艾迪与多柔比星联合对骨肉瘤细胞杀伤协同作用的观察

目的:探讨中药制剂艾迪对骨肉瘤化疗的增效作用及其相关机制。方法:将艾迪与多柔比星单独及联合应用于骨肉瘤OS732细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜及荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变,免疫细胞化学技术分析凋亡相关蛋白Fas表达。结果:艾迪与多柔比星对骨肉瘤细胞都有剂量依赖性杀伤作用,艾迪浓度达到25μL/mL时,细胞生长受到抑制,再增加艾迪浓度抑制率不再明显改变,但如与1μg/mL多柔比星合用将使细胞生长抑制率进一步提升,P=0.003。细胞超微结构观察及凋亡率测定结果也显示,艾迪与多柔比星联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡,且联用时骨肉瘤Fas表达明显提升,P=0.005。结论:艾迪与小剂量多柔比星合用与单用多柔比星相比可更高效杀伤骨肉瘤细胞,此作用与上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡有关。     

多柔比星的耐药机制

多柔比星广泛应用于乳腺癌等肿瘤的化疗中,但因耐药使其应用受到一定限制。多柔比星耐药的产生机制可能涉及转运蛋白、凋亡蛋白、DNA修复功能、酶等因素。逆转多柔比星耐药的研究也在持续进行,为临床上克服多柔比星耐药提供了有效方案。但具体机制仍有待进一步阐释,并期待提出更合理的策略以提高疗效。     

表柔比星、脂质体多柔比星单药对乳腺癌细胞和树突状细胞生长的抑制作用

背景与目的:表柔比星(epirubicin)是临床上治疗乳腺癌的一线化疗药物,脂质体多柔比星(liposome doxorubicin)是一种新型脂质体类药物,相比传统蒽环类药物可以降低心脏毒性和骨髓抑制.树突状细胞(dentric cell,DC)在肿瘤免疫中起到重要作用.本实验旨在探讨这2种药物对人乳腺癌细胞株Bcap37和MDA-MB-231,以及人树突状细胞生长的抑制作用,以评估2种制剂在乳腺癌治疗中的价值.方法:用不同浓度(0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 μg/ml)表柔比星和脂质体多柔比星分别作用于Bcap37、MDA-MB-231和树突状细胞,MTT法检测24、48和72 h时对细胞生长的抑制率.结果:2种药物对肿瘤细胞和正常细胞均有抑制作用.与对Bcap37、MDA-MB-231的作用相比,脂质体多柔比星对树突状细胞的抑制作用较小(F=22.208,P<0.01;F=20.534,P<0.01).脂质体药物对Bcap37的抑制作用强于MDA-MB-231(F=12.873,P<0.01).结论:恶性程度低的乳腺癌细胞对脂质体多柔比星的敏感性高,恶性程度高的细胞则化疗敏感性低.脂质体制剂较普通制剂对于正常树突状细胞的毒性小.     

多柔比星葡聚糖纳米粒对卵巢癌细胞SKOV3的杀伤作用及研究

目的制备载多柔比星葡聚糖纳米粒（DOX／DEX-PLA）,观察其药物缓释规律,探讨其对卵巢癌细胞的杀伤作用。方法以双乳化剂蒸发法制备DOX／DEX-PLA载药纳米粒,透射电镜观察纳米粒形态,分光光度法计算载药率,体外药物释放实验考察纳米粒对DOX的缓释作用。MTT法观察对卵巢癌细胞的体外杀伤作用,动物实验观察其体内抑瘤效应。结果DOX／DEX-g-PLA纳米微粒呈球形,粒径约83nm,药物包封率约67．1％。体外释放实验提示,纳米制剂中约50％的药物持续缓慢释放,可持续达7天;体内抑瘤实验显示,纳米缓释制剂间隔给药疗效优于未包载药物每日给药的疗效。结论DOX／DEX-PEA纳米粒可有效抑制卵巢痛细朐的毕长．     

脂质体多柔比星治疗淋巴瘤临床观察

目的 研究脂质体多柔比星治疗淋巴瘤患者的临床疗效和毒副反应.方法 40例淋巴瘤患者均行脂质体多柔比星联合化疗,并观察其近期疗效和毒副反应.结果 40例淋巴瘤患者总有效率为80.0％,主要毒副反应为骨髓抑制和心脏毒性.结论 脂质体多柔比星治疗淋巴瘤安全有效.     

