雷公藤内酯醇对佐剂关节炎模型大鼠关节中核因子-κB受体激活剂配基表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对佐剂关节炎大鼠关节中核因子-κB受体激活剂配基(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法:复制大鼠佐剂关节炎模型,关节炎起病后分别灌胃给予雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤,关节炎病程高峰期运用免疫组化和图像分析技术测定关节滑膜和骨组织RANKL和OPG的表达,同时测定胫骨关节端骨密度。结果:给予雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤的大鼠骨密度均高于模型组(P<0.05),大鼠关节滑膜、软骨下骨和小梁骨区域中RANKL表达量均低于模型组(P<0.05,P<0.01),OPG关节骨组织表达量均低于模型组(P<0.05)。结论:抑制炎性关节中RANKL表达可能是雷公藤内酯醇和甲氨蝶呤抑制类风湿关节炎关节骨侵蚀的机制之一。     

佐剂关节炎大鼠滑膜组织中核因子κB表达的研究

目的 :研究核因子kappaB(NF κB)在佐剂关节炎 (AA)大鼠滑膜组织中的表达 ,探讨类风湿关节炎(RA)的发病机制。方法 :分别用免疫组织化学法及原位杂交法检测AA大鼠滑膜组织中NF κB蛋白及NF κBmRNA的表达。用显微图像分析系统对结果进行定量分析。结果 :AA大鼠滑膜中NF κB的蛋白及mRNA水平均较正常组明显升高 (P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,NF κB蛋白主要分布于滑膜衬里细胞、巨噬细胞、成纤维细胞及淋巴细胞中。胞浆及胞核内均有染色 ,但胞核染色较深 ,多呈团块状分布 ,而胞浆染色较浅。NF κBmRNA阳性细胞与蛋白阳性的细胞种类相同 ,主要分布于胞浆中。结论 :滑膜组织的NF κB可能参与RA的病理过程     

甲氨喋呤对佐剂性关节炎大鼠滑膜病理和核转录因子-κB表达的影响

目的:甲氨喋呤治疗类风湿关节炎疗效确切,但机制研究较少,文中观察大鼠佐剂性关节炎(AA)模型滑膜组织苏木素-伊红(HE)染色变化,探讨甲氨喋呤(MTX)对AA滑膜组织病理和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响. 方法:将30只SD大鼠用弗氏完全佐剂(CFA)造模后分为3组,正常对照组(对照组)、模型组及MTX组,每组10只.MTX组将MTX 0.3mg/(kg·d)溶于5%的葡萄糖注射液2ml,腹腔注射(共5次),对照组、模型组用5%葡萄糖注射液腹腔注射,正常饲养.15d后将大鼠处死,取滑膜组织、固定、包埋、切片、染色、镜检,对滑膜组织病理学的影响采用评分检测,免疫组化染色检测核转录因子-κB(NF-κB)的表达和活性. 结果:H-E染色后光镜下滑膜病理评分比较,MTX组较模型组低(P<0.05 ),膝关节滑膜组织NF-κB的表达增加(P<0.05),经MTX治疗后以上指标恢复至正常水平(P>0.05). 结论:MTX可减轻佐剂关节炎大鼠炎性反应,消除肿胀;减少滑膜组织炎性细胞浸润.其机制可能是通过下调滑膜细胞NF-κB的表达.     

