盐酸格拉司琼胶囊健康人体药代动力学研究

目的:建立测定人血浆中格拉司琼浓度的LC/MS/MS法,并应用于健康人体药代动力学研究.方法:12例健康受试者单剂量口服2 mg盐酸格拉司琼胶囊,LC/MS/MS法测定血浆中格拉司琼浓度,采用非房室模型统计矩法计算药代动力学参数.结果:单剂量口服2 mg盐酸格拉司琼胶囊后,主要的药代动力学参数Cmax、tmax 、t1/2、MRT、Cl/F、AUC0 24和AUC0-∞分别为(6.93±1.90)ng/ml,(1.35±0.29)h,(5.59±1.87)h,(8.05±1.84)h,(54.23±16.08)L/h,(36.61±8.87)ng·h·ml-1和(39.32±9.36)ng·h·ml-1.结论:本分析方法的准确度、灵敏度、专属性及定量线性范围等均符合生物样品的分析要求,适用于盐酸格拉司琼胶囊的人体药代动力学研究.     

复方孕二烯酮周效避孕贴剂的体外经皮渗透及体内药代动力学

制备含孕二烯酮与炔雌醇的周效避孕贴剂,并对其体内外质量进行考察。分别建立孕二烯酮和炔雌醇体外含量测定的HPLC法,进行鼠皮渗透试验,并按照中国药典测定释放度;分别建立孕二烯酮和炔雌醇体内分析的LC-MS/MS和GC-MS法,研究贴剂家兔经皮给药的药代动力学行为。结果表明,孕二烯酮与炔雌醇的体外鼠皮渗透均呈零级动力学,渗透速率分别为0.377,0.092μg/(cm2.h);两种药物的体外释放均符合Higuchi方程,168 h累积释放百分率分别为90.7%和92.2%;复方孕二烯酮贴剂与市售片剂家兔给药后,孕二烯酮的cmax分别为(4.44±0.24),(8.43±2.15)ng/mL,tmax分别为(12.50±1.96),(0.20±0.05)h,AUC分别为(1 029.25±91.58),(311.84±100.88)ng/mL.h;炔雌醇cmax分别为(2.63±0.13),(7.85±1.73)ng/mL,tmax分别为(48.44±7.61),(0.25±0.02)h,AUC分别为(752.40±62.91),(216.10±56.83)ng/mL.h。两种药物的周效贴剂与市售片剂相比,cmax显著减小,tmax明显延长,AUC显著增大,具有显著或极显著性差异。复方孕二烯酮贴剂一次给药即能维持较长时间(7 d)平稳的血药浓度,有望成为新型的非口服避孕制剂。     

二妙丸中3种生物碱成分在Beagle犬体内的药代动力学

建立高灵敏的LC-MS/MS法测定血浆中小檗碱、巴马汀和药根碱的浓度,并用于研究Beagle犬灌服市售二妙丸后体内3种生物碱的药代动力学特征。6只健康Beagle犬,雌雄各半,单剂量灌服市售二妙丸制剂(相当于小檗碱25mg/kg)后,0～48 h间隔采集血样,采用电喷雾正离子化质谱法监测血浆中各成分的浓度。测得小檗碱、药根碱和巴马汀的cmax分别为(4.474±1.8),(0.508 3±0.2),(0.812 4±0.7)ng/mL,t1/2分别为(38.1±15.4),(23.8±9.9),(20.2±17.1)h,AUC0-48 h分别为(37.4±3.9),(3.75±1.2),(3.01±0.9)ng.h/mL。结果显示Beagle犬口服给药二妙丸后小檗碱、药根碱和巴马汀的血药浓度低,达峰时间快,消除半衰期长。     

RP-HPLC法测定Beagle犬血浆中间尼索地平浓度及其药代动力学

目的:建立间尼索地平的高效液相色谱分析方法,研究其在Beagle犬体内的药代动力学。方法:血浆样品经液-液萃取后,用HPLC法进行分析。色谱柱为Diamond C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-20 mmol/L KH2PO4(60∶40);流速为1 mL/min;紫外检测波长为237 nm。结果:Beagle犬口服3种不同浓度的间尼索地平(1.0,2.5,12.5 mg/kg)后,血药浓度经时曲线均呈现明显的双峰现象。第1次达峰时间在1 h左右,第2次达峰时间在2-3 h,血药浓度峰值cmax较低。cmax与AUC均与剂量呈正相关。结论:间尼索地平经口服给药后,吸收较迅速,cmax较低可能与肝脏的首过效应有关;双峰现象可能与药物存在肝肠循环有关。     

