SARS:来自病毒成分的结构正开始被揭示出来

严重急性呼吸综合征 (SARS)是冠状病毒家族所致疾病之一。冠状病毒具有复杂的遗传组织 ,因此人们对它的复制周期知之甚少。冠状病毒家族有大量的复制基因 ,它们可以加工为大量用于形成复制 /转录复合体的成分。这种复合体包括未知功能的非结构蛋白 (nsp)。已经测定了其中一种nsp9蛋白的结构 ,并揭示出该蛋白结合在单链RNA(ssRNA)上。nsp9是一种二聚体 ,每个单体具有 1个 β螺旋和 7个 β 链的筒状结构。它的序列没有已知的同源结构 ,但其 β 筒状结构与寡糖 /寡核苷酸结合 (OB)折叠的 5 链 β 筒状结构相似 ,主要存在于核酸结合蛋白中…     

基于新型冠状病毒结构蛋白的诊疗技术的研究进展

近年来,冠状病毒感染人体事件频繁发生,给人类造成了巨大损失。新型冠状病毒(SARS-CoV-2)不仅传播迅速,而且具有致命性,目前已构成全球大流行,导致了数十万人的死亡。因此SARS-CoV-2的及时诊疗十分重要。由于冠状病毒的结构蛋白在病毒复制感染传播过程中发挥重要作用,所以综述了基于此次SARS-CoV-2 4种结构蛋白S、E、M、N的相关诊断治疗预防技术的研究进展,为更好地深入了解冠状病毒的致病机制以及为临床检出和药物疫苗研发提供有力支持。     

新型冠状病毒抗原表位融合蛋白的设计制备及免疫特性研究

新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染人体后可引起发热、咳嗽等呼吸道症状,重症者可发生新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)、严重急性呼吸综合征、甚至死亡。目前针对新型冠状病毒的感染无特效治疗药物,主要依靠疫苗接种来阻断其传播。在新型冠状病毒的结构蛋白中,刺突蛋白(Spike, S)和核衣壳蛋白(Nucleocapsid, N)是其主要的抗原蛋白,也是制备新型冠状病毒疫苗和研发抗体检测试剂的重要候选蛋白。使用原核表达系统表达重组新型冠状病毒抗原表位融合蛋白,并对其免疫原性进行验证。本研究通过分析筛选出新型冠状病毒结构蛋白S1、N及E蛋白的抗原表位,将筛选出的含强抗原表位的片段串联成融合蛋白,利用基因工程技术构建了表达融合蛋白的工程菌,纯化复性后获得了可溶性的融合蛋白。不同剂量的融合蛋白配伍不同的佐剂后进行小鼠免疫实验,通过检测抗血清的效价及相关细胞因子的水平,评价融合蛋白诱导的体液免疫和细胞免疫效果。设计的融合蛋白以包涵体的形式表达,经透析复...     

FXYD蛋白家族的研究进展

近年来,人们研究了大量蛋白家族的结构、功能,尤其是其与肿瘤的关系,以期从分子水平探寻治疗肿瘤的手段。FXYD蛋白家族就是其中之一,大量研究证实FXYD蛋白家族成员是Na,K-ATPase的调节器,其中的成员之一FXYD3还与肿瘤有着密切的关系,本文简单介绍下FXYD蛋白家族的一些新近研究进展。     

SARS病毒蛋白中caveolin推测的结合位点

目的：获得SARS冠状病毒蛋白与caveolin-1蛋白相互作用的信息,识别病毒蛋白中可能的caveolin-1结合位点,为SARS冠状病毒蛋白的功能研究以及设计抗SARS病毒的药物和疫苗提供线索．方法：基于3个caveolin结合基序,采用氨基酸基序搜索方法预测SARS冠状病毒蛋白中可能与caveolin-1相互作用的区域,并用分子模拟和分子对接的方法进一步证实它们之间的相互作用。结果：通过生物信息学分析,在SARS冠状病毒蛋白中发现了36个caveolin结合基序。经过分子模拟和分子对接,获得了SARS冠状病毒蛋白与caveolin-1相互作用的8个结合位点。这些caveolin-1结合位点分别位于replicase 1AB、S蛋白、ofr3蛋白和M蛋白．结论：caveolin-1可能是SARS冠状病毒蛋白结合的一个靶点,它们之间的相互作用可能与SARS冠状病毒的感染、复制、装配和释放有关。     

人类丙型肝炎病毒的产生依赖极低密度脂蛋白的聚集和分泌

Huang H…∥PNAS.-2007,104(14).-5848～5853丙型肝炎病毒(HCV)和富含甘油三酯的极低密度脂蛋白(VLDL)均由肝细胞分泌且以复合体的形式在血液中循环。研究者通过磁性免疫分离法纯化了HCV赖以复制的膜囊泡,这些囊泡包含HCV复制复合体,且富含VLDL聚集所需的蛋白质:载脂蛋白B(apoB     

