应用双重免疫组化技术研究肥大细胞亚型与食管癌的相关性

目的：探讨食管癌组织中肥大细胞（mastcell，MC）亚型的变化及其浸润程度与食管癌临床病理特征的关系。方法：采用双重免疫组化染色方法对90例食管癌根治术手术标本中MC进行检测，并探讨MC亚型T型、TC型和C型与食管癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移之间的关系。结果：食管癌组织内的MC主要分布于癌旁交界区。食管癌中MC、和MCTC两种亚型MC的表达与食管癌浸润深度及淋巴结转移呈显著的负相关性，而MCC型MC的表达与癌组织浸润深度及转移无关。结论：癌间质内MCT和MCTC型MC的浸润可能具有抑制食管癌生长及转移的作用。MC浸润的数量与食管癌的生物学行为有相关性，对食管癌患者预后评估有一定的参考价值。     

双重免疫组化技术鉴定食管癌中肥大细胞的亚型

目的: 建立用于检测食管癌中肥大细胞(mast cell,MC)亚型的双重免疫组化染色方案.方法: 采用双重免疫组化技术染色在食管癌组织中肥大细胞内表达的类胰蛋白酶(tryptase)和类糜蛋白酶(chymase).结果: MC大部分为T型或C型,少部分为TC型.食管癌组织内的MC主要分布于癌旁交界区.结论: 采用双重免疫组化染色方法以确定食管癌中MC的亚型是可行的,为深入研究MC亚型在食管癌发展和预后评价中的临床意义提供了基础.     

锰超氧化物歧化酶在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌临床病理特征及生物学行为的关系.方法 采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),检测45例食管鳞癌组织及距肿瘤组织边缘＞5 cm的正常组织中MnSOD蛋白和mRNA的表达水平,并分析其与食管癌临床病理特征及生物学行为之间的关系.结果 MnSOD蛋白在45例食管鳞癌组织中的阳性表达率为31.1%,明显低于正常食管组织中的阳性表达率(86.7%,P＜0.05).MnSOD mRNA在45例食管鳞癌组织的相对表达量为0.310±0.036,亦明显低于其在正常食管组织中的相对表达量(0.482±0.053,P＜0.05).MnSOD蛋白和mRNA的表达与食管鳞癌的病变长度、浸润深度和组织学分级有关,即病变长度越长、浸润深度越深、组织学分级越高者,MnSOD表达水平越低(均P＜0.05).MnSOD蛋白和mRNA的表达与食管鳞癌的淋巴结转移状况、病变部位和病变类型均无关(均P＞0.05).结论 食管鳞癌组织中,MnSOD蛋白和mRNA的表达水平均明显降低,检测MnSOD的表达对食管癌的临床治疗和预后判断有一定的参考价值.     

p120ctn和Kaiso在食管癌中的表达及意义

目的:探讨p120ctn和Kaiso在食管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学(SP)方法检测77例鳞状细胞癌、23例腺癌以及20例正常食管黏膜组织中p120ctn蛋白和Kaiso蛋白的表达,并进行相关性分析。结果:与正常食管黏膜组织相比,在食管鳞癌和食管腺癌组织中,p120ctn膜表达减少直至消失,细胞浆内表达逐渐增强,Kaiso蛋白主要表达于食管癌细胞浆内。在食管癌组织中p120ctn蛋白和Kaiso蛋白的表达与淋巴结转移及癌组织浸润深度密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、组织学类型、分化程度无明显相关性(P>0.05)。结论:p120ctn蛋白和Kaiso蛋白的表达与食管癌的淋巴结转移和浸润深度密切相关,提示食管癌的发生发展可能与p120ctn和Kaiso有关,p120ctn和Kaiso可能是食管癌新的标志物和治疗靶点。     

血管内皮生长因子C在食管鳞癌组织中表达及与其临床病理特征的关系研究

目的探讨食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C表达及与其临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法,检测173例食管鳞癌组织中血管内皮生长因子C的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果食管鳞癌组织中VEGF-C表达率达83.24%,VEGF-C表达与患者年龄、性别、血型、肿瘤直径、肿瘤部位、大体分型、浸润深度、组织学分级无统计学意义(P>0.05);而与淋巴结转移、病理学分期有统计学意义(P<0.01)。结论食管鳞癌中VEGF-C呈高表达,其在淋巴结转移中起重要作用。     