甲磺司特活性代谢物M-1的人体药代动力学

目的:研究甲磺司特活性代谢物4-(3-乙氧基-2-羟基丙氧基)-丙烯酰苯胺(M-1)在健康志愿者体内的药代动力学特征。方法:10名健康志愿者男女各半,单次及多次口服甲磺司特颗粒剂后,采用HPLC-MS法测定人血浆中甲磺司特活性代谢物M-1的浓度,计算药代动力学参数。结果:单次口服甲磺司特颗粒剂100 mg后,甲磺司特活性代谢物M-1的血药达峰浓度为(9.84±2.41)ng/mL;达峰时间为(3.0±1.3)h;AUC为(80.58±10.49)ng.h/mL;消除半衰期为(6.5±1.4)h。多次口服甲磺司特颗粒剂后,甲磺司特活性代谢物M-1的血药达峰浓度为(14.08±1.79)ng/mL;达峰时间为(2.5±1.2)h;AUC为(82.20±12.17)ng.h/mL;消除半衰期为(8.3±1.6)h。结论:多次给药后甲磺司特活性代谢物M-1的人体药代动力学参数与单次给药的药代动力学参数基本一致,AUC与tmax均与性别无关。     

液相色谱-串联质谱测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度及其药代动力学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度,并研究其灌胃给药后在大鼠体内的药代动力学特征。方法以槲皮素为内标,采用HPLC-MS/MS方法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18,流动相为甲醇-10 mmol/L醋酸铵水溶液-甲酸(80∶20∶0.15,v/v/v),采用多反应监测(MRM)模式,监测离子分别为:m/z 449.1→m/z287.1(紫云英苷),m/z301.1→m/z151.1(槲皮素);DAS2.0药动学软件计算药动学参数。结果紫云英苷在1.00～1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r2=0.9929);定量下限为1.00 ng/ml;低、中、高浓度的提取回收率均大于93%。大鼠灌胃给药后在0.5±0.1 h达到231.1±67.3 ng/ml的峰值浓度,血浆半衰期为3.9±1.3 h,AUC0-∞为782.6±152.8(ng.h/ml)。结论本方法灵敏度高、选择性强、分析时间短,适用于血浆中紫云英苷的浓度测定及其药代动力学研究。     

盐酸拉贝洛尔缓释片在犬体内的药代动力学研究

目的研究盐酸拉贝洛尔缓释片在犬体内单剂量和多剂量口服给药后的药代动力学过程.方法采用反相高效液相色谱法测定犬血浆中拉贝洛尔的浓度.流动相为乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钠(28∶72),色谱柱为Shimadzu VP-ODS,5μ, 150 mm×4.6 mm I.D.,检测波长218 nm,流速1.2 ml/min.动物试验分别采用12只健康成年犬,进行单剂量和多剂量给药,并于相应的时间点取血测定血浆中的药物浓度.结果所建立的HPLC-UV方法的最低检测浓度为0.10 μg/ml.12只犬按性别和体重区组随机口服两种拉贝洛尔制剂后(均为100 mg),测得普通片和缓释片拉贝洛尔的药动学参数分别为k=0.1187±0.0755 h-1和0.0984±0.0255 h-1,tmax1.15±0.49 h和3.83±1.17 h,cmax3.19±0.42和1.97±0.84 μg/ml.另采用12只犬按性别和体重区组随机实验设计多剂量口服两种拉贝洛尔制剂,5 d后血药浓度达到稳态水平,受试制剂和参比制剂的css分别为1.84±0.54和1.99±0.29 μg/ml(经剂量校正).结论缓释片与普通片相比,达峰时间有所延长,达峰浓度有所降低,多剂量给药后缓释片每天2次和普通片每天3次给药的波动度无差异,说明缓释片具有一定的缓释效果,多剂量给药后拉贝洛尔在犬体内的药代动力学特性未发生改变.     

甲巯咪唑大鼠经皮给药的药代动力学

目的:研究甲巯咪唑在大鼠体内经皮吸收的药代动力学,并与口服吸收动力学进行比较.方法:采用HPLC法测定大鼠口服(2 mg/kg)或经皮(1,2,4 mg/kg)给药后血清和甲状腺组织中的甲巯咪唑浓度.色谱柱为Lichrospher C18柱,流动相为甲醇-水(10:90),流速1.0 min,柱温30℃,检测波长UV 254 nm.结果:口服或经皮(2 mg/kg)给药后,甲巯咪唑的tmax分别为1.5 h和2.5 h,cmax分别为1 716.6和817.2ng/mL,AUC分别为4 606.2和3 739.6 ng·h/mL,t1/2分别为2.64 h和2.70 h,甲状腺组织中的药物浓度分别于给药后2 h和1 h达到峰值,其峰浓度分别为307.7和320.9 ng/50 mg.经皮给予高、中和低3个剂量甲巯咪唑后,其AUC与剂量呈现线性相关性.结论:甲巯咪唑口服给药的血药浓度明显高于经皮给药的血药浓度,但甲状腺组织中的药物浓度无显著性差异,提示经皮给药的全身不良反应小于口服给药.     