脂质体多柔比星治疗淋巴瘤的疗效

目的：探讨脂质体多柔比星用于临床治疗淋巴瘤的疗效以及安全性。方法：选取90例淋巴瘤患者作为研究对象,均采用脂质体多柔比星治疗,对患者临床资料、治疗结果、随访情况等进行回顾性分析。结果：90例淋巴瘤患者治疗总有效率为74.44%,初治者总有效率（79.25%）与复治者（67.57%）相近,组间无明显差异（P >0.05）。常见不良反应为骨髓抑制、心电图异常、心功能异常等;患者随访3年生存率为62.22%,初治者（71.70%）略高于复治者（48.65%）,但组间比较差异无显著性（P >0.05）。结论：采用脂质体多柔比星临床治疗淋巴癌,效果显著,不良反应较小,安全性高,建议在临床可作为治疗淋巴瘤的首选药物进行推广应用。     

多柔比星心脏毒性机制及防治研究进展

多柔比星(ADM)是一种广谱、高效的蒽环类抗肿瘤药物,长期应用容易导致累积性、不可逆性心脏病变.有关ADM心脏毒性的机制较复杂,主要涉及氧化应激、线粒体病变、心肌细胞凋亡等.近年来一系列减少ADM心脏毒性而不影响其抗肿瘤活性的措施被人们采用.文章就ADM心脏毒性的发病机制及防治措施方面的进展作一综述,期望为改善肿瘤患者的长期生存率提供借鉴.     

瘦素对多柔比星诱导人肝癌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察瘦素对多柔比星诱导人肝癌细胞株Huh7凋亡的影响并探讨其可能的机制。方法用多柔比星作为凋亡诱导剂预处理细胞3h后,在培养液中加入浓度为100ng/mL的瘦素,24h后提取细胞DNA电泳检测DNA ladder,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达情况。结果瘦素能够抑制多柔比星诱导的人肝癌细胞凋亡。与对照组相比,瘦素处理组的DNA ladder条带明显减弱,Hochest33258荧光染色也发现瘦素处理组的凋亡细胞明显减少,流式细胞仪检测发现对照组的凋亡率是(47.77±2.90)%,而瘦素处理组的凋亡率是(30.17±2.03)%,明显下降,P<0.01;实时荧光定量PCR检测发现Bcl-2 mRNA表达量增高至对照组的(2.31±0.17)倍,Bax mRNA表达量减弱至对照组的(0.46±0.04)倍,差异均有统计学意义,P<0.05和P<0.01。结论瘦素可以抑制人肝癌细胞的凋亡,可能是通过上调抗凋亡因子Bcl-2的表达及抑制促凋亡因子Bax的表达来实现其抗凋亡作用。     