血管内皮生长因子在食管癌中的表达和临床意义

目的探讨食管癌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）、血管生成与食管癌临床病理特点的关系。方法采用免疫组织化学技术,检测５０例食管癌组织ＶＥＧＦ蛋白表达和微血管密度（ＭＶＤ）。分析ＶＥＧＦ和ＭＶＤ的关系及其与食管癌组织学分型、浸润度、生长方式、淋巴结转移和预后的关系。结果ＶＥＧＦ阳性者ＭＶＤ值显著高于阴性者,ＶＥＧＦ及ＭＶＤ与食管癌浸润深度、淋巴结转移密切相关,与组织学分型、生长方式也有明显相关性。结论ＶＥ     

PTEN蛋白表达与子宫内膜癌的相关性研究

目的:探讨子宫内膜癌中抑癌基因PTEN的表达,及其与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化检测16例正常子宫内膜、32例子宫内膜癌组织中PTEN蛋白的表达,分析其与临床病理的相关性.结果:抑癌基因PTEN在子宫内膜癌组中蛋白阳性表达显著低于正常子宫内膜组(P<0.01).PTEN阳性表达的缺失与组织学分级与肌层浸润深度有关(P<0.05).结论:PTEN基因突变及蛋白表达缺失与子宫内膜癌的发生有关,与子宫内膜癌的分化程度、肌层浸润深度有相关性.     

食管鳞癌组织中P-selectin的表达与淋巴结转移的关系

目的　探讨P selectin在食管鳞癌中的表达水平及其与食管癌病理分级和淋巴结转移的关系。方法　应用原位杂交及免疫组化SP技术研究了P selectinmRNA及蛋白在有转移的和无转移的食管鳞癌中的表达。结果　癌组织中P selectinmRNA及蛋白的阳性率在有转移的食管鳞癌中的表达分别为 76.2 % ( 16/2 1)和 85 .7% ( 18/2 1) ,在无转移的食管鳞癌中的表达分别为 48.5 % ( 16/3 3 )和5 4.5 % ( 18/3 3 )。它们的表达与浸润深度和淋巴结转移呈正相关 (P <0 .0 5 )。P selectinmRNA与P selectin蛋白的表达呈明显负相关(r =0 .0 0 5 )。结论　P selectin与食管癌浸润深度和淋巴结转移关系密切     

结直肠癌中FHIT蛋白的异常表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌中脆性组氨酸三联体(FH IT)基因蛋白表达状况与临床病理指标的关系。方法采用半定量免疫印迹(W estern b lot)检测30例结直肠癌及其癌旁正常组织(≥5 cm)FH IT蛋白表达状况。结果30例癌组织有56.7%的FH IT蛋白表达异常,FH IT蛋白表达量与患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小及组织学类型无关(P>0.05)而与肿瘤的组织分化程度、浸润深度、Dukes分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。在浸润深度越深、分化程度越低、Dukes分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中,FH IT蛋白低表达越明显。结论FH IT蛋白表达状况可能与结直肠癌组织学分级、浸润程度、Dukes分期及淋巴结转移相关,提示FH IT蛋白表达降低可能对结直肠癌发生、发展具有重要作用。     

E2F1在食管癌中的表达及其临床意义

目的:探讨E2F1在食管癌患者中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化法对内镜活检确诊的80例食管癌标本石蜡切片进行染色,并取同体距离癌组织4cm以上的正常食管上皮组织40例作为对照。免疫组化染色检测E2F1的表达,并分析其与食管癌临床病理特征的关系。结果:E2F1蛋白在食管癌组织中阳性表达率显著高于癌旁正常食管组织。E2F1的表达与食管癌浸润深度、淋巴结转移和临床分期、病理类型、病灶大小密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无明显相关(P>0.05)。结论:E2F1在食管癌组织中表达状态与食管癌发生发展关系密切,对食管癌患者预后评估有一定的参考价值。     

