医院内诺如病毒感染的三种病原学检测方法应用比较

目的找到一种简便易行的检测感染性腹泻粪便标本中诺如病毒的方法。方法用两种酶免疫吸附试剂盒检测北京地区婴幼儿腹泻和综合医院内成人感染性腹泻粪便标本中的诺如病毒,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)作对照,评价这两种试剂盒。用两种试剂盒分别检测69份儿科病房标本和来自3家综合医院15份成人医院内感染性腹泻的粪便标本中诺如病毒;其中5份儿科病房和15份成人病房的粪便标本还同时进行了RT-PCR检测。结果84份粪便标本中,试剂盒甲的诺如病毒检出率为20.2%(17/84),试剂盒乙的诺如病毒检出率为36.9%(31/84);两种试剂盒的符合率为73.8%(62/84),但试剂盒乙的检出率显著高于试剂盒甲(P<0.01)。在应用了RT-PCR检测的20份标本中,阳性率为55.0%(11/20)。试剂盒甲与RT-PCR检测结果相比,检出率明显低于RT-PCR(P<0.05),试剂盒乙与RT-PCR检测结果相比,检出率差异无统计学意义(P>0.05)。3家综合医院的成人标本中,每家医院都有2份或2份以上送检标本诺如病毒检测阳性,结合临床诊断可判定为诺如病毒医院内感染暴发。结论酶免疫吸附方法检测诺如病毒感染简便易行、利于推广,试剂盒乙可以替代RT-PCR方法应用于临床。3家综合医院都存在诺如病毒医院内感染的暴发。     

2015年开封市诺如病毒腹泻流行特征及影响因素

目的了解开封市诺如病毒腹泻流行情况,分析影响因素,为诺如病毒的预防治疗提供依据。方法 2015年采集哨点医院急性腹泻患者粪便标本,采用荧光逆转录聚合酶反应法(RT-PCR)检测诺如病毒GⅠ和GⅡ基因型,并描述病毒流行特征。结果共采集标本340份,检出诺如病毒阳性67份,阳性率为19.70%,其中GⅠ型5份(占7.46%),GⅡ型62份(占92.54%)。男性急性腹泻患者诺如病毒阳性率为20.97%,女性为18.18%,差异无统计学意义(P>0.05)。腹泻主要发生在春季(3-5月),诺如病毒阳性率最高为3月(32.14%),最低为8月(0);7-12月阳性率(27.37%)高于1-6月(16.73%)(P<0.05)。21~50岁患者阳性率(53.73%)高于≤20岁患者(31.34%)和≥51岁患者(14.93%);教师/医生/干部/职员人群阳性率(22.84%)高于其他人群(14.42%),以上差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论诺如病毒是开封市腹泻病例的主要病原之一,其阳性率与季节、患者年龄、职业等有关,应采取针对性防治措施。     

2012-2013年上海市浦东新区成人病毒性腹泻感染情况调查

目的了解上海市浦东新区2012—2013年间成人病毒性腹泻感染情况。方法通过实时荧光PCR方法检测该区14家监测医院成人腹泻患者粪便标本中的轮状病毒、诺如病毒、星状病毒、扎如病毒和肠腺病毒。结果共检测腹泻患者粪便样本3 403份。在1 060份样本中检出至少1种病毒核酸,核酸阳性检出率为31.15%。诺如病毒、轮状病毒、扎如病毒、星状病毒以及肠腺病毒的检出率分别为21.28%、7.70%、1.85%、1.55%和0.59%。患者的性别分布不存在差异,性别比为0.95∶1。诺如病毒在各年龄组均有检出。不同病毒病原的感染存在不同的高峰期,但主要集中在秋冬季。结论诺如病毒是浦东地区成人病毒性腹泻的主要病原。应该加强对病毒性腹泻的监测,预防由诺如病毒引起的腹泻暴发。     

