肺结核患者外周血单个核细胞中miRNA-150的表达及意义

目的分析外周血单个核细胞(PBMC)中miRNA-150在肺结核患者(TB)及健康人群(HD)中的表达差异,探讨miRNA-150诊断活动性肺结核的应用价值。方法选择41例TB患者为实验组(其中19例为涂阳患者,22例为凃阴患者),同时选择35例HD为对照组。采集外周抗凝血利用密度梯度离心法分离PBMC,提取总RNA,利用Taq Man探针q PCR技术检测miRNA-150在各组人群中的相对表达量,以RNU6B作为内参基因。结果 miRNA-150在TB患者外周血PBMC中表达量为(8.74±1.36),显著高于健康对照组(3.544±0.59),差异有统计学意义(P0.05);应用ROC曲线分析表明,miRNA-150诊断TB的敏感性为61%,特异性为82%。痰涂片阳性TB患者中miRNA-150表达水平显著高于痰涂片阴性患者(12.30±2.43Vs 5.66±1.12),差异有统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-150在TB患者PBMC中表达水平升高,尤其是涂阳患者,可以作为诊断TB的分子标识。     

痛风患者外周血单个核细胞环状RNA的表达谱分析

目的:分析环状RNA（circRNA）在痛风患者PBMCs中的表达谱,探讨circRNA在痛风发生发展中可能的作用机制。方法:收集24例急性期痛风患者（AG）、24例间歇期痛风患者（IG）以及24名健康体检者（HC）外周血标本。随机选取3例AG、3例IG、3名HC,采用基因芯片技术筛选其PBMCs中差异表达的circR...     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞凋亡的检测

支气管哮喘是由多种炎性细胞和炎性介质参与的慢性气道炎症 ,其中单核 巨噬细胞在哮喘发病中起重要作用。本研究意在观察哮喘患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)的凋亡及糖皮质激素对其的影响。一、对象与方法1.对象 :(1)哮喘组 :2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 0年 12月在我院呼吸科就诊的中、重度哮喘急性发作期患者 30例 ,男 17例 ,女 13例 ,年龄 (38± 11)岁 ,诊断符合 1997年中华医学会呼吸病学分会制定的支气管哮喘防治指南 (支气管哮喘的定义、诊断、治疗、疗效判断标准及教育和管理方案 )。所有患者对包括屋尘螨在内一项以上过敏原测定结果阳…     

慢性乙肝合并肺结核患者外周血单个核细胞HBV pgRNA的表达与免疫功能的相关性

目的 研究慢性乙肝(CHB)合并肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)HBV前基因组RNA(pgRNA)的表达及其与免疫功能的相关性.方法 将2018年3月-2019年3月我院结核门诊新确诊的40例CHB合并肺结核患者随机分为两组,对照组(n=20)采用2HRZE/4HR方案进行常规抗结核治疗,治疗组(n=20)在此...     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞端粒酶活性的研究

目的 了解乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）端粒酶活性的表达情况。方法 通过扩增端粒重复序列（TRAP）及光度酶联免疫法，分别检测健康人及各类乙型肝炎患者PBMC的端粒酶水平。结果 各组患者PBMC在植物血凝素（PHA）刺激前均有端粒酶活性的表达，以急性型肝炎组最高，重型肝炎组最低，二者差别具有显著性（P〈0．001）。PHA刺激后与刺激前比较各组端粒酶活性均有显著性升高（P〈0．001），刺激后的端粒酶水平以重型肝炎组为最低，与其他三组比较差别具有显著性（P〈0．05）。慢性重型乙型肝炎经胸腺五肽（TP5）治疗后端粒酶活性显著增高（P〈0．05）。结论 HBV急性感染期PBMC的端粒酶水平升高；慢性感染期PBMC的端粒酶水平在体内被抑制。TP5具有免疫调节作用，能使过低的端粒酶水平趋向于正常。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞c-kit受体表达的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-kit受体的表达及其临床意义。方法：采用免疫荧光标记，流式细胞仪检测SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白（CD117）表达，反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）检测其c-kit mRNA的表达水平，并分别与正常人比较。结果：SLE患者PBMC中c-kit受体及其mRNA表达水平与正常组相比显著增高（P＜0．05）；活动期与非活动期相比显著增高（P＜0．05），非活动期SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白表达与正常人差异无显著性（P＞0．05），PBMC的c-kit受体蛋白表达与其SLEDAI显著相关（P＜0．01），结论：SLE患者PBMC c-kit受体蛋白水平及其mRNA表达水平均显著高于正常人，且与疾病活动呈正相关，c-kit受体可能在SLE的病程变化中起着重要作用。     

