严重烫伤大鼠骨骼肌泛素基因表达的变化

烧伤后机体蛋白质分解代谢增强 ,超过合成代谢 ,造成负氮平衡。本室研究表明 ,依赖三磷酸腺苷及泛素的 2 6Ｓ蛋白酶复合体 (ＡＴＰ -ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ - 2 6Ｓｐｒｏ ｔｅａｓｏｍｅ)系统为烫伤后骨骼肌蛋白质降解的主要途径[1 ] ,且烫伤后泛素含量呈明显的进行性增加。笔者拟应用皮肤全层烫伤大鼠模型观察多聚泛素ｍＲＮＡ水平的变化 ,以探讨骨骼肌泛素基因表达的变化与蛋白质代谢的相关性。一、材料与方法1.实验动物 :雄性健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠40只 ,体重 ( 15 0± 2 0 )ｇ ,本校动物所提供。2 .动物分组及处理 :随机分为正常对照组及烫…     

血浆β-羟丁酸在糖尿病早期诊断中的意义

目的 探讨血浆β-羟丁酸在糖尿病早期诊断、预测及防治中的意义。方法 对500例不同人群的空腹、餐后血糖及血浆β-羟丁酸进行分析。结果 β-羟丁酸大于210umol/L可以作为糖尿病的诊断指标,具有较好的特异性和敏感性(分别为94％和60％)。结论 血浆β-羟丁酸不仅可作为DM早期诊断的指标,还可以反映糖耐量受损的情况,为DM的早期预测与防治提供可靠的依据。     

中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响

【摘要】 目的 观察在高渗盐溶液 (HS) 补液基础上应用中药抗休克合剂对严重烫伤大鼠早期肠损伤的影响。方法 选取 32 只 8 周龄 SD 大鼠, 按照随机数表法将其随机分为假伤组、LR 组、HS600 组、HS600+中药组,每组 8 只。假伤组大鼠建立假伤模型以及 LR 组、HS600 组、HS600+中药组大鼠建立烫伤模型后, LR 组大鼠采用乳酸钠林格注射液 (LR) 补液, HS600 组大鼠采用 600 mmol / L HS 补液, HS600+中药组大鼠采用 600 mmol / LHS 补液+中药抗休克合剂灌胃。对比观察模型建立 24 h 后各组大鼠血 Na+浓度, 血清炎症因子水平以及小肠组织氧化应激水平与 p38 丝裂原活化蛋白激酶 (p38MAPK) 通路活化程度。结果 LR 组大鼠血 Na+浓度明显低于假伤组、HS600 组及 HS600+中药组 (q = 14.910、32.211、30.010, P 均<0.001), 且 HS600 组与 HS600+中药组无明显差异 (q = 2.198, P= 0.130)。LR 组、HS600 组及 HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-10、白细胞介素-18 水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值均明显高于假伤组 (肿瘤坏死因子-α: q = 16.070、10.810、7.579, P 均<0.001; 白细胞介素-10: q = 15.920、20.210、23.850, P 均<0.001;白细胞介素-18: q = 12.750、7.562、3.897, P < 0.001、P < 0.001、P = 0.049; 丙二醛: q = 28.450、20.320、10.160, P 均<0.001; 磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值: q = 54.310、15.090、9.196, P 均<0.001), 且 HS600+中药组大鼠血清肿瘤坏死因子-α 与白细胞介素-18 水平以及小肠组织中丙二醛水平和磷酸化 p38MAPK 与p38MAPK 比值均明显低于 LR 组与 HS600 组、白细胞介素-10 水平明显高于 LR 组与 HS600 组 (肿瘤坏死因子-α:q = 8.494、3.932, P<0.001、P = 0.048; 白细胞介素-18: q = 9.357、4.165, P<0.001、P = 0.031; 丙二醛: q =18.290、10.160, P 均<0.001; 磷酸化 p38MAPK 与 p38MAPK 比值: q = 45.110、5.899, P<0.001、P= 0.001; 白细胞介素-10: q = 7.929、3.939, P<0.001、P= 0.047)。LR 组、HS600 组及 HS600+中药组大鼠小肠组织中超氧化物歧化酶水平均明显低于假伤组 (q = 20.880、14.120、11.110, P 均<0.001), 且 HS600+中药组明显高于 LR组与 HS600 组 (q = 9.772、4.008, P<0.001、P= 0.043)。结论 与单独应用 LR 或 HS 补液相比, 在 HS 补液基础上加用中药抗休克合剂可有效降低严重烫伤大鼠机体炎症反应及氧化应激反应程度、抑制 p38MAPK 通路过度活化, 从而减轻早期肠损伤。     