外周血核因子κB受体激活剂配体/护骨素比值在类风湿关节炎患者骨质疏松性骨折中的意义

目的 探讨外周血核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和护骨素(OPG)水平的变化在类风湿关节炎(RA)患者合并骨质疏松性骨折(OPF)中的意义.方法 选择2010-2012年安徽医科大学第一附属医院风湿科住院的RA患者384例为RA组,年龄16 ～ 82岁,平均(49±14)岁;并根据RA组年龄和性别构成匹配入选158名健康人为对照组,年龄24 ～ 76岁,平均(50±11)岁.严格按照OPF定义并参考X线片判断两组OPF发生情况,以双能X线骨密度吸收法测定其骨密度(股骨区+腰椎2～4),酶联免疫法检测外周血RANKL和OPG水平.比较两组发生OPF的情况、外周血RANKL和OPG水平、骨密度值及其骨质疏松发生率.结果 384例RA患者OPF发生率21.35％(82例),明显高于对照组的3.80％ (6/158)(x2=25.371,P ＜0.01).与健康对照组比较,RA患者外周血RANKL水平(0.150±0.143比0.1叭±0.066,t=4.178,P＜0.000 1)、OPG水平(0.457±0.293比0.359 ±0.216,t=3.347,P=0.001)和RANKL/OPG比值(0.41 ±0.35比0.34±0.20,t=2.111,P=0.036)均明显升高.327例RA患者在各测定部位的骨密度均明显低于正常组(P＜0.01),骨质疏松发生率为37.00％(121/327),明显高于健康对照组的13.92％(22/158)(x2=27.291,P＜0.01).发生OPF的RA患者组较无OPF组具有更高的骨质疏松发生率(x2=38.186,P＜0.01)、更大的年龄(t=4.377,P＜0.01)、更长的病程(t=2.612,P=0.009)、更高的RANKL水平(t =3.554,P=0.01)、更高的RANKL/OPG比值(t=2.651,P=0.010)、更高的健康问卷评分(t=2.418,P=0.016)、更低的血清游离钙水平(=2.183,P=0.030)、更低的血红蛋白水平(=2.125,P =0.036)、更高的双手X线Sharp评分(t=2.747,P=0.007)、更差的X线分期构成(x2=7.856,P =0.049)、更高的糖皮质激素使用率(x2 =9.066,P =0.003).服用糖皮质激素的RA患者具有更高的骨质疏松发生率(x2=7.489,P=0.006)和OPF发生率(x2=9.066,P=0.003).logistic Regression (Backward LR法)分析显示,年龄(OR=1.029,P=0.039,95％ CI:1.001 ～1.057)和骨质疏松的发生(OR=3.159,P=0.001,95％ CI:1.562～6.385)、RANKL/OPG比值(OR =3.516,P =0.013,95％ CI:1.305 ～9.647)为RA患者发生OPF的危险因素.结论 RA患者OPF发生率为21.35％,约是正常对照组的5.6倍,年龄、病程和外周血RANKL/OPG比值是RA发生OPF的危险因素,也与糖皮质激素的使用有关.     

雷公藤甲素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中核转录因子-κB和诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察雷公藤甲素(TP)对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中核转录因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的作用,探讨TP治疗变应性鼻炎的可能机制.方法:健康SD大鼠40只随机等分为4组:卵清蛋白(OVA)致敏组、TP处理组、地塞米松(DM)处理组和正常对照(SC)组.以OVA致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,HE染色观察鼻黏膜组织病理学变化,免疫组织化学SP法测定鼻黏膜组织中NF-κB、iNOS的表达.结果:SC组病理学未见异常表现;TP处理组和DM处理组可见鼻黏膜轻度肿胀,少量炎性细胞浸润;OVA致敏组可见鼻黏膜高度肿胀,大量炎性细胞浸润.OVA致敏组与其他3组比较,NF-κB、iNOS表达强度差异均有统计学意义(P均<0.01),TP处理组和DM处理组间差异均无统计学意义(P均>0.05).OVA致敏组大鼠鼻黏膜组织中NF-κB的表达强度与iNOS呈正相关(r=0.818,P<0.01).结论:TP可通过抑制鼻黏膜组织中NF-κB的活性来抑制iNOS的表达.     

