强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞和CD28CD40的检测及临床意义

目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血淋巴细胞中数量的变化和共刺激分子CD28CD40外周血淋巴细胞上的表达的临床意义.方法 采用流式细胞术检测60例AS患者和30例健康对照者外周血淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19相对数量,检测CD28、CD40L在CD3 CD4 、CD3 CD8 T细胞上和CD40在CD19 B细胞上的表达情况.结果 AS患者CD3 、CD3 CD4 、CD19 细胞较正常对照组显著增高(P＜0.05),CD3 CD8 T细胞较正常对照组降低(P＜0.05);AS患者CD28、CDD40L在CD3 CD4 、CD3 CD8 T细胞上和CD40在CD19 B细胞上的表达都较正常对照组显著增高(P＜0.05).结论 强直性脊柱炎(AS)外周血淋巴细胞中数量变化及共刺激分子CD28、CD40表达情况与AS患者免疫功能紊乱和发病机制密切相关.     

系统性红斑狼疮患者CD40—CD40L的检测及临床意义

目的探讨CD40-CD40L在系统性红斑狼疮(SLE)患者淋巴细胞上的表达及意义。方法采用流式细胞术检测SLE患者淋巴细胞CD40及CD40L的表达,并与对照组比较。结果SLE患者淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞CD40L的表达显著高于对照组(P<0.05),而CD40在淋巴细胞及CD3-淋巴细胞上的表达,两组无显著性差异(P>0.05)。结论CD40-CD40L共刺激分子途径在SLE发病机制中起重要作用,以CD40L表达上调为重要特点。     

急性冠脉综合征患者外周血CD40L表达增高

目的检测急性冠脉综合征(ACS)患者CD4 T细胞CD40L的表达率、血清可溶性CD40配体(sCD40L)的水平,探讨CD40/CD40L在ACS发病中的作用及可能途径。方法ACS患者42例,包括稳定型心绞痛(SAP)12例、不稳定型心绞痛(UAP)14例、急性心肌梗死(AMI)16例;健康对照者13例。流式细胞分析术检测CD4 T细胞表达CD40L的阳性细胞率,ELISA法检测血清sCD40L水平。结果AMI、UAP、SAP、对照组CD4 T细胞中表达CD40L的阳性细胞率分别为(8.67±3.31)%、(3.24±1.13)%、(2.29±1.93)%、(0.57±0.19)%,AMI组显著高于其他三组(P均<0.05),UAP组亦显著高于对照组(P<0.05);四组血清sCD40L水平分别为(14.53±8.08)ng/mL、(8.06±6.96)ng/mL、(7.37±3.59)ng/mL、(4.45±1.48)ng/mL,AMI组显著高于其他三组(P均<0.05)。结论ACS患者CD4 T细胞CD40L的表达率和血清sCD40L水平增高,在ACS发病过程中起重要作用;CD40L和sCD40L有望作为冠心病危险性的预测因子。     

儿童过敏性紫癜CD40-CD40L的表达

目的　探讨儿童过敏性紫癜(HSP)CD4 0- CD4 0L的表达与免疫紊乱的关系。方法　采用流式细胞术检测30例HSP患儿外周血淋巴细胞CD4 0 - CD4 0L的表达以及免疫功能,同时以30名健康儿童作为对照组。结果　(1)HSP组CD4 0的表达与对照组比较差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,而CD4 0L的表达较对照组增高(P <0 .0 1)。(2 )HSP患儿TH2类细胞因子中的IL 4 ,IL 5及IL 6明显增高,TH2的特异性膜蛋白分子CD30表达也显著高于正常水平,TH1类细胞因子IL- 2及IFN γ分泌减少。(3)HSP存在选择性的IgG的异常增高,血浆中仅IgA、IgE水平高于对照,IgG、IgM无差别。结论　HSP儿童存在CD4 0 CD4 0L表达异常与免疫功能紊乱,且二者有内在的联系。     

