突出的颈椎间盘组织炎症反应机制研究(英文)

目的研究颈椎病发生中突出颈椎间盘组织的炎症反应机制及其在颈椎间盘退行性变和颈椎病发病中的作用。方法临床收集了31例脊髓型颈椎病患者的35个突出的颈椎间盘标本和3例成年人的7个正常颈椎间盘标本。将每个标本分为2份,1份作组织学检查,观察有无炎细胞浸润,1份用生物化学方法测定其中白细胞介素-1α(IL-1α),IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)3种细胞因子含量。结果35例突出颈椎间盘中,18例(51%)在边缘区域有大量炎细胞浸润,其余17例(49%)未见炎细胞浸润,对照组也未见炎细胞浸润。生物化学测定结果表明,颈椎病组IL-1α,IL-6和TNF-α分别为(10.4±1.9),(7.7±2.1),(7.5±1.7)pg/g,有炎细胞浸润组分别为(10.6±2.2),(8.6±1.6),(8.0±1.6)pg/g,无炎细胞浸润组分别为(10.2±1.6),(6.7±2.6),(7.0±1.8)pg/g,对照组分别为(2.0±0.9),(1.2±1.0),(1.3±0.8)pg/g,3种细胞因子含量明显高于正常对照组(P=0.0001,t=11.3591,7.9510,9.3728)。炎细胞浸润组与无炎细胞浸润组3种细胞因子含量相当,差异无显著性意义(P>0.05,t=0.6120,2.6204,1.7394)。结论突出颈椎间盘组织具有炎症反应特性,并可能在颈椎间盘退行性变和颈椎病的发生发展中起重要作用。     

糖尿病大鼠椎间盘组织中戊糖甙素与细胞凋亡的关系

背景：细胞凋亡可能是引起椎间盘细胞减少的一个主要因素。但是关于诱导椎间盘细胞凋亡的生物学因素还不清楚。目的：通过观察糖尿病大鼠椎间盘细胞凋亡情况，探讨可能与凋亡有关的因素。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：实验地点在上海九院实验动物中心和上海第二医科大学生物物理教研室完成。36只雄性SD大鼠(4月龄)，购自中科院上海实验动物中心，平均体质量244go按随机数字表法分为2组，每组18只。千顶措施：处理组用腹腔单次注射链脲佐菌素溶液(streptozotocin，STZ，40mg／kg)造成糖尿病。正常对照组，仅给予等量的柠檬酸缓冲液。72h后测定大鼠的血糖，血糖在16．0mmol／L以上者确定为糖尿病。分别在第1，3，4个月时每组各取6只大鼠处死，取其腰椎间盘组织，进行测定。主要观察指标：用流式细胞术检测椎间盘细胞凋亡情况。用高效液相层析法测定椎间盘组织中戊糖甙素含量变化。结果：处理组大鼠在注射STZ溶液后，血糖水平均高于16．0mmol／L[(23．71&;#177;2．69)mmol／L]。在不同时期，糖尿病大鼠组椎间盘细胞凋亡率(％)分别是18．52&;#177;4．81，18．74&;#177;5．13，19．41&;#177;5．22，明显高于同期对照组4．59&;#177;2．24，9．38&;#177;2．37，10．78&;#177;3．86(P&;lt;0．05)，糖尿病大鼠椎间盘组织中戊糖甙素含量(nmol／g)分别是33．53&;#177;5．88，37．03&;#177;12．77，36．53&;#177;11．95，明显高于同期对照组13．87&;#177;3．30，13．60&;#177;2．56，15．33&;#177;4．04(P&;lt;0．05)。椎间盘组织中戊糖甙素含量与椎间盘细胞凋亡率之间呈正相关性(r=0．857-0．970，P&;lt;0．05)。结论：糖尿病大鼠椎间盘细胞凋亡明显增加。戊糖甙素等糖基化终末产物可能是促进椎间盘细胞凋亡的因素之一。     

颈椎间盘假体稳定性生物力学评价

目的 借鉴腰椎人工椎间盘置换成熟的经验。评价颈椎人工椎间盘置换对失稳颈段脊柱稳定性的重建作用。方法 在6具新鲜尸体的颈椎标本上切除C5-6椎间盘，将人工颈椎间盘假体植入该间隙内。对该颈椎节段进行前屈／后伸、左／右侧弯和左／右旋转运动稳定性评价。经颈椎三维运动测量系统测出该节段的运动范围(ROM)。随后施加2Nm，0．6Hz的疲劳载荷共2500次，评定其稳定性，并与标准的C5-6椎间盘破坏后稳定性值相比较。结果 正常C5-6前屈、后仲运动范围平均值为17．03&;#176;；人工椎间盘植入后前屈、后伸运动范围7．80&;#176;，疲劳载荷后前屈、后伸运动范围9．98&;#176;；椎间盘破坏后前屈、后伸运动范围25．53&;#176;，人工椎间盘植入具有显著的稳定性。正常左右侧弯运动范围平均值为10．75&;#176;；人工椎间盘植入后和疲劳载荷后左右侧弯运动范围分别为8．43&;#176;和9．43&;#176;，椎间盘破坏后左、右侧弯运动范围20．70&;#176;。正常左、右旋运动范围平均值为14．82&;#176;；人工椎间盘植入后和疲劳载荷后左、右旋运动范围分别为13．38&;#176;和13．83&;#176;，椎间盘破坏后左右旋运动范围25．88&;#176;。结论 颈椎间盘破坏后椎节稳定性显著性破坏。人工椎间盘植入后脊柱在前屈、后伸，左右侧弯方向上稳定性显著性改善，左右旋转接近正常值，并可提供59%正常屈伸活动，88%正常左右侧弯活动，93%正常左右旋转活动。     

