单方绿豆粉干预哮喘小鼠肺组织中白三烯C4和5-脂氧合酶及其激活蛋白的变化效应

目的探讨压热解毒单方绿豆粉对哮喘肺小鼠组织中白三烯及5-脂氧合酶、5-脂氧合酶激活蛋白含量的影响. 方法实验于2002-10/2003-04在广东医学院呼吸疾病研究所完成.32只清洁级雄性昆明种纯白小鼠,随机分为4组生理盐水对照组、卵蛋白哮喘模型组、地塞米松治疗组、绿豆粉治疗组,每组8只.参照文献[1]建立小鼠卵蛋白哮喘模型.除对照组小鼠予生理盐水处理外,其余各组小鼠于第1,7,14天给予鸡卵白蛋白抗原液0.5 mL(含氢氧化铝凝胶2 mg和鸡卵白蛋白15μg)腹腔注射,第21天始用1%鸡卵白蛋白雾化吸入来激发小鼠哮喘发作,2次/d,每次1 h,连续3 d.每次雾化前30 min,生理盐水对照组和卵蛋白哮喘模型组给予生理盐水10 mL/kg,地塞米松治疗组给予地塞米松2 mg/kg,绿豆粉治疗组给予绿豆粉液10 mL/kg,灌胃.肺组织匀浆中白三烯B4、白三烯C4含量检测应用ELISA方法;各组肺组织中5-脂氧合酶、5-脂氧合酶激活蛋白的表达应用免疫组化方法检测. 结果实验所用32只小鼠均进入结果分析.①小鼠肺组织中白三烯B4比较生理盐水对照组明显低于卵蛋白哮喘模型组[(0.151±0.055,0.293±0.058)mg/L,(P＜0.01)].②小鼠肺组织中白三烯C4比较绿豆粉治疗组明显低于哮喘模型组[(2.091±0.273,2.482±0.278)mg/L,(P＜0.01)].③小鼠肺组织中5-脂氧合酶的活性比较免疫组化法检测结果显示绿豆粉组明显低于哮喘模型组[(12.3±4.9,25.0±6.6),(P＜0.01)].④小鼠肺组织中5-脂氧合酶、5-脂氧合酶激活蛋白的表达绿豆粉治疗组、地塞米松治疗组与生理盐水对照组比较无显著性变化(P＞0.05). 结论白三烯B4、白三烯C4在肺组织中的高水平,5-脂氧合酶、5-脂氧合酶激活蛋白表达的增加在鸡卵白蛋白致敏小鼠的哮喘发病中起重要作用.单方绿豆可显著降低哮喘小鼠肺组织中白三烯C4含量,抑制哮喘小鼠肺组织中5-脂氧合酶、5-脂氧合酶激活蛋白的表达,从而表现出抗哮喘的活性.     

木犀草素抑制支气管哮喘气道重塑的作用

目的：观察中药木犀草素对哮喘小鼠气道重塑的抑制作用并探讨其可能机制。方法：实验于2006—01／04在南京医科大学呼吸病研究室完成。SPF级雄性BALB／c小鼠32只，体质量18～22g，随机数字表法分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、木犀草素组，每组8只。卵蛋白致敏反复雾化吸入共8周，建立慢性哮喘模型，每次雾化前30min，正常对照组、哮喘模型组生理盐水灌胃，地塞米松组、木犀草素组分别使用地塞米松及木犀草素进行干预。观察支气管肺泡灌洗液中自细胞介素5和γ-干扰素水平的变化。对肺组织切片行苏木精一伊红染色，借助图像分析软件测量基底膜周径、平滑肌面积、管壁面积，计算出支气管管壁厚度和平滑肌厚度。结果：纳入小鼠32只，均进入结果分析。①经过反复抗原激发，哮喘模型组肺泡灌洗液中自细胞介素5水平明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[（50．7&;#177;2．9），（16．1&;#177;1．2），（26．8&;#177;1．5），（25．9&;#177;2．6）ng／L，P〈0．05]。②γ-干扰素水平明显低于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[（38．1&;#177;3.3），（64．2&;#177;3．5），（58．2&;#177;4．2），（54．3&;#177;2.4）ng／L，P〈0．05]。③哮喘模型组支气管管壁厚度和平滑肌厚度明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[管壁厚度：（17．1&;#177;1．6），（12．7&;#177;1．1），（14.3&;#177;1．1），（14．0&;#177;1．2）μm；平滑肌厚度：（6．0&;#177;0．5），（4．5&;#177;0．4），（5．0&;#177;0．5），（5．2&;#177;0．6）μm，P〈0．05]。结论：木犀草素可抑制气道壁的增厚和平滑肌增殖，减轻气道重塑。     