胰岛素强化治疗对严重创伤患者伤后蛋白质代谢的影响

目的探讨胰岛素强化治疗对严重创伤患者伤后蛋白质代谢的影响。方法 60例严重创伤患者随机分为胰岛素强化治疗组(30例)和常规治疗组(30例),在强化治疗前、治疗开始后1、3、7、14、21、28d晨起取静脉血检测血清白蛋白(AL)、转铁蛋白(TF)、视黄醇结合蛋白(RBP),留取当日24h尿液,检测尿3-甲基组氨酸排泄值和24h尿总氮含量。结果严重创伤后,血清白蛋白、转铁蛋白和视黄醇结合蛋白均出现下降、逐渐回升恢复过程。2组比较,强化组蛋白回升时间早于对照组,血清中含量也明显高于对照组(P<0.05)。每日尿总氮、尿3-甲基组氨酸排泄值伤后出现上升,但强化组明显低于对照组(P<0.01)。结论胰岛素强化治疗可以减轻伤后增强的蛋白质分解代谢,一定程度上逆转负氮平衡状态。     

胰岛素治疗对烫伤脓毒症骨骼肌蛋白高降解的影响

目的探讨胰岛素对烫伤脓毒症骨骼肌蛋白高降解的调节。方法沸水烫伤并注射内毒素建立烫伤和脓毒症兔模型,使用胰岛素控制血糖。检测伸趾长肌蛋白降解率和蛋白酶体的基因与蛋白表达变化。结果胰岛素治疗显著降低了伤后骨骼肌蛋白降解率和蛋白酶体的表达。结论胰岛素能抑制泛素-蛋白酶体途径活性的增强,减轻烫伤和脓毒症时骨骼肌蛋白高降解。     

严重烫伤大鼠骨骼肌蛋白质降解途径及泛素作用的研究

目的阐明严重烧伤后蛋白质降解的主要途径，以期为伤后代谢调理和防治提供理论依据。方法以包括一侧后肢３７％体表皮肤全层严重烫伤大鼠为模型，分别抑制不同蛋白质降解途径，以荧光分光光度法测定比目鱼肌酪氨酸体外总释放量，并采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法观察泛素含量的变化。结果阻断依赖ＡＴＰ－泛素途径后，能显著抑制大鼠伤肢蛋白质降解。同时，泛素含量均呈明显的进行性增加。结论烫伤后骨骼肌蛋白质高分解主要是通过依赖ＡＴＰ－泛素途径进行的     

荧光定量PCR验证大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢高通量芯片中miRNA-30a表达及意义

目的探讨miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中的表达及意义。方法建立严重烫伤大鼠模型,将16只大鼠分为实验组与对照组,每组各8只,于伤后72 h留取胫骨前肌标本。应用TRIZOL法抽提胫骨前肌中总RNA,采用丹麦锁核苷酸技术Exiqon miRCURYTMLNA microRNA芯片(第七代),约700条捕获探针,数据库版本为v.18.0,分别检测实验组与对照组胫骨前肌标本中miRNA-30a的表达水平,实时定量聚合酶链反应(PCR)验证以检验芯片数据的可靠性。结果芯片筛查结果显示,miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢中表达下调,而荧光定量PCR结果同样显示miRNA-30a表达降低。结论 miRNA-30a在大鼠严重烫伤后早期骨骼肌代谢过程中表达下调明显,其作用机制需进一步研究证实。     

严重体表烫伤后大鼠比目鱼肌蛋白质代谢与TNF作用的机制探讨

为探讨重度烧（烫）伤早期局部和远隔部位骨骼肌蛋白质代谢变化不一致的机制，以包括一侧后肢的３７％体表皮肤全层严重烫伤大鼠为模型，观察伤后第３天双后肢比目鱼肌蛋白质代谢变化及肿瘤坏死因子的作用。结果表明，烫伤局部骨骼肌蛋白质分解速率与ＴＮＦ浓度明显增高，证实ＴＮＦ可以增强在体骨骼肌蛋白质分解代谢，而ＴＮＦ单抗可以使伤肢比目鱼肌增高了的蛋白质分解代谢有明显的减轻作用，由此说明，ＴＮＦ在创伤早期局部骨骼肌     