硝苯地平缓释片临床前药动学及生物利用度研究

目的 研究硝苯地平缓释片在Beagle犬体内的药动学和生物利用度。方法 采用双周期随机交叉试验设计,分别给予8只Beagle犬受试制剂（硝苯地平缓释片）或参比制剂（硝苯地平控释片）30 mg,采用LC-MS/MS法测定给药后不同时间的血药浓度。选用DAS 2.0软件计算药动学参数,并对药代参数进行配对t检验统计分析。结果 血浆中硝苯地平线性范围为0.05～30 ng/mL,最低定量限为0.05 ng/mL,分析方法灵敏、准确、特异性高。受试制剂和参比制剂的峰浓度、达峰时间和药-时曲线下面积分别为（4.46±2.11）、（5.21±2.68）ng/mL,（11.0±3.85）、（7.38±2.97）h,（49.5±25.9）、（49.6±25.2）ng?h/mL。以药–时曲线下面积计算受试制剂的相对生物利用度为（104±43.5）%。结论 建立的分析方法操作简单、准确、重复性好,可用于犬体内硝苯地平药动学和相对生物利用度的研究;受试制剂具有一定的延迟释放特征。     

葛根素及其磷脂复合物在Beagle犬体内的药动学比较

目的研究葛根素及其磷脂复合物中葛根素在B eag le犬体内药动学。方法采用HPLC法测定犬血中葛根素,以同组犬(3只,雄性)交叉口服葛根素及其磷脂复合物,药-时曲线数据经3P 97药动学计算程序处理。结果分别以葛根素及其磷脂复合物给B eag le犬口服(剂量为葛根素52.5 m g/kg),葛根素的药-时过程符合开放型双室一级动力学模型,葛根素口服的AUC、Cm ax、tm ax分别为(10.91±4.83)m g.h/L、(3.00±1.13)m g/L、(1.62±0.30)h,而葛根素磷脂复合物的AUC、Cm ax、tm ax分别为(13.67±2.72)m g.h/L、(1.91±0.51)m g/L、(2.38±1.27)h,统计结果表明AUC之间差异有显著性。结论形成磷脂复合物可提高葛根素在B eag le犬体内的吸收。     

3种挥发油对马钱子总碱透皮贴片体外经皮渗透的影响

目的 研究砂仁、草果、白豆蔻挥发油对马钱子总碱贴片中马钱子总碱（主要含马钱子碱和士的宁）体外经皮渗透的影响。方法 以小鼠离体皮肤为实验材料,采用改良Franz扩散池法,以HPLC法测定马钱子总碱贴片中马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的累积渗透量（Q_n）,考察3%、5%、7%、10%砂仁、草果、白豆蔻挥发油对马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的促渗效果。结果 不同质量浓度挥发油中,以5%砂仁挥发油、3%草果挥发油、10%白豆蔻挥发油渗透速率（J_SS）最大,分别为1.039、0.951、0.907 mg/(cm²·h);与不加促渗剂的阴性对照组相比,增渗倍数（ER）分别为1.212、1.230、1.383,其中5%砂仁油的ER大于阳性对照10%氮酮。结论 5%砂仁油、3%草果油、10%白豆蔻油均能明显促进马钱子总碱贴片中马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的透皮吸收。     

小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较

目的 比较高效液相色谱(HPLC)-紫外光(UV)、HPIC-荧光(FLD)和HPLC-质谱(MS)3种检测方法测定小鼠不同脑组织中单胺类神经递质含量的优劣性,并应用最优方法测定血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质的含量.方法 分别采用HPLC仪器搭配UV、FLD和MS检测器建立小鼠不同脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量测定方法,并进行系统的方法学验证,采用HPLC-FLD法对血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质DA、NE和5-HT含量进行测定.结果 HPLC-UV法的定量限分别为DA 103.5 ng/mL、NE 107.5 ng/mL、5-HT 93.6 ng/mL;HPLC-FLD法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 10.75 ng/mL、5-HT9.36 ng/mL;HPLC-MS法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 32.25 ng/mL、5-HT 9.36 ng/mL.HPLC-FLD和HPLC-MS法对DA和5-HT的测定优于HPLC-UV法,HPLC-FLD法对于NE的测定优于HPLC-MS法,而HPLC-MS法存在较强的基质效应.HPLC-FLD法检测结果示血管性抑郁小鼠海马组织中DA含量最低,大脑皮质中5-HT含量最低,而不同脑组织中NE含量没有明显差别.结论 与HPLC-UV法和HPLC-MS法相比,HPLC-FLD法更适用于小鼠脑组织中单胺类神经递质(DA、NE、5-HT)的含量测定.DA和5-HT可以用作血管性抑郁症疾病的诊断标志物.     