脊髓后角神经元蛋白激酶C活化与哮喘及地塞米松的关系

目的：探讨蛋白激酶C在哮喘豚鼠C7-T5段脊髓后角的表达及地塞米松的抑制作用。方法：实验于2003—03／06在中国医科大学神经生物实验室进行，健康白色豚鼠40只，随机分为4组：①生理盐水组8只，腹腔注射生理盐水1mL，10d后雾化吸入生理盐水，隔日1次，共20d。②单纯致敏组8只，腹腔注射100g／L卵蛋白(含等量氢氧化铝凝胶)1mL，10d后雾化吸入生理盐水，隔日1次，共20d。③哮喘组12只，腹腔注射100g／L卵蛋白(含等量氢氧化铝凝胶)1mL，10d后雾化吸入10g／L卵蛋白溶液(不含氢氧化铝凝胶)，隔日1次，共20d。④地塞米松组12只，操作同哮喘组，从激发哮喘后第6天起，每天于哮喘后腹腔注射地塞米松【2mg／(kg&;#183;d)】，1次／d，共5次。利用免疫组织化学和免疫蛋白印迹观察哮喘豚鼠C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C(参与支气管平滑肌增殖)蛋白变化。结果：40只豚鼠均进入结果分析。C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C的表达变化：生理盐水组与单纯致敏组豚鼠表达基本相近(0．113&;#177;0．009，0．116&;#177;0．007，t=1．554，P&;gt;0．05)；哮喘组豚鼠表达比生理盐水组明显上调(0．176&;#177;0．010，t=23．033，P&;lt;0．01)，地塞米松组表达则明显低于哮喘组(0．128&;#177;0．009，t=17．359，P&;lt;0．05)。结论：哮喘豚鼠内脏感觉传入部位C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C呈过表达，应用地塞米松可抑制蛋白激酶C表达的增加。此结果进一步揭示了哮喘发病过程中有神经免疫机制的参与。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠气道重构的影响