沉默YAP逆转肺癌PC9细胞多柔比星耐药性及其机制研究

背景与目的：耐药性是导致肺癌患者化疗失败的主要原因。探讨YAP对人肺癌PC9细胞多柔比星耐药的逆转作用及其机制。方法：利用体外筛选方法从多柔比星敏感性肺癌细胞系PC9获得耐药细胞克隆,并检测YAP的表达水平;利用shRNA沉默细胞中YAP的表达,应用MTS法检测肿瘤细胞药物敏感性,流式细胞术检测细胞周期、凋亡及对Rh-123的吸收能力,蛋白[质]印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)技术检测ABCB1、ABCC1、p53、Runx2、ITGB2和ErbB4的表达水平及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,AKT)的磷酸化水平变化。结果：经体外诱导获得多柔比星耐药细胞克隆PC9/Adr,且YAP蛋白在其中高表达,利用shRNA得到不同YAP沉默程度的PC9/Adr。YAP沉默后,细胞生长速度降低,细胞对多柔比星的敏感性显著增加,细胞周期被阻滞在G0/G1期,多柔比星诱导的细胞凋亡增多,细胞吸收Rh-123也增多,并与YAP的沉默程度呈正相关。Western blot和QRT-PCR结果显示,YAP沉默后,ABCB1、ABCC1、Runx2、ITGB2和ErbB4蛋白表达下调,而p53的表达上调,AKT的磷酸化水平则下降。结论：YAP过表达与PC9/Adr的耐药性相关,沉默YAP可恢复PC9/Adr对多柔比星的敏感性。这一作用与调节耐药相关基因的表达、促进细胞凋亡有关。     

阿托伐他汀增加乳腺癌细胞对多柔比星敏感性的研究

目的探讨他汀类药物增加乳腺癌细胞对多柔比星敏感性的机制。方法(1)用不同浓度的多柔比星(0、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28μg/ml)与0、2μmol/L的阿托伐他汀联合处理MDA-MB-231细胞,通过细胞计数检测试剂盒(CCK-8)检测450 nm波长下的吸光度值,从而计算细胞活力。(2)分别用0.3μg/ml多柔比星、2μmol/L阿托伐他汀单药及两药联合处理MDA-MB-231细胞,并以未经任何药物处理的细胞作为对照组,通过Hoechst染色检测MDA-MB-231细胞凋亡情况,通过细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,通过Western blot检测MDA-MB-231细胞中caspase 3、caspase 9、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、甾醇调节元件结合蛋白转录因子2(SREBP2)及低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达。细胞活力比较采用析因分析,未凋亡细胞数、划痕面积百分比、穿膜细胞数及不同蛋白表达等指标的多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法。结果(1)与多柔比星单药相比,阿托伐他汀与多柔比星联合应用可以显著抑制MDA-MB-231细胞活力(F=243.043,P<0.001);不同浓度多柔比星组细胞活力比较,差异有统计学意义(F=1803.617,P<0.001);两个因素存在交互作用(F=21.030,P<0.001)。(2)各组的未凋亡细胞数比较,差异具有统计学意义(对照组:94.00±4.24:阿托伐他汀组:57.00±1.41,多柔比星组:34.50±2.12,阿托伐他汀+多柔比星组:19.00±2.83,F=261.021,P<0.001),两两比较结果显示,组间差异均有统计学意义(P均<0.050)。各组间的划痕面积百分比比较,差异具有统计学意义[对照组:(28.94±3.59)%,阿托伐他汀组:(31.00±2.99)%,多柔比星组:(40.16±2.38)%,阿托伐他汀+多柔比星组:(60.86±3.60)%,F=42.080,P<0.050]。与对照组、阿托伐他汀组及多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组划痕面积均增加(P均<0.050)。各组穿膜细胞数比较,差异具有统计学意义(对照组:101.20±14.55,阿托伐他汀组:75.80±7.33,多柔比星组:32.40±4.78,阿托伐他汀+多柔比星组:8.80±2.50,F=118.031,P<0.001),两两比较结果显示差异均具有统计学意义(P均<0.050)。各组MDA-MB-231细胞中凋亡相关蛋白caspase 3、caspase 9的表达比较,差异均有统计学意义(F=128.854、247.530,P均<0.001)。与多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组caspase 3、caspase 9蛋白的表达显著增加(P均<0.050)。4组MDA-MB-231细胞中HMGCR、SREBP2、LDLR蛋白的表达量比较,差异均具有统计学意义(F=183.193、227.470、586.087,P均<0.001)。两两比较结果显示,与对照组比较,阿托伐他汀+多柔比星组中HMGCR表达明显升高,SREBP2、LDLR表达明显降低(P均<0.050);与对照组相比,多柔比星组HMGCR的表达无明显改变(P>0.050),SREBP2、LDLR的表达明显降低(P均<0.050),阿托伐他汀组HMGCR表达高于对照组(P<0.050);与多柔比星组相比,阿托伐他汀+多柔比星组HMGCR表达增加(P<0.050),SREBP2的表达降低(P<0.050),LDLR的表达无明显变化(P>0.050)。结论阿托伐他汀通过抑制HMGCR表达,减少细胞内胆固醇的合成,使细胞更依赖于外源性胆固醇的摄取;多柔比星通过抑制LDLR表达减少外源性胆固醇的摄取;因此,当两药联用后由于细胞内胆固醇合成减少,使细胞更依赖于外源性胆固醇的摄取,对多柔比星更加敏感。     

