JMJD1A通过调节c-Myc的表达影响胃癌细胞的增殖及侵袭

[目的]探讨JMJD1A调节c-Myc的表达变化对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。[方法]使用QRT-PCR和Western blot实验检测JMJD1A、c-Myc基因表达,CCK8用于检测转染后细胞的增殖能力,Transwell实验及划痕实验检测转染后细胞的侵袭及迁移能力。[结果]JMJD1A高表达并且可调控c-Myc的表达,对c-Myc的表达呈正调控。在JMJD1A的表达受到干扰后,胃癌细胞的增殖能力明显下降,侵袭和迁移能力明显降低。[结论]JMJD1A能够通过调控c-Myc表达促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。     

c-Myc调控lnc-CCDC117-1对舌鳞癌进展的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNAs)lnc-CCDC117-1与致癌转录因子c-Myc之间的靶向调控关系及lnc-CCDC117-1敲低、过表达后对舌鳞癌细胞发展的影响。方法 将携带有flag-c-Myc、plko.1-shc-Myc及其对照的慢病毒载体分别转染HN6、SCC9、CAL27细胞，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lnc-CCDC117-1的表达情况。此外，荧光原位杂交实验检测lnc-CCDC117-1在细胞内的定位。在此基础之上，构建lnc-CCDC117-1的表达载体、敲低载体并转染HN6、SCC9、CAL27细胞，CCK-8法、克隆形成等实验验证舌鳞癌细胞的增殖状况。结果 通过基因芯片技术初步筛选出了受c-Myc正调控的lncRNAs,在舌鳞癌细胞HN6中过表达或敲低c-Myc后，验证了这些lncRNAs与芯片结果一致，并表明lnc-CCDC117-1的表达差异最显著。qRT-PCR实验表明c-Myc对lnc-CCDC117-1具有正性调节的作用，过表达c-Myc显著上调lnc-CCDC117-1;敲低c-Myc明显下调lnc-CCDC117-1水平。...     

类a-高重复顺序和Alu家族DNA的原位杂交研究

核酸分子原位杂交,已广泛应用于基因定位和基因调控表达的研究。目前已能把5S RNA基因。18S+28S基因、组蛋白基因、血红蛋白基因等精确地定位于人类不同号染色体。有关类a-高重复顺序已有原位杂交的报道,它定位于人1、3、7、10、19号染色体的着丝粒区,这种基因是由340个碱基对组成富有AT的高重复顺序。Alu家族是近年来发现的另一类高重复顺序,是由300个左右碱基对组成,其重复拷贝数约为500,000,它不同于类a-顺序,可能参与基因调控。如在珠蛋白、胰岛素等结构基因     

小分子药物CX-3543对胆管癌QBC939细胞中c-Myc相关miRNA及miRNA靶基因表达的影响研究

目的 探讨在小分子药物CX-3543作用下,胆管癌细胞QBC939中癌基因c-Myc相关的miRNA及miRNA靶基因的表达变化.方法 MTT检测CX-3543对QBC939细胞增殖的影响.Western blot检测CX-3543处理后细胞中c-Myc及c-Myc相关miRNA靶基因的表达,同时,Northern blot检测c-Myc相关miRNA的表达.结果 CX-3543抑制QBC939细胞增殖.CX-3543可抑制QBC939细胞中c-Myc的表达,且与作用时间及剂量正关性.同时CX-3543抑制了c-Myc相关miRNA(miR-9、miR-19和miR-20α)的表达,继而上调了miR-9及miR-19的靶基因E-钙粘蛋白及RB1的表达,下调了miR-20α靶基因Pten的表达.结论 CX-3543可有效抑制胆管癌细胞系QBC939中癌基因c-Myc的表达,影响c-Myc相关miRNA及miRNA靶基因的表达,减弱c-Myc介导的通路对胆管癌的影响.     