食管癌组织中GLUT1蛋白表达与食管癌细胞浸润、转移的相关性研究

目的探讨GLUT1表达与食管癌浸润及转移生物学行为的关系。方法应用免疫组化S-P法检测60例食管癌中GLUT1的表达。结果侵及浅肌层、深肌层和浆膜层的食管瘌组织中，GLUT1蛋白的强阳性表达率分别为28．57％、68．18％和89．28％，三者之间差异有统计学意义（P〈0．01）。GLUT1在食管癌癌旁淋巴结转移组和无转移组中的强阳性表达率分别为86．96％和46．15％．二暂之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论GLUT1蛋白的过表达可能参与了食管癌的浸润及淋巴结转移。     

HPA和HIF-1α在食管鳞癌发生发展中的表达及生物学意义

目的探讨乙酰肝素酶(HPA)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与食管鳞癌发生、发展的关系。方法应用原位杂交技术检测70例食管鳞癌组织、26例癌旁不典型增生组织和23例切缘正常组织中HPAmRNA表达,同时,应用免疫组化法检测HIF-1α蛋白在全部标本中的表达。结果HPA mRNA和HIF-1α的阳性表达率在正常食管组织、癌旁不典型增生组织和食管癌组织中依次增高(P<0.05);HPA mRNA和HIF-1α的表达与食管鳞癌侵袭深度、淋巴结转移及临床分期有关(P< 0.05),而与分化程度无关(P>0.05)。在食管鳞癌组织中,HPA mRNA的表达与HIF-1α的表达显著相关(P<0.01)。结论HPA mRNA和HIF-1α阳性表达与食管鳞癌的生长、侵袭及转移有关,两者在食管鳞癌的发生、发展过程中可能存在着一定的协同作用;检测HPA mRNA与HIF-1α表达有助于食管鳞癌生物学性能的判断。     

Ezrin蛋白和c—met在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Ezrin蛋白和c—met在食管鳞癌中的表达及其在食管鳞癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学（SP）法检测50例食管鳞癌患者癌组织标本及癌旁正常上皮组织中Ezrin蛋白和c—met的表达情况,并结合临床相关因素进行分析。结果在50例癌旁正常上皮组织中,Ezrin蛋白阳性表达率为34．0％,c—met阳性表达率为8．0％,而在50例食管鳞癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率为76．0％,c—met阳性表达率为58．0％。Ezrin蛋白在食管鳞癌组织中的表达与浸润深度和有无淋巴转移有关（P〈0．05）。c—met在食管鳞癌组织中的表达与有无淋巴转移有关（P〈0．05）。c—met阳性表达组Ezrin蛋白表达阳性率显著高于c—met阴性表达组（P〈0．05）。结论联合检测Ezrin与c—met的表达能够综合判断食管鳞癌的恶性程度和其潜在的转移能力,Ezrin蛋白有望成为一个肿瘤转移的标志物和预后的评价指标。     

VEGF-C在食管鳞癌和神经胶质瘤中的表达及其意义

背景和目的：近几年研究发现,某些恶性肿瘤能表达血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor—C,VEGF-C),VEGF—C是迄今发现的惟一特异性促淋巴管生长因子。目前恶性肿瘤组织中VEGF—C的表达与肿瘤淋巴转移的关系方面的研究资料尚少。本研究拟通过检测、比较VEGF-C在两种不同转移特性的恶性肿瘤即人食管鳞癌和神经胶质瘤组织中的表达,分析恶性肿瘤组织中VEGFP—C的表达与肿瘤淋巴转移的关系。方法：采用免疫组化法检测VEGF-C在72例食管鳞癌(其中淋巴结转移29例,无淋巴结转移43例)和23例神经胶质瘤组织(病理学诊断为星形细胞瘤,I～Ⅳ级)中的表达,并对VEGF-C的表达与临床病理因素之间的关系作进一步的分析研究。结果：神经胶质瘤组织中未见VEGF—C抗原表达;食管鳞癌组织VEGF-C阳性表达率为38．88％(28／72),其中VEGF-C阳性表达率在有淋巴结转移组为62．07％(18／29),在无淋巴结转移组为23．26％(10／43),在浸润深度T2、T3期为58．82％(20／34),在T1期为21．05％(8／38),结论：VEGF-C阳性表达与食管鳞癌的淋巴结转移、浸润深度有关。VEGF—C是促进食管鳞癌经淋巴转移的重要因素。     