斑蝥酸钠对结肠癌HCT116细胞凋亡及PUMA表达的影响

目的 探讨斑蝥酸钠对结肠癌细胞凋亡及p53上调凋亡控制因子（PUMA）表达的影响。方法 采用不同浓度斑蝥酸钠（0.1、0.25、0.5、1、2 μg／ml）处理结肠癌细胞HCT116 24 h,并设不加药对照组。测量其单层细胞跨膜电阻值（TER）以评价斑蝥酸钠对HCT116细胞凋亡的影响,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HCT116细胞的PUMA mRNA和蛋白水平变化;HCT116细胞经0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μg／ml 抑制性κB激酶β（IKKβ）质粒转染或10、20、40、80 nmol／L 核因子（NF）-κB抑制剂（BAY 11-7082）处理后,采用Western blotting检测其PUMA蛋白水平。结果 与对照组比较,各浓度斑蝥酸钠处理后HCT116细胞的TER降低,PUMA mRNA和蛋白水平升高,且以上效应呈浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;与未处理的HCT116细胞相比,IKKβ质粒转染后,PUMA蛋白表达增加,而BAY 11-7082可降低斑蝥酸钠对PUMA的上调作用,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 斑蝥酸钠可通过NF-κB通路上调PUMA的表达,进一步诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡。     

磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI 介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的抑制作用

目的：探讨磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的特异性杀伤作用。方法：亚克隆基因重组法构建靶向肝癌的自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK和肿瘤细胞成像报告基因载体p[HRE]AFP-Luc,并用限制性内切酶凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功。共沉淀法制备Fe3O4 纳米粒并以聚乙烯亚胺（PEI）修饰后得到磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI,将其作为肿瘤基因治疗的载体和磁流体热疗的介质,并利用透射电镜、粒径仪、傅里叶转换红外光谱等对Fe3O4@PEI进行表征鉴定。利用小动物活体成像仪检测Fe3O4@PEI 系统运送报告基因p[HRE]AFP-Luc 至荷瘤裸鼠后的生物发光信号。p[HRE]AFP-HSVTK/Fe3O4@PEI作用于肝癌细胞后,以MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡细胞比例,动物实验验证体内肿瘤生长速度及瘤体质量抑制效果,并用透射电镜分析肿瘤组织的亚细胞结构。结果：成功构建磁性纳米颗粒Fe3O4@PEI以及重组载体p[HRE]AFP-HSVTK和p[HRE]AFP-Luc,经尾静脉注射Fe3O4@PEI运送的p[HRE]AFP-Luc后,活体成像系统显示仅能在裸鼠肿瘤组织检测到明显的成像信号,其主要器官病理组织分析无明显病理损伤。在体外肿瘤细胞杀伤试验中,联合治疗组细胞增殖抑制率分别高于磁流体热疗组和基因治疗组[ （76.02±7.33)% vs (42.31±4.28)%、(47.76±4.81)%,均P<0.05],联合治疗组瘤细胞的凋亡率高于单独热疗组和基因治疗组[ （34.05±3.41)% vs (14.41±1.55)%、(11.64±1.20)%,均P<0.01]。体内治疗实验显示,联合治疗组移植瘤体积增长明显减慢甚至下降,瘤块质量显著小于其他单独治疗组（P＜0.05）;瘤块细胞亚结构出现明显的凋亡形态。结论：自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK对肝癌细胞具有选择性杀伤作用,Fe3O4@PEI可以作为有效的基因治疗载体和磁流体热疗的介质,其介导的肝癌靶向治疗联合磁流体热疗能特异地抑制肝癌移植瘤。     

