茶多酚的表遗传机制与肿瘤防治

茶多酚(tea polyphenols,TP)是绿茶中对人体有益的主要成分,其对多种不同类型的肿瘤发生可能具有防护作用,其中包括表遗传途径.表遗传指不改变DNA序列的情况下基因表达发生可遗传改变的机制,主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑、siRNA和miRNA调控等,在人类的大多数肿瘤中都观察到表修饰模式的异常.茶多酚具有抑制DNA甲基转移酶、改变组蛋白修饰和miRNA表达的生物学活性,对肿瘤的防护与治疗具有一定的价值.该文就茶多酚的表遗传机制的研究进展作一简要概述.

Abstract：

Tea polyphenols (TP) is one of components from green teas, beneficial to human health. They may help prevent different types of tumors, and are involved in epigenetic pathway. Epigenetics is defined as reversible heritable changes in gene expression that occur without alteration in DNA sequence, including DNA methylation, histone modification, chromatin remodeling, and RNA interference.Most of tumors in humans have shown the abnormal patterns of epigenetics. Tea polyphenols demonstrated some effects of epigenetic agents, inducing epigenetic changes through modifying methylation, histone modifications and expression of some miRNAs. It has potential to be used as an agent for tunor prevention.     

肿瘤化疗药物中的表遗传药理学研究

表遗传事件与肿瘤的发生、发展密不可分。近年来,对肿瘤化疗药物的研究已不再局限于原有单独使用经典的化疗药物,而发展到从表遗传药理(epigenetic pharmacology)角度进行单独或联合用药的深入研究。现就与表遗传药理相关的甲基化抑制剂、去乙酰化酶抑制剂、两者联合使用及其与经典化疗药物联合应用的研究进展进行综述。     

肿瘤细胞中的表遗传编码紊乱

不改变基因的DNA编码，通过改变DNA双链与组蛋白间紧密度来决定基因是否转录表达，这称为表遗传编码机制。表遗传编码的生理作用是通过组蛋白修饰和DNA甲基化，调控细胞在适当的时间、空间位置表达适当的基因，从而控制细胞的增殖状况和分化方向。在细胞发育过程中，细胞内DNA甲基化水平增龄性增高，基因转录活性逐渐降低，使细胞从幼稚增殖进入成熟分化。肿瘤细胞中出现表遗传编码紊乱，致细胞增殖失控，不能进入分化成熟阶段。基因启动子出现甲基化重排，阻碍转录因子与启动子结合，导致基因转录丧失正常调控，合成成熟功能蛋白受阻。利用表遗传机制（如RNA干涉）可成为肿瘤治疗的新方法。     

茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的分子机制研究进展

茶多酚具有抗癌作用,但其分子机制尚未明了.近年来,茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的研究取得了许多突破性进展.茶多酚能下调肿瘤细胞DNA拓扑异构酶与DNA引物酶的活性,抑制DNA的复制;茶多酚可明显促进WAF1/p21,KIP1/p27,p16,p18和p53蛋白表达,抑制cyclin D1,CDK4和CDK6表达,使细胞周期发生G1/S与G2/M阻滞;茶多酚也能通过干预AP-1与NF-kB信号转导通路、调控细胞内氧化还原状态、抑制端粒酶活性等多种机制导致肿瘤细胞增殖抑制.     

茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的分子机制研究新进展

茶多酚具有抗癌作用,但其分子机制尚未明了.近年来,茶多酚抑制肿瘤细胞增殖的研究取得了许多突破性进展.茶多酚能下调肿瘤细胞DNA拓扑异构酶与DNA引物酶的活性,抑制DNA的复制;茶多酚可明显促进WAF1/p21,KIP1/p27,p16,p18和p53蛋白表达,抑制cyclin D1,CDK4和CDK6表达,使细胞周期发生G1/S与G2/M阻滞;茶多酚也能通过干预AP-1与NF-kB信号转导通路、调控细胞内氧化还原状态、抑制端粒酶活性等多种机制导致肿瘤细胞增殖抑制.     

肿瘤表遗传学研究的进展

人类基因组含有两类遗传信息 ,一类遗传信息提供生命所必需蛋白质的模板 ,另一类表遗传学的 (epigenetic)信息提供了何时、何地和如何应用遗传信息的指令。表遗传学是研究没有 DNA序列变化的、可遗传的表达改变。近几年来表遗传学已成为许多生命学科的研究前沿。 DNA甲基化型式是表遗传学信息的主要形式 ,表遗传学的异常通过引起癌遗传学途径基因的失能与获能、增加基因组的不稳定性和印记丢失等途径参与肿瘤的形成 ;同时提供了肿瘤防治的新的干预点 ,有广泛的应用前景。本文还讨论了现代基因的概念和 epigenetics翻译问题     