噬菌体展示库筛选冠状病毒刺突蛋白抗体

目的 筛选特异性结合冠状病毒刺突蛋白（简称S蛋白）抗原的特异性抗体。方法 根据冠状病毒S蛋白家族数据库,合成保守序列,分子克隆连接到pet-22原核表达载体,纯化蛋白免疫小鼠产生相应的多克隆抗体,利用噬菌体展示技术提取免疫后小鼠脾脏制备噬菌体抗体scfv展示库,经过高通量筛选得到对S蛋白抗原具有高亲和力和强特异性的抗体片段。结果 通过合成的冠状病毒S蛋白糖蛋白亚基CoV＿Spike＿S1-S2＿S2制备了抗体scfv噬菌体展示库,筛选出能与冠状病毒S蛋白特异性结合的单克隆抗体scfv片段。结论 构建的小鼠抗Cov-Spike的抗体scfv库可筛选到特异性结合冠状病毒S蛋白抗原的特异性抗体,为进一步筛选、鉴定具有潜在防治冠状病毒感染的抗体系列药物提供了可行的方法。     

SARS-CoV-2主蛋白酶抑制剂的研究进展

主蛋白酶(main protease, M^pro)作为冠状病毒种间相似性极高的共有蛋白酶,且高度保守,是病毒复制过程中不可或缺的蛋白水解酶,因此是抗SARS-CoV-2药物设计的重要靶标。本文针对新型冠状病毒主蛋白酶抑制剂进行全面综述,涵盖化学结构、抗病毒活性与成药性、结合模式与构效关系等。     

血管生成素样蛋白的结构与功能

血管生成素样蛋白家族(Angptls)是近年发现的一类新的分泌性糖蛋白家族,它与血管生成素(Ang)具有相似的结构域,但是两者在基因表达和功能上有着不同特点。作为一类新的蛋白家族,Angptls在代谢和血管生成中的作用已得到广泛关注,本文就Angptls的结构、表达特点和功能方面的近期研究作一综述。     

Ezrin分子生物学特点及其与肝细胞肝癌关系的研究进展

Ezrin又称细胞绒毛蛋白(cytovillin),是细胞骨架相关蛋白,其编码基因Vil2,定位于染色体6q25、2q26.Ezrin是Ezrin亚家族的原型,主要存在于小肠上皮细胞的刷状缘和胎盘的微绒毛中.后续研究发现,Ezrin和根蛋白(RadiLxin)和膜突蛋白(Moesin)在结构和功能关系非常紧密,故称之为ERM家族.     

基因组特定基因座相关蛋白的纯化

真核生物的DNA在染色质中被多种蛋白复合体结合及调控，本文介绍了一种叫做离体染色质片段蛋白组学（proteomics of isolated chromatin segments，PICh）的方法来解析调控特定基因座的蛋白。PICh利用一种特殊的核酸探针来分离鉴定结合基因组DNA的蛋白。利用PICh法从人端粒染色质上纯化鉴定出了大多数已知的端粒因子，并发现了大量新的调控蛋白。     

心肌肌钙蛋白T的研究进展

肌钙蛋白复合体发现于1965年，当时认为它是一种球蛋白，分子量为50Kd。不久发现，肌钙蛋白复合体由三种蛋白质组成：TnT、TnL、TnC。每种蛋白质各具有重要的生物学特性，其中TnT的作用是将肌钙蛋白附着在原肌球蛋白上，是重要调节蛋白。就心肌来说，大量文献证明，cTnT（心肌肌钙蛋白）为心肌损伤的特异性、敏感性指标。现就cTnT研究进展综述如下.[第一段]     

阿片受体二聚化研究:药物靶标发现新策略

以往认为阿片受体以单聚体与G蛋白发生相互作用，其比例是按1：1偶联。然而，近年来随着G蛋白偶联受体克隆的成功及其特异性抗体的出现，关于阿片受体二聚化出现了大量报道，用Western印迹法分析异源细胞表达系统，已证明有免疫反应性复合体，而这些复合体相当于阿片受体（μ，k，δ）单体、二聚体、高级寡聚体。     

复制蛋白A功能研究进展

复制蛋白A(RPA)是目前国内外研究细胞DNA损伤应激反应的热点之一。RPA是真核细胞中主要的单链结合蛋白,包含70-,34-和14-ku 3个亚单位。RPA在DNA复制和修复过程中起着重要的作用。复制开始与延长阶段中,RPA具有解链、结合单链模板并维持DNA连续复制的功能;DNA损伤时,RPA与许多具有染色体结构维持、保护、修复功能的蛋白质簇集在DNA损伤位点,共同完成对DNA损伤的检测并进行修复。     