肺癌患者血浆CD62P、血清sCD40/sCD40L水平的检测及临床意义

目的：通过测定肺癌患者血清中可溶性CD40（sCD40）、可溶性CD40L（sCD40L）、血浆CD62P的含量,探讨血小板源性CD40/CD40L在肺癌外周血中的表达及其临床意义。方法体外分离85例肺癌患者（肺癌组）和25名健康志愿者（对照组）的血清和血浆。用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P的含量进行测定。结果（1）肺癌组血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P含量明显高于健康对照组（P均＜0.01）。（2）不同病理类型肺癌患者血清sCD40、sCD40L含量、血浆CD62P含量差异均无统计学意义（P均＞0.05）。（3）肺癌患者sCD40、sCD40L、CD62P的含量随临床分期的进展而呈升高趋势。（4）有远处转移肺癌患者sCD40、sCD40L、CD62P的含量明显高于无远处转移患者（P均＜0.05）。（5）肺癌患者术后2周时血浆CD62P、血清sCD40L的含量均较术前下降,但血清sCD40含量与术前相比差异无统计学意义。且其CD62P、sCD40L的表达水平成正相关关系（r=0.300,P＜0.05）。结论（1）肺癌患者血清sCD40、sCD40L、血浆CD62P含量增加,且表达水平与肺癌的进展程度相关,血小板源性CD40/CD40L系统在肺癌的发病中具有重要作用。（2）检测血小板源性CD40L、CD62P表达水平对研究肺癌的临床分期、预后判断有一定的参考价值。     

T淋巴细胞协同刺激分子表达异常与类风湿性关节炎患者免疫功能紊乱

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者T细胞表面协同刺激分子表达与其发病的相关性及临床意义。方法采用流式细胞术分析RA患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子CD28、CD152和CD154的表达。结果RA患者外周血CD4 T细胞较正常对照组增加,分别为(41.86±7.67)%vs(32.20±6.51)%,CD8 T细胞减少,分别为(23.82±6.88)%vs(28.16±8.43)%,差异均有统计学意义(均P<0.05);协同刺激分子CD28在RA患者较对照组CD4 和CD8 T细胞亚群上分子的表达均减少分别为(9.81±1.36)%vs(42.13±0.59)%和(7.27±3.24)%vs(18.56±2.17)%,而CD152分子的表达均增加,分别为(0.46±1.21)%vs(0.13±0.42)%和(18.78±0.14)%vs(0.42±0.47)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);CD154分子在RA患者CD4 T细胞和CD8 T细胞上表达较正常对照组也均增加,分别为(3.64±2.61%)vs(2.37±1.05)%和(4.23±1.24)%vs(2.13±0.67)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论RA患者机体的免疫功能紊乱与T淋巴细胞表面协同刺激信号分子表达异常具有相关性。     

急性冠脉综合征患者血小板CD40L与血清中性粒细胞的相关性研究

目的:探讨急性冠脉综合征患者血小板CD40L表达与中性粒细胞的相关性.方法:收集在本院住的急性冠脉综合征患者87例,其中不稳定心绞痛72例,急性心肌梗死15例.采用流式细胞技术检测血小板CD40L的表达,采用Pearson相关分析法研究血小板CD40L与血清白细胞和中性粒细胞数的相关性.结果:急性心肌梗死组患者血小板CD40L水平(3.96±2.36)显著高于不稳定心绞痛组(3.77±2.53,P＜0.05).急性冠脉综合征患者血小板CD40L表达与血清白细胞计数、中性粒细胞计数均呈正相关,(相关系数r分别为0.466和0.519,均P＜0.05):结论:急性冠脉综合征患者血小板CD40L表达与中性粒细胞计数呈正相关.     