肿瘤表遗传学（十二）

第十二讲肿瘤研究中表遗传学与遗传学及其存在的问题和前景（2）1表突变与肿瘤易感性表突变（epimutation）是一类表遗传现象。近年来,表突变在人类疾病和肿瘤易感性研究中意义日益受到关注,此文概述近年来的重要进展。     

肿瘤表遗传学研究的进展

人类基因组含有两类遗传信息，一类遗传信息提供生命所必需蛋白质的模板，另一类表遗传学的(epigenetic)信息提供了何时、何地和如何应用遗传信息的指令。表遗传学是研究没有DNA序列变化的、可遗传的表达改变。近几年来表遗传学已成为许多生命学科的研究前沿。DNA甲基化型式是表遗传学信息的主要形式，表遗传学的异常通过引起癌遗传学途径基因的失能与获能、增加基因组的不稳定性和印记丢失等途径参与肿瘤的形成；同时提供了肿瘤防治的新的干预点，有广泛的应用前景。本文还讨论了现代基因的概念和epigenetics翻译问题。     

表遗传修饰与配子形成和胚胎早期发育

DNA甲基化，去甲基化及组蛋白的共价修饰是主要的表遗传修饰(epigenetic reprogramming)方式。在配子形成和早期胚胎发育中，其与基因组印记(genomic imprinting)、染色质结构重组(chromatin remodeling)、X-染色体失活(X-inactivation)的形成均有密切关系，它们的共同作用机制是调节基因的表达。表遗传修饰至少发生在两个关键时期——配子形成期和植入前胚胎，如果在此期间发生异常，则会导致胚胎的死亡及生后各种疾病的发生。     

茶多酚的离体抗氧化作用

目的和方法 采用分光光度法及电泳法,以离体ＲＢＣ膜,肝匀浆还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平,质粒ＤＮＡ损伤程度为检测指标测定茶多酚对离体生物组织的抗氧化作用。结果：茶多酚能显著抑制紫外线致人ＲＢＣ溶血作用（Ｐ〈０．０１）,能显著抑制＾６０Ｃｏγ射线致质粒ＰＵＣ１９ＤＮＡ单链断裂作用（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）对ＶｉｔＣ／Ｆｅ＾２＋激发的肝匀浆ＧＳＨ耗竭,茶多酚也具有显著的抑制作用（Ｐ〈０．０５或Ｐ〉     

茶多酚在体外诱导HL-60细胞的凋亡

目的：寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂。方法：选用茶的主要活性成分茶多酚,采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法,ＤＮＡ凝胶电泳以及透射电镜技术,在体外观察了茶多酚对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）凋亡的影响。结果：被２５０ｍｇ／Ｌ茶多酚作用５ｈ后ＨＬ－６０细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带,透射电镜下看到凋亡小体,茶多酚对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞杀伤作用。结论：在体外培养条件下,茶多酚可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡     

茶多酚对慢性酒精中毒肝损伤影响的实验研究

目的　探讨茶多酚在预防慢性酒精中毒对肝损伤方面的作用及其可能的机制。 方法　将40只雄性昆明小鼠随机分成正常对照组、酒精组、茶多酚低剂量组和茶多酚高剂量组。酒精组、茶多酚组连续90 d喂服30%酒精,8 h后再分别喂服纯水,浓度1%、2%的茶多酚悬液。正常对照组以同样方式和剂量每天2次喂服纯水。末次灌胃24 h检测血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）的含量和肝组织中超氧化物歧化酶SOD、丙二醛（MDA）、组织内活性氧类物质（ROS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）的水平;同时,取肝组织行免疫组织化学显示Bcl-2和Bax的表达。 结果　与正常对照组比较,酒精损伤组肝细胞Bax阳性表达均明显升高（P＜0.01）,肝细胞Bcl-2阳性表达明显降低（P＜0.01）。茶多酚喂服的两组有所改善。 结论　慢性酒精中毒可以引起肝损伤,而喂服茶多酚能减轻损伤程度。     

茶多酚对酒精诱导的小鼠肝脂质过氧化和血清ALT活性变化的影响

目的: 研究茶多酚(TP)对酒精性肝损伤的防治作用。方法: 通过离体和整体实验,采用分光光度法和血清生化检测法,检测肝组织脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平和血清谷丙转氨酶(ALT)的活性。结果: 离体实验中,TP+酒精组肝MDA水平明显低于生理盐水+酒精组(P＜0.01)。整体实验中,TP+酒精组小鼠肝脏MDA水平和血清中ALT活性均显著低于生理盐水+酒精组(P＜0.05)。此外,灌酒精1h后再给TP组,小鼠肝脏MDA含量也明显低于酒精+生理盐水组(P＜0.01)。结论: 茶多酚能抑制酒精引起的小鼠肝组织MDA水平和血清ALT活性的升高,可能具有防治酒精性肝损伤的作用。     

