱氢表雄酮具有抗动脉粥样硬化作用.它可能具有调脂作用、抑制血管平滑肌细胞增殖作用、抗血小板聚集、抑制胶原和胶原基因表达、抑制从单核细胞分泌的白细胞介素6、对抗高胰岛素血症、提高细胞钙离子反应和血管松弛性而起抗动脉粥样硬化作用.     

三七总皂甙对人高脂血清诱发的胎儿血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

为观察三七总皂甙对高脂血清刺激的人胎儿血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。利用体外细胞培养技术 ,用人高脂血清造成血管平滑肌细胞增殖的模型并通过MTT测定、细胞计数及透射电镜下的细胞超微结构的观察等方法 ,观察了三七总皂甙对人胎儿血管平滑肌细胞的保护作用。结果发现 ,人高脂血清可明显刺激人胎儿血管平滑肌细胞的增殖并引起其表型的改变。而三七总皂甙可呈浓度依赖性地抑制血管平滑肌细胞的增殖并可显著抑制高脂血清对血管平滑肌细胞的促增殖作用。此结果提示 ,三七总皂甙的抗动脉粥样硬化作用可能部分是通过抑制血管平滑肌细胞异常增殖来实现的。     

三七总皂甙对人高脂血清诱发的胎儿血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

为观察三七总皂甙对高脂血清刺激的人胎儿血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。利用体外细胞培养技术,用人高脂血清造成血管平滑肌细胞增殖的模型并通过MTT测定、细胞计数及透射电镜下的细胞超微结构的观察等方法,观察了三七总皂甙对人胎儿血管平滑肌细胞的保护作用。结果发现,人高脂血清可明显刺激人胎儿血管平滑肌细胞的增殖并引起其表型的改变。而三七总皂甙可呈浓度依赖性地抑制血管平滑肌细胞的增殖并可显著抑制高脂血清对血管平滑肌细胞的促增殖作用。此结果提示,三七总皂甙的抗动脉粥样硬化作用可能部分是通过抑制血管平滑肌细胞异常增殖来实现的。     

曲尼司特对血管平滑肌细胞增殖及C-myc基因表达的影响

为探讨曲尼司特防治冠状动脉成形术后再狭窄及动脉粥样硬化的作用机制，以培养的大鼠血管平滑肌细胞为模型，应用氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验及反转录-多聚酶链反应技术。观察致分裂原对血管平滑肌细胞增殖及C-myc基因表达的影响；并检测曲尼司特对致分裂原诱导的增殖及C-myc基因表达的抑制效应。结果显示，曲尼司特可明显抑制血小板源生长因子和血管紧张素Ⅱ诱导的DNA合成和C-myc基因表达。以上提示，曲尼司特能明显抑制血管平滑肌细胞增殖，其作用机制可能与抑制C-myc基因表达有关。     

一氧化氮对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞细胞间粘附分子-1表达的影响

为探讨肿瘤坏死因子－α介导单核细胞与血管平滑肌细胞粘附致动脉 粥样硬化及一氧化氮抗动脉粥样硬化的机制,用体外培养的大鼠血管平滑肌细胞,以硝普钠为一氧化氮供体,采用细胞粘附实验,流式细胞术和逆转录－聚合酶链反应观察一氧化氮对肿瘤坏死因子－α诱导的细胞间粘附分子－1在血管平滑肌细胞中的表达及其对单核细胞与血管平滑肌细胞粘附的影响。结果发现一氧化氮显著抑制肿瘤坏死因子－α诱导的单核细胞与血管平滑肌细胞的粘附及细胞间粘附分子－1在血管平滑肌细胞中的表达,减少血管平滑肌细胞表面的细胞间粘附分子－1,结果表明一氧化氮抑制细胞间粘附分子－1基因表达及降低单核细胞与血管平滑肌细胞之间的粘附率是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

丙丁酚对氧化型低密度脂蛋白和氧自由基促血管平滑肌细胞增殖的影响

本文用细胞计数和MTT快速比色计量法观察到体外培养的半主动脉平滑肌细胞分别与氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶共厕培养后,前者明显增殖(p<0.01)。抗氧化剂丙丁酚(100μmol·L-1)能抑制氧化型低密度脂蛋白和黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶促平滑肌细胞增殖作用;一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸对两者促平滑肌细胞增殖的作用无影响,同时也不能阻断丙丁酚的抑制两者促细胞增殖作用.这一结果提示,丙丁酚能抑制氧化型低密度脂蛋白和外源性氧自由基促平滑肌细胞增殖,这一作用可能与血管平滑肌细胞中一氧化氮的合成及释放无关。     