胃癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28表达的检测及临床意义

目的 探讨胃癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28的表达及其临床意义.方法 用流式细胞术对48例胃癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD8及CD28进行了检测.结果 (1)胃癌组CD8+CD28-细胞与对照组比较明显增高(P＜0.05),CD8+CD28+细胞则明显减低(P＜0.01).(2)胃癌患者手术后CD8+CD28-细胞明显低于手术前(P＜0.01),CD8+CD28+细胞明显高于手术前(P＜0.05).(3)胃癌患者淋巴结转移组CD8+CD28-细胞明显低于未转移组(P＜0.01).(4)Ⅲ期胃癌患者CD8+CD28-细胞与Ⅰ期和Ⅱ期相比明显增高(分别P＜0.01,P＜0.05),随着临床分期的进程CD8+CD28+细胞、CD8-CD28+细胞逐渐减低(分别P＜0.01,P＜0.05).结论 检测胃癌患者的外周血中的CD8和CD28的表达,对了解患者的免疫状况,疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值.     

大剂量辛伐他汀对急性冠状动脉综合征患者血小板CD40L表达的影响

目的观察早期应用大剂量辛伐他汀强化治疗对急性冠状动脉综合征患者血小板CD40L表达的影响。方法 87例急性冠状动脉综合征患者随机分为小剂量辛伐他汀组46例和大剂量辛伐他汀组41例,患者在标准化治疗基础上于入院24h内给予辛伐他汀治疗,小剂量辛伐他汀组给予辛伐他汀20mg/d,大剂量辛伐他汀组给予辛伐他汀60mg/d,均口服7d。观察2组治疗前、后血小板聚集率、血小板CD40L表达的变化。结果治疗后2组血小板聚集率较治疗前均明显下降(P<0.05),大剂量辛伐他汀组血小板聚集率((29.4±7.7)%)较小剂量辛伐他丁组((34.2±11.1)%)降低更明显(P<0.05);治疗后2组血小板CD40L水平均明显下降(P<0.05),大剂量辛伐他汀组血小板CD40L水平(3.07±0.86)较小剂量辛伐他汀组(3.41±0.70)下降更明显(P<0.05)。结论早期大剂量辛伐他汀短期治疗可有效抑制血小板功能,降低血小板CD40L的表达。     

急性冠脉综合征患者高表达的CD40L和炎症因子相关性

目的 检测急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+T细胞CINOL的表达率、其血清可溶性CD40配体(sCD40L)和高敏C反应蛋白(hsCRP)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的浓度,分析CD40L(sCD40L)与炎症因子的相关性,探讨CD40/CD40L在ACS发病中的作用及可能途径.方法 采用前瞻性研究方法,选取2006.10-2007.4中山大学附属第一医院急诊科、心血管医学部冠心病患者32例,包括稳定性心绞痛(SAP)7例、不稳定性心绞痛(UAP)14例、急性心肌梗死(AMI)11例.正常对照组(CON)为与患者年龄、性别相匹配的健康志愿者8例.所有受试者均排除感染、肿瘤、风湿、肝肾功能不全,未使用类固醇和免疫抑制剂等.流式细胞分析术(FCM)检测CD4+T细胞表达CD40L的阳性细胞率,ELISA法检测血清sCD40L、ICAM-1和VCAM-1浓度,免疫比浊法检测血清hsCRP浓度.所有资料使用SPSS 11.0进行统计学分析.结果 ANI、UAP、SAP、CON组CD4+T细胞中表达CD40L的阳性细胞率(%)分别为8.60±3.02、3.24±1.13、2.18±1.80、0.59±0.18,AMI组显著高于其他3组(P＜0.05),UAP组亦显著高于CON组(P＜0.05);4组血清sCD40L浓度分别为14.47±8.00、8.06±6.96、7.32±3.58、4.48±1.49(ng/mL),ANI组明显高于其他3组(P＜0.05);4组血清:hsCRP浓度分别为20.30±7.57、14.04±8.03、3.78±4.99、O.93±0.77(mg/L),AMI组显著高于其他3组(P＜0.05),UAP组亦显著高于SAP组与CON组(P＜0.05);4组血清ICAM-1浓度分别为418.09±222.19、212.86±128.43、165.04±32.12、108.62±62.27(ng/mL),AMI组显著高于其他3组(均P＜O.05),UAP组亦高于CON组(P＜0.05);4组血清VCAM-1浓度分别为5540.02±2614.65、3760.95±1915.01、4167.27±2084.48、2405.65±870.45(ng/mL),AMI组显著高于CON组(P＜0.01);AMI组CD4+T细胞中表达CD40L的阳性细胞率与VCAM-1呈明显正相关性(r=0.730,P=0.011),其血清sCD40L与hsCRP、ICAM-1、VCAN-1呈明显正相关性(r=0.677,P=0.011;r:0.901,P=0.000;r=0.714,P=0.014).结论 急性冠脉综合征患者CD4+T细胞CINOL的表达率和血清sCINOL浓度升高,且与血清hsCRP、ICAN-1、VCAM-1呈明显正相关;在ACS发生中起作用,此和hsCRP、ICAM-1、VCAN-1等有关,而CD40L/sCD40L可望作为冠心病危险性的预测因子.     

