人类骨髓细胞体外培养的临床应用

1966年 Bradley 等在半固体琼脂培养基中培养小鼠骨髓细胞成功后,体外造血细胞培养的方法不断改进。特别1979年以来,进展颇为迅速。不仅能使小鼠各种造血细胞亚群在体外培养基中长成集落,且某些方法已用于培养人的造血细胞。这对于研究血细胞的发生及调节机理,探讨各种造血功能障碍的病因和细胞缺陷提供了途径。临床上也正在广泛应用于许多疾病的早期诊断、指导治疗和判断预后等。     

微生物抗溶菌酶活性测定法

根据抗溶菌酶的微生物可以纯化溶菌酶的特点,作者利用下述方法测定了1296株归9个属的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗溶菌酶活性。用生理盐水将溶菌酶制备成10-250μg/ml的溶液,以不同浓度的溶茵酶溶液0.5ml与热溶化并冷却到45℃的琼脂培养基4.5ml混合,倒入平皿使之成均匀的一层,这时制备成的各平皿中琼脂含溶菌酶浓度是1—25μg/ml(浓度间隔是1μg/ml)。在上述凝固的琼脂表面放上小块被检菌的琼脂培养物或是一杯肉汤培养物(含菌为10~9/ml),37℃孵育18—24小时后,用三氯甲烷蒸汽熏蒸30分钟,以杀死生成的被检菌菌落,再用0.7%的琼脂培养基3ml(含指示菌—藤黄微球菌2665株10~9个菌)在     

对用尿素-动力-靛基质培养基(UMI)识别和区分大便培养中沙门氏菌和志贺氏菌的评价

作者将Christensen氏尿素酶培养基进行改良而制成尿素-动力-靛基质(UMI)培养基.这种培养基可用于从大便标本培养物中筛选沙门氏菌和志贺氏菌.Christensen氏尿素酶培养基的基本成份不变,仅将胰蛋白胨浓度由0.1%增加至1%,琼脂浓度由2%降至0.2%.用UMI培养基和标准的传统方法测定687株肠杆菌科细菌的尿素酶、动力和靛基质产生能力,以评价这一改良培养基的敏感性.结果有     

鉴定念珠菌的新型鉴别分离培养基

CHROMagar Candida是由法国巴黎CHRO-Magar公司研制并推出的一种酵母菌鉴别分离培养基。对临床上重要的酵母菌的分离与鉴定.通常使用沙保弱葡萄糖琼脂培养基、Nickerson’s培养基、BiGGY琼脂培养基、磷钼酸盐琼脂培养基等。这些培养基有的制备困难、有的不适合于临床实验室的常规使用。为此,作者等研制出一种新型培养基,它适用于临床实验室对大多数酵母菌的分离与鉴定,能抑制杀菌生长,能对混合培养的酵母菌菌种作出鉴定,而且在这种培养基上生长的酵母菌,其存活不受影响。这一培养基的组成(每L)中含有蛋白陈(10g)、葡萄糖(20g)、琼脂(15g)、氯霉素(0.5g)以及色原混合物(2g)。     

维甲酸对人类正常和恶性造血细胞的作用及其临床应用

60年以前,Wolbach已注意到缺乏维生素A的小鼠会发生癌前性上皮病变,但能被维生素A族物质(retinoid)逆转。体外实验表明,维生素A的衍生物——维甲酸(Retinoic Acid,RA)能抑制化学致癌物诱导的细胞恶变。随后又发现,RA能诱导人类早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60的分化和成熟。这些工作引起了人们对RA的广泛兴趣和研究。本文就RA对人类正常造血细胞和白血病细胞的作用及其临床应用作一综述。一、RA对正常造血细胞集落生长的刺激作用迄今为止,RA对造血细胞的作用多半是在体外实验体系中观察的。许多作者证明RA能促进正常入骨髓细胞集落的生长。Douer等应用琼脂培养基培养正常人CFU-     