c-Myc基因在人非小细胞肺癌中的表达及基因沉默抑制H1299细胞效果的实验研究

目的:分析人非小细胞肺癌(non-small cell carcinoma,NSCLC)组织中c-Myc基因的表达,探讨沉默c-Myc基因在非小细胞肺癌基因治疗中的前景?方法:应用实时荧光定量PCR法检测84例非小细胞肺癌组织及其相应癌旁组织中c-Myc基因mRNA的表达情况?通过脂质体LipofactAMINE2000将c-Myc基因siRNA瞬时转染至非小细胞肺癌H1299癌株细胞中,顺铂(Cisplatin,cis)药物毒性实验验证c-Myc基因沉默对肿瘤细胞的抑制效果?应用RT-PCR检测H1299细胞中c-Myc基因RNA的表达,CCK-8法检测抑制细胞的效果?结果:非小细胞肺癌组织中c-Myc基因mRNA的表达水平高于相应的癌旁组织,差异有统计学意义(P < 0.05)?c-Myc siRNA瞬时转染后的H1299细胞中,c-Myc基因mRNA的表达水平显著下降(P < 0.05)?将c-Myc基因沉默和顺铂联合使用,还可以显著提高顺铂对H1299细胞增殖的抑制效果(P < 0.05)?结论:c-Myc基因在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,沉默c-Myc基因能显著提高顺铂抑制非小细胞肺癌H1299 细胞增殖的作用,c-Myc基因有可能成为NSCLC基因治疗的新靶点?     

沉默HMGA基因对非小细胞肺癌A549细胞增殖和转移的影响及机制

目的：研究沉默HMGA1 和HMGA2 基因的表达对非小细胞肺癌细胞A549恶性增殖和转移的影响及其机制。方法：通过MTT实验测定HMGA1和HMGA2基因沉默之后,A549细胞的增殖能力;通过流式细胞术测定HMGA1和HMGA2基因沉默之后,A549细胞凋亡的情况;利用划痕实验测定分别沉默HMGA1和HMGA2基因的表达之后,A549细胞的转移能力;用Q-PCR和Western blot分析HMGA1和HMGA2基因沉默后,抑制A549细胞增殖和转移的分子机制。结果：siRNA-HMGA1和siRNA-HMGA2 干扰A549 细胞48 h后,A549 细胞的生长活力降低（P ＜0.05）。Q-PCR结果显示,siRNA-HMGA1 干扰A549 细胞48 h之后,导致细胞凋亡相关基因FOXM1和c-Myc的相对表达量降低（P ＜0.05）,但对细胞侵袭转移相关基因E-Cadherin、N-Cadherin和Vimentin的表达没有影响（P ＞0.05）。Western blot实验结果进一步证实siRNA-HMGA1干扰A549细胞后,可抑制FOXM1和c-Myc蛋白水平的表达（P ＜0.05）。Q-PCR结果显示,siRNA-HMGA2不仅可以导致FOXM1和c-Myc的表达量降低（P ＜0.05）,还可促进细胞侵袭转移相关基因E-Cadherin的表达,并抑制N-Cadherin和Vimentin的表达（P ＜0.05）。Western blot结果进一步证实,沉默HMGA2在A549细胞内的表达后,会导致FOXM1和c-Myc表达量的降低（P ＜0.05）,E-Cadherin表达量的增加（P ＜0.05）,同时引起N-Cadherin和Vimentin表达量的降低（P ＜0.05）。结论：HMGA1和HMGA2基因沉默后,通过下调FOXM1和c-Myc的表达诱导A549细胞凋亡;HMGA2表达的沉默通过下调N-Cadherin和Vimentin的表达,上调E-Cadherin的表达抑制A549细胞的转移。     

雌激素受体α及其靶基因c-Myc与植入前胚

雌激素受体α(ERα)属于类固醇激素受体超家族,是细胞核中需要配体激活的转录因子,对细胞和组织的增殖、分化和发育有重要的调节作用。c-Myc是ERα目的基因,属于Myc基因家族,是一种核蛋白类的原癌基因。ERα调控着c-Myc的表达,而c-Myc的表达变化也影响着ERα的功能发挥,彼此之间存在关联。它们在哺乳动物植入前胚中呈阶段特异性表达,在植入前胚发育中发挥一定作用。     

活化Notch1信号下调Wnt信号抑制结肠癌细胞增生

目的 构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,研究过度活化Notch1信号对人结肠癌细胞HT-29细胞增生的影响作用及机制.方法 将人Notch1基因胞内区(ICN)克隆至反转录病毒载体pCLNRX中,与包装载体pCL-10A1共转染293细胞,制备重组病毒上清,检测病毒效价.MTT法检测稳定表达外源性ICN对细胞生长的影响,RT-PCR及Western Blot检测c-Myc、β-catenin表达水平.结果 成功构建重组反转录病毒载体pCLNRX-ICN,通过共转染获得了具有较高效价的重组反转录病毒.通过表达外源性ICN而过度活化Notch1抑制HT-29的生长,并下调Wnt信号途径关键调控分子β-catenin的蛋白表达水平,但对β-catenin的mRNA水平未见明显影响.而且过度活化Notch1对c-Myc的蛋白及mRNA表达水平均无明显影响. 结论 过度活化Notch1信号部分通过下调Wnt信号而抑制HT-29的生长,且该作用不依赖c-Myc的抑制.     