严重烫伤大鼠胰岛素受体信号传导缺陷的研究

研究３０％体表面积全层皮肤烫伤大鼠伤后胰岛素受体信号传导改变机理。在不同浓度的胰岛素作用下伤后骨肌膜受最大结合容量降低，胰岛素对腺苷酸环化酶活性调节敏感性降低，但反应性正常，比目鱼肌葡萄糖摄取刺激的敏感性及反应性均明显降低，提示烫伤后骨骼肌胰岛抵抗与胰岛素刺激葡萄糖的跨膜转运的信号传递障碍有关。     

严重烫伤大鼠肝脏胰岛素抵抗发生机制的研究

目的：探讨严重烫伤后胰岛素信号在肝细胞转导缺陷的环节，以阐明严重烫伤后肝脏胰岛素抵抗的发生机制。方法：以30％体表面积背部皮肤全层(Ⅲ度)烫伤大鼠为模型，采用WGA-Sepharuse 4B亲和层析技术部分纯化大鼠肝细胞胰岛素受体，通过胰岛素受体结合实验、受体蛋白γ-^32P-ATP自身磷酸化SDS—聚丙烯配胺凝胶电泳(SDS-PAGE)放射自显影和外源性底物磷酸化，观察烫伤大鼠早期肝细胞胰岛素受体结合行为、受体β—亚基自身磷酸化和受体酪氨酸蛋白激酶(TPK)活性的变化。结果：严重烫伤大鼠伤后3d肝细胞膜岛素受体最大结合容量及亲和力无明显改变；但受体β—亚基自身磷酸化能明显下降；受体TPK活性亦明显降低并对胰岛素刺激的反应性明显减退。结论：严重烫伤后胰岛素信号在肝细胞转导发生偶联障碍，导致胰岛素生物效应受体后缺陷可能是严重烫伤后肝脏胰岛素抵抗发生的分子机制。     

多巴胺对严重烫伤大鼠血清乳酸、一氧化氮水平的影响

大鼠预置心导管 ,3 0 %Ⅲ度烫伤后静脉复苏 ,观察多巴胺 [3 μg/(kg·min) ]持续给药后大鼠的血清乳酸、一氧化氮 (NO)水平的变化。结果显示 ,与对照组相比 ,多巴胺治疗能显著降低严重烫伤大鼠血清中的乳酸、NO水平 ,以伤后 3～ 12h明显。研究表明 ,多巴胺可降低严重烫伤大鼠休克期血清乳酸、NO水平。     

极化液对严重烫伤内毒素血症大鼠胰岛β细胞功能的影响

糖代谢障碍是创伤后住院患者常见并发症，创伤高血糖患者感染率和病死率明显升高。从胰岛素抵抗角度研究创伤后糖代谢障碍机制的文献报道较多，但国内外从胰岛β细胞功能不全角度研究创伤后糖代谢障碍机制，以及胰岛β细胞功能不全保护措施的文献报道尚少。胰岛素对Ⅱ型糖尿病患者胰岛β细胞具有保护作用，但含胰岛素的极化液对创伤胰岛β细胞功能是否有保护作用值得探讨。为此，笔者观察了极化液对严重烫伤内毒素血症大鼠的胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）的影响，以期为临床早期发现胰岛β细胞功能和保护胰岛β细胞功能提供实验依据。     

严重烫伤大鼠骨骼肌20S蛋白酶含量及活性的变化

目的　研究 2 0S蛋白酶在烧伤后负氮平衡形成机制中的作用。方法　将提纯的 2 0S蛋白酶免疫兔 ,得效价为 1:3 2的抗血清。再以此多抗为工具 ,用免疫沉淀扣除法及免疫印迹法 ,以3 7%体表皮肤全层烫伤大鼠为模型 ,研究烫伤后大鼠骨骼肌中 2 0S蛋白酶活性和含量的变化。结果　烫伤后第 1,2 ,3天 ,伤肢和未伤肢酶活性比对照组显著增加。伤后 2 ,3天 ,伤肢和未伤肢酶含量比对照组显著增加。结论　严重烫伤后大鼠骨骼肌中 2 0S蛋白酶活性和含量的增加与烧伤后负氮平衡的形成密切相关 ,为防治烧伤后负氮平衡的形成提供一个新途径。     

