宫内接触甲基汞对发育阶段大鼠脑神经细胞凋亡和细胞周期影响的研究

目的 :探讨宫内接触甲基汞所致脑发育神经细胞损伤的机理。方法 :对妊娠 7～ 1 0 d的大鼠每天灌胃给予 4mg/ kg氯化甲基汞。对 2 0 d胎鼠和出生 1～ 7d幼鼠的脑组织行流式细胞术定量分析。结果 :1宫内接触甲基汞可诱导初生期大鼠脑神经细胞凋亡。 2宫内接触甲基汞对脑神经细胞周期有一定的影响。结论 :宫内接触低剂量甲基汞是以诱导凋亡的方式致脑神经细胞损伤。     

创伤性脑损伤诱导海马细胞凋亡模型的建立

目的 建立用于研究创伤性脑损伤诱导海马细胞凋亡的模型。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠单侧大脑皮质承受不同高度（２、５、和１０ｃｍ）下落的１０ｇ重锤打击（皮质压缩幅度３ｍｍ）,致轻、中、重度脑损伤。观查１￣７ｄ脑含水量,组织病理学变化及原位末端标记法（ＴＵＥＮＬ）检测伤侧海马凋亡细胞的变化。结果 伤侧皮质和海马损伤程度与重锤下落的高度有关,轻、中度损伤各时相点脑含水量无明显变化,重度损伤组３￣７ｄ脑含水量显     

Effects of methylmercury chloride on the brain chromatin structure in rats at various developing stages

妊娠７～１１ｄ的孕鼠，经腹腔连续注入氯化甲基汞（２ｍｇ／ｋｇ体重），采用Ｈｅｗｉｓｈ和Ｂｕｒｇｏｙｎｅ法分离纯化不同发育阶段新生大鼠的脑细胞核，来探讨氯化甲基汞对其脑染色质结构的影响。接触或不接触氯化甲基汞的大鼠脑细胞核分别经ＤＮａｓｅ１和ＥｃｏＲ１核酸内切酶消化后进行缺口翻译。结果接触氯化甲基汞生后３ｄ的大鼠脑细胞核３Ｈ－ｄＡＭＰ的掺入量明显低于相应未接触氯化甲基汞的对照组（Ｐ＜０．０５）。我们认为氯化甲基汞对大鼠发育过程中脑染色质结构的影响可能与胎、幼鼠对甲基汞神经毒性的易感有密切关系。     

大鼠生后不同发育阶段下丘脑细胞凋亡的研究

目的：探讨大鼠生后下丘脑不同发育阶段细胞凋亡的规律及禁水对细胞凋亡的影响。方法取生后发育不同阶段的大鼠下丘脑,（１）用Ｂｏｕｉｎ液固定,骼ＴＵＮＥＬ染色;（２）用改良的Ｂｏｕｉｎ液固定,核固红结晶比染色。结果：（１）委后１ｄ凋亡细胞最多,主要位于下且脑背侧偶室旁核附近。生后５ｄ,凋亡细胞明显减少。以后凋亡的亡细胞越业越少。６０ｄ和见到凋亡细胞,两种以方法结果相似;（２）成年大鼠禁水后,未见凋亡细胞     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c—Jun表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞（ＭＭＣ）对发育脑组织损伤的机理。方法：将Ｗｉｓｔａｒ系妊娠大鼠于妊娠７￣１０ｄ连续灌胃给予ＭＭＣ ４ｍｇ／ｋｇ,取Ｐ１（ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｄａｙ １）,３,５,７,１０,１５仔鼠脑组织制备常规组织切片,采用免疫组织化学法检测ｃ－Ｊｕｎ表达。结果：对照组发育阶段仔鼠大、小脑有ｃ－Ｊｕｎ表达。随着出生后时间延长,大,小脑ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞数下降,并且ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞上有典型凋     