急性髓系白血病患者骨髓细胞c-Myc基因的表达及其临床意义

目的 研究急性髓系白血病（AML）患者骨髓细胞c-Myc基因的表达及其临床意义。方法 选取2018年9月—2020年9月新疆医科大学第一附属医院143例初治AML患者为研究对象。对照组来自20名志愿者的正常骨髓样本。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测AML患者骨髓细胞中c-Myc基因的表达,分析其与临床特征及疗效的关系;采用Sanger测序法检测AML患者C-kit 8/17、NPM1、FLT3-TKD/ITD、CEBPa基因突变情况。影响因素的分析采用单因素Cox和多因素逐步Cox回归模型。结果 初治AML患者的c-Myc基因相对表达量高于对照组（P <0.05）。143例AML患者中基因突变患者98例,检出率为68.5%(98/143)。c-Myc基因表达与CEBPa基因突变呈正相关（r=0.174,P=0.037）。c-Myc基因高表达组2个疗程的完全缓解率为40.0%(36/90),c-Myc基因低表达组为77.4%(41/53)。单因素和多因素逐步Cox回归分析结果显示,c-Myc基因高表达和染色体核型分析异常的AML患者有较差的无事件生存和总生存期。结...     

MBP-1分子真核表达载体的构建及其在食管癌细胞株Eca109中的高表达

目的:初步探讨MBP-1的分子功能.方法:通过PCR扩增获得MBP-1基因编码序列,将其定向插入质粒pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-mbp-1,重组质粒转染体外培养的食管癌Eca109细胞株,Western-blotting检测MBP-1在食管癌细胞中的表达.结果:筛选出分子量较大的重组质粒,酶切分...     

MBP-1在人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡和侵袭中的作用

目的 探讨癌症-MYC基因(C-myc)启动子结合蛋白1(MBP-1)在人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡和侵袭中的作用.方法 培养人食管癌细胞系Ec109,分为MBP-1模拟物组、siRNA-MBP-1组、阴性对照组和空白对照组,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot检测与细胞周期相关的C-myc、周期蛋白D1 (Cyclin D1)和周期蛋白E(Cyclin E).结果 与阴性对照组和空白对照组相比,转染MBP-1模拟物可使食管癌细胞Ec109中MBP-1表达上调(P＜0.05),食管癌细胞增殖能力降低,凋亡比例升高,G0/G1期细胞比例降低,侵袭细胞数减少,细胞中C-myc、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达被抑制;沉默MBP-1后,siRNA-MBP-1组食管癌细胞Ec109中MBP-1表达下调,食管癌细胞增殖能力增加,凋亡比例下降,G0/G1期细胞比例升高,侵袭细胞数增加,细胞中C-myc、Cyclin D1和Cyclin E蛋白表达上调.结论 MBP-1与人食管癌细胞株Ec109细胞增殖、凋亡、侵袭能力密切相关,其机制可能与细胞周期异常有关.     

4-1BB(CD137)配体在几种肿瘤细胞株上的表达

目的：研究4—1BBL在几种人肿瘤细胞株上的表达。方法：用RT—PCR及法检测肿瘤细胞内4—lBBL mRNA水平的表达；用流式细胞仪检测肿瘤细胞膜表面4—1BBL的表达。结果：4—1BBL在Jurkat细胞株上高表达(98．97％)，在HL-60和K562上表达较低(分别为24．77％和19．23％)，而在HL-29细胞株上基本不表达(2．13％)。结论：4—1BBL在不同肿瘤细胞株表达水平不同。     

神经黏附分子NECL1抑制神经胶质瘤细胞的迁移、侵袭并诱导其分化

目的 在NECL1表达缺失的神经胶质瘤细胞系中探讨神经黏附分子NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响.方法 在U251胶质瘤细胞系中,通过划痕及Transwell实验观察NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响,通过对细胞外金属蛋白酶活性的检测证明NECL1恢复表达后对肿瘤侵袭能力的影响.利用不同培养密度的U251细胞,对NECL1恢复表达后细胞形态进行观察,并通过Western blot实验验证相关蛋白的表达.结果 在NECL1表达缺失的胶质瘤细胞系U251中,恢复NECL1的表达后,肿瘤细胞的迁移及侵袭受到了抑制. NECL1恢复表达的U251细胞有向星形胶质细胞分化的趋势,星形胶质细胞标志蛋白神经胶质纤维酸性蛋白的表达上调.结论 神经黏附分子NECL1作为一个潜在的胶质瘤抑制因子,对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力均有不同程度抑制作用,同时,NECL1具有诱导神经胶质瘤U251细胞向星形胶质细胞方向分化的潜能.     