严重烫伤大鼠骨骼肌蛋白降解途径及泛素作用的研究

阐明严重烧伤后蛋白质降解的主要途径，以期为伤后代谢调理和防治提供理论依据。方法以包括一侧后肢３７％体表皮肤全层严重烫伤大鼠为模分别抑制不同蛋白质解途径，     

游泳对不同蛋白质负荷大鼠蛋白质代谢的影响

实验观察了３种蛋白质负荷水平（７％、１７％、２７％）的Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠，游泳后蛋白质代谢情况，结果表明，游泳可降低氮平衡值和骨骼肌氮含量，而血清尿素和氨基酸水平以及肝脏氮含量均增高，表明蛋白质分解代谢增强。游泳对不同蛋白质负荷水平大鼠的影响程度不同，１７％组大鼠更有利于抵御高强度游泳引起的蛋白质分解作用，并具有较强的运动耐力。     

补充肌酸对游泳大鼠骨骼肌代谢的影响

为探讨补充肌酸对提高大鼠运动能力的作用，观察了肌酸对游泳大鼠骨骼肌代谢的影响。本实验取雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只，随机分为正常对照组、游泳对照组和游泳＋补充肌酸组。两个游泳组每天游泳训练１ｈ，９天后， 游泳４ｈ，测定血乳酸和尿素氮水平，测定骨骼肌乳酸、糖原和线粒体脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平、线粒体膜的流动性以及线粒体矿物元素钙（Ｃａ）、镁（Ｍｇ）、钾（Ｋ）含量。结果显示：肌酸可抑制游泳运动后大鼠的血乳酸浓度、血清尿素氮、骨骼肌乳酸、线粒体ＬＰＯ的升高幅度，抑制骨骼肌糖原、线粒体膜流动性和矿物质元素Ｃａ、Ｍｇ、Ｋ含量的下降。以上结果表明，肌酸可改善运动后骨骼肌线粒体功能。     

补充支链氨基酸对运动大鼠心肌、骨骼肌代谢的影响

目的：探讨补充支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对运动大鼠心肌、骨骼肌代谢的影响。方法：雄性Ｗｉｓｔａｒ鼠随机分为正常对照组、游泳对照组和ＢＣＡＡ游泳组，除ＢＣＡＡ游泳组饲料添加ＢＣＡＡ外，其余两组均摄食普通酪蛋白饲料。经３周游泳训练，测血乳酸和肿瘤坏死因子ＴＮＦ水平骨骼肌和心肌 糖原含量，ＬＤＨ及Ｃａ~（２＋）-ＡＴＰａｓｅ活性。结果：两游泳组大鼠心肌和骨骼肌ＬＤＨ活性显著增强，血乳酸水平明显升高。与游泳对照组相比，ＢＣＡＡ游泳组骨骼肌和心肌Ｃａ~（２＋）-ＡＴＰａｓｅ活性均明显增强，血清ＴＮＦ、心肌糖原增幅更明显，骨骼肌糖原含量减幅降低。结论：补充ＢＣＡＡ可能具有调节运动大鼠心肌、骨骼肌代谢作用。     

钒酸钠改善严重烫伤大鼠胰岛素抵抗的作用机制

目的 探讨钒酸钠改善创伤后胰岛素抵抗和糖代谢紊乱的作用机制。方法 用钒酸钠胃饲３０％ＴＢＳＡⅢ度烫伤大鼠,观察血糖,胰岛素,乳酸动态变化,糖原储存和脂肪合成的变化,以及对胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶（ＩＲ－ＴＰＫ）活性的影响。结果 钒酸钠降低严重烫伤大鼠高血糖,高胰岛素和高乳酸血症,增加肌肉和肝脏糖储存及胰岛素刺激的脂肪合成,对骨骼肌细胞膜胰岛高素受体影响不明显,但可明显恢复ＩＲ－ＴＰＫ活性。结论 钒     

小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠血清乳酸、一氧化氮水平的影响

目的 :观察小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠血清乳酸和一氧化氮的影响。方法 :大鼠预置心导管 ,3 0 %Ⅲ度烫伤后静脉复苏 ,观察小剂量多巴胺 (3 μg/kg min)持续给药后大鼠的血清乳酸、一氧化氮水平的变化。 结果 :与对照组相比 ,小剂量多巴胺治疗能显著降低严重烫伤大鼠血清中的乳酸、一氧化氮水平 ,以伤后 3～ 12h明显。结论 :小剂量多巴胺可降低严重烫伤大鼠休克期血清乳酸、一氧化氮水平