亚硝酸钠抑菌作用的试验观察

在实验室观察了亚硝酸钠对金黄色葡萄球菌(ＡＴＣＣ6538)的抑菌作用。用划线法接种试验菌于普通营养琼脂平板上,将沾亚硝酸钠溶液滤纸片(直径6ｍｍ)贴在平板表面。于37℃培养48ｈ。结果,浓度≤10%的亚硝酸钠抑菌圈小于6ｍｍ(无抑菌作用);50%～100%者抑菌圈大于6ｍｍ。用无菌蒸馏水对倍稀释药液,将经不同浓度亚硝酸钠作用的菌药混合液分别加入双倍浓度肉汤中,于37℃培养48ｈ。结果,经浓度≤40%亚硝酸钠作用后肉汤管均长菌,≥80%亚硝酸钠者均不长菌亚硝酸钠抑菌作用的试验观察@冯伶$太原铁路分局太原铁路卫生防疫站!太原030013@李少岚$太原铁…     

粪便样本中志贺菌分离培养方法的优化

目的 优化从腹泻患者粪便标本中分离培养志贺菌的方法.方法 使用EC肉汤和志贺菌增菌液对129份粪便样本进行增菌培养,采用普通PCR方法检测ipaH基因,使用木糖赖氨酸去氧胆酸钠琼脂(XLD)培养基、麦康凯琼脂(MAC)以及沙门志贺菌培养基(SS)等选择性培养基分离培养志贺菌.使用志贺菌参考菌株,进行模拟增菌培养,利用荧...     

脐血血浆支持造血祖细胞体外集落培养的研究

10份去血小板的脐血血浆混合后用于研究其对造血细胞培养的支持作用。发现按10％的终浓度加入粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)琼脂培养体系时,集落产率稍高于用GM-CSF作刺激因子组。当按30％终浓度加入含EPO的甲基纤维素培养体系时,可支持CFU-GM、爆式红系集落(BFU-E)、巨核细胞集落(CFU-Meg),粗-巨噬细胞与红系细胞混合的集落(CFU-GEM),粒-巨噬细胞与红细胞、巨核细胞混合的集落(CFU-GEMM)生长,而混合成人血浆则无此作用。植物血凝素刺激的单个核细胞条件液(PHA-MNCCM)对大部分集落有促进作用,但均无统计学意义。国产IL-3可提高CFU-GEM产率,但似乎不利于含巨核细胞的集落生长。研究结果提示,脐血血浆含有丰富的造血刺激活性,利用脐血血浆进行造血祖细胞体外集落培养可能为简化并推广体外造血细胞培养提供新的途径。     

MALDI-TOF MS鉴定马尔尼菲篮状菌的实验条件优化

目的 构建用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)鉴定马尔尼菲篮状菌的数据库,并探索用于MALDI-TOF MS鉴定马尔尼菲篮状菌的最佳培养条件和前处理方法 .方法 利用8株马尔尼菲篮状菌构建自建数据库,比较不同培养基[沙保弱葡萄糖琼脂培养基(SDA)、沙氏葡萄糖肉汤培养基(SDB)]、培养...     

用于人牙周细菌药敏试验的琼脂培养基

牙周病是具有不同临床表现及不同微生物所致的炎症。牙周囊中隐藏着100-150种细菌,占优势的有5-10种。主要是厌氧菌、兼性厌氧菌和嗜碳酸菌。单纯使用抗菌素,或者与手术清创术联合治疗牙周病都是有效的。药敏试验有助于合理选用抗菌药物,为此提出了一种适用于多数牙周菌株体外药敏试验的培养基,称V培养基。该培养基的优点是:(1)牙周菌生长良好;(2)成分容易配制;(3)药物最小抑菌浓度(MIC)同其他培养基得到的一致;(4)不需添加血液。 V培养基的成分如下:每升含胰蛋白胨15克,酵母浸膏5克,氯化钠5克,葡萄糖2克,丙酮酸钠2克,甲酸钠1克,延胡索酸钠1.5克,琥珀酸钠0.1克,吐温-800.25毫升,琼脂15克,氯血红素5毫克,维生素K_30.5毫克。作者比较了50株牙周菌在V培养基和6种其他培养基(Wilkins-Chalgren琼脂WCA、Schaedler琼脂、Brucella琼脂、胰蛋白酶黄豆血平板TSA、以及加血液的Schaedler和Brucella琼脂)上的生长情况。 V培养基同TSA在牙周细菌生长的能力和数量上相似;同WCA相比,试验的24种细菌中有17种结果相似,有6种细菌在V培养基上生长优于WCA;V培养基明显优于Schaedler和Brucella琼脂,牙周细菌在这些琼脂上生长不良。加血液能增加Brucella琼脂上细菌的生长,但对Schaedler琼脂无明显促进作用。用同样的上述牙周菌株在V培养基及常用于临床厌氧菌敏感试验的培养基WCA上进行青霉素、四环素、氯霉素、克林达霉素和红霉素等5种抗菌素的药敏试验比较,测得的MIC基本相同。只有腐蚀类杆菌(“Corroding”Bacteroides)在V培养基上的MIC高于WCA,可能是因细菌在V培养基上生长较好,以致抑菌需要的抗菌素浓度增高。总之,V培养基用于培养牙周病分离的细菌可与血琼脂培养基媲美,甚至更佳。在药敏试验上,其价值同WCA类似。因此,V培养基不失为进行人牙周菌药敏试验的合适培养基。     