核因子-κB与类风湿关节炎相关性的研究进展

核因子-κB（NF-κB）是一类主要参与机体炎性分子高表达调控的转录因子。在类风湿关节炎（RA）中的意义逐渐受到重视。作者就NF-κB在RA发病中的作用及药物干预的研究情况作一综述。     

佐剂性关节炎大鼠骨密度及血清骨保护素和核因子-κB受体激活因子配体的变化

目的：观察佐剂性关节炎大鼠的骨密度、血清骨保护素（ OPG）及核因子-κB受体激活因子配体（ RANKL）的表达。方法：将30只SD大鼠随机均分为正常对照组、模型1组、模型2组,除正常对照组外,其余大鼠均制成佐剂性关节炎模型。造模后第21天处死模型1组,第28天处死正常对照组和模型2组。以双能X线吸收测定法测量整体右侧胫骨和距胫骨远端约1 cm兴趣区检测骨密度;ELISA方法检测血清OPG、RANKL的表达。结果：模型1组大鼠兴趣区的骨密度明显低于正常对照组（P〈0.01）;模型2组大鼠兴趣区的骨密度均较模型1组和正常对照组显著降低（P〈0.01）;3组大鼠整体右侧胫骨骨密度值差异无统计学意义（P〉0.05）。模型1组、模型2组血清OPG、RANKL表达及OPG/RANKL比值与正常对照组差异均有统计学意义（P〈0.01）。同时模型1组与模型2组血清 OPG、RANKL 表达及 OPG/RANKL 比值差异亦均有统计学意义（P 〈0.01）。结论：佐剂性关节炎大鼠胫骨远端骨丢失的发生在整体胫骨之前。造模后第21天和第28天的 OPG 表达降低, RANKL表达升高,OPG/RANKL比值降低。     

核因子-κB信号通路在类风湿关节炎患者中的作用

核因子-κB转录因子家族密切参与炎症反应的调节过程,在不同风湿性疾病患者发病中发挥重要作用。本文综述核因子-κB信号通路在类风湿关节炎患者中作用的新进展,并基于此信号通路,探讨熊果酸对类风湿关节炎患者的潜在性治疗作用,以期为中草药有效成分改善类风湿关节炎患者的研究提供新思路。     

雷公藤红素通过NF-κB阻断尿酸钠晶体诱导的痛风性关节炎大鼠炎性分子表达

目的观察雷公藤红素对急性痛风性关节炎大鼠的治疗作用及可能机制。方法采用微晶型尿酸钠（monosodium urate monohydrate crystal, MSU）关节腔内注射诱导SD大鼠急性痛风性关节炎,同时用雷公藤红素（1 mg/kg）进行干预,测定关节肿胀度、关节浸出液中炎症因子、细胞因子的转录和蛋白水平,并进行病理学检查,同时观察雷公藤红素对关节滑膜和软骨组织NF-κB表达和活化的影响,并进行统计学分析。实验分为4组：对照组、雷公藤红素组、MSU诱导的模型组和雷公藤红素干预组（MSU+雷公藤红素）,每组4只大鼠。结果与对照组相比,尿酸钠晶体模型组大鼠踝关节明显肿胀,两组差异有统计学意义（P<0.01）。雷公藤红素干预组与模型组相比,没有观察到雷公藤红素对尿酸钠晶体导致的足肿胀有抑制作用（P>0.05）。雷公藤红素能抑制尿酸钠导致的模型鼠炎性介质IL-8、COX-2和NO的释放,并能抑制IL-8的mRNA转录。雷公藤红素能显著抑制尿酸钠导致的模型鼠关节滑膜和软骨组织的NF-κB表达和活化。结论雷公藤红素在体内能抑制MSU导致的炎性介质IL-8、COX-2和NO的释放,这种抑制效果与其能抑制MSU导致的NF-κB表达和活化有关。雷公藤红素作为治疗急性痛风性关节炎的候选新药,值得进一步研究。     

雷公藤内酯醇对AD细胞模型核因子κB表达的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以记忆减退、认知障碍、人格改变为临床特征的中老年中枢神经系统退变性疾病,发病机制至今尚未完全阐明。β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)沉积激活胶质细胞引发脑内炎症反应在AD的发生发展中扮演着重要角     