腺病毒介导多基因对胆管癌细胞凋亡的诱 导和肝细胞毒性损害

目的：研究腺病毒介导的多基因（ＧＭ－ＣＳＦ、Ｂ７－１、ｐ５３、ＩＬ－２）对胆管癌细胞系ＱＢＣ９３９ 凋亡的诱导作用和对正常肝细胞的作用。方法：应用ＴＵＮＥＬ细胞凋亡检测法和光镜观察,分析同时含ＧＭ－ＣＳＦ、Ｂ７－１、ｐ５３、ＩＬ－２ ４ 种目的基因的重组腺病毒载体（Ａｄ－ｍ ｕｌｔｉｇｅｎｅｓ）对胆管癌细胞系ＱＢＣ９３９ 和肝细胞系Ｌ０２的作用以及对大鼠肝脏的毒性损害。结果：Ａｄ－ｍｕｌｔｉｇｅｎｅｓ与化疗药物顺铂协同,能诱导３０％ 左右的ＱＢＣ９３９发生凋亡,并对肝细胞系Ｌ０２ 和大鼠肝细胞无明显毒性损害。结论：Ａｄ－ｍ ｕｌｔｉｇｅｎｅｓ能诱导胆管癌细胞ＱＢＣ９３９ 发生凋亡,且与化疗药物顺铂具有协同增强作用。初步分析对人肝细胞及大鼠肝脏无明显毒性损害,具有一定的临床应用前景。     

甘草酸二铵对缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的影响

目的：观察甘草酸二铵（dammonii glycyrrhizinatis,DG)对局灶性脑缺血再灌注诱导的脑神经细胞凋亡的防治作用，并探讨其神经保护作用的机制。方法：雄性witar大鼠分为3组，假手术组（sham组），缺血再灌注组（IR组），给药组（DG组），采用大脑中动脉栓塞模型（MCAO），缺血2h再灌注12h，24h后，分别观察脑组织超微结构，脑神经细胞凋亡情况，结果：与IR组相比，DG组脑组织病理损害明显减轻，神经细胞凋亡减少。结论：DG可明显抑制局灶性脑缺血－再灌注所诱导的脑神经细胞凋亡，起到一定的社会保护作用。     

新生儿缺氧缺血性脑病海马细胞凋亡的实验研究

目的：探讨新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）中海马迟发性神经元死亡现象，研究其凋亡的作用机理。方法：通过ＨＩＥ的动物模型，应用ＤＮＡ电泳、电镜、原位末端标记技术等手段，分别对缺氧３ｈ完成后１、４、１８、２４、４０、７２ｈ及７ｄ组和对照组海马凋亡细胞形态、密度、时间进行观察比较。结果：光镜、电镜显示细胞皱缩、染色质边集、出现凋亡小体，ＤＮＡ电泳图谱显示梯状形态，原位标记显示海马各区标记阳性的细胞，定量比较显示ＨＩＥ后４０ｈ点海马细胞凋亡最明显，其中ＣＡ１区持续至７ｄ以后。结论：在ＨＩＥ中细胞死亡存在着凋亡作用；未成熟脑对缺氧缺血存在迟发性的损伤反应     

地塞米松诱导幼龄大鼠胸腺细胞凋亡模型

目的：建立一个比较实用且成型时间短的地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡模型。方法：给幼龄大鼠（４周￣５周）腹腔注射地塞米松（０．０２ｇ／ｋｇ）采用形态学（光镜和电镜）、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度分析等方法研究３、６、９、１５、２４ｈ等不同注射时间胸腺细胞凋亡变化。结果：在１５ｈ内,地塞米松诱导的大鼠胸腺细胞凋亡百分率随时间延长,凋亡发生率从６．２％逐渐增至５８．５％,注射地塞米松１５ｈ,在光镜和     

脑缺血后海马CA1区细胞凋亡现象的观察

观察大鼠完全性前脑缺血再灌注损伤过程中海马ＣＡ１区神经元死亡的另一种形式－细胞凋亡。采用琼酯糖凝胶电泳及原位缺口翻译法，观察海马ＣＡ１区神经元是否有凋亡特征性改变。结果；脑缺血损伤后５ｄ，从海马ＣＡ１区神经元提取ＤＮＡ，其琼酯糖凝胶电泳呈现典型梯状结构。而采用原位缺口翻译法，发现缺血损伤后３ｄ，海马ＣＡ１区开始出现胞核染色体阳性的凋亡细胞，缺血损伤后５ｄ，凋亡细胞达到高峰。结论：海马ＣＡ１区尽管     