微量刃天青显色法快速测定结核分枝杆菌MIC及菌型鉴定

目的 用刃天青显色法快速测定结核分枝杆菌(MTB)MIC及菌型初步鉴定,并确定抗结核药物折点浓度.方法 用30株国家结核参比实验室熟练度测试质控菌株和64株临床分离菌株为试验菌株,在96孔培养板中,用Middlebrook 7H9液体培养基将抗结核药物进行连续双倍稀释后,加入一定浓度菌液,用刃天青显色法测定MIC.根据...     

介绍一种简单、实用的淋菌培养基

淋病奈瑟菌(简称淋菌),目前国内常用血液琼脂或巧克力琼脂培养基培养,在这种培养基上菌落较小约0.5～1mm左右,容易影响检出率.为了使淋菌生长得更好,提高检出率,我们研制了一种简单、实用的淋菌培养基,经应用获得了满意的效果.     

046 选择性培养基用于临床标本分离酵母菌的重要性

为了评价选择性真菌培养基用于从临床标本中分离酵母菌的重要性 ,作者比较了普通细菌培养基和沙保罗氏琼脂对酵母菌的分离率。比较研究　共 5 5 8份标本 ,来源于腹部脓肿、伤口和引流液等。标本接种于血平板、巧克力平板、乳糖琼脂平板和沙保罗氏琼脂。沙保罗氏琼脂中加入链霉素和青霉素以抑制细菌生长。所有培养基在 37℃孵育 48ｈ。5 5 8份标本中有 5 0份培养出酵母菌 ,其中 6份纯培养 ,44份混合培养(2 2份只能从沙保罗氏琼脂培养出酵母菌 )。沙保罗氏琼脂被证明是最适用于从含有酵母菌和需氧的革兰氏阴性菌的标本中分离酵母菌的培养基 ,…     

抑制变形杆菌迁移生长的一种培养方法

抑制变形杆菌迁移生长的一种培养方法天津武警医学院（３００１６２）韩景田普通变形杆菌、奇异变形杆菌在普通琼脂平板上具有迁移性生长现象，是其特征之一。以往获得单个菌落的培养方法是提高培养基中琼脂的浓度，或在培养基中加入某种化学试剂等。近年我们在实验中发现...     

细菌鞭毛染色的效果和影响因素

目的探讨在细菌鞭毛染色过程中,各种因素对染色效果的影响。方法将受试菌种在不同琼脂浓度的培养基中培养一定的时间后,移至无菌蒸馏水中孵育,然后进行鞭毛染色。结果细菌鞭毛在液体或半固体培养基中能较好地体现动力;培养8～12h为鞭毛形态观察最佳时间;镜检显示以6×108/mL的菌悬液,在无菌蒸馏水中舒展10min,染色5min的效果最好。结论在细菌鞭毛染色过程中,培养基的琼脂浓度、菌种的培养时间、细菌在无菌蒸馏水中舒展时间、染色液的配制、染色时间等因素都会影响染色效果。     