雷公藤内酯对癫痫大鼠P-糖蛋白表达影响

目的：研究海人酸致痫大鼠模型中P-糖蛋白（P—gP）表达水平的变化及雷公藤内酯干预对其的影响。方法：84只SD大鼠随机分成3组,其中对照组28只,海人酸致痫组28只。雷公藤内酯干预组28只。应用Western—Blot法检测各组动物海人酸致痫后6、24、48、72h海马区P-gp的表达,RT—PCR法检测各组动物各时间点P—gPmRNA的表达。结果：雷公藤内酯干预组海马区各时间点P—gp及P—gpmRNA的表达均较海人酸致痫组显著下调（P〈0．05）,且雷公藤内酯干预后48h下调P—gp作用明显。结论：雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠耐药有逆转作用,其机制与下调致痫大鼠海马区P-gp的表达有关。     

外周血单个核细胞中VEGF mRNA的表达与类风湿性关节炎继发间质性肺疾病的关系

目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,探讨VEGF在RA发病中的作用及与RA继发间质性肺疾病(ILD)的相关因素.方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测64例RA患者,20例健康者PBMC中VEGFmRNA的表达.其中RA组按是否存在ILD分为单纯RA组35例和RA继发ILD组29例.结果 RA患者PBMC中VECFmRNA的表达明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RA继发ILD组显著高于单纯RA组(P<0.01).结论 VEGF是RA发病中重要的细胞因子,在RA继发ILD过程中对促进肺纤维化可能起着一定的作用.     

胶原诱导的关节炎和佐剂诱导的关节炎大鼠模型的制备

目的 制备实用性的胶原诱导的关节炎(CIA)和佐剂诱导的关节炎(AA)动物模型.方法 采用牛Ⅱ型胶原蛋白溶于0.5 mol/L醋酸中,加入等量弗氏不完全佐剂混匀乳化配成牛Ⅱ型胶原蛋白乳剂和灭活卡介苗溶于弗氏不完全佐剂中配成弗氏完全佐剂分别足跖皮内免疫Wistar大鼠,第21天加强免疫,利用YLS-7B足趾容积测量仪测量大鼠足部体积,利用PLANMECA TNTRAX线摄片机对大鼠足部拍摄,然后进行大鼠后足的近端趾间和跖趾关节病理观察.结果 CIA加强组和AA高剂量组大鼠免疫足出现明显的红肿,且肿胀足体积与正常对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);X线和病理HE染色结果亦显示,关节组织呈现关节间隙狭窄、滑膜纤维组织增生、软骨及骨的破坏等病变.结论 经改进的CIA和AA大鼠模型呈现典型的关节病变的特征,可为进一步研究人类类风湿性关节炎的发病机制和新药研发提供良好实用性动物模型.     

复方除痹汤对大鼠佐剂型关节炎血液流变学的影响

目的：观察复方除痹汤对大鼠佐剂型关节炎的治疗作用及其作用机制。方法：将64只SD大鼠随机分正常组、模型组、雷公藤组、复方除痹汤组、复方除痹汤＋雷公藤组,除正常组外其余各组大鼠造模为佐剂型关节炎模型,致炎30min前和致炎后8h、22h、32h、46h和56h分别给予相应药物1次,然后停药至第17天。第17天（即治疗第1天）开始再继续给药,致炎后第28天全部大鼠股动脉放血致死,行血液流变学检测。结果：模型组大鼠全血低切、中切、高切及卡松黏度均明显高于正常组,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,复方除痹汤＋雷公藤组全血低切、中切、高切指标有一定程度的下降,差异有统计学意义（P〈0.05）,其他用药组差异均无统计学意义（P〉0.05）;卡松黏度差异无统计学意义（P〉0.05）;与正常组比较,模型组红细胞计数和红细胞压积均上升,差异有统计学意义（P〈0.05）,红细胞聚集指数差异无统计学意义（P〉0.05）;与模型组比较,复方除痹汤＋雷公藤组红细胞计数和红细胞压积有一定程度的下降,差异有统计学意义（P〈0.05）,其他用药组差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：复方除痹汤联合雷公藤多苷片对佐剂型关节炎模型大鼠血液流变学具有一定的改善作用。     