狼疮肾炎患者外周血单个核细胞CD134表达的动态变化及意义

目的 探讨CD134共刺激分子的动态变化特点及其存很狼疮肾炎（LN）发病机制中的可能作用。方法 采用流式细胞仪检测活动期和非活动期LN患者外周血单个核细胞（PBMC），在加入抗CD3单抗、白细胞介素（IL）-2刺激培养前、后的不同时段CD134^＋细胞数的动态改变。结果 经抗CD3ε单抗／rIL-2刺激前，活动期LN患者PBMC的CD134^＋细胞百分比已明显增加，主要表现在CD4^＋T细胞亚群上，CD8^＋T细胞则不明显。在刺激活化后，相比于正常对照组，活动期和非活动期LN患者PBMC的CD134^＋细胞百分比12h已明显增加，24h达到高峰，持续到48h仍处于高水平，72～96h后开始下调；至96hi活动期组仍高于正常对照组。结论 不论是活动期或非活动期LN患者，当T细胞受刺激活化后，主要是CD4^＋T细胞表面的CD134分子处于高表达状态和持续时间延长，CD8^＋T细胞只少量且呈一过性地表达：LN患者，特别是活动期LN患者的T细胞处于异常活化状态。     

老年糖尿病患者外周血单个核细胞胰岛素受体研究

外周组织对胰岛素呈抵抗状态是 2型糖尿病发病的重要原因 ,胰岛素受体异常是常见的原因。本文对 2型糖尿病患者外周血单个核细胞胰岛素受体进行研究 ,旨在探讨胰岛素受体在 2型糖尿病老年患者的变化。1　临床材料1 1　对象　糖尿病组 42例 ,符合WHO (1999)糖尿病诊断标准 ,临床分型符合 2型糖尿病者 ,病程 1～ 3 6年 ,均为口服降糖药治疗。其中老年组 2 3例 ,年龄 60～ 87岁 (平均 71 3± 14 6岁 ) ;体重指数 (BMI) 18 4～ 2 8 6(平均 2 3 4± 2 2 8) ;非老年组 19例 ,年龄 3 0～ 5 9岁 (平均 45 3± 11 6岁 ) ,BMI2 0 0～ 3 0 2 …     

冠心病患者外周血单个核细胞激活诱导凋亡的检测

激活诱导细胞死亡(activation-induced cell death,AICD)也称细胞凋亡,外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在抗原、丝裂原等刺激下可引起AICD.为了探讨冠心病患者PBMC的AICD水平,我们应用丝裂原PHA-P分别与正常人及冠心病患者PBMC体外培养,通过流式细胞仪检测PBMC凋亡率,了解冠心病免疫细胞变化,探讨冠心病发病的免疫机制.     

肺结核患者外周血单核细胞中差异表达miRNA的筛选

目的 研究肺结核患者外周血单个核细胞中miRNA的差异表达。 方法 选择10例肺结核患者和10例健康人。每人抽取5 ml静脉血,提取外周血单个核细胞（PBMC）,分别将肺结核患者组和健康对照组的PBMC混合,提取总RNA和miRNA,进行miRNA荧光标记和纯化,用芯片筛选差异表达的miRNA,以校正后的两个样本间杂交信号强度的比值,来判断芯片的结果。以实时定量PCR验证。 结果 筛选出26个差异表达的miRNA,其中13个上调的miRNA和13个下调的miRNA。通过比较肺结核患者与健康对照者实时定量PCR结果证实,hsa-miR-1（分别为1.085±0.005,1.018±0.011）表达上调（t=4.334, P<0.01）,hsa-miR-146a(分别为0.948±0.008,1.036±0.005)（t=4.460, P<0.01）与hsa-let-7e(分别为1.020±0.007,1.091±0.004)（t=4.149, P<0.01）表达下调。 结论 多种miRNA在肺结核患者外周血单个核细胞中有异常表达。     

溶血离心培养法检测肺结核患者外周血分支杆菌及其L型

目的　建立一种自血液中分离分支杆菌及其L型的新方法。方法　肺结核患者的外周血直接或溶血离心后取沉淀种入 92 3TB和 92 3TBL液体培养基培养 ,培养物用免疫酶染色 (ABC法 )鉴定。结果　 6 5份标本分支杆菌和分支杆菌L型血培养的阳性率、总检出率分别为 15 %、2 6 %、32 % ;溶血离心培养法的阳性率明显高于直接培养法 (P <0 0 5 ) ;相应痰培养中 ,抗酸杆菌和抗酸菌L型的阳性率、总检出率分别为 38%、2 0 %和 5 2 % ,高于肺结核患者外周血培养的阳性率 (P <0 0 5 ) ;但血、痰配对检测总阳性率可达 6 5 %。结论　肺结核患者外周血存在分支杆菌及其L型 ,并以L型为主 ;溶血离心液体培养结合免疫酶染色可常规用于检测血液中分支杆菌及其L型 ;结合痰标本检测 ,可提高肺结核患者细菌学检查的阳性率     