目的：观察布地奈德对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的干预情况，并比较早期和晚期治疗效果的差异。 方法：实验于2004-11／2005-03在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。①Wistar大鼠42只随机分为4组，对照组12只，第1天腹腔注射生理盐水2mL。第15天雾化生理盐水，1次／d，20min／次；哮喘组12只，第1天腹腔注射100g／L卵蛋白2mL（包括卵白蛋白200mg，氢氧化铝100mg），第15天雾化20g／L卵蛋白，1次／d，20min／次．以出现点头运动、腹肌收缩为哮喘发作标志；布地奈德早期治疗组各12只。程序同哮喘组，每次雾化卵蛋白前1h吸入0．5g／L布地奈德20min；布地奈德晚期治疗组6只，哮喘模型建立2周后再于每次雾化卵蛋白前1h吸入布地奈德，1次／d，20min／次。各组连续雾化8周。（多于雾化2周时前3组大鼠每组取6只，采用ELISA法测血中肿瘤坏死因子α水平，放免法测肺泡灌洗液中内皮素-1水平。计数肺泡灌洗液中细胞总数及分类。③各组大鼠肺组织切片苏木精-伊红染色，8周时行胶原染色，免疫组织化学神经生长因子、转化生长因子β1染色，计算机图像分析软件测量各项指标。 结果：42只大鼠全部进入结果。①连续雾化2周时，哮喘组肺泡灌洗液中细胞总数，嗜酸粒、中性粒细胞比例，内皮素-1、肿瘤坏死因子“含量均显著高于对照组和早期治疗组[（9.03&;#177;1．32）比（4．97&;#177;0．98），（5．52&;#177;1．07）&;#215;10^8L^1；（4．67&;#177;0．93）％比（1．25&;#177;0．52）％，（2．00&;#177;0．71）％；（4．42&;#177;0．74）％比（1．33&;#177;0．61）％，（2．00&;#177;0．89）％；（37．17&;#177;6．82）比（15．83&;#177;3．19），（21．00&;#177;3．14）n#L；（42．00&;#177;5．22）比（21．50&;#177;5．09），（25．67&;#177;5．39）ng／L；P均〈0．01]。②连续雾化8周时，早期治疗组气道炎性细胞计数、平滑肌面积、气道内壁面积、胶原面积均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），均明显低于哮喘组及晚期治疗组（P〈0．01或P〈0．05）。③连续雾化8周时，早期治疗组神经生长因子和转化生长因子β1表达强于对照组（P〈0．05），均比哮喘组和晚期治疗组明显减弱（P〈0．01）。 结论：早期治疗在2周内可明显抑制气道炎症和气道重构，但对于慢性哮喘即反复接触变应原至8周时即使早期治疗也只能部分抑制炎症和延缓重构的进展，晚期治疗仅能部分抑制炎症反应，不能逆转已经形成的气道重构。     

一氧化氮及一氧化氮合酶在哮喘大鼠气道高反应中的作用

目的：探讨一氧化氮及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)在哮喘大鼠气道炎症中的作用及激素对其活性的影响，以期为该病的预防、康复措施介入提供理论依据。方法：实验选用雄性豚鼠30只，按随机数字法将豚鼠分为3组：①哮喘组：用100g／L卵蛋白腹腔注射1mL致敏，2周后用10g／L卵蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作。②激素组：诱喘同前，每次诱喘前腹腔内注射甲基强的松龙10mg／kg。③对照组：用生理盐水代替诱喘剂。每组分别测定其血浆和肺组织NO2^-／NO3^-水平、肺组织诱导型NOS(inducible nitric oxide synthase，iNOS)和原生型NOS(constitute nitric oxide synthase，cNOS)活性水平，并用组织化学染色法观察NOS在豚鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果：3组豚鼠血浆NO2^-／NO3^-水平差异无显著性意义(P&;gt;0．05)，哮喘组肺组织中NO2^-／NO3^-和iNOS活性水平[(0．87&;#177;0．08)μmol／g，(56&;#177;14)nmol／g]明显高于对照组和激素组[(0．19&;#177;0．06)μmol／g，(12&;#177;6)mnol／g；(0．18&;#177;0．07)μmol／g，(12&;#177;5)nmol／g](P&;lt;0．01)。对照组肺组织化学方法显示的阳性产物呈蓝色沉淀，主要分布于各级支气管上皮细胞，哮喘组及激素组阳性产物变化不明显。哮喘组肺组织iNOS活性水平和肺组织NO2^-／NO3^-水平呈高度正相关(r=0．782．P&;lt;0．05)。结论：一氧化氮可引起气道高反应性而导致和(或)加重哮喘发病。用甲基强的松龙治疗哮喘可减轻气道炎症，使哮喘大鼠肺组织中iNOS表达降低。     