雷公藤内酯对海人酸诱导大鼠脑小胶质细胞MHC分子表达的影响

目的:评价雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠神经元的免疫保护作用。方法:结晶紫染色观察神经元形态,免疫组化技术检测小胶质细胞MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子的表达。结果:30μg/kg雷公藤内酯可使大鼠的癫痫抽搐状态明显较海人酸组缓和,出现时间较海人酸组晚(P<0.05),且可使海人酸诱导大鼠活化小胶质细胞的数量减少,凋亡神经元数量减少。30μg/kg雷公藤内酯可下调海人酸诱导大鼠脑小胶质细胞表达MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子(P<0.01)。结论:雷公藤内酯通过抑制小胶质细胞表达MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子和免疫应答对海人酸诱导大鼠神经元凋亡具有免疫保护作用。     

石藤胶囊对佐剂性关节炎大鼠OPG、RANKL表达的影响

[目的]观察石藤胶囊对佐剂性关节炎(A A)大鼠血清及关节组织核因子κB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的影响。[方法]采用弗氏完全佐剂诱导的大鼠A A模型。Wistar大鼠32只,随机分为模型组、石藤胶囊组、雷公藤组,正常对照组各8只。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定大鼠血清中核因子KB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的水平,免疫组织化学法检测大鼠关节中OPG、RANKL的表达。[结果]石藤胶囊可以明显降低A A大鼠血清和关节中的RANKL水平,提高血清和关节中的OPG水平。[结论]石藤胶囊能够通过抑制破骨细胞通道对AA发挥防治作用。     

铝对大鼠黑质酪氨酸羟化酶mRNA表达的影响

为了探讨铝对中枢神经系统多巴胺能神经元的影响,采用地高辛标记酪氨酸羟化酶（TH）反义RNA探针原位杂交组织化学方法,观察了氯化铝对大鼠黑质THmRNA表达的影响。结果发现,大鼠服用氯化铝3个月后,黑质背侧部多巴胺神经元THmRNA杂交信号弱于对照组,表明氯化铝对大鼠黑质THmRNA表达有抑制作用。     

雷公藤内酯醇对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇对血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响及其作用机制。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,细胞融合达60％时培养基中加入不同浓度的雷公藤内酯醇和雷帕霉素。采用细胞计数法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测VSMCs内c-fos mRNA表达水平。结果雷公藤内酯醇和雷帕霉素均明显抑制血清诱导的大鼠VSMCs增殖,阻断细胞由G0／G1期向S期转化;RT-PCR检测显示,随着雷公藤内酯醇浓度的增加,c-fos mRNA表达明显减少。结论雷公藤内酯醇能明显抑制血清诱导的VSMCs增殖,而阻断细胞周期、下调原癌基因c-fos mRNA的表达可能是其药理机制之一。     

雷公藤内酯醇对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其作用机制.方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,细胞融合达60%时培养基中加入不同浓度的雷公藤内酯醇和雷帕霉素.采用细胞计数法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测VSMCs内c-fos mRNA表达水平.结果雷公藤内酯醇和雷帕霉素均明显抑制血清诱导的大鼠VSMCs增殖,阻断细胞由G0/G1期向S期转化;RT-PCR检测显示,随着雷公藤内酯醇浓度的增加,c-fos mRNA表达明显减少.结论雷公藤内酯醇能明显抑制血清诱导的VSMCs增殖,而阻断细胞周期、下调原癌基因c-fos mRNA的表达可能是其药理机制之一.