糖尿病大鼠椎间盘中白细胞介素-1a和肿瘤坏死因子-a的含量变化

背景：糖尿病患者椎间盘突出手术后效果较差，有研究表明与椎间盘组织中有一些炎性细胞因子及其水平的变化有关，但真正的原因和机制尚不十分清楚。目的：测定糖尿病大鼠椎间盘组织中白细胞介素-1a(IL-1a)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)的含量变化，探讨其术后效果不佳的可能原因。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：实验在上海九院实验动物中心和上海第二医科大学免疫研究所完成。对象为清洁级雄性SD大鼠36只，购自中科院上海实验动物中心，4月龄，平均体质量244g。干预措施：将SD大鼠随机分为2组，每组18只。糖尿病组：用腹腔单次注射链脲佐菌素溶液(streptozotocin，STZ)，40mg／kg，造成糖尿病模型。正常对照组：仅给予等量的柠檬酸缓冲液。72h后测定大鼠的血糖。血糖在16.0mmol／L以上者确定为糖尿病。分别在1，3，4个月时处死大鼠(每组中取6只)，取其腰椎间盘组织采用ELISA法(免疫酶联反应)进行测定。主要观察指标：椎间盘组织中IL-1a和TNF-a的含量。结果：在干预1，3，4个月时，糖尿病组中IL-la的含量分别为(1．22&;#177;0．28)，(1，21&;#177;0．21)，(1．36&;#177;0．28)ng／g，对照组分别为(0．20&;#177;0．07)，(0．15&;#177;0．04)，(0．18&;#177;0．06)ng／g。糖尿病组TNF-a的含量分别为(0．99&;#177;0．20)，(1．05&;#177;0．19)，(1．08&;#177;0．19)ng／g，对照组分别为(0．31&;#177;0．08)，(0.27&;#177;0．07)，(0．28&;#177;0．05)ng／g，糖尿病组IL-1a和TNF-a的含量明显高于正常对照组(P&;lt;0．01)。两组中IL-1a和TNF-a的含量在3个不同时期差异无显著性意义。结论：糖尿病大鼠的椎间盘组织中IL-1a和TNF-a的含量明显增加，并在较长时间内维持在高水平。这些变化可能与造成糖尿病患者椎间盘突出术后效果相对差有关。     

大鼠颈椎间盘退行性交后软骨细胞凋亡及形态学改变

背景：椎间盘软骨终板是椎间盘营养渗透的主要途径，又是维持脊柱生物力学的重要结构之一。对其重要性的认识及相关研究日益深入，但对椎间盘退行性变的确切原因仍不清楚。目的：动态观察大鼠颈部动静力失去平衡后颈椎间盘软骨细胞凋亡的形态学改变以及凋亡率。设计：采用完全随机对照设计。地点和对象：实验在上海中医药大学脊柱病研究所完成，对象为8月龄清洁级SD大鼠60只，雌雄各30只。干预：将雌雄大鼠分别按随机数字表法分为3，5，7月对照组与模型组，每组10只，雌雄各5只。取大鼠颈背部正中纵向切口，切开皮肤后，充分游离各层肌肉，横向切断深群颈夹肌和头、颈、寰最长肌，完全切除颈髂肋肌与头半棘肌，然后再依次切断C2～C7棘上和棘间韧带，建立的动静力失衡性颈椎间盘退行性变模型。主要观察指标：3，5，7月后椎间盘软骨细胞凋亡程度。结果：退行性变椎间盘内有典型凋亡的软骨细胞。与对照组比较，各个模型组软骨细胞凋亡指数明显升高(P&;lt;0．01)；模型组间比较，TUNEL法5，7月软骨细胞凋亡指数分别为36．59&;#177;5．93和36．36&;#177;5．13较3月(27．73&;#177;4．12)明显升高(P&;lt;0．01)，流式细胞仪PI法5，7月细胞凋亡指数分别为37．56&;#177;3．82和28．02&;#177;3．48较3月(21．45&;#177;2．23)明显升高(P&;lt;0．01)。结论：退行性变椎间盘软骨终板内软骨细胞凋亡数目增多，这可能是椎间盘退行性变的重要机制之一。     