Increased expression of matrix metalloproteinase 7 and 9 and membrane type 1-matrix metalloproteinase in esophageal squamous cell carcinomas

BACKGROUND: The 5-year survival rate of patients with submucosal (sm) esophageal carcinoma continues to be much worse than that with intramucosal (m) lesions. The reasons are unclear, but matrix metalloproteinases (MMPs) and membrane type matrix metalloproteinases (MT-MMPs) are known to be involved in degradation of extracellular matrix macromolecules associated with tumor cell invasion. Expression of these enzymes may have some relation to the difference in survival between patients with sm and m esophageal carcinomas. METHODS: Surgical specimens from 148 primary esophageal squamous cell carcinomas were examined for expression of MMP-1, 2, 3, 7, and 9; tissue inhibitor of MMP (TIMP)-1 and 2; MT1-MMP; and MT2-MMP by immunohistochemical staining. The results were compared with tumor progression and other clinicopathologic parameters. Localization of gelatinase activity was also confirmed in carcinoma cells by in situ zymography. RESULTS: Expression of MMP-7 and 9, expression of MT1-MMP, and gelatinase activity were elevated in the carcinomas, correlating with depth of tumor invasion. Percentages of positive sm cases were 44.0%, 51.9%, and 52.0%, respectively, significantly higher than for the m cases. Percentages of venous invasion positive cases were 61.9%, 65.1%, and 65.1%, respectively. CONCLUSIONS: Expression of MMP-7 and 9 and MT1-MMP is closely associated with invasion depth and venous invasion in esophageal squamous cell carcinomas.     

Clinicopathological significance of vascular endothelial growth factor (VEGF)-C in human esophageal squamous cell carcinomas

The purpose of this study was to investigate the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) -C in human esophageal squamous cell carcinomas to elucidate its role in lymph node metastasis and tumor progression. The expression of VEGF-C and flt-4 genes was examined in 5 esophageal carcinoma cell lines, 12 fresh biopsy specimens and 48 archival surgical specimens of human esophageal carcinoma tissues by RT-PCR and immunohistochemistry. Immunohistochemistry using antibodies against CD34 (endothelial cell specific) was also carried out and microvessels were quantified by counting vessels in a 200x field in the most vascular area of the tumor. Of the 5 human esophageal carcinoma cell lines, 4 constitutively expressed VEGF-C mRNA. In 8 (66.7%) of 12 cases, VEGF-C mRNA was detected in only tumor tissues but not in normal mucosa by RT-PCR. There was a significant relationship between VEGF-C and flt-4 mRNA expression. Out of the 48 surgical specimens of esophageal carcinomas, 19 (39.6%) and 10 (20.8%) exhibited intense VEGF-C immunoreactivity in the cytoplasm of many cancer cells and the stromal cells, respectively. In contrast, Flt-4 was mainly expressed on the lymphatic endothelial cells. Normal and dysplastic esophageal squamous epithelium exhibited no or faint cytoplasmic staining of VEGF-C. VEGF-C expression correlated with depth of tumor invasion, tumor stage, venous invasion, lymphatic invasion and lymph node metastasis. Vessel count was significantly higher in the VEGF-C positive tumors than in the negative tumors. These results overall suggest that VEGF-C may play a role in tumor progression via lymphangiogenesis and angiogenesis in human esophageal carcinoma.     

Prognostic significance of Fas and Fas ligand expressions in human esophageal cancer.