共信号分子CD40/CD40L质粒标准品的构建

背景:目前,对CD40/D40L的研究主要集中在可溶性和蛋白方面,对其在转录水平上的研究文献不多,可能与其无商品化质粒标准品有关.目的:构建检测CD40/CD40L mRNA表达水平差异的标准品.设计、时间及地点:单一样本实验,于2009-04在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成.材料:取手术切除的子宫肌瘤组织,经患者知情同意.方法:以手术切除的子宫肌瘤组织细胞的总RNA为模板、Random 6mers为引物反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人CD40/CD40L基因相应的cDNA片断,构建PMD-18-CD40/CD40L重组质粒,鉴定测序后,用荧光定量PCR制作标准曲线.主要观察指标:①RNA质量检测结果.②扩增的目的片段电泳结果.③CD40/CD40L基因测序结果.④标准品的扩增情况.结果:组织提取的总RNA完整性良好,构建的CD40/CD40L质粒经PCR扩增后分别得到136 bp,200 bp的清晰条带,测序结果与目的片段完全一致,且质粒的原始浓度为2.66×10~(13)、2.45×10~(13) copies/mL,倍比稀释至2.0×10~6 copies/mL均能得到良好的标准曲线(R~2=1).结论:实验成功构建了CD40/CD40L基因荧光定量PCR标准质粒.     

Microvascular thrombosis and CD40/CD40L signaling

Summary. Background: Although inflammation and thrombosis are now recognized to be interdependent processes that activate and perpetuate each other, the signaling molecules that link these two processes remain poorly understood. Objectives: The objective of this study was to assess the contribution of the CD40/CD40L signaling system to the enhanced microvascular thrombosis that accompanies two distinct experimental models of inflammation, that is, endotoxemia (lipopolysaccharide [LPS]) and dextran sodium sulfate (DSS)‐induced colitis. Methods: Thrombosis was induced in cerebral (LPS model) and cremaster muscle (DSS model) arterioles and venules of wild‐type (WT) mice and mice deficient in either CD40 (CD40^?/?) or CD40L (CD40L^?/?), using the light/dye (photoactivation) method. Results and conclusions: A comparison of thrombus formation between WT and mutant mice revealed a role for CD40 and/or CD40L in the inflammation‐enhanced thrombosis responses in both of the cerebral and muscle vasculatures. However, the relative contributions of CD40 and its ligand to thrombus formation differed between vascular beds (brain vs. muscle) and vessel types (arterioles vs. venules). The protective effect of CD40L deficiency in cerebral arterioles exposed to LPS was significantly blunted by administration of soluble CD40L. These findings implicate CD40 and its ligand in the enhanced thrombus formation that is associated with acute and chronic inflammation.     