α-黑素细胞刺激素对大鼠局灶脑缺血再灌注后炎症反应的影响

背景：研究表明，神经免疫调节肽α-黑素细胞刺激素(α-melanophorestimulating hormone，α-MSH)可通过抑制促炎因子释放、改善淋巴细胞活力等途径发挥其抗炎、抗菌、退热和免疫调节作用，在防治全身炎性反应综合征中可能有良好的应用前景。目的：研究α-MSH对缺血-再灌注后脑组织炎性细胞浸润及黏附分子(intercellular adhesion moleeule，ICAM-1)表达的影响。设计：随机双盲对照实验。单位：解放军第三军医大学西南医院急救部。材料：健康雄性Wistar大鼠60只，由第三军医大学实验动物中心提供。实验分3组，即假手术组、缺血组和α-MSH治疗组，每组根据缺血2h后再灌注6，12，24，48，72h5个时相点分为5组，每组各时相点4只。干预：制备大脑中动脉闭塞模型，在每个时间点取2只动物用免疫组织化学方法检测ICAM-1的表达情况。各时间点取2只动物用于检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性。在透射电镜下观察脑组织细胞超微结构。主要观察指标：ICAM．1阳性表达，MPO活性，细胞超微结构。结果：缺血再灌注后高倍镜下(&;#215;200)每平方毫米大鼠脑组织切片的ICAM-1阳性细胞数在假手术组中稳定于(1．02&;#177;0．14)～(1．15&;#177;0．16)个／mm^2；缺血组6h后ICAM-1开始上升，于12h达高峰，由(2．82&;#177;0．07)个／mm^2增至(7．08&;#177;0．09)个／mm^2，24-72h其表达水平仍明显高于假手术组；α-MSH治疗组ICAM-1表达明显下调，由(4．51&;#177;0．11)个／mm^2降至(2．97&;#177;0．09)个／mm^2。脑组织MPO活性在假手术组中稳定于(3．17&;#177;0．27)～(3．67&;#177;0．23)nkat；缺血组于12h开始升高，24h达高峰，由(5．83&;#177;0．15)nkat增至(9．00&;#177;0．25)nkat，到72h活性持续升高；α-MSH治疗组MPO活性较缺血组明显下降，24h活性为(6．63&;#177;0．27)nkat。超微结构观察显示假手术组神经元结构完整；缺血组再灌注神经细胞膜和胶质细胞膜、核膜出现破坏，线粒体肿胀，12h超微结构改变达高峰；治疗组早期同缺血组，12h后并未随时间进一步加重。结论：α-MSH能减轻缺血-再灌注后脑组织炎性细胞浸润及ICAM-1表达，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

免疫球蛋白改善新生儿缺氧缺血性脑病患者意识、肌张力障碍

目的 探讨静脉注射免疫球蛋白(IVIG）改善新生儿缺氯缺血性脑病(HIE)患者意识、肌张力障碍的临床疗效及其作用机制。方法 将40例HIE患儿随机分为IVIG治疗组及常规治疗组。比较两组患儿临床症状、体征消失及住院时间；并采用ELISA法检测患儿治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β1)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果 与常规治疗组相比，IVIG治疗组患儿意识、肌张力障碍等症状消退时间及住院时间较常规治疗组均显著缩短[(36&;#177;11)hvs(55&;#177;20)h．(34&;#177;18)hvs(50&;#177;19)h，(252&;#177;37)hvs(280&;#177;50)h，t=2．04～3．63,P&;lt;0．05]。IVIG治疗后患儿PBMC产生前炎症细胞因子水平明显低于治疗前[TNF-α(1．0&;#177;1．6)μg／L,ILvs(4．2&;#177;3．8)μg／L，IL-1β：(1．1&;#177;1．5)‘μg／Lvs(3．4&;#177;3．8)μg／L，IL-6：(0．8&;#177;1．4)μg／Lvs(3．0&;#177;3．2)μg／L，P&;lt;0．01]，而常规治疗前后无明显差异。结论 IVIG早期应用对改善HIE患儿意识、肌张力障碍具有较好疗效，可能是通过抑制PBMC产生TNF-α，IL-1β和IL-6等损伤性细胞因子发挥作用。     

肿瘤坏死因子-α在大鼠脑缺血再灌注中的表达及对神经细胞凋亡的影响

目的：观察大鼠脑缺血再灌注损伤后肿瘤坏死因子-α(tumor necmsis factor-alpha，TNF-α)表达及细胞凋亡情况，探讨TNF-α在脑缺血再灌注损伤中的作用。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，分为3组：脑缺血再灌注组大鼠大脑中动脉阻塞2h，再灌注2，6，12，24，48，72，96h、假手术组及永久缺血组，分别测定TNF-α表达(用免疫组织化学法)及细胞凋亡数(原位凋亡检测试剂盒)。结果：脑缺血再灌注组TNF-α表达水平[6h：(15．0&;#177;3．21)个／mm^2，12h：(47．0&;#177;0．87)个／mm^2，24h：(49．0&;#177;10．3)个／mm^2，48h：(44．8&;#177;6．9)个／mm^2，96h:(37．9&;#177;6.4)个／mm^2、细胞凋亡数[2h：(33．3&;#177;0．8)个／mm^2，6h:(56．6&;#177;1．6)个／mm^2，12h:(72．3&;#177;4.2)个／mm^2．24h：(86．6&;#177;5．5)个／mm^2，48h：(96．8&;#177;0．9)个／mm^2]明显高于假手术组(P&;lt;0.01)及永久缺血组(P&;lt;0.05)；且TNF-α表达与细胞凋亡数关系密切(r=0．567．P&;lt;0，01)。结论：大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF-α在神经元迟发性坏死中起着重要作用。     