TIPE2在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导的蛋白8-2(tumor necrosis factor-induced protein 8 like 2,TIPE2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其在COPD发病中的作用.方法 选择42例符合标准的COPD患者及37名健康对照者,用荧光定量PCR法检测其TIPE2的表达水平,用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)的含量,由定量数据分析其直线相关关系.结果 COPD组TIPE2表达水平明显低于正常组(11.25±1.37比4.50±1.04,P＜0.01),而炎性细胞因子TNF-α、IL-6的含量明显高于正常组;COPD组TIPE2的表达水平与血清中TNF-α、IL-6的水平均呈负相关,而正常组二者之间无明显相关性.结论 COPD患者PBMC中TIPE2表达下降,且其表达水平与炎性细胞因子TNF-α、IL-6呈负相关,TIPE2可能在COPD的发病中发挥重要作用.     

聚合酶链反应检测肺结核患者外周血单个核细胞中结核分 …

探讨外周血单个核细胞中结核分支杆菌ＤＮＡ检测在肺结核诊断中的价值。方法采用改良Ｔｒｉｔｏｎ－ｘ－１００法分离，制备单个核细胞中模板，ＤＮＡ，聚合酶链反应扩增结核分支杆菌２４０ｂｐ基因片段，同时分析了影响ＰＣＲ结果的有关因素。结果８９例肺结核患者的血标本，８４例肺结核患者的痰标本中，结核分支杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７３％和５７％；８４例肺结核患者外周血，痰标本配对检测总阳性率可达８７％。     

淋巴细胞趋化因子受体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的探讨淋巴细胞趋化因子受体(XCR1)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,及其与疾病的相关性。方法收集93例确诊的SLE患者和30名健康对照组,收集PBMC,提取RNA。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测研究对象XCR1mRNA表达水平。结果!"XCR1mRNA在PBMC中表达水平,患者组(1.57±0.84)与正常对照组(0.19±0.14),两者差异无统计学意义(P>0.05)。活动期(2.09±1.38)与对照组比较,两者差异有统计学意义(t=2.392,P=0.02);活动期与非活动期(0.31±0.24)比较,差异有统计学意义(t=3.091,P=0.003);非活动期与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。"#SLE患者组XCR1mRNA水平与疾病活动度评分(SLEDAI)关系:SLE患者组PBMC中XCR1mRNA表达水平与SLEDAI作直线相关性分析,XCR1mRNA水平与SLEDAI(r=0.540,t=5.445,P=0.000)呈正相关。"$SLE患者PBMC中XCR1mRNA表达与临床表现及实验室检查相关性:SLE抗SSA抗体阳性患者(17/68,1.4±1.2)比阴性患者(51/68,3.5±4.9),其XCR1mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(t=2.78,P=0.007)。结论XCR1mRNA表达水平在PBMC中活动期SLE患者比非活动期及对照组增高,与疾病的活动性(SLEDAI)正相关,非活动期与对照组差异无统计学意义。SLE抗SSA抗体阳性患者比阴性患者,其XCR1mRNA表达水平降低,两组均较健康对照组增高。提示XCR1参与疾病的发展,与疾病的活动性相关,XCR1可能参与抗SSA抗体的形成过程,造成组织损伤。     

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞蛋白质组学研究

目的 运用蛋白质组学的方法,比较正常人及早期活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)蛋白质的差异表达,寻找RA疾病相关致病蛋白质.方法 选取9例早期活动期RA患者以及9名健康成年志愿者,用淋巴细胞分离液分离PBMCs,抽提PBMCs中的蛋白,采用同相pH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者PBMCs总蛋白质.凝胶经考马斯亮蓝染色显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证部分差异蛋白质.结果 获得RA患者及正常人PBMCs蛋白质双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为556和579,匹配率分别为89.4%和 88.5%,通过比较分析,差异表达蛋白质点数为23,选取18个点进行质谱鉴定,成功鉴定14个蛋白质,其中a-肌动蛋白、纤维蛋白素原a-链、载脂蛋白A-I(ApoA-I)等9个蛋白质点在RA中表达上调,硫氧还蛋白-2、谷胱甘肽S-转移酶等6个蛋白质点在RA中表达下调,这些差异蛋白质的功能涉及物质代谢、抗氧化、信号传导、能量产生及细胞骨架.并用RT-PCR方法验证差异蛋白质ApoA-I.其结果与上述蛋白质差异表达结果相符.结论 在RA患者PBMCs中存在着差异表达蛋白质,这些差异蛋白质可能是RA发病的内在因素.其RT-PCR结果与蛋白质差异表达相符,证明蛋白质组研究的可靠性.