细胞凋亡在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用

目的：研究细胞凋亡在新生儿缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）中的作用。方法：结扎新生７ｄ龄大鼠左颈总动脉后吸８％浓度氧２ｈ制成ＨＩＢＤ模型,应用苏木素－伊红（ＨＥ）染色、原位缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）、ＤＮＡ电泳分析综合研究新生大鼠ＨＩＢＤ后脑细胞的死亡形式。结果：缺氧缺血（ＨＩ）后０ｈＨＥ染色即发现左侧纹状体有一些神经元呈凋亡早期的改变;ＨＩ后１８ｈＴＵＮＥＬ染色在左脑皮质及纹状体见到阳性凋亡细胞;ＨＩ后２ｄＤＮＡ电泳见到ＤＮＡ梯形带;ＨＩ后２～３ｄ凋亡达高峰;持续至少２１ｄ。结论：３种方法均表明细胞凋亡为ＨＩＢＤ后神经元的主要死亡形式,也是加重脑损伤的一个因素。     

腹侧海马内强啡肽与癫痫发作敏感性形成关系探讨

用免疫组化方法检测一次给予惊厥剂量 酸诱发ＳＤ大鼠出现急性癫痫发作后,癫痫发作敏感性形成过程中（ＫＡ后１￣７ｄ）,海马内源性强啡肽Ａ（１－８）免疫反应活性（ＤＹＮＡ（１－８）－ＬＩ）动态变化过程。结果表明,ＫＡ后１￣７ｄ,背、腹侧海马苔状纤维（ＭＦ）ＤＹＮＡ（１－８）明显增强,ＫＡ后２￣４ｄ,在腹侧海马龋状回颗粒细胞（ＤＧＣｓ）层部位出现ＤＹＮＡ（１－８）－ＬＩ免疫反应阳性神经元,５－７ｄ后上述改     

氯化甲基汞对大鼠脑毒蕈碱受体的影响

通过大鼠体内、外试验研究氯化甲基汞对其脑组织Ｍ胆碱受体的影响。体外试验结果表明：氯化甲基汞能抑制氚标记配体二苯羟乙酸奎宁酯（￣３Ｈ－ＱＮ用与大鼠大脑Ｍ胆碱受体的结合，其ＩＣ＿（５０）为０．０１３７±０．００３７ｍｏｌ／Ｌ；饱和试验结果进一步证实了其抑制作用是因为氯化甲基汞可减少大鼠大脑组织受体的最大结合位点以及降低￣３Ｈ－ＱＮＢ与受体的亲合力。体内试验是在大鼠受孕的第７～１２天，每天经腹腔分别注射氯化甲基汞溶液１．５，２．５，３．５ｍｇ／ｋｇ。各组仔鼠出生后于第７、１４、２１天处死，分离出大、小脑，分别制成匀桨进行Ｍ胆碱受体与￣３Ｈ－ＱＮＢ的结合试验。观察结果显示氯化甲基汞对仔鼠发育的大脑和小脑的Ｍ胆碱受体与￣３Ｈ－ＱＮＢ的结合均具有抑制效应。     

肝细胞生长因子对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤的影响

目的：研究肝细胞生长因子(HGF)对缺氧、缺糖诱导的星形胶质细胞（As）损伤及凋亡的影响。方法：以缺氧、缺糖来诱导原代培养的大鼠大脑皮层星形胶质细胞损伤。用不同终浓度（20～100ng/mL）的HGF处理星形胶质细胞,以乳酸脱氢酶（LDH）漏出率作为细胞损伤指标,四甲基偶氮唑盐（MTT）还原试验检测细胞活力,流式细胞术检测凋亡细胞,透射电镜观察细胞超微结构。结果：缺氧缺糖引起LDH漏出率增高,细胞活力下降,细胞凋亡率增高。HGF处理后,LDH漏出率降低,细胞活力增高,同时细胞凋亡率降低（P＜0.05）,最大效应剂量为60ng/mL。结论： HGF对星形胶质细胞缺氧缺糖损伤具有保护作用,能减少星形胶质细胞凋亡,并呈一定的剂量依赖关系。     

KG881对佐剂性关节炎大鼠免疫功能的影响

ＫＧ８８１是一种口服含金抗类风湿性关节炎新药，福氏完全佐剂致炎后ｄ１９ｉｇ给药（含金量５、１０、２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），连续７ｄ，对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠免疫功能有明显的抑制作用：降低刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）及脂多糖（ＬＰＳ）诱导的ＡＡ大鼠脾淋巴细胞的增殖反应；抑制ＬＰＳ诱导的ＡＡ大鼠腹腔巨噬细胞产生的白细胞介素１。此抑制作用有剂量依赖性。     