脑心通对局灶性脑缺血大鼠行为学和脑组织肿瘤坏死因子α的影响

目的：探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织肿瘤坏死因子α表达的影响。方法：实验于2004-03／11在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。取成年健康雄性SD大鼠150只，制造大鼠局灶性大脑中动脉阻断造模手术后，将大鼠随机分为5组，即脑心通4g／kg组、2g／kg组、1g／kg组、生理盐水和假手术组，各组又分为6，24，48，72h，7d 5个亚组，每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药，生理盐水组给同体积的生理盐水，于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑，观察脑含水量的变化，病理切片苏木精一伊红染色观察组织病理学改变，免疫组织化学的方法测定肿瘤坏死因子α的动态变化。结果：实验中有8只大鼠死亡，后随机补充，进入结果分析仍为150只大鼠。①行为学评分：大鼠在大脑中动脉阻断后手术对侧肢体存在不同程度瘫痪，在术后48和72h时神经功能缺损最为明显，7d时神经功能基本恢复正常。②病理观察：除假手术组外，其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润；梗死后48h，炎性细胞浸润明显增多；并持续到7d。③脑组织含水量：与假手术组相比，其他各组在各时间段均增加。术后24，48h脑心通4g／kg组为(78．95&;#177;1．36)％，(79．44&;#177;1．01)％，脑心通2g／kg组为(79．03&;#177;0．87)％，(80．46&;#177;1．54)％，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(79．21&;#177;0．68)％，(82．02&;#177;1．76)％．(79．30&;#177;1．11)％，(82．68&;#177;0．91)％，P&;lt;0．05]。④肿瘤坏死因子d阳性细胞表达：与假手术组相比，其他各组在各时问段均增加，梗死后6h开始增多，48h达高峰。术后24，48h脑心通4g／kg组为(27．6&;#177;2．1)，(18．4&;#177;1．5)个，脑心通2g／kg组为(38．4&;#177;2．1)，(23．2&;#177;3．3)个，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(50．4&;#177;5．6)，(30．8&;#177;5．3)，(52．8&;#177;3．7)，(33．0&;#177;4．7)个，P&;lt;0．05]。结论：脑心通可能通过减轻脑水肿，降低脑内肿瘤坏死因子α的表达减少炎性细胞的浸润，从而对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

血小板衍生生长因子对体外培养人椎间盘细胞功能的影响

目的：观察血小板衍生生长因子对体外培养人椎间盘细胞凋亡、分裂增殖及基质合成的影响。 方法：实验于2003-05／2004-02在卫生部小儿先天畸形重点实验室完成。2003-05／12中国医科大学附属第一临床医院骨科施行脊柱侧凸前路松解术的患者8例，术前检查无代谢性软骨疾病。将术中取出椎间盘组织（患者知情同意）立即置人装有HAMF-12培养液的无菌瓶内带至实验室。体外单层培养人椎间盘细胞，取生长良好的第2代细胞实验，加入不同浓度（1，10，100，1000μg/L）的血小板衍生生长因子，利用dUTP缺口末端标记法检测椎间盘细胞凋亡；用噻唑蓝法观察椎间盘细胞分裂增殖情况，利用氯胺T法和Alcian法检测细胞培养液中羟脯氨酸及硫酸软骨素的含量。 结果：①血小板衍生生长因子对人椎间盘细胞凋亡的影响：不同浓度血小板衍生生长因子10，100，1000μg/L椎间盘细胞凋亡率与对照组比较差异均有非常显著性意义（0．91&;#177;0．32，0．52&;#177;0．24，0．11&;#177;0．04，P〈0．01），低浓度（1μg／L）血小板衍生生长因子对椎间盘细胞凋亡无影响。②不同浓度血小板衍生生长因子的培养液中硫酸软骨素和羟脯氨酸的含量：随着血小板衍生生长因子浓度的增加（10，100，1000μg/L），硫酸软骨素含量、羟脯氨酸含量明显增加[硫酸软骨素：（33．34&;#177;4．32），（48．67&;#177;6．71），（69．79&;#177;6．62）μg/L；羟脯氨酸：（5．79&;#177;0．91），（8.27&;#177;1．23），（10.34&;#177;1．51）μg/L，P〈0．01]，血小板衍生生长因子的浓度与两者呈正相关（ra=0．875，p〈0.01；rb=0．912，P〈0．01）。③血小板衍生生长因子对椎间盘细胞生长和增殖的影响：10μg／L组和100μg／L组血小板衍生生长因子对人椎间盘细胞有促进增殖的作用，1μg/L组血小板衍生生长因子对人椎间盘细胞的增殖无影响，而1000μg／L组血小板衍生生长因子可抑制人椎间盘细胞增殖。 结论：血小板衍生生长因子对体外培养的椎问盘细胞凋亡具有拮抗作用，并对椎间盘细胞的分裂增殖、基质中胶原及蛋白多糖的合成具有促进作用。主     

氦氖激光血管内照射对颈髓损伤患者血液流变学及抗氧化能力的影响

目的：观察低能量氦氖激光血管内照射(ILIB)对颈髓损伤患者血液流变学及机体抗氧化能力的影响并探讨其临床意义。方法：将49例颈髓损伤患者分为低能量氦氖激光治疗组25例和常规治疗组24例，治疗前及治疗1个月后检测血液流变学及超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平，与对照组比较，观察低能量氦氖激光对颈髓损伤患者血液流变学及抗氧化能力的影响。结果：颈髓损伤患者血液黏度增高，血清SOD活力降低且MDA含量增高。与常规治疗组相比，治疗后激光组全血黏度高低切变值和血浆黏度均明显改善[(4．8&;#177;0.9)mPa&;#183;s vs (5．7&;#177;1．2)mPa&;#183;s，(6.1&;#177;1．0)mPa．s vs (7.5&;#177;12)mPa&;#183;s，(1．68&;#177;0．28)mPa&;#183;s vs (2.16&;#177;0．28)mPa&;#183;s1(t=2.451-2.537,P&;lt;0．05)，血清SOD活力增高[(1.52&;#177;0．17)pmol／(s&;#183;L)vs(1．35&;#177;0．25)pmol／(s&;#183;L)](t=2.652．P&;lt;0.05)，MDA含量显著降低[(4．0&;#177;0．7)μmol/L vs (4．8&;#177;0.8)μmol／L](t=2．478，P&;lt;0．05)。结论：低能量氦氖激光血管内照射可改善颈髓损伤患者血液流变学状况，提高机体抗氧化能力减轻自由基的损害。     