Esophageal carcinomas have recently been shown to express Fas ligand (FasL) and down-regulate Fas to escape from host immune surveillance. However, the prognostic importance of Fas/FasL and their correlation with clinicopathological characteristics are yet to be delineated in this highly malignant carcinoma. Specimens from 106 esophageal squamous cell carcinoma patients were used for immunohistochemical evaluation of Fas, FasL, and CD8 expressions. Fifty-two (49%) and 34 (32%) patients were positive for FasL and Fas, respectively. There were no associations between FasL expression and clinicopathological characteristics except lymph vessel invasion. Strong FasL expression correlated with significant (P = 0.0011) decrease in tumor nest CD8+ cells. However, neither FasL nor CD8+ had any impact on patient survival. Strong Fas expression was correlated with depth of invasion (40.3% in pT1,T2 versus 20.5% in pT3,T4; P = 0.0308), histological differentiation (45.7% in well versus 25.4% in nonwell; P = 0.0347), and lymph node metastasis (22.6% in positive versus 45.5% in negative; P = 0.0129). Fas expression was one of the independent favorable prognosticators for patients' survival (risk ratio, 3.26; P = 0.0103) in esophageal SCC. Fas expression was an independent prognosticator for recurrence-free survival, whereas FasL expression did not influence the survival in esophageal squamous cell carcinoma. Down-regulation of tumor Fas may be the hallmark of immune privilege for the tumor, thus causing the patients' poorer outcome. Tumor FasL may counterattack the host immune cells to such an extent that the prognosis is not affected.     

VEGF-C和受体VEGFR-3 mRNA在食管鳞癌中的表达及意义

目的:观察血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)在食管鳞癌组织中的表达,分析其与肿瘤淋巴结转移的关系.方法:采用RT-PCR方法检测32例食管鳞癌组织、10例正常食管粘膜中VEGF-C/VEGFR-3 mRNA的表达情况,分析其与各临床病理因素之间的关系.结果:食管鳞癌组织中VEGF-CmRNA表达阳性率为68.75%(22/32),其中18例VEGFR-3 mRNA阳性,VEGF-C和VEGFR-3的表达密切相关(P＜0.01).VEGF-C mRNA的表达与食管鳞癌的淋巴结转移、浸润深度显著相关(P＜0.01,P＜0.05),但与患者年龄、肿瘤大小及分化程度无关.正常食管粘膜中未见VEGF-C/VEGFR-3 mRNA表达.结论:VEGF-C/VEGFR-3是促进食管鳞癌经淋巴结转移的重要因素.     

P-糖蛋白在食管贲门癌中的表达及意义

目的探讨P-糖蛋白（P-gp）在食管贲门癌中的表达及意义。方法应用免疫组化方法检测P-gP在69例食管鳞癌和64例贲门腺癌及相应癌旁正常组织中的表达。分析P-gp的表达与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移之间的关系。结果P-gP在69例食管癌中仅1例表达阳性,表达率为1．45％,P-gp在责门癌中的表达率为57．8％,二者比较差异有统计学意义,并且P-gP在责门癌中的表达高于相应癌旁正常组织（P〈0．05）。P-gp的表达与贲门癌的分化程度有关（P〈0．05）,而与癌的浸润深度、淋巴结转移无关（P〉O．05）．结论P-gp在食管癌的多药耐药中所起作用甚微,食管癌的多药耐药可能与其他耐药蛋白的表达有关;而贲门癌的多药耐药则与P-gp的表达有关;p-gP的表达可在一定程度上反映肿瘤的分化程度,但并不能反映肿瘤的浸润、转移等生物学特征。     

食管鳞癌组织中骨桥蛋白的表达及其临床意义

目的 研究骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在食管鳞癌患者组织中的表达及临床意义。方法 分别选取120例食管鳞癌癌组织、46例癌旁不典型增生组织和120例正常食管黏膜组织,分别用免疫组化法检测各种组织中OPN蛋白的表达情况,并分析其临床意义。结果 在食管鳞癌癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中,OPN的阳性表达率分别为76.67%（92/120）、34.78%（16/46）和0（0/120）。食管鳞癌的临床分期、淋巴结转移、癌组织的浸润深度均与OPN蛋白的阳性表达明显相关（P均〈0.05）。食管鳞癌组织中OPN蛋白阳性表达组与阴性表达组患者的5年生存率分别为10.7%及28.6%（P〈0.05）。结论 OPN蛋白在食管鳞癌的发生、发展中起到十分重要的作用,检测OPN蛋白的表达具有重要临床意义。