胎儿咽-食管肌层α-平滑肌肌动蛋白,肌球蛋白重链Ⅱ、Ⅲ表达的三维分布

目的:探讨胎儿咽、食管肌层中α-平滑肌肌动蛋白(α-smouth muscle actin,α-SMA)、肌球蛋白重链Ⅱ(myosin heary chain-Ⅱ、MHC-Ⅱ)、MHC-Ⅰ表达及其空间分布。方法:采用免疫组织化学SABC法及蛋白印迹法对20例胎儿咽、食管的α-SMA、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达进行观察。结果:MHC-Ⅱ和MHC-Ⅰ共定位食管上、中段肌层,并主要表达在外部纵行肌,由上至下逐渐减少,至食管下段消失。而α-SMA则在食管上端内层肌开始表达,呈环行排列,由上至下逐渐增加,并由内肌层扩展到外肌层。结论:α-SMA、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ共存于胎儿食管上中段,骨骼肌和平滑肌的移行呈渐进性,无明确界线。     

小鼠食管肌层形成与分化

目的：研究α-SMA、α-SCA、结蛋白和MHC在小鼠食管肌层表达的时空特点及和食管肌层发育关系。方法：应用免疫组化PAP法和TINEL，凋亡染色法，对胎龄12d至生后5d小鼠食管连续切片进行染色。结果：α-SMA在胎龄12d开始表达。第14～15d，可见左侧第3、4、6弓动脉壁的α-SMA阳性细胞延伸至食管后壁。α-SCA和结蛋白较强表达见于第14～15d，食管下段和内肌层表达强度高于食管上段和外肌层，但16d后，外肌层显较强α-SCA和结蛋白表达。MHC表达开始于16d食管上段外肌层，18d扩展至甲状腺水平，外肌层和食管上段表达较内肌层和食管下段强。结论：α-SMA、α-SCA、结蛋白和MHC在食管肌层发育过程中有不同的时空表达模式。食管肌层的部分细胞可能和弓动脉壁的平滑肌细胞有同一来源。     

肌球蛋白重链Ⅱ和α-平滑肌肌动蛋白在成年犬咽-食管肌层的表达

目的:研究健康成年毕克犬咽和食管肌层肌球蛋白重链Ⅱ(MHC-Ⅱ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达及其空间分布.方法:采用免疫组织化学SP法对6例健康成年毕克犬咽-食管肌层MHC-Ⅱ、α-SMA的表达进行观察.结果:MHC-Ⅱ在咽部和食管上端至近贲门部肌层均有表达;α-SMA在食管中段下份内肌层最内侧开始有少量表达,至近贲门部食管肌层其表达逐渐增强,由内肌层最内侧扩展至外肌层.结论:与人类不同,成年毕克犬咽和食管上端至近贲门部肌层均有MHC-Ⅱ表达,其表达强度由上而下呈渐进性减弱;成年毕克犬咽和食管肌层α-SMA主要表达在食管中段下份和食管下段,其表达强度自食管中段下份至近贲门部呈渐进性加强.     

全层铺片技术显示胃肠道不同部位Cajal间质细胞

正Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC),是西班牙神经解剖学家Santiago Ramony Cajal于1893年首次在胃肠道中发现的一类特殊间质细胞,与胃肠道平滑肌和神经纤维末梢在解剖学上有紧密联系,具有独立功能,既是胃肠起搏细胞,又具有传导神经递质的作用~[1]。ICC广泛存在于哺乳动物的整个消化道管壁内,按分布区域可大致分为:分布于胃、小肠和结肠内的环肌与纵行肌之间的肌间神经丛ICC;位于黏膜下环肌层表面的ICC;位于小肠深肌丛区域的ICC;广泛散布于环肌和纵肌肌束内的ICC~[2]。目前消化道全层铺片技术由于能够直观、全面地显示ICC的分布、形态以及形成的细胞网络,而成为研究胃肠神经系统的重要方法之一,但文献中却鲜少提及此方法的详细操作过程。已知ICC特异性表达由原癌基因c-kit编码的受体酪氨酸激酶     

SD大鼠食管体部和食管胃连接部肌细胞的分布特点及其意义

目的:了解SD大鼠食管体部与食管胃连接部肌细胞的分布特点,并试图阐明食管胃连接部功能产生的机制.方法: 选取成年SD大鼠的食管体部及食管胃连接部标本切片,H-E染色和肌球蛋白重链Ⅱ(MHC-Ⅱ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学显色,观察肌细胞的种类及分布特点.结果: 食管胃连接部内层环形肌明显增厚,以前壁增厚最为显著;食管体部与食管胃连接部均表达MHC-Ⅱ细胞,食管胃连接部后壁环行肌内仅有少量α-SMA表达;贲门近胃底侧有一带状分布的MHC-Ⅱ阳性纵行肌细胞.结论: 胃和食管的肌层在食管胃连接部有一重叠区,食管下括约肌是构成食管胃连接部高压区的主要因素之一,其中增厚的前壁环行肌的作用可能更为重要.     