丹参对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响

观察丹参对血管平滑肌细胞迁移的作用,并探讨其作用机理。本研究用羟基脲抑制血管平滑肌细胞增殖后,观察丹参对血管平滑肌细胞迁移、迁移相关基因表达及能量转换的影响。发现丹参对新生小牛血清诱导的血管平滑肌细胞迁移具有显著抑制作用;Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明丹参可抑制与细胞迁移相关的骨桥蛋白基因表达;肌酸激酶活性分析显示丹参可显著降低该酶活性。上述结果提示：丹参抑制血管平滑肌细胞迁移的作用与抑制骨桥蛋白基因表达和减缓能量转换有关。     

线粒体融合素2基因突变体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究大鼠线粒体融合素2基因的蛋白激酶A磷酸化位点两种突变体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其相关的信号通路.方法 利用两种携带蛋白激酶A磷酸化位点突变的线粒体融合素2基因重组腺病毒(Adv-Mfn2-alaPKA和Adv-Mfn2-asnPKA)和携带线粒体融合素2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2),感染培养的大鼠血管平滑肌细胞.水溶性四甲基偶氮唑盐法比较各组细胞增殖的变化;流式细胞术比较各组细胞周期的变化;免疫印迹法比较各组线粒体融合素2基因和磷酸化细胞外调节激酶1/2蛋白表达变化.结果 感染重组腺病毒的三组细胞线粒体融合素2基因表达差异无显著性.与对照组相比,Adv-Mfn2-alaPKA和Adv-Mfn2组显著抑制细胞增殖(P<0.01),停滞于G_0/G_1期细胞比例显著增加(P<0.01),磷酸化细胞外调节激酶1/2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),且Adv-Mfn2-slaPKA作用更明显(P<0.01),而Adv-Mfn2-asnPKA组较对照组差异无显著性.结论 Mfn2-alaPKA通过细胞外调节激酶1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用较线粒体融合素2基因更明显;而Mfn2-asnPKA对血管平滑肌细胞无抑制增殖的作用,对细胞外调节激酶1/2信号通路也无作用.蛋白激酶A磷酸化位点是调控线粒体融合素2基因抗血管平滑肌细胞增殖的重要功能位点.     

尿酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察尿酸（uricacid,UA）对动脉粥样硬化关键环节———血管平滑肌细胞增殖的影响。方法:以体外培养的大鼠血管平滑肌细胞为实验对象,分为对照组、尿酸组和洛沙坦+尿酸组,每组处理后用MTT法分析细胞增殖活力,流式细胞仪（flowcytometry,FCM）检测细胞增殖周期。结果:尿酸作用后培养细胞的MTT值明显高于对照组（40mg/LUA:0.65±0.06;对照:0.37±0.07,P<0.01）,并且存在剂量依赖效应;尿酸所致上述效应还存在时间依赖性;洛沙坦能部分阻断尿酸刺激血管平滑肌细胞增殖作用。流式细胞分析显示尿酸作用使血管平滑肌细胞G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加。结论:尿酸能够促进血管平滑肌细胞增殖,存在剂量及时间依赖效应;该作用可能部分通过血管紧张素Ⅱ的受体介导。     

三七总皂甙对血管平滑肌细胞增殖及c-myc基因表达的影响

目的探讨三七总皂甙对血小板源生长因子刺激的血管平滑肌细胞增殖的影响及其可能机制。方法运用血小板源生长因子刺激兔体外血管平滑肌细胞增殖模型,通过四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞术及免疫细胞化学法观察三七总皂甙对其增殖活性、细胞周期及c-myc蛋白表达的影响。结果血小板源生长因子显著刺激血管平滑肌细胞增殖,三七总皂甙呈浓度依赖性抑制血管平滑肌细胞增殖,对血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖亦具有显著抑制作用;三七总皂甙作用下血管平滑肌细胞处于G1/G0期的细胞数增多,而G2/S期的细胞数显著减少,c-myc蛋白的表达亦降低。结论三七总皂甙对基础状态下及血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖均具有显著抑制作用,部分机制与其阻滞血管平滑肌细胞G1/G0期向S期转化以及下调c-myc基因表达有关。     