神经弹拨术治疗腰椎间盘突出症前后血液流变学改变

背景：椎间盘在生理状态下是与循环隔绝的无血管组织，营养来源于周围血管的渗透作用。任何影响椎间盘周围毛细血管网的因素，都是影响椎间盘营养的危险因素，椎间盘的功能变化可能影响血液流变学系统及椎闯盘本身的细胞代谢和转运。目的：探讨神经弹拨术治疗腰椎间盘突出症(Protrusion of lumbar intervertebral disk，LIDP)前后与血液流变学的相关性。设计：非随机对照的研究。地点和对象：1999～01／2001-12菏泽市立医院收治LIDP患者100例，男63例，女37例；年龄17～60岁，平均35．84岁；病程2d～14年。健康组50例为健康体检抽取，男28例，女22例；平均37．63岁。干预：对100例LIDP患者应用神经弹拨术治疗前后及50例健康成年人的血液流变学9项指标进行检测比较。全血自动黏度快测仪测定全血比高切、中切及低切黏度值。血细胞比容(HCT)：采用温氏(Wintrobe)法。红细胞沉降率(FSR)：采用魏氏国际标准法。红细胞降率K值，经公式换算而成。血浆纤维蛋白原：采用亚硫酸钠比浊法。体外血栓长度：采用SDZ-Ⅱ型体外血栓测定仪测定。体外血栓湿重：采用TG328A电光分析天平测定。主要观察指标：检测血液流变学指标。结果：100例患者治疗前血细胞比容、全血比黏度(高切、中切及低切)、体外血栓长度及湿重分别为0．44&;#177;0．03，(5．78&;#177;0．46)，(7．74&;#177;0．69)，(15．49&;#177;1．04)mPa&;#183;s，(17，69&;#177;5．14)mm．(69．49&;#177;15．14)mg，高于健康组[0．43&;#177;0．03，(5．59&;#177;0．36)，(7．30&;#177;0．46)，(14．86&;#177;1．02)mPa&;#183;s，(14．10&;#177;2．46)mm，(58．98&;#177;12．31)mg]，而治疗后又趋于正常，t=2．74～6．10，P&;lt;0．05或P&;lt;0．01。结论：LIDP患者血流呈黏稠倾向，其病因及疗效可能与血液流变学相关，疼痛解除血液流变学恢复正常。     

脑缺血再灌注损伤后炎症反应与赛来昔布的脑保护作用

目的：细胞间黏附分子1及白细胞浸润参与了脑缺血再灌注损害过程，观察赛来昔布对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死体积、脑缺血坏死区周边细胞间黏附分子1和白细胞浸润的影响，探讨其是否具有脑保护作用。方法：实验于2003-12／2004-02在大连医科大学附属第二医院中心实验室进行。SD大鼠36只随机分为3组：赛来昔布组(n=16)、安慰剂组(n=16)及假手术组(n=4)，其中赛来昔布组和安慰剂组按脑缺血再灌注2，4，6，24h分为4个亚组(n=4)。手术前10min赛来昔布组用赛来昔布灌胃(0．25mg／g,以3mL生理盐水溶解)，安慰剂组安慰剂灌胃，剂量相同，然后参照改良的Longa-Zea线栓法制作大脑中动脉闭塞及再通模型，假手术组仅做颈部正中切口暴露右侧颈总动脉后缝合皮肤。观察大鼠大脑中动脉闭塞2h再灌注2，4，6，24h4个时相点梗死体积，缺血区白细胞计数，并应用免疫组织化学法染色观察细胞间黏附分子1阳性微血管数。结果：36只大鼠进入结果分析。①赛来昔布组再灌注后2，4，6，24h的梗死体积明显小于同时段安慰剂组[(4．8l&;#177;0．13)％，(8．22&;#177;0．25)％，(11．83&;#177;0．62)％，(15．93&;#177;0．42)％，(6．56&;#177;2．07)％，(10．12&;#177;2．37)％，(13．53&;#177;1．47)％，(17．86&;#177;2．78)％，P&;lt;0．05]。②假手术组细胞间黏附分子1阳性表达为(0．63&;#177;0．62)个，未见白细胞浸润。脑缺血再灌注后，脑缺血坏死区周边微血管内皮细胞细胞间黏附分子1达及白细胞浸润增多，并于24h达高峰，此时细胞间黏附分子1表达及白细胞浸润赛来昔布组低于同期安慰剂组[(43．00&;#177;1．41)，(6．25&;#177;1．26)，(59．50&;#177;2．25)，(6．75&;#177;1.8)个，P&;lt;0．01]。结论：赛来昔布可缩小脑缺血再灌注后的脑梗死体积，抑制局灶性脑缺血再灌注时炎症反应，非特异性地起到脑保护作用。 黏附分子l；白细胞     