茶多酚对HL-60细胞株体外增殖及细胞周期的影响

目的 探讨茶多酚对人急性早幼粒白血病细胞株HL-60细胞增殖和细胞周期的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT比色法)观察茶多酚对体外培养的HL-60细胞增殖活性的影响.采用HE染色、荧光染色观察用茶多酚后细胞形态变化.用流式细胞仪(FACS)检测细胞凋亡率及细胞周期.结果 (1)MTT比色法检测显示茶多酚能抑制HL-60细胞增殖,在一定范围内呈剂量和时间依赖性(P＜0.05).当茶多酚浓度达到400和800 mg/L时,48 h抑制率分别为(58.90±1.19)%和(72.57±0.70)%.(2)流式细胞仪分析,茶多酚处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰.其凋亡率呈时间、剂量依赖性.(3)流式细胞术发现茶多酚可使HL-60细胞阻滞于S期,其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相剂量关系,以作用24 h对细胞周期的阻滞作用最强.结论 茶多酚能有效抑制HL-60细胞增殖,在一定范围内具有时间和剂量依赖性.茶多酚可体外诱导HL-60细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于S期.     

茶多酚对正常大鼠及糖尿病大鼠右室乳头肌收缩功能的影响

目的：研究不同浓度的茶多酚（TP）对于正常大鼠及糖尿病大鼠成模后第6周、第8周右室乳头肌收缩功能的影响。 方法： 以四氧嘧啶复制糖尿病大鼠模型，将成模后第6周、第8周糖尿病大鼠右心室乳头肌游离，置于氧合台氏液中，电刺激状态下，记录乳头肌收缩功能，观察不同浓度的茶多酚的影响，并与对照组大鼠进行比较。 结果： 成模糖尿病大鼠第6周时舒张1/2间期延长（P<0.05），收缩速度:+dT/dtmax，-dT/dtmax均降低(P<0.01,P＜0.05)，至第8周张力增量，收缩速度:+dT/dtmax，-dT/dtmax降低（P<0.01）,舒张1/2间期延长（P<0.01）。正常SD大鼠和糖尿病大鼠右室乳头肌给予不同浓度的茶多酚，在15-120 mg/L的浓度范围内，茶多酚对于正常大鼠可以产生正性肌力作用;虽然糖尿病6周大鼠的右室乳头肌收缩功能有所降低,但对茶多酚产生与正常大鼠相似的反应，而糖尿病8周的大鼠对于茶多酚无明显反应。 结论： 茶多酚应用于早期的糖尿病性心肌病，可以产生正性肌力作用，但是对于有严重的心肌损害的糖尿病大鼠心肌，不能产生正性肌力作用。     

高糖和茶多酚对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶2及其诱导因子表达的影响

目的 探讨高糖对内皮细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其诱导因子(EMMPRIN)表达的影响,以及茶多酚对高糖作用的干预情况.方法 培养人脐静脉内皮细胞,分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组.培养24 h后,用免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot法测定细胞内MMP-2及EMMPRIN的变化.结果 高糖下调内皮细胞MMP-2及EMMPRIN表达,其变化随时间延长更为明显;而茶多酚干预组MMP-2活性明显上调(P<0.05);茶多酚干预组EMMPRINmRNA及蛋白表达均较高糖组上调(P<0.05),茶多酚干预可拮抗高糖对内皮细胞的影响.结论 高糖影响内皮细胞的细胞外基质降解,茶多酚可以抑制这种作用.     

茶多酚对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响及机制研究

目的探究茶多酚(TP)对精索静脉曲张(Vc)SD大鼠生精细胞凋亡及细胞色素c(Cyt-c)、波形蛋白表达的影响及机制。方法将36只SD大鼠分为对照组、Vc组和Vc+TP组,每组12只。Vc组和Vc+TP组通过左肾静脉结扎构建精索静脉曲张模型,Vc+TP组大鼠给予茶多酚(40 mg/kg)灌胃,对照组和Vc组以等量生理盐水灌胃,连续4周。干预4周后取出大鼠睾丸组织,通过HE染色和TUNEL染色观察睾丸组织损伤和生精细胞凋亡情况,并检测茶多酚对氧化应激指标的影响。通过RT-qPCR和Western blot检测Cyt-c和波形蛋白表达。结果HE染色结果显示,Vc组出现广泛的上皮损伤,Vc+TP组损伤情况明显轻于Vc组。Vc组凋亡指数高于对照组及Vc+TP组(P<0.05)。Vc组丙二醛(MDA)水平高于对照组及Vc+TP组(P<0.05),而超氧化物歧化酶(SOD)水平低于对照组及Vc+TP组(P<0.05);Vc组波形蛋白mRNA和蛋白表达水平均低于对照组及Vc+TP组(P<0.05),而Cyt-c mRNA和蛋白表达水平均高于对照组及Vc+TP组(P<0.05)。结论茶多酚可通过抑制氧化应激反应保护线粒体功能并促进波形蛋白的表达,从而抑制生精细胞凋亡,减轻睾丸损伤,达到缓解精索静脉曲张的目的。