磁性纳米Fe_3O_4对卵巢癌细胞耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系

背景与目的：目前认为多药耐药（muhi-drug resistance,MDR）是卵巢癌化疗失败和复发的主要原因。本研究探讨磁性纳米Fe3O4颗粒对卵巢癌细胞（SKOV3／DDP）耐药性的逆转作用及其与凋亡相关基因的关系。方法：将卵巢癌细胞的耐药株SKOV3／DDP分为对照组、顺铂组（DDP组）、磁性纳米Fe3O4颗粒组（Fe3O4-MNPs组）、DDP＋磁性纳米Fe3O4颗粒组（DDP＋Fe3O4-MNPs组）4个组,用MTT比色法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡,电感耦合等离子体原子发射光谱法测细胞内顺铂的含量,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2和SurvivinmRNA在SKOV3／DDP中的表达。结果：Fe3O4-MNPs组细胞耐药性的逆转倍数为2．259。DDP＋Fe3O4-MNPs组细胞凋亡率[（42．1±5．6）％VS．（26．9±4．1）％]及细胞内铂含量[（0．074＋_0．006）μmol／Lvs．（0．057±0．003）μmol／L]均高于DDP组（P〈0．05）,其差异有统计学意义（P〈0．05）。DDP＋Fe3O4-MNPs组细胞bcl-2、survivin mRNA表达均低于DDP组,其差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：磁性纳米Fe3O4颗粒可逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐受性,作用机制可能与其降低抗凋亡基因bcl-2和survivin mRNA表达有关。     

雷公藤内酯醇对淋巴瘤 Raji 细胞 ID4基因及 DNA 甲基转移酶表达的影响

目的：探讨雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）对淋巴瘤 Raji 细胞 ID4基因及 DNA 甲基转移酶（DNA methyltransferases,DNMT）mRNA 表达的影响。方法：收集经0、20ng／ml TPL 处理的 Raji 细胞,采用荧光定量RT －PCR 法检测 Raji 细胞 ID4基因 mRNA 的表达。经0、5、10、15、20ng／ml TPL 处理的 Raji 细胞,采用荧光定量 RT －PCR 法检测 Raji 细胞 DNMT1、DNMT3A和 DNMT3B mRNA 的表达。结果：未经 TPL 处理的 Raji 细胞ID4基因无表达,20ng／ml TPL 作用后 ID4基因表达增强。在0～20ng／ml 浓度范围内,随着 TPL 浓度的增加, DNMT1、DNMT3A和 DNMT3B表达下降并呈浓度依赖性。结论：TPL 可抑制 Raji 细胞 DNA 甲基转移酶 mRNA,恢复 Raji 细胞 ID4基因 mRNA 表达。     