生脉注射液对2型糖尿病肾病患者血液肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的影响

目的：观察生脉注射液对2型糖尿病肾病患者血液细胞因子的影响，探讨生脉注射液治疗2型糖尿病肾病的机制。方法：2000—03／2003—06永州市人民医院内分泌科住院2型糖尿病肾病患者56例。按随机数字法将患者分为治疗组和对照组，各28例。选择30例本院健康体检自愿者作为对照组。治疗组给予生脉注射液治疗，对照组予常规西药治疗。于治疗前后检测患者血液中细胞因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平并与正常组进行比较。结果：生脉注射液治疗2型糖尿病肾病总有效率75％，而对照组总有效率为43％，两组比较，差异有显著性意义(r=5．976，P=0．028)。2型糖尿病肾病患者TNF-α和IL-6水平明显高于正常组(t=17．56，18．15，P&;lt;0．01)。治疗前生脉注射液治疗组血液中TNF-α【(245．88&;#177;29．93)ng／L】和IL-6[(213．45&;#177;32．76)ng／L]水平与对照组血液中TNF-α[(257．43&;#177;27．65)ng／L]和IL-6【(203．87&;#177;34．15)ng／L】比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；治疗后生脉注射液治疗组血液中TNF-α[(197．52&;#177;25．67)ng／L]和IL-6[(145．83&;#177;26．67)ng／L]显著低于对照组血液中TNF-α[(243．76&;#177;28．52)ng／L]和IL-6[(184．26&;#177;29．61)ng／L]水平(t=6．377，5．103，P均&;lt;0．01)。生脉注射液治疗组治疗后尿蛋白量【(1．15&;#177;0．58)g／24h】显著低于对照组【(1．46&;#177;0．64)g／24h】(t=1．899，P&;lt;0．0001)，且生脉注射液治疗组治疗前和治疗后24h尿蛋白量与TNF-α和IL-6水平呈正相关(r=0．6432，0．7537，0．7246，0．6858，P&;lt;0．01)。结论：生脉注射液对2型糖尿病肾病有显著疗效，可能与生脉注射液能调节炎性细胞因子的产生。抑制炎症反应有关。     

类风湿关节炎患者Th亚群在其发病机制中的作用。

目的：在单细胞水平上研究类风湿关节炎(RA)患者滑液及外周血中Thl／Th2细胞因子模式，探讨Th亚群在RA发病机制中的作用和意义。方法：15例RA患者的滑液单个核细胞(SFMC)和外周血单个核细胞(PBMC)及lO例正常人的PBMC用PMA离子霉素和莫能菌素刺激培养6h，细胞内细胞因子免疫荧光双标染色后，用流式细胞仪检测Th亚群。结果：与PBMC[Thl，Th2，Th0分别为(8．1&;#177;2．1)％，(2．8&;#177;1．O)％，(1．8&;#177;0．5)％)相比，RA患者SFMC中Thl和Th0的比例明显增高(Thl(29．2&;#177;3．9)％，Th0(4．0&;#177;1．4)％)，而Th2则明显降低[(1．2&;#177;0．6)％]；RA患者和正常人PBMC中，Thl，Th2，Th0差异均无显著性意义[正常人Thl，Th2，Th0分别为(7．3&;#177;2．2)％，(3．4&;#177;1．1)％，(2．1&;#177;0．8)％]。结论：RA患者关节内存在Th1亚群的不平衡，Thl和Th0占明显优势，Th2则明显减少，恢复Thl／Th2平衡对RA的疾病进程和治疗将有重要意义。     

大鼠脑组织缺血再灌注后促红细胞生成素对神经元的保护

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量、凋亡细胞数量变化、脑组织匀浆一氧化氮含量、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性改变的影响。方法：实验于2003-03／2004-12在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室完成。选择健康Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只，缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)，缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。除正常对照组线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注。促红细胞生成素组于再灌注开始时经腹腔按2000U／kg注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2．6，12，24，48h，每个时间点6只。应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用硝酸还原酶法测定脑组织一氧化氮含量，羟胺法测定脑组织超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸法测定脑组织中丙二醛含量。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286.7&;#177;33.8)，(268.6&;#177;44.5)个／视野；(271．9&;#177;30．4)．(240．8&;#177;22，5)个／视野：(258，3&;#177;29．5)，(2018&;#177;307)个／视野；(t=3.189～5.589，P&;lt;0.01)]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后6，12，24，48h比生理盐水对照组阳性细胞数明显减少[(21.5&;#177;5.8)，(28．4&;#177;6．51个／视野：(327&;#177;4．6)，(48.8&;#177;7.6)个／视野；(42.8&;#177;6.6)，(60．7&;#177;10.2)个／视野；(51.8&;#177;9.5)个／视野，(81.6&;#177;12．3)个／视野，(t=3.457～6.347,P&;lt;0.01)1。③脑组织一氧化氮含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6．12，24，48h比生理盐水对照组一氧化氮含量明显降低[(48．2&;#177;5．1)，(59，4&;#177;5．5)mmol／L;(51．4&;#177;6，3)，(66，3&;#177;98)mmol／L：(59．7&;#177;6．6)，(80.7&;#177;10.2)mmol／L；(55．7&;#177;8．1)，(77．8&;#177;9.2)mmol／L：(49.3&;#177;6．7)，[67．3&;#177;7，1)mmol／L，(t=3．258～5，624，P&;lt;0．01)]。④脑组织超氧化物歧化酶活性：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组超氧化物歧化酶活性明显增高[(3.78&;#177;0.74)，(3.21&;#177;0．31)μkat／L；(3．41&;#177;0.43)，(2．92&;#177;0.31)μkat／L；(3．21&;#177;0．35)，(2．51&;#177;0．27)μkat／L；(3．64&;#177;0．55)，(3.01&;#177;0.32)μkat／L；(4．10&;#177;0.56)，(3.55&;#177;0.41)μkat／L，(t=3．485～6，457，P&;lt;0．01)]。⑤脑组织丙二醛含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组丙二醛含量明显降低[(40.7&;#177;4．4)，(54.6&;#177;6．7)μmol／L；(51.3&;#177;5.4)，(65.7&;#177;8．8)μmol／L；(61.7&;#177;7．2)，(77.4&;#177;7.5)μmol／L；(53.8&;#177;6．4)，(67．8&;#177;9.1)μmol／L；(39．7&;#177;4．0)，(53．3&;#177;4.9)μmol／L，(t=3.541～6.045，P&;lt;0．01)]。结论：促红细胞生成素可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马cAl区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，降低一氧化氮生成量，使脂质过氧化反应的程度减轻，起到了对神经细胞的保护作用。     