Proteomics analysis of antimalarial targets of Garcinia mangostana Linn.

ObjectiveTo investigate possible protein targets for antimalarial activity of Garcinia mangostana Linn. (G. mangostana) (pericarp) in 3D7 Plasmodium falciparum clone using 2-dimensional electrophoresis and liquid chromatography mass-spectrometry (LC/MS/MS).Methods3D7 Plasmodium falciparum was exposed to the crude ethanolic extract of G. mangostana Linn. (pericarp) at the concentrations of 12μg/mL (IC₅₀ level: concentration that inhibits parasite growth by 50%) and 30 μg/mL (IC₉₀ level: concentration that inhibits parasite growth by 90%) for 12 h. Parasite proteins were separated by 2-dimensional electrophoresis and identified by LC/MS/MS.ResultsAt the IC₅₀ concentration, about 82% of the expressed parasite proteins were matched with the control (non-exposed), while at the IC₉₀ concentration, only 15% matched proteins were found. The selected protein spots from parasite exposed to the plant extract at the concentration of 12 μg/mL were identified as enzymes that play role in glycolysis pathway, i.e., phosphoglycerate mutase putative, L-lactate dehydrogenase/glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, and fructose-bisphosphate aldolase/phosphoglycerate kinase. The proteosome was found in parasite exposed to 30 μg/mL of the extract.ConclusionsResults suggest that proteins involved in the glycolysis pathway may be the targets for antimalarial activity of G. mangostana Linn. (pericarp).     

盐酸青藤碱醇质体的制备及其体外经皮渗透研究

目的 制备盐酸青藤碱醇质体并考察醇质体作为盐酸青藤碱经皮给药载体的渗透特性。方法 采用注入法制备盐酸青藤碱醇质体,并对其形态、粒径及包封率进行分析;采用透皮扩散仪,以小鼠皮肤进行体外透皮试验,比较盐酸青藤碱在水溶液、脂质体以及醇质体中的透皮行为。结果 制得的盐酸青藤碱醇质体外形圆整,平均粒径为88.7 nm,包封率为62.8%,累积透皮量和透皮速率均明显高于盐酸青藤碱脂质体和水溶液。结论 醇质体能明显促进盐酸青藤碱的经皮渗透,有望成为盐酸青藤碱透皮给药的新载体。     

呋喃丹及其代谢产物呋喃酚在大鼠体内的死后分布研究

建立生物样品中呋喃丹及其代谢物呋喃酚的高效液相色谱-质谱联用内标分析法,研究两者大鼠体内的死后分布规律。灌胃给予大鼠4倍LD₅₀(44 mg/kg)浓度为1.8 mg/mL自制呋喃丹混悬液,死亡后分别于0,12,24,48,72和96 h取材,HPLC-MS/MS法测定心血、心、肝、脾、肺、肾、脑、左下肢肌、胃壁等检材中呋喃丹及呋喃酚含量。结果显示,死后0 h呋喃丹在大鼠体内分布如下:胃壁>肺、肝>肾、脾>心脏、心血、脑,并逐渐从胃壁、肺及心血向肝、肾、心及骨骼肌中转移。而呋喃酚在大鼠体内分布如下:胃壁>心血>肝、肾>脾、肌肉、肺、脑>心,心血、心、肝、脾、肾中的呋喃酚浓度死后显著上升(P<0.05)。呋喃丹的降解及呋喃丹在不同组织间的扩散迁移共同导致了呋喃丹及其代谢产物呋喃酚组织浓度的死后变化。本研究建立的呋喃丹及呋喃酚组织含量HPLC-MS/MS检测方法及获得的死后分布规律可作为呋喃丹中毒死亡案件的法医学鉴定提供参考,并且为全面正确采取检材进行毒物分析提供方向。     

Improved simultaneous quantitation of candesartan and hydrochlorthiazide in human plasma by UPLC–MS/MS and its application in bioequivalence studies