依那普利对自发性高血压大鼠平滑肌细胞Gqα基因表达的影响

目的:(1)自发性高血压大鼠是否存在Gqα基因表达的异常;(2)ACEI抑制血管平滑肌的增殖是否与抑制Gqα基因表达有关.方法:采用半定量RT-PCR方法,观察SHR及WKY主动脉血管平滑肌细胞静止期及增殖期Gqα基因表达情况以及依那普利对Gqα基因表达的影响.结果:(1)静止期,SHR及WKY血管平滑肌细胞Gqα mRNA表达无明显差别;在10%小牛血清刺激下,SHR血管平滑肌细胞Gqα mRNA表达增加四倍(P<0.01);(2)依那普利对静止期SHR Gqα mRNA表达无明显作用,对小牛血清引起的Gqα mRNA表达的增加有明显抑制作用,且呈浓度及时间依赖性;(3)非特异性肽类AngⅡ受体阻制剂无此作用.结论:SHR的Gqα基因表达反应性增加,依那普利对高血压病的治疗除抑制ACE 外,通过对Gq蛋白基因表达的抑制也起一定的作用.     

线粒体融合素基因2突变体Mfn2-1A抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及机制研究

目的:研究线粒体融合素基因2(Mfn2)的突变体片段Mfn2-1A,对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞的增殖抑制作用,并进一步探讨相关作用机制。方法:用已构建的重组腺病毒Adv-Mfn2-1A感染大鼠血管平滑肌细胞,利用细胞计数、四甲基偶氮唑盐比色法检测血管平滑肌细胞增殖,流式细胞仪检测细胞生长周期,蛋白免疫印迹法分析Mfn2-1A对信号通路Mek-Erk1/2蛋白表达水平的影响。结果:重组腺病毒Adv-Mfn2-1A感染平滑肌细胞能正常表达相应蛋白;转染Adv-Mfn2-1A后能抑制平滑肌细胞增殖(P<0.05),第3天开始效果明显;Adv-Mfn2-1A较Adv-Mfn2作用效果更显著(P<0.05);转染Adv-Mfn2-1A和Adv-Mfn2后阻滞于G0/G1期的细胞明显增多,转染Mfn2-1A后阻滞在G0/G1期细胞达到(77.74±3.67)%;Mfn2-1A可降低平滑肌细胞中磷酸化Erk1/2蛋白的表达,效果比Mfn2更明显(P<0.05)。结论:Mfn2基因突变体片段1A可明显抑制血管平滑肌增殖,使细胞阻滞在G0/G1期,其机制与抑制Mek-Erk1/2信号通路有关。     

硫化氢：动脉粥样硬化研究新靶点

硫化氢是继一氧化氮和一氧化碳之后又一新的具有心血管调节功能的内源性气体信号分子。硫化氢能够通过保护血管内皮、抑制血管平滑肌细胞增殖和泡沫细胞的形成来抑制动脉粥样硬化的发展,硫化氢的这种保护作用是通过抗炎症、抗氧化应激等机制实现的。因此,硫化氢有望成为一种新的抗动脉粥样硬化作用的药物研发靶点。     

卡托普利对血管平滑肌细胞增殖和PDGF—B、bFGF及相关癌基因的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用氚-胸腺嘧啶核苷（［3H］－TdR）参入法，流式细胞术，免疫细胞化学及NorthemBlot杂交方法，观察卡托普利（Cap）对VSMC增殖的作用及对生长因子PDGF－B，bFGF及其相关癌基因c－sis，c－myc表达的影响。结果发现：Cap能逆转内皮素所致的［3H］－TdR参入量增多，阻止血管平滑肌细胞由静止期（G0／G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂（G2／M期），并能逆转内皮素引起的PDGF—B，bFGF抗原，c－sis，c－mycmRNA表达增强。提示：aop有抑制血管平滑肌细胞增殖作用，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

青蒿素及其衍生物在心血管疾病中的应用

青蒿素及其衍生物除抗疟疾外,对心血管系统也具有保护作用.青蒿素通过增加收缩型血管平滑肌细胞基因表达、干扰心室肌细胞动作电位、抑制心肌间质纤维化等机制,发挥抑制动脉粥样硬化、抗心律失常、抑制心肌梗死等作用,为临床治疗心血管系统相关疾病提供新思路.     