酒依赖患者家庭干预后生活质量对照分析

目的：探讨家庭干预对酒依赖患者及家属生活质量的影响。方法：对济宁、泰山、枣庄3地市286例酒依赖患者采用单纯随机抽样方法划分为干预组(n=148)和对照组(n=138)，对干预组家庭采用上门随访、电话随访等形式给予有关治疗的详细内容及注意事项，并给予心理辅导3年后与对照组家庭采用相应生活质量问卷进行评定。结果：干预组患者生理维度(3．5&;#177;0．5)、心理维度(3．4&;#177;0．7)、总均分(3．4&;#177;0．6)明显高于对照组(3．2&;#177;0．5，3．2&;#177;0．6，3．2&;#177;0．5)，(t=5．09，2．59。-2．83，P(0．0l—0．05)。而对照组焦虑(1．9&;#177;0．5)、抑郁(1．8&;#177;0．3)、躯体化(2．0&;#177;0．8)及SCL均分(1．9&;#177;0．6)却高于干预组(1．7&;#177;0．3。1．6&;#177;0．5，1．8&;#177;0．7，1．7&;#177;0．6)，(t=-4．15，-4．08，-2．26，-2．83，P(0．0l～0．05)。家庭干预组在客观评分(4．6&;#177;1．2)、家庭关系(5．8&;#177;1．4)及Q0L总分(60．2&;#177;12．5)明显优于对照组(4．1&;#177;1．1。5．0&;#177;0．8，52．2&;#177;l0．2)，(￡=3．68，2．48，5．93，P(0．0l—0．05)。家庭干预组和对照组复发率分别为l0．9％，64．5％。结论：综合式家庭干预有利于提高酒依赖患者及家属的生活质量，降低复发率，提高患者的社会功能。     

人颈椎间盘假体置换后颈椎应力分布评价

目的：采取生物力学实验应力分析手段，评价颈椎间盘假体植入后颈椎应力分布及力学性能变化。方法：实验于2004—04／05在上海大学生物力学研究所实验室进行。采集6具新鲜人尸体颈椎标本（家属自愿捐助）。颈椎间盘假体采用医用不锈钢和医用聚乙烯材料制作，高度为5mm，深度为14mm。屈伸活。动度为8&;#176;，左右侧弯10&;#176;。实验标本在C3-7平面截取标本并在上、下截面浇灌骨水泥平台，两端平行度≤1&;#176;。分为正常组（未置换假体前）和颈椎间盘置换组（置换假体后），每组均为6个标本。模拟人体正常颈椎受力状态。选择50，100和150N3个级别载荷，测试两组C4-5椎节在屈曲、伸展和侧屈状态下，椎体和关节突关节应变和应力。结果：两组各6个标本均进入结果分析。①两组颈椎椎体和小关节的载荷-应变变化：正常颈椎在载荷150N时，屈曲位C4微应变为1406&;#177;98，C，为860&;#177;60；随着载荷增加，C4应变增加较大。伸展位，C4微应变为2035&;#177;140，C5为1450&;#177;102；随着载荷增加，C4和C5应变均增大。侧屈位时，颈椎应变情况位于屈曲位和伸展位之间。人工颈椎间盘置换后，C4，C5和C4-5关节突关节在各种体位及载荷下均较正常颈椎的应变略小（P〉0．05）。②两组颈椎椎体与小关节的应力：正常颈椎应力前屈时C4为（1．97&;#177;0．14）MPa，C5小于C4为（1．20&;#177;0．09）MPa，C4-5关节突关节为（1．54&;#177;0．11）MPa。伸展位时，C4，C5和C4-5关节突关节应力显著增加[（2．85&;#177;0．20），（2．03&;#177;0．14），（2．18&;#177;0．17）MPa]。颈椎问盘假体置换后，C4，C5和C4-5节突关节的应力值较正常组略减小（P〉0．05）。颈椎间盘假体置换后屈曲、伸展和侧屈体位时应力变化规律与正常组一致。结论：颈椎间盘假体植入椎间隙后，椎体和小关节的载荷-应变以及应力分布具有类似正常椎间盘的生物力学特性，说明该设计具有显著的椎节稳定性。并且在生理载荷下保留椎节活动度以及不同运动状态下正常应力分布的生物力学功能。     