附睾特异分泌蛋白Lipocalin13的原核表达和纯化及其与配体结合特性的分析

大鼠Lipocalin13(rLcn13)是最近发现的一个大鼠附睾特异分泌的lipocalin家族蛋白,与男性生殖密切相关。该工作分析了rLcn13的染色体定位和基因特征,用同源模建方法获得了rLcn13蛋白的三级结构,并构建了rLcn13蛋白的原核表达系统,对rLcn13蛋白进行了可溶表达和纯化,并研究了rLcn13蛋白的配体结合特性。结果表明:(1)rLcn13蛋白在原核表达系统中能实现可溶性表达,并具有良好的三级结构;(2)rLcn13蛋白的二级结构以β-折叠为主;(3)rLcn13蛋白具有较强的视黄酸结合能力,也能结合其它一些lipocalin蛋白的配体;(4)rLcn13蛋白在大鼠附睾中可能起着视黄酸结合和转运作用,并有可能参与免疫反应。该研究为rLcn13蛋白的三维结构解析及其生理功能以及其它lipocalin家族蛋白的结构与功能关系的研究奠定了基础。     

SARS冠状病毒疫苗猴体免疫应答研究[英]／Gao W，Tamin A，Soloff A，et al／／Lancet

已经证实引起严重急性呼吸道综合征(SARS)的病原体是一种新型冠状病毒(CoV)。美国匹兹堡大学医学院Gao等报道用表达SARS-CoV结构蛋白的重组腺病毒疫苗接种恒河猴的研究结果。     

SLC26蛋白家族成员功能及意义的研究进展

目前研究发现人类许多疾病与离子通道蛋白相关,故对于离子通道蛋白如何参与人类疾病的发展已成为各大学者的研究热点。 SLC26阴离子通道蛋白家族作为目前一类研究较多的离子通道蛋白,具有成员多、结构功能复杂多样等特点,可作为SO42-转运蛋白、阴离子交换器、阴离子通道蛋白等在组织上的特异性表达来发挥其功能,SLC26阴离子通道蛋白家族的表达及功能受多种机制调节,其家庭成员结构及功能变化与人类先天性营养不良、先天性氯化物腹泻、先天性耳聋及消化道疾病等多种人类疾病相关。本文就SLC26蛋白家族其结构功能、各家族成员及其主要功能、相关调节因素及其与相关疾病的关系等进行综述。     

冠状病毒复制分子生物学与防控措施研发进展

目的以新冠肺炎致病菌2019-nCoV,中东呼吸综合征相关冠状病毒MERS-CoV和严重急性呼吸综合征相关冠状病毒SARS-CoV为代表的冠状病毒成为最近重大公共卫生关注焦点。研发更好的防控措施需要更好地认识冠状病毒,尤其是其基因组和复制分子生物学。方法文献综述和基因组序列分析。结果全球14673篇相关文章,美国NCBI有40个冠状病毒全基因组序列,GEO(Gene expression omnibus)有33个冠状病毒相关转录组数据。结论冠状病毒基因组具有独特的性质,复制特点,不少病毒蛋白具有多功能,包括与宿主相互作用,影响宿主蛋白质翻译后修饰如泛素化和去泛素化,调控宿主免疫病理。这些为疫苗、诊断和药物等新防控措施研发提供了基础。     

壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体用于牙周组织工程支架初探

目的构建壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙多孔复合体,观察其微观结构与体内外降解情况,探讨其作为牙周组织工程软骨支架的可行性。方法采用二次冻干技术制备壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体,冰冻切片和扫描电镜观察微观形态;将壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体支架置于人工降解液及植入大鼠背部肌肉,观察体内外降解情况及生物相容性。结果壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体呈海绵状,孔隙较均匀,孔形态不规则,孔隙之间彼此联通,孔隙率约80%,孔径200μm左右。4周体外降解率60%,在植入早期可见一过性炎性反应,随后逐渐降解,12周时基本降解吸收。结论壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙多孔复合体具有良好的三维立体结构及可降解性,是一种可行的牙周组织工程支架。     

能作为药物目标的又一种SARS病毒蛋白

不久前曾有报道美国 Medarex公司正在开发抗 SARS病毒纤突蛋白抗体。最近确认又一种 SARS病毒蛋白——主要蛋白酶可作为药物目标 ,中国和德国的研究小组已报告它与抑制剂复合的晶体结构。　　主要蛋白酶能释放 SARS病毒复制酶基因编码的蛋白的功能性多肽。这些蛋白介导病毒复制和转录 ,从而使主要蛋白酶在病毒生活周期中起重要作用 ,并成为开发抗 SARS病毒和其他冠状病毒药物的引人关注的目标。　　科学家的新研究提供了对主要蛋白酶 (包括活性位点构象 )的初步观察。他们发现 SARS病毒主要蛋白酶具有与其他冠状病毒共同的特点 ,但…