葛根总黄酮对实验性哮喘大鼠的预防效应

目的：探讨脾T淋巴细胞亚群在实验性大鼠哮喘模型中的表达，和葛根总黄酮对T淋巴细胞亚群及对实验性哮喘的预防作用。方法：实验于2003—03-01／04—02在解放军总医院实验动物中心完成。用卵蛋白致敏并激发建立了SD大鼠哮喘模型，32只大鼠随机分为4组，每组8只。为正常对照组、卵蛋白激发哮喘发作组、葛根总黄酮灌胃组、葛根总黄酮预防组，每组分别测定动脉血血气作为哮喘严重程度的缺氧评定指标，测定血液中白细胞介素4水平，同时采用流式细胞仪观察脾T细胞亚群的变化。结果：4组32只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠血气结果：卵蛋白激发哮喘发作组动脉血氧分压低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(4．24&;#177;2.20)．(10.04&;#177;13)，(9.68&;#177;1．35)kPa，P&;lt;0．01】；卵蛋白激发哮喘发作组剩余碱低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(1．82&;#177;1．31)，(2．77&;#177;2．18)，(2．67&;#177;2．18)mmol／L，P&;lt;0.01】；卵蛋白激发哮喘发作组血氧饱和度低于正常对照组和葛根总黄酮灌胃组【(51．8&;#177;35．9)，(64．55&;#177;29．87)，(62.51&;#177;40．31)％，P&;lt;0.05】。②各组大鼠脾T淋巴细胞亚群变化：葛根总黄酮预防组CD4^+低于卵蛋白激发哮喘发作组(13．19&;#177;3．33，18.37&;#177;1．98，P&;lt;0．01)，葛根总黄酮预防组CD8^+高于卵蛋白激发哮喘发作组(8．01&;#177;0．42，6．25&;#177;0．63，P&;lt;0．01)，葛根总黄酮预防组CD4^+／CD8^+低于卵蛋白激发哮喘发作组(1．61&;#177;0.35，2．94&;#177;0．32，P&;lt;0．01)。③白细胞介素4：卵蛋白激发哮喘发作组为(85．2&;#177;12．3)ng／L，比正常对照组和葛根总黄酮预防组大鼠显著增高【(3．3&;#177;0．7)。(7．74&;#177;1．0)ng／L，P&;lt;0．01】。结论：脾T淋巴细胞亚群的活化参与哮喘的发病过程，葛根总黄酮可以抑制免疫细胞T淋巴细胞的活化和过表达，可能通过恢复CD4^+／CD8^+比值，加强CD8^+T淋巴细胞对CD4^+T淋巴细胞的抑制作用，抑制嗜酸性粒细胞增生和IgE的合成从而阻断哮喘发病。     

穴位敷贴对支气管哮喘豚鼠肿瘤坏死因子及白细胞介素2的影响——空白对照与标准对照

目的：观察中药穴位敷贴对实验性哮喘豚鼠血清中哮喘相关细胞因子肿瘤坏死因子及白细胞介素2的影响，并与地塞米松的作用效应相比较。方法：实验于2004—05／06在广州中医药大学动物实验中心完成。选用健康Hartly豚鼠60只，随机分为4组，每组各15只。采用卵蛋白致敏制作豚鼠支气管哮喘模型，用中药穴位敷贴治疗（穴位敷贴组）与地塞米松组（标准对照）及模型组（空白对照）和正常对照组比较。①穴位敷贴组于造模成功，哮喘发作次日开始治疗。治疗穴位选择大椎、肺俞、肾俞。用大块胶布将药物敷贴固定于穴位处。每次敷药6h，隔日治疗1次，共治疗7次。②地塞米松组采用腹腔注射地塞米松0．5mg／kg，治疗时间与次数同敷贴组。③模型组造模成功后令其自然恢复。正常对照组不造模，不给予任何治疗。④各组动物治疗结束后血清肿瘤坏死因子和白细胞介素2水平的检测采用放射免疫分析法。结果：在造模及治疗阶段模型组死亡4只、穴位敷贴组死亡3只，地塞米松组死亡2只，正常对照组死亡2只。每组取10只共40只进入结果分析。①模型组豚鼠血清肿瘤坏死因子、白细饱介素2水平均高于正常对照组[（0．707&;#177;0．113），（0．377&;#177;0．134）mg／L；（1．552&;#177;0．315），（0．790&;#177;0．311）mg／L，P〈0．05]。②穴位敷贴组和地塞米松组血清肿瘤坏死因子、白细胞介素2水平明显低于模型组[（0．445&;#177;0．195），（0．330&;#177;0．132），（0．707&;#177;0．113）mg／L；（1．033&;#177;0．541），（0．971&;#177;0．502）。（1．552&;#177;0．315）mg／L，P分别小于0．05和0．01]。③穴位敷贴组和地塞米松组肿瘤坏死因子、白细胞介素2水平差异不显著[（0．445&;#177;0．195），（0．330&;#177;0．132）mg／L；（1．033&;#177;0．541），（0．971&;#177;0．502）mg／L，P〉0．05]。结论：穴位敷贴与地塞米松均可降低血清肿瘤坏死因子、白细胞介素2水平，但差异不显著，说明穴位敷贴与地塞米松的标准作用一致。穴位敷贴治疗哮喘可能是通过降低血清肿瘤坏死因子、白细胞介素暑水平这些炎症因子而发挥起效应。     