纳米Fe3O4／CD133Ab复合物对胶质瘤U251细胞放疗增敏作用的实验研究

目的 探讨纳米Fe3O4／CD133Ab复合物对脑胶质瘤U251细胞的放射增敏作用。方法 细胞免疫组化法检测脑胶质瘤U251细胞CD133的表达情况;流式细胞分选获得U251-CD133+细胞;MTT法观察纳米Fe3O4／CD133Ab复合物和CD133Ab分别对脑胶质瘤细胞U251及U251-CD133+的细胞毒作用;克隆形成抑制实验检测纳米Fe3O4／CD133Ab复合物和CD133Ab对脑胶质瘤U251细胞放射增敏的影响。结果 脑胶质瘤U251细胞中有CD133分子阳性表达并可以分选出CD133阳性表达细胞;在0.0488～25μg／ml范围内,纳米Fe3O4／CD133Ab复合物作用于脑胶质瘤U251及U251-CD133+细胞24h的细胞毒性呈明显剂量依赖性,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＞0.05）。纳米Fe3O4／CD133Ab复合物对脑胶质瘤U251和U251-CD133+细胞的增殖抑制率最高值分别为59.46％和56.66％,IC50分别为11.84μg／ml和12.06μg／ml。纳米Fe3O4／CD133Ab复合物+照射组与CD133Ab+照射组比较,细胞存活分数差异有统计学意义（P＜0.05）,在照射4Gy以上时,随X射线剂量增加而放射敏感性增强。结论 纳米Fe3O4／CD133Ab复合物对脑胶质瘤细胞U251和U251-CD133+有细胞毒作用,并且对U251细胞有放射增敏作用。     

Effects of Triptolide on Cell Proliferation and CXCR4 Expression in Burkitt＇s Lymphoma Raji Cells In Vitro

Objective： To investigate the inhibitory effects of triptolide on cell proliferation and CXCR4 expression in Burkitt＇s lymphoma cell line Raji cells. Methods： The effects of triptolide on the growth of Raji cells were studied by 3-（4, 5-Dimethyl-2-thiazolyl）-2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium（MTT） assay. The effects of triptolide on CXCR4 expression on Raji cells were studied by flow cytometric analysis. Chemotaxis assays were performed to observe the effects of triptolide on migration of Raji cells towards recombinant human SDF-1α （rhSDF-1α） in vitro. Results： Triptolide inhibited the proliferation of Raji cells in a dose- and time-dependent way with a 24-h IC50 value of 43.06 nmol/L and a 36-h IC50 value of 25.08 nmol/L. Triptolide could downregulate the CXCR4 expression on Raji cells in a dose-dependent manner. Furthermore, chemotaxis assays showed that triptolide could block the migration of Raji cells to rhSDF-1α in vitro, and the inhibition was dose-dependent. Conclusion： Triptolide could inhibit the proliferation and migration of Raji cells in vitro. The underlying anti-tumor mechanism of triptolide might be related to the anti-proliferative effect and the blockage of SDF-1/CXCR4 axis.     

阿霉素联合p21CIP1基因转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2增殖的影响

背景与目的:阿霉素类药物是治疗肝母细胞瘤的传统化疗药,但近年来其疗效不佳是困扰临床的一大问题,目前配合基因治疗提高阿霉素的疗效,是肝母细胞瘤治疗发展的新趋势。本实验研究阿霉素与p21基因转染联合对人肝母细胞瘤HepG2细胞增殖的影响。方法:实验分为空白对照组、单独加药组、pcDNA3转染对照组、p21转染组及p21转染 药物联合组。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染后HepG2细胞的生长趋势,联合处理后细胞增殖抑制状况;荧光定量PCR检测转染后p21mRNA的表达情况,联合处理后survivinmRNA的水平变化。结果:转染后,p21转染组在第3d和第4d的生长速度明显慢于两对照组(P<0.01);经鉴定其有p21mRNA表达量的增高,是空白对照组的155倍(P<0.05)。以空白组为对照,在第3～5d,联合组增殖抑制率明显高于单独加药组和p21转染组(第3d:43.92%vs.32.97%、35.77%,P<0.01;第4d:59.86%vs.39.35%、40.96%,P<0.01;第5d:51.81%vs.33.91%、10.68%,P<0.01);且1～4d内随联合用药时间的延长,抑制效应增强(r=0.91,P<0.05),并在第4d时较显著(Q=1.07)。荧光定量PCR显示,联合组survivinmRNA水平显著低于p21转染组(P<0.01);与单独加药组比较,联合作用仅在48h时差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在一定时间范围内p21可增强阿霉素对HepG2细胞的增殖抑制作用,降低胞内survivinmRNA的表达。     