CD_(138)与头颈部肿瘤转移

CD138(Syndecan-1)是一种细胞黏附分子,具有促进细胞增殖、细胞-基质及细胞-细胞黏附等多种功能,CD138分子的表达在控制恶性肿瘤细胞生长和转移过程中具有重要作用,其在多种恶性肿瘤中的表达明显缺失,可作为判断肿瘤预后的指标,本文主要阐述CD138的分子生物学特性及其与头颈肿瘤转移的相关性研究进展。     

MBP-1 C-myc及MMP-9在大肠癌组织中的表达及意义

目的探讨大肠癌组织中MYC启动子结合蛋白1（MBP－1）的表达与临床病理学特征的关系,分析MBP－1蛋白和C-myc、基质金属蛋白酶9（MMP－9）表达的相互关系。方法应用免疫组织化学法检测84例大肠癌组织和40例大肠腺瘤组织中MBP－1、C-myc、MMP－9的表达情况,并从84例大肠癌患者中取40例癌旁组织作为对照。结果大肠癌组织中MBP－1阴性表达率高于腺瘤组织和癌旁对照组织（ P＜0.05）,表达强度也低于腺瘤组织和癌旁对照组织（ P＜0.05）;腺瘤组织中MBP－1阳性表达率和表达强度与癌旁对照组织相比差异无统计学意义（ P＞0.05）。大肠癌组织中C-myc阳性表达率和表达强度高于癌旁对照组织（P＜0.05）;大肠癌组织中MMP－9蛋白阳性表达率（58.3％）高于癌旁对照组织（12.5％）,差异有统计学意义（P＜0.05）。MBP－1表达和C-myc表达呈负相关,与MMP－9表达无相关性。 TNM分期低、有淋巴结转移的组织MBP－1表达强度低于TNM分期高、无淋巴结转移的组织（ P＜0.05）。结论 MBP－1、C-myc和MMP－9可能共同参与了大肠癌的发生发展。     

免疫检查点PD-1/PD-L1小分子抑制剂的研究进展

研究发现多种肿瘤通过上调自身和肿瘤微环境的PD-L1表达,持续激活PD-1(programmed cell death protein 1,PD-1)/PD-L1(programmed cell death-ligand 1)信号通路,抑制T细胞的功能,导致肿瘤免疫逃逸的发生。目前已有多种PD-1/PD-L1单抗药物上市,并且获得了较为满意的临床效果。但因为单抗生产成本高昂,存储运输条件苛刻,有免疫原性等问题,寻找免疫检查点PD-1/PD-L1小分子抑制剂成为了当前新药开发的热点。本文详细介绍了PD-1/PD-L1的生物学机制,按结构分类综述了PD-1/PD-L1小分子抑制剂的研究进展,并对小分子抑制剂的研发进行了展望。     

TGF-β与PD-L1在肿瘤微环境中的相互调节作用

转化生长因子β(TGF-β)是一类具有多种生物学活性的细胞因子,参与调节细胞的增殖、分化、发育和凋亡等多种生命活动,在肿瘤的发生、发展中起到双重调节作用。协同刺激分子程序性死亡配体1(PD-L1)广泛表达于肿瘤组织,具有抑制T细胞免疫从而促进肿瘤发生的作用。肿瘤微环境中TGF-β和PD-L1之间的相互调节作用对肿瘤的发生、发展尤为重要。现就TGF-β和PD-L1在肿瘤微环境中的相互调节作用予以综述。     

CD_(44)在肿瘤干细胞的研究进展

肿瘤干细胞是存在肿瘤组织中的少部分具有干细胞性质的细胞群。越来越多的证据表明肿瘤组织中存在肿瘤干细胞,并且其与肿瘤的增殖、转移、复发和对放化疗不敏感关系密切。近年来,CD44作为干细胞和多种肿瘤组织干细胞的表面标志分子被广泛研究。现对CD44分子的结构、功能及其在肿瘤干细胞研究领域的应用予以综述。