血液透析患者血浆中可溶性CD40及CD4+T细胞上CD154水平的变化

目的 探讨CD40-CD40配体(CD154)相互作用在血液透析患者免疫异常及肾脏损伤中的可能作用。方法 慢性肾功能衰竭进行血液透析患者22名,透析前采静脉血,正常对照10名,非空腹采静脉血;sCD40的测定采用ELISA法,CD4+T细胞上CD154的测定采用双色流式细胞仪。结果 sCD40在正常对照血浆中水平为(30.28±11.09)pg/ml,而血液透析患者为(781.22±203.03)pg/ml,显著高于正常对照(P<0.01)。外周血CD4+T细胞上CD154在正常对照的水平为(29.24±3.99)％,而血液透析患者为(41.41±5.54)％,也明显高于正常对照(P<0.05);说明在血液透析患者,其CD40-CD154相互作用处于过度活跃状态。结论 CD40-CD154可能通过影响免疫功能及加速肾脏损伤参与了尿毒症的发生发展,阻断CD40-CD154相互作用可能有助于延缓疾病进程。     

慢性肾衰竭患者血浆sCD40和sCD40L的变化

目的 探讨慢性肾衰竭(CRF)患者血浆中可溶性CD40(sCD40)和可溶性CD40配体(sCD40L)的变化以及在肾损伤和免疫异常中的可能作用.方法 选择2006年9月至12月首都医科大学附属北京同仁医院肾内科收治的慢性肾衰竭未透析患者(CRF组)30例,血液透析中心维持性血液透析3个月以上的尿毒症患者(HD组)30例,与患者年龄、性别相匹配的健康正常对照组20例.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆sCD40和sCD40L的水平,并进行相关因素分析,观察血液透析对sCD40和sCD40L的影响.用方差分析和Pearson相关性分析进行统计学分析.结果 (1)CRF组和HI)组sCD40水平均明显高于对照组(P＜0.01),HD组sCD40水平较CRF组升高(P＜0.01);(2)CRF组和HD组sCD40L水平均明显高于对照组(P＜0.01),HD组sCD40L水平较CRF组轻度升高,但无显著差异(P＞0.05);(3)CRF组sCD40水平与血肌酐(Scr)和C-反应蛋白(CRP)之间成正相关(r=0.637,P＜0.01;r=0.551,P＜0.05),sCD40L水平与Scr和CRP之间也存在相关性(r=0.553,P＜0.05;r=0.686,P＜0.01),sCD40、sCD40L水平与血压、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、血白蛋白(Alb)、血糖(Glu)、尿素氮(Bun)及血脂等指标之间无相关性(P＞0.05).血液透析组sCD40、sCD40L与上述指标之间无相关性,与透析病程和透析充分性(Kt/V)之间也无相关性(P＞0.05);(4)一次血液透析过程,HD后sCD40水平较HD前略有升高,差异无统计学意义(P＞0.05),HD后sCD40L水平较HD前下降,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 CRF患者血浆中sCD40和sCD40L水平升高,HD患者更明显,有可能参与CRF患者肾损伤和免疫异常.     

系统性红斑狼疮患者CD40-CD40L的检测及临床意义

目的探讨CD40-CD40L在系统性红斑狼疮(SLE)患者淋巴细胞上的表达及意义.方法采用流式细胞术检测SLE患者淋巴细胞CD40及CD40L的表达,并与对照组比较.结果SLE患者淋巴细胞及CD4+T淋巴细胞CD40L的表达显著高于对照组(P＜0.05),而CD40在淋巴细胞及CD3-淋巴细胞上的表达,两组无显著性差异(P＞0.05).结论CD40-CD40L共刺激分子途径在SLE发病机制中起重要作用,以CD40L表达上调为重要特点.     

CD40-1C/T基因多态性与急性冠脉综合征易感性的研究

目的 探讨CD40基因-1C/T单核苷酸多态性位点(SNP)与急性冠脉综合征(ACS)易感相关性及血小板表达CD40的关系.方法 研究对象来自江苏大学附属医院心内科2007年7月至2008年11月住院患者.ACS患者210例,SA患者189例,对照组163例.ACS的诊断:(1)心绞痛或胸闷或心电图改变;(2)肌钙蛋白I升高;(3)冠脉造影至少一支冠脉血管直径狭窄≥50%.稳定型心绞痛:心绞痛稳定发作3个月以上.所有入选者均行冠脉造影.排除患有感染、肿瘤及肝肾疾病.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)检测CD40基因多态性并测序鉴定,流式细胞术检测血小板表达CD40水平.等位基因频率及遗传平衡采用x~2检验.结果 ACS组CC基因型频率(31%)及C等位基因频率(57.9%)明显高于SA组(15.9%,43.1%)及对照组(16.0%,42.6%),在SA组与对照组差异无统计学意义(X~2=0.053,P=0.974;X~2=0.017,P=0.897).各组C等位基因携带者血小板表达CD40水平明显增高(P<0.0001).结论 CD40基因-1C/T SNP与ACS相关,C等位基因增加ACS患病风险.     