喂饲褐藻酸小鼠血脂水平和抗氧化能力的变化

目的：观察褐藻酸对高脂膳食小鼠血脂水平和抗氧化能力的影响。 方法：实验于2004-03／07在中南大学公共卫生学院测试中心完成，选择昆明种小鼠40只，随机分为4组，即对照组、高脂模型组及褐藻酸0．2，0．5mg／g组，每组10只。对照组每日给予普通饲料；高脂模型组每日给予高脂饲料（2％胆固醇、0．4％胆盐、10．0％猪油、87．6％普通饲料）；褐藻酸0．2，0．5mg／g组小鼠在每日给予高脂饲料的同时，分别给予褐藻酸0．2，0．5mg／g，喂饲6个月。分别于实验第1周及6个月末，经小鼠眼球采血测定血清三酰甘油、胆固醇、丙二醛含量。 结果：纳入40只小鼠，全部进入结果分析，无脱失。①各组小鼠血清三酰甘油、胆固醇含量比较：喂养6个月后褐藻酸0．2，0．5mg／g组血清三酰甘油含量显著低于高脂模型组[（2．135&;#177;0．432），（2．059&;#177;0．172），（2．461&;#177;0．153）mmoL／L（q=4．1162，4．5762，P〈0．05-4）．01）]；褐藻酸0．2，0．5mg／g组血清胆固醇含量显著低于高脂模型组[（5．531&;#177;0．871，4．871&;#177;1．086，6．574&;#177;1．027）mmol／L（q=3．9971，4．6831，P〈0．05～0．01）]。②各组小鼠血清丙二醛含量比较：喂养6个月后褐藻酸0．2，0．5mg／g组血清丙二醛含量显著低于高脂模型组[（2．325&;#177;0．267），（2．013&;#177;0．310），（2．571&;#177;9．654）μmol／g（q=1．2541，1．0833，P〈0．05）]。 结论：褐藻酸对高脂膳食致小鼠血脂升高有一定的抑制作用，同时亦有减少脂质过氧化反应的作用。     

迷走神经阻断对哮喘诱导延髓内脏带及下丘脑室旁核和视上核Fos蛋白表达的影响

目的：研究支气管哮喘状态下迷走神经向脑传递免疫信息的作用。方法：实验于2003-10／2004-06在解放军第一军医大学珠江医院冲经外科进行。清洁级雄性豚鼠20只单纯随机分为4组：假手术+生理盐水；手术+生理盐水；假手术+卵蛋白；手术+卵蛋白。建立豚鼠哮喘模型，在致敏状态下切断或假切断颈部双侧迷走神经，术后2周用卵蛋白经呼吸道激发豚鼠哮喘发作，2h后处死动物，用免疫组织化学ABC法观察延髓内脏带(MVZ)、下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)Fos蛋白的表达。结果：假手术和手术组豚鼠给予生理盐水刺激后，仅在MVZ背内侧部、中间网状带和腹外侧部、SON和PVN内发现少数浅染的FOS蛋白阳性细胞。假手术组豚鼠卵蛋白激发后，MVZ，PVN和SON内可发现大量FOS蛋白表达，分别为(498．00&;#177;134．28)，(99．27&;#177;15．32)，(305．10&;#177;84．68)个，手术组豚鼠卵蛋白激发后上述核团内的Fos蛋白表达量则明显减少，分别为(239．78&;#177;48．28)，(62．36&;#177;19．02)，(127．14&;#177;57．01)个，两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：迷走神经在支气管哮喘免疫应答中，可能是传递呼吸道免疫信息的重要途径之一。     