壳聚糖关节腔注射对骨性关节炎膝关节功能及关节液炎性因子的影响

目的：观察关节腔注射壳聚糖对膝关节骨性关节炎患者关节液炎性因子白细胞介素1、白细胞介素6、超氧化物歧化酶及丙二醛含量的变化．评估壳聚糖关节腔注射对骨性关节炎关节功能的影响。方法：选择2002-09／2004-10遂宁市人民医院骨科20例膝关节骨性关节炎患者，共26膝，其中男7例9膝，女13例17膝；年龄35～72岁；病程6个月～30年。患者均经X射线片证实为膝关节骨性关节炎且自愿参加研究。给予患者关节腔注射10g／L壳聚糖，1个月内2次为1个疗程，每次治疗间隔2周。1年内4个疗程，每个疗程间隔2个月。观察膝关节的休息痛、活动痛、压痛、肿胀和关节功能，以上评定结果(计分)之和为关节功能指数。分值越高表示功能越差。测定治疗后1，4，7，12个月关节液中白细胞介素1和白细胞介素6水平，丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性的改变。结果：①治疗后4，7，12个月的关节功能指数[(8．6&;#177;1．8)，(7．3&;#177;1．7)，(5．6&;#177;1．9)分]明显低于治疗前[(10．5&;#177;2．1)分，t=3．256，4．590，5278，P&;lt;0．01]。②治疗后1，4，7，12个月关节液白细胞介素1水平[(345．9&;#177;60．4)，(311．7&;#177;30．5)．(2735&;#177;20．6)，(223．5&;#177;31．6)ng／L]明显低于治疗前[(425．3&;#177;56．3)ng／L](t=2．956～6．321，P&;lt;0．01)。白细胞介素6水平[(440．7&;#177;61．2)．(3807&;#177;51．4)，(310．8&;#177;36．9)，(240．8&;#177;29．9)ng／L]明显低于治疗前[(515．3&;#177;45．7)ng／L，t=3．125～5．236，P&;lt;0．01]。⑧超氧化物歧化酶活性[(2．68&;#177;0．40)，(3．68&;#177;0．51)，(4．71&;#177;0．54)，(5．21&;#177;0．60)μkat／L]明显高于治疗前[(1．71&;#177;0．59)μkat／L](t=3．025～5．786，P&;lt;0．01)。④丙二醛水平[(23．8&;#177;2．6)，(19．6&;#177;2．6)，(16．2&;#177;2．5)．(13．2&;#177;2．5)mmol／L]明显低于治疗前[(30．5&;#177;3．4)mmol／L，t=3．287～5．642，P&;lt;0．011。结论：壳聚糖关节腔注射可减少关节液中炎性因子白细胞介素1和白细胞介素6及丙二醛水平，升高超氧化物歧化酶活性，并有效地缓解骨性关节炎的临床症状。     

脑心通对实验性脑梗死大鼠行为学和脑组织NF-κB影响的量效分析

目的：研究不同剂量脑心通对实验性脑梗死大鼠神经功能障碍、脑水肿及脑组织中炎性细胞因子NF-κB表达的影响。方法：实验于2004-03／11在河北医科大学神经内科实验室进行，取成年健康雄性SD大鼠150只，制备大脑中动脉梗死模型，造模手术完毕后，将大鼠随机分为5组，即脑心通大剂量(4g／kg)组、中剂量(2g／kg)组，小剂量(1g／kg)组、生理盐水和假手术组(假手术组为4k造模组)，各组又分为6，24，48，72h，7d 5个亚组，每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药，生理盐水组给同体积的生理盐水，于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑，应用干一湿重法观察脑含水量变化、苏木精-伊红染色观察梗死周围炎性细胞浸润、免疫组织化学方法观察脑组织中NF-κB表达。结果：150只大鼠经补充进入结果分析。①造模后大鼠手术对侧肢体存在不同程度瘫痪，术后48和72h时神经功能缺损最为明显，7d时神经功能基本恢复正常。②除假手术组外，其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润；梗死后48h，炎性细胞浸润明显增多；并持续到7d。③与假手术组相比，其他各组NF-κB阳性细胞表达在各时间段均增加，梗死后6h开始增多，48h达高峰。脑心通大剂量组术后24，48h脑组织中NF-κB阳性细胞[(13．8&;#177;2．49)个，(21．0&;#177;3．16)个]，比脑心通中剂量组[(21．0&;#177;3．54)个，(29．2&;#177;3．11)个]、脑心通小剂量组[(21．0&;#177;3．99)，(31．2&;#177;2．59)个]和生理盐水组减少[(21．4&;#177;3．97)个，(33．8&;#177;1．30)]个表达明显(P&;lt;0．05)]。④与假手术组相比，其他各组脑组织含水量在各时间段均增加。术后24，48h脑含水量脑心通大剂量组[(78．95&;#177;1．36)％，(79．44&;#177;1．01)％]与脑心通中剂量组[(79．03&;#177;0．87)％，(80．46&;#177;1．54)％]，明显低于同期的脑心通小剂量组[(79．21&;#177;0．68)％，(82．02&;#177;1．76)％]和生理盐水组[(79．30&;#177;1．11)％，(82．68&;#177;0．91)％P&;lt;0．05]。结论：脑心通干预可改善脑梗死大鼠的神经功能抑制炎性细胞因子NF-κB的表达，减轻脑水肿，保护神经元，其功能改善程度与脑心通剂量成正相关。