The CD40-CD40L system in cardiovascular disease

Abstract

The CD40-CD40L system is a pathway which is associated with both prothrombotic and proinflammatory effects. CD40 and its ligand were first discovered on the surface of activated T cells, but its presence on B cells, antigen-presenting cells, mast cells, and finally platelets, is evident. The soluble form of CD40L (sCD40L) is derived mainly from activated platelets and contributes to the pathophysiology of atherosclerosis and atherothrombosis. Indeed, sCD40L has autocrine, paracrine, and endocrine activities, and it enhances platelet activation, aggregation, and platelet-leucocyte conjugation that may lead to atherothrombosis. It has even been suggested that sCD40L may play a pathogenic role in triggering acute coronary syndromes. Conversely, blockade of this pathway with anti-CD40L antibodies may prevent or delay the progression of atherosclerosis. Concentrations of sCD40L also predict risk of future cardiovascular disease in healthy women and clinical outcomes in patients with acute coronary syndromes. However, there are controversial and uncertain points over the application of this biomarker to clinical cardiology. In this review, we provide an overview of potential implications of CD40-CD40L signalling and sCD40L as a biomarker in patients with atherosclerotic vascular diseases.     

CD40/CD40L在MM患者中的表达及其对预后的意义

目的:探讨CD40/CD40L在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其对预后的影响.方法:选取2016年5月-2017年6月于沧州市人民医院接受治疗的MM患者30例,作为MM组,同期选取在本院体检的健康人30例为正常组,采用流式细胞术检测两组人员血清中化疗前后CD40/CD40L的水平,分析其与MM患者淋巴细胞群、病理分...     

穿心莲有效成分对内皮细胞CD40表达的干预作用

目的:检测白细胞分化抗原40(CD40)在动脉内皮细胞中的表达,探讨穿心莲有效成分(API0134)对内皮细胞中CD40表达的干预作用。方法:应用体外细胞培养的方法培养豚鼠主动脉内皮细胞,并将培养出来的内皮细胞分为5组:对照组、氧自由基(OFR)损伤组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤组、OFR+API0134组、ox-LDL+API0134组。采用免疫荧光方法以及RT-PCR方法观察并检测ox-LDL及OFR对内皮细胞CD40表达的影响以及API0134对此表达所产生的效应。结果:与对照组相比,ox-LDL及OFR组内皮细胞CD40表达mRNA水平显著增高(P<0.01),而穿心莲组内皮细胞CD40 mRNA表达水平则明显降低(P<0.05);穿心莲组与对应的损伤组比较,内皮细胞上CD40 mRNA的表达水平明显降低(P<0.05)。结论:穿心莲有效成分API0134具有预防动脉粥样硬化作用,其机制可能与其抑制损伤内皮细胞中CD40的表达有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞CD40表达及临床意义

目的 对SLE患者外周血单核细胞上CD40的表达水平及其与SLEDAI评分有无相关性进行分析.方法 用免疫荧光标记和流式细胞仪技术检测21例SLE患者和18名正常人外周血单核细胞上CD40的表达.结果 SLE患者外周血中CD14＋CD40＋/CD14＋百分率明显高于正常对照组（P〈0.01）.SLE患者外周血CD14＋细胞CD40表达水平和SLEDAI评分呈正相关.结论 SLE患者CD14＋CD40＋/CD14＋高于正常人,认为单核细胞CD40表达增高参与SLE的发病过程.