小鼠食管肌层的发育

应用免疫组化PAP法和TUNEL凋亡染色法，对小鼠胚胎及生后1～5天食管肌层的发育进行了研究，以阐明小鼠食管肌层的分化发育特点。结果显示：α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)是食管肌层最先表达的标志蛋白。ED12(胎龄12天)的食管上段，α-SMA表达限于后壁间充质细胞。中段以下，可见α-SMA弱阳性细胞形成不连续环形围绕食管腔。ED13，     

神经元核心抗原和神经元特异性烯醇化酶在人胚胎小肠发育阶段的表达

 目的：探讨神经元核心抗原（neuronal nuclear antigen,NeuN）和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)在人胚胎小肠发育阶段的分布规律及其表达意义。方法：应用免疫组织化学法检测第2~4月龄段共16例人胚胎小肠壁细胞NeuN和NSE的表达、分布状况。结果：第2~4月胎龄段,NSE在人胚胎小肠肌间神经丛内的神经元及神经纤维均呈强阳性表达,在黏膜下层,随着胎龄的增大,NSE阳性表达细胞和纤维数量逐渐增多,在肠腺内均有少量散在分布的NSE阳性细胞;在黏膜层的腺体和上皮组织内均有散在的NeuN阳性细胞分布,随着胎龄的增大,NeuN阳性细胞数量增多;在肌间神经丛,第3月龄段开始,有少量NeuN阳性细胞,随着胎龄的增大, NeuN阳性细胞数量逐渐增多;在黏膜下层,未见NeuN阳性细胞分布。结论: 人胚胎小肠发育阶段,NeuN和NSE在小肠壁的阳性表达和分布不一致,均参与小肠壁神经元及神经内分泌细胞的发育过程。     

Cajal间质细胞在胆囊结石形成中的作用分析

目的 观察Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)和c-kit蛋白在正常胆囊和结石胆囊中的分布和表达情况,探讨ICC与胆囊结石发病的关系.方法 对手术切除的25例结石胆囊和15例非结石胆囊石蜡包埋组织标本和新鲜组织,通过c-kit免疫组化染色和Western blot,对两组胆囊标本ICC和c-kit蛋白进行检测.结果 所有胆囊标本中均发现c-kit阳性的ICC分布于胆囊平滑肌层,结石胆囊ICC数目和c-kit蛋白表达明显少于非结石胆囊.结论 胆囊结石发病过程中胆囊动力学的减弱有可能与ICC的减少有一定关联.     

α-SMA在口腔粘膜下纤维性变成纤维细胞中的表达

目的探讨肌成纤维细胞在口腔粘膜下纤维性变(OSF)发病机制中的作用.方法免疫组化法检测组织中和体外培养成纤维细胞中平滑肌肌动蛋白α (α-SMA)的表达;免疫组化法和RT-PCR法检测槟榔碱对OSF及正常成纤维细胞产生α-SMA和其mRNA表达情况.结果正常口腔粘膜组织中除血管壁外无阳性染色,而OSF组织中在粘膜下层有大量梭形细胞胞浆被染成棕黄色;体外培养的正常组织来源成纤维细胞中有很少量的α-SMA蛋白表达,OSF来源的成纤维细胞中早期有大多数细胞(85.80%±3.56%)表达α-SMA;槟榔碱干预成纤维细胞后不能增加平滑肌肌动蛋白α蛋白和mRNA的表达.结论肌成纤维细胞可能在OSF的发病机制中起重要作用,OSF组织中的肌成纤维细胞可能不是槟榔成分直接作用于成纤维细胞转化而来的.     

豚鼠膀胱中二聚体Cajal间质细胞的分布特点及意义

目的　观察二聚体Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)在豚鼠膀胱不同组织及部位的分布特点,并探讨其意义。 方法　电子显微镜下观察豚鼠膀胱壁组织切片黏膜层,黏膜下层,肌层内二聚体ICC分布情况;对膀胱组织切片进行免疫荧光染色,用c-Kit抗体标记ICC,激光共聚焦显微镜下观察二聚体ICC在膀胱顶部、体部、颈部的分布特点。 结果　在电子显微镜下见二聚体ICC主要分布于黏膜下层,而肌层主要以单体ICC为主。免疫荧光染色发现每高倍镜视野下膀胱顶部二聚体ICC平均数量为（3.47±0.53）个,体部和颈部为（1.57±0.45）个和(0.49±0.19)个。膀胱顶部二聚体ICC数量明显高于体部和颈部（P<0.01）。 结论　二聚体ICC主要分布于豚鼠膀胱顶部的黏膜下层,可能是感受黏膜张力刺激,引发顶部膀胱自发兴奋的起搏细胞。