橙皮水提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响

目的：探讨腹腔注射橙皮水提取物后小鼠睡眠时间和自发活动的变化。方法：实验于2005-01／02在赣南医学院科研中心实验室完成，选择健康成年昆明种雄性小鼠90只，体质量18～22g。①小鼠自发活动实验：30只小鼠分为3组（n=10）。各组分别腹腔注射橙皮水提取物5mg／g，10mg／g和等量生理盐水，15min后放回吊笼中，通过换能器将小鼠的自发活动记录在IMS-2A型二道生理记录仪上，稳定3min后记录15s内用药后活动波形。小、中、大波（波幅小于5mm，5～10mm，10mm以上）分别为小鼠轻、中、强度活动。②小鼠阈上剂量戊巴比妥钠睡眠时间实验：30只小鼠分为3组（n=10）。各组分别腹腔注射橙皮水提取物5mg／g，10mg／g和等量生理盐水，15min后，3组均腹腔注射戊巴比妥钠0．02mL／g，以小鼠翻正反射消失为入睡指标，从翻正反射消失至恢复的这段时间为睡眠持续时间。③小鼠阈下剂量戊巴比妥钠睡眠时间实验：30只小鼠分为3组（n=10）。各组分别腹腔注射橙皮水提取物5mg／g。10mg／g和等量生理盐水，15min后，3组均腹腔注射戊巴比妥钠O．01mL／g，比较各组小鼠的入睡只数、入睡时间和睡眠持续时间。结果：90只小鼠全部进入结果分析。①小鼠自发活动的大、中波个数：橙皮水提取物5mg／g，10mg／g组显著少于生理盐水组[（58．3&;#177;12．5，45．6&;#177;10．1，90．5&;#177;14．7）个，（t=2．341，3．215，P〈0．05-0．01）]。②阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间：橙皮水提取物5mg／g，10mg／g组小鼠的入睡时间显著短于生理盐水组9（3．1&;#177;1．6，2．5&;#177;1．4，5．5&;#177;2．6）min，（t=2．323，3．135。P〈0．05-0．01）]，而睡眠持续时间显著长于生理盐水组[（132．4&;#177;45．6，155．6&;#177;47．2，98．2&;#177;32．8）min，（t=2．548，3．355，P〈0．05-0．01）]。③阈下剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠情况：橙皮水提取物5mg／g，10m（g组小鼠的入睡数量高于生理盐水组（4，8，0只），而睡眠持续时间显著长于生理盐水组[（43．2&;#177;31．0，51．5&;#177;38．1，0）min，（t=3．335～3．371，P〈0．01）]。结论：橙皮水提取物能明显缩短小鼠入睡时间、延长睡眠持续时间、抑制小鼠自发活动，具有镇静作用，与戊巴比妥钠有协同的中枢抑制作用。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

精神疾病患者家属教育的情况分析

目的：通过对精神疾病患者家属教育的调查，探讨家属教育的内容和教育方式。方法：采用自拟问卷对参加系列教育的家属进行调查分析。结果：患者和家属接受教育次数越多，对疾病知识了解越多；在患者的亲属中患者的父母参加教育比率较大。结论：家属教育对治疗疾病起着积极的作用，应更具有针对性，同时还应该注意教育方式。