微波和γ线复合照射致Raji细胞损伤的形态和计量学研究

目的研究高功率微波和γ线复合照射引发Raji细胞凋亡和坏死发生规律及Ca^2＋浓度变化在其中的作用。方法建立微波和1线复合照射Raji细胞模型;细胞分成4个实验组,单纯S-HPM照射组（S-HPM组）、单纯^60Coγ射线照射组（γ组）、微波和1线复合照射组（1＋S—HPM组）及实验对照组,采用Annexin—V和PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡和坏死率的改变;利用Fluo-3荧光探针负载和激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）定量检测细胞内游离Ca^2＋浓度的变化。结果1．细胞凋亡和坏死：吖线与微波复合照射后出现典型的凋亡和坏死改变,1线组和复合组与对照组比较凋亡率和坏死率显著升高,同单纯1线组相比,复合组凋亡和坏死率升高更显著。2．Ca^2＋浓度：各辐射组细胞内Ca^2＋荧光强度均明显高于对照组,各辐射组间均具有显著性差异,强度依次为1＋S-HPM〉γ〉S-HPM。结论单纯微波和γ线照射均可导致Raji细胞凋亡和坏死率增加,微波与γ线复合照射的损伤效应较单纯照射加重,其损伤特点主要表现为γ线效应,微波在一定程度上加重了γ线的损伤;胞内钙超载可能是其损伤机制之一。     

亚砷酸与甲磺酸伊马替尼单用及联用对淋巴瘤细胞Raji增殖和凋亡的影响

 目的　研究不同浓度的亚砷酸（As2O3）、甲磺酸伊马替尼（简称伊马替尼）单用及联用对恶性淋巴瘤细胞株Raji的影响。方法　采用MTT法检测两药对Raji细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪检测两药对Raji细胞Caspase-3的表达及G1期、S期的比例变化。采用免疫组织化学SABC法检测p16蛋白的表达。结果　As2O3、伊马替尼及两药联用均使细胞抑制率升高,两药联合组与各单药组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。As2O3上调Raji细胞Caspase-3表达呈时间、剂量依赖效应（P＜0.0001）。伊马替尼对Caspase-3表达无明显影响（P＞0.05）,且两药联用无协同上调Caspase-3作用（P＞0.05）。Raji细胞随As2O3浓度升高、作用时间延长,p16蛋白平均吸光度值增加（P＜0.05）。伊马替尼在低浓度72 h与高浓度48 h、72 h时p16蛋白表达与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。但两药联用无协同上调p16蛋白表达的作用（P＞0.05）。As2O3可使G1期细胞比例明显增高,S期比例降低,呈现剂量、时间依赖效应（P＜0.0001）,并出现明显凋亡峰。伊马替尼对Raji细胞周期无影响（P＞0.05）。两药联合组与单用As2O3组差异亦无统计学意义（P＞0.05）。结论　As2O3可通过激活Caspase-3表达诱导Raji细胞凋亡、上调p16蛋白、阻滞细胞周期于G1期来发挥抗肿瘤作用。伊马替尼在高浓度时可以上调Raji细胞p16蛋白的表达。As2O3和伊马替尼对恶性淋巴瘤细胞株Raji细胞无协同作用。     

四氧化三铁纳米粒子增强二氢卟吩e6对胶质瘤U251细胞的声动力治疗效果

目的:探讨四氧化三铁(Fe3O4)纳米粒子(PION)作为药物载体增强二氢卟吩e6(chlorin e6,Ce6)在胶质瘤中的增效作用.方法:采用高温降解法和相转移法制备PEG-Fe3O4@Ce6复合纳米粒子(PION@E6),用水合粒径分析、透射电镜、胶体稳定性分析、紫外可见光吸收光谱等方法对PION@E6进行鉴定....