A validated ultra-performance liquid chromatography mass spectrometric method (UPLC–MS/MS) was used for the simultaneous quantitation of candesartan (CN) and hydrochlorothiazide (HCT) in human plasma. The analysis was performed on UPLC–MS/MS system using turbo ion spray interface. Negative ions were measured in multiple reaction monitoring (MRM) mode. The analytes were extracted using a liquid–liquid extraction (LLE) method by using 0.1 mL of plasma volume. The lower limit of quantitation for CN and HCT was 1.00 ng/mL whereas the upper limit of quantitation was 499.15 ng/mL and 601.61 ng/mL for CN and HCT respectively. CN d₄ and HCT-¹³Cd₂ were used as the internal standards for CN and HCT respectively. The chromatography was achieved within 2.0 min run time using a C18 Phenomenex, Gemini NX (100 mm×4.6 mm, 5 µm) column with organic mixture:buffer solution (80:20, v/v) at a flow rate of 0.800 mL/min. The method has been successfully applied to establish the bioequivalence of candesartan cilexetil (CNC) and HCT immediate release tablets with reference product in human subjects.     

超声引导下腹横肌平面阻滞复合瑞芬太尼靶控输注在胰管结石体外震波碎石术中的应用

目的 评价超声引导下腹横肌平面阻滞联合瑞芬太尼靶控输注应用于胰管结石体外震波碎石术(ESWL)中的效果。方法 随机选择60例首次接受ESWL治疗胰管结石的患者,分为R组和TR组(每组n=30)。R组患者仅接受瑞芬太尼靶控输注(TCI),TR组患者接受瑞芬太尼TCI前30min接受超声引导下腹横肌平面阻滞。采用Dixon序贯法计算两组患者的瑞芬太尼半数有效量(EC₅₀),记录患者围术期视觉模拟疼痛量表(VAS)、Ramsay镇静量表、血流动力学参数、呼吸参数和不良事件。结果 R组和TR组患者瑞芬太尼EC₅₀分别为3.448ng/ml(95%CI:1.636~3.946)和2.523ng/ml(95%CI:0.744~2.991),差异具有统计学意义(P＜0.05)。两组患者疼痛和镇静评分相当。两组患者血流动力学和呼吸参数均无明显差异。与R组相比,TR组不良事件发生率更低(10% vs 56.7%,P＜0.001),瘙痒发生率更低(6.7% vs 26.7%,P=0.038)。结论 腹横肌平面阻滞联合瑞芬太尼靶控输注可为胰管结石ESWL提供满意的镇痛和镇静,且不良事件发生率更低。     

活体肾移植术中靶控输注丙泊酚效应室浓度与实测血浆药物浓度的对比分析

目的 探讨终末期肾功能衰竭（ESRD）患者行亲属供肾肾移植术,丙泊酚靶控输注（TCI）效应室浓度与实测血浆药物浓度相关性。方法 选取2016年3~10月安徽省立医院择期活体供肾肾移植受体27例,选择血浆靶控,采用丙泊酚和瑞芬太尼诱导麻醉,维持脑电双频指数（BIS）为45~55。依次记录麻醉诱导后10、20、30及40 min及肾移植术中开放髂血管后10、20、30及40 min各时间点丙泊酚TCI效应室浓度,并采集动脉血3 mL,经高效液相色谱串联质谱法（HPLC/MS/MS）测定人血浆实测丙泊酚浓度。监测计算肾移植手术中丙泊酚TCI的偏象度及精密度。结果 与麻醉前（基础值）比较,麻醉后术中HR减慢、平均动脉压（MAP）及BIS值下降,差异有统计学意义（P<0.05）,SpO₂差异无统计学意义（P>0.05）。与麻醉前（基础值）比较,术中髂血管开放前中心静脉压（CVP）差异均无统计学意义（P>0.05）,术中髂血管开放后CVP较开放前均增高,差异有统计学意义（P<0.05）。髂血管开放前丙泊酚TCI偏离度及精密度分别为9.58%、10.42%,髂血管开放后丙泊酚TCI偏离度及精密度分别为14.17%、14.19%,二者均在临床使用范围（-15%<偏离度<15%,精密度<30%）。髂血管开放前丙泊酚效应室浓度、髂血管开放后丙泊酚效应室浓度与实测血浆药物浓度间均存在显著的相关性（F=2.35,R²=0.58,F=2.95,R²=0.71,P<0.05）。髂血管开放前后丙泊酚效应室浓度与实测血浆药物浓度间浓度差值比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TCI丙泊酚用于ESRD患者术中维持,效应室浓度与实测血药浓度存在显著相关关系。肾移植患者术中丙泊酚TCI,其偏离度及精密度均在临床使用范围。髂血管开放后大量补液对麻醉深度影响较小,无需增加丙泊酚效应室浓度。