牛膝多肽对NMDA诱导的大鼠原代视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的：探讨牛膝多肽（ABPP）对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导的体外培养大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）损伤的保护作用。方法：采用新生大鼠视网膜神经细胞体外原代培养,随机分为对照组、NMDA组、ABPP＋NMDA组[按ABPP不同药物质量浓度（0.1、0.3、1.0、3.0μg/ml）设4个亚组]和地西平（MK-801）＋NMDA组。采用倒置显微镜观察细胞形态;抗Thy-1.1细胞免疫荧光染色鉴定培养细胞中RGCs纯度;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst/PI双染色法定性观察细胞凋亡;流式细胞术AnnexinV/PI双染色法定量测定细胞凋亡率。结果：NMDA可诱导大鼠视网膜神经节细胞凋亡,与NMDA组比较,0.3μg/ml ABPP可提高RGCs存活率,减少细胞凋亡（P〈0.05）。结论：ABPP可抑制NMDA诱导的视网膜神经节细胞凋亡,保护视网膜神经元。     

LAK和TIL细胞的表型测定

应用多种抗人淋巴细胞的单克隆抗体和流式细胞仪，分析用ＩＬ－２诱生患者淋巴细胞２周形成的ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞的表型。结果：ＬＡＫ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（８５．０±２．５３）％，ＣＤ＿（１６）细胞为（８．３±１．０）％，证实ＬＡＫ细胞是以Ｔ细胞为主，包括有ＮＫ细胞的混合群体。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占８１．４８％，因而推测ＬＡＫ细细胞中，抗原特异性和ＭＨＣ限制性的ＣＴＬ细胞占有很大比例。ＴＩＬ细胞中ＣＤ＿３￣＋细胞为（６４．７±９．７）％，ＣＤ＿（１６）￣＋细胞为（１．６±０．２）％，Ｌｅｕ７￣＋细胞为（６．８±１．１）％。双标记表型分析ＣＤ＿８￣＋Ｌｅｕ７￣－的ＣＴＬ细胞占ＣＤ＿８￣＋细胞的８６．７６％，证实ＴＩＬ细胞主要是Ｔ细胞，ＮＫ细胞极少。     

促性腺激素释放激素类似物那法瑞林对人乳腺癌细胞BCaP—37生？…

目的：观察促性腺激素释放激素（ＬＨＲＨ）类似物那法瑞林对体外培养的人乳腺癌细胞ＢＣａＰ－３７生长的影响。方法：培养的ＢＣａＰ－３７细胞。经下列条件作用４ｄ后进行细胞计数：（１）加入１０＾－５￣１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林;（２）加入１０＾－７￣１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ的雌二醇（Ｅ２）;（３）在含１０＾－８ｍｏｌ／ＬＥ２的条件下,加入１０＾－５￣１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ的那法瑞林或他莫昔芬;（４）加入１     

水蛭肽注射液对大鼠脑神经细胞凋亡的影响

目的探讨水蛭肽注射液对脑神经保护作用机制。方法采用栓线法阻塞大鼠大脑中动脉,制作MCAO模型即脑缺血再灌注损伤模型。实验动物脑缺血再灌注后进行神经功能评分并观察脑组织神经细胞凋亡的形态,计算脑组织神经细胞凋亡的百分率。结果水蛭肽注射液能降低损伤后大鼠神经功能评分,能抑制再灌注损伤后脑组织神经细胞凋亡。与川芎嗪对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论水蛭肽注射液能减低脑神经细胞凋亡的发生率,对缺血脑组织具有保护作用。     

坐骨神经损伤诱导脊髓IL-1 mRNA的表达及其与星形胶质细胞、NOS阳性细胞的关系

目的 观察坐骨神经损伤不同时间脊髓内ＩＬ－１ ｍＲＮＡ表达及其与星形胶质细胞、ＮＯＳ阳性细胞间的关系。方法 采用坐骨神经切断所致大鼠脊髓前角运动神经元损伤模型,应用ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组织化学技术。结果 （１）ＩＬ－１在脊髓内的表达直接与坐骨神经损伤及时程密切相关,损伤３ｄ在受累脊髓节段出现的ＩＬ－１ ｍＲＮＡ的表达,损伤７ｄＩＬ－１表达明显,１４ｄ时表达仍然存在。（２）坐骨神经损伤后,脊髓受累节段