用于嗜热脂肪杆菌培养的琼脂粉灭菌法

<正> 用于培养基的琼脂,人们多只重视其硬度、透明度,忽视对存在自然菌的检查,因此常因灭菌不彻底而给实验(如嗜热脂肪杆菌培养)带来困难。我们对不同批号的日本产与青岛产琼脂粉进行了试验观察。将上述琼脂粉制成含量1.5%的营养琼脂,每瓶170 ml,用手提式压力蒸汽灭菌器灭菌(121℃,20分钟)后,分别置于37℃与56～60℃条件下培养。结     

培养和检测幽门螺旋菌尿素酶活性的新培养基

目前鉴定幽门螺旋菌(HP)的方法虽多,但均不理想。本文研究了一种新的平板培养基,不含血液,可直接培养该菌并检测其尿素酶活性。该培养基系非选择培养基(NSM),由哥伦比亚琼脂39g、氯化血红素10mg、IsoVitalex20ml、尿素20mg、酚红1.2mg、琼脂4g,蒸馏水980ml 组     

不同培养基及B族链球菌增菌肉汤检测B族链球菌效果评价

目的通过分析B族链球菌(GBS)检测的阳性检出率和平板选择性能来评价GBS筛查培养基、哥伦比亚血琼脂培养基和GBS增菌肉汤检测结果的可靠性和临床应用的可行性。方法收集妊娠晚期35~37周孕妇阴道下端及肛周样本242例、中段尿样本15例,同时直接接种及经GBS增菌肉汤增菌后接种哥伦比亚血平板和GBS筛查平板,观察各培养基上GBS的生长情况。结果直接接种后分别培养24 h和48 h,哥伦比亚血琼脂培养基GBS的检出率均为7.39%(19/257);而GBS筛查培养基的检出率为24 h 5.45%(14/257)、48 h 7.39%(19/257)。经GBS增菌肉汤增菌后,无论培养时间是24 h还是48 h,哥伦比亚血琼脂培养基GBS的检出率均为9.73%(25/257);GBS筛查培养基的检出率均为8.95%(23/257)。与直接接种相比,选择性增菌后GBS的检出率明显升高;2种培养基GBS的检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论临床样本先经GBS增菌肉汤18~24 h增菌后再接种至GBS筛查培养基或哥伦比亚血琼脂培养基,24 h即可观察生长结果,GBS菌落易于辨认且提高了阳性检出率。     

流感嗜血杆菌埃及生物群巴西紫癜热克隆的研究进展

近年在巴西发现流感嗜血杆菌埃及生物群(HIBA)能引起一种新的小儿病症,即巴西紫癜热(Brazilian PurPuric Fever,BPF)。资料表明,其病原即HIBA。随后又将HIBA 克隆称为BPF 克隆。一、生物学性状(一)培养特性:HIBA 需要x 和V 因子才能生长。目前常用Adolfo Lutz 双相培养瓶增菌,其固相为5%巧克力兔血Mueller-Hinton 琼脂,液相为脑心浸液肉汤、1.2%明胶及0.5%聚茴香脑磺胺钠(Sodium Polyanetholesulfonate)。此外,Trans分离培养基和GIBCO 儿科培养基亦可用来培养HI-BA。Adolfo Lutz 双相培养基和Trans 分离培养基     

用MTM培养基从污染标本中分离奴卡氏菌

作者为寻求一种分离培养奴卡氏菌的选择性培养基,根据奴卡氏菌的药物敏感试验结果,从临床实验室常用的选择性培养基中选择了两种培养基:改良Thayer—Maztin 培养基(MTM 培养基),每毫升含万古霉素4μg、粘菌素7.5μg、制霉菌素12500μg 和环丝氨酸头孢西丁果糖琼脂(CCFA),每毫升含环丝氨酸500μg,头孢西丁16μg。对奴卡氏菌进行了培养研究。将经过常规实验方法分离鉴定后,于酵母浸液琼脂斜面4℃保存的37株奴卡氏菌(星形奴卡氏菌31株,巴西奴卡氏菌4株,豚鼠奴卡氏菌和奴卡氏菌各1株)。先在增补5%绵羊红细胞的心脑浸液