人参皂甙Rg3对高龄大鼠血管结构与功能的影响

目的:研究人参皂甙Rg3对高龄大鼠血管壁结构和血管收缩、舒张功能的影响。方法:40只12月龄的SD大鼠随机分为观察组(B组,10只)和治疗组(C组,30只)。治疗组按给药剂量的不同被随机分为C1组、C2组、C3组,分别给予人参皂甙Rg3 5、10、20mg·kg-1·d-1灌胃治疗;B组给予安慰剂治疗。两组均普通饮食喂养,20月龄时,在无菌条件下取大鼠的胸主动脉条备检。10只3月龄的SD大鼠为青年组(A组)阴性对照组,同样方法取材备检。采用HE染色和电镜观察胸主动脉结构,用离体胸主动脉血管环灌流实验检测血管的收缩和舒张功能。结果:A组大鼠血管壁形态正常。B组大鼠血管平滑肌细胞增殖、管腔狭窄、基质明显增生。B组血管收缩和舒张功能均较A组下降(P0.05)。C3组的血管收缩和舒张功能较B明显改善(P0.05)。结论:高龄大鼠血管壁发生明显的血管老化病理和病理生理变化,表现为平滑肌细胞增殖、管腔狭窄、基质增生、胞质脂褐素沉积、血管收缩和舒张功能下降。人参皂甙Rg3长期服用能够显著地抑制高龄大鼠血管中层平滑肌细胞增殖,减轻基质增生,抑制血管舒缩功能的降低,有潜在的抗血管老化作用。     

动脉粥样硬化患者血清miR-520b表达水平及相关机制

目的探讨动脉粥样硬化患者血清miR-520b表达水平及相关作用机制。方法选取该院收治的动脉粥样硬化患者42例,收集同期42名健康老年人为对照。qRT-PCR检测外周血清miR-520b表达水平。经targetscan和miRanda数据库预测importin 8(IPO8)为miR-520b的可能靶基因,通过双荧光素酶报告基因检测证实;体外细胞实验采用Western印迹检测miR-520b对人血管内皮细胞IPO8表达的影响;CCK-8法和Tranwells实验检测miR-520b对人血管平滑肌细胞增殖、迁移能力的影响。结果动脉粥样硬化患者血清miR-520b相对表达量低于健康老年人(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测证实IPO8是miR-520b的直接作用靶基因;转染miR-520b类似物人血管内皮细胞IPO8蛋白相对表达量低于类似物阴性对照组(P<0.05);转染特异性miR-520b抑制物后,血管内皮细胞中IPO8蛋白相对表达量高于抑制物对照组(P<0.05)。提升miR-520b表达后人血管平滑肌细胞增殖和迁徙能力均低于相应阴性对照(P<0.05);抑制miR-520b表达后人血管平滑肌细胞增殖和迁徙能力均高于相应阴性对照,差异有统计学意义(P<0.05)。结论动脉粥样硬化患者血清miR-520b表达水平明显降低;miR-520b可通过阻断NF-κB信号通路及抑制血管平滑肌细胞增殖、迁徙来发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

川芎嗪对血管平滑肌细胞增殖及表达c-myc基因的影响

为观察川芎嗪对血管平滑肌细胞增殖的影响,在建立凝血酶诱导的体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞增殖模型后,应用免疫细胞化学方法观察川芎嗪对血管平滑肌细胞表达ｃ－ｍｙｃ基因蛋白的影响;并用流式细胞术观察了血管平滑肌细胞增殖周期的变化。结果发现,川芎嗪能够显著抑制凝血酶诱导的血管平滑肌细胞ｃ－ｍｙｃ基因蛋白表达增加,使血管平滑肌处于ＧＩ期的细胞数显著增多,Ｓ期和Ｇ２＋Ｍ期的细胞数显著减少。结果提示,川芎嗪对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖有显著抑制作用,其机制与抑制ｃ－ｍｙｃ基因表达有关。     

脂肪细胞补体相关蛋白30与动脉粥样硬化

脂肪细胞补体相关蛋白30(Acrp30)是新近发现的一种脂肪细胞因子,与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病有一定相关性,并在动脉粥样硬化斑块形成中发挥重要作用.Acrp30可通过改善血管内皮功能、抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化、阻止平滑肌细胞增殖和迁移及抑制炎症反应发挥抗动脉粥样硬化的作用.