绍兴市5岁以下儿童病毒性腹泻常见病原体分析

目的分析绍兴市5岁以下儿童病毒性腹泻常见病原体,为防制病毒性腹泻提供依据。方法采集2014—2018年于绍兴市妇幼保健院住院的5岁以下腹泻儿童的粪便标本,采用胶体金法检测轮状病毒,采用实时荧光定量PCR方法检测诺如病毒核酸和肠道腺病毒核酸。描述性分析5岁以下腹泻儿童病毒阳性情况。结果共送检粪便样本1 077份,检出病毒阳性402份,阳性率为37.33%;二重感染41份,阳性率为3.81%;未发现三重感染。轮状病毒阳性218份,阳性率为20.24%;诺如病毒阳性155份,阳性率为14.39%,均为GⅡ型;肠道腺病毒阳性70份,阳性率为6.50%。轮状病毒、诺如病毒和肠道腺病毒阳性率均以1岁最高,分别为32.57%、23.43%和8.00%。不同年龄腹泻儿童轮状病毒和诺如病毒阳性率差异均有统计学意义(P0.05),肠道腺病毒阳性率差异无统计学意义(P0.05)。轮状病毒阳性率在1月最高,为50.79%;诺如病毒阳性率在11月最高,为32.67%;肠道腺病毒全年均处于低发流行趋势。结论绍兴市5岁以下腹泻儿童病毒阳性率为37.33%,好发于1岁儿童,以轮状病毒感染为主,不同病原体的流行时间不同。     

北京市2013－2014年肠道门诊腹泻患者中诺如病毒感染的流行病学及临床特征分析

目的 了解北京市肠道门诊腹泻患者诺如病毒感染的流行状况及临床特点。方法 采集2013年4月至2014年3月北京市肠道门诊1 892名腹泻患者粪便标本, 并收集患者的流行病学及临床症状资料。使用real time RT-PCR对诺如病毒核酸进行检测, 采用描述性流行病学方法进行分析。结果 2013年4月至2014年3月北京市肠道门诊腹泻患者诺如病毒阳性率为14.2%(269/1 892);寒冷月份阳性率较高;怀柔区、延庆县等西北部山区阳性率较高;6月龄至5岁儿童诺如病毒阳性率高于其他年龄组, 差异有统计学意义(P=0.006), 散居托幼儿童诺如病毒阳性率高于其他职业人群, 差异有统计学意义(P=0.025);诺如病毒阳性腹泻患者恶心、呕吐症状发生率高于阴性患者, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 诺如病毒是肠道门诊腹泻患者的重要病原, 6月龄至5岁腹泻儿童诺如病毒感染率高于其他人群, 恶心、呕吐为诺如病毒感染的常见症状。     

2014－2017年深圳市龙华区食源性所致病毒性腹泻的病原学分析

目的 分析深圳市龙华区食源性疾病哨点监测医院食源性所致病毒性腹泻患者的病原构成特征,为辖区病毒性腹泻疾病防制提供科学依据。 方法 收集2014年至2017年深圳市龙华区食源性疾病病原学哨点监测医院报告的监测病例信息。采集患者的粪便样本进行4种病毒(包括轮状病毒、诺如病毒、星状病毒和肠道腺病毒)检测。 结果 共采集411份食源性所致病毒性腹泻患者粪便样品,总体病毒阳性检出率为40.63%,其中轮状病毒阳性检出率为22.38%,诺如病毒阳性检出率为15.33%;病原谱以轮状病毒和诺如病毒为主(合占92.81%),2016年构成比诺如病毒超过轮状病毒。人群特征方面,男性样品总体病毒阳性检出率为38.40%,女性样品总体病毒阳性检出率为43.68%,不同性别样品病毒阳性检出率无统计学差异,但不同年龄患者病毒阳性检出率存在差异,儿童(<15岁)总体病毒阳性检出率为47.40%,显著高于成人(≥15岁)的34.70%(χ²=6.833,P=0.009),儿童轮状病毒阳性检出率为28.13%,显著高于成人的17.35%(χ²=6.835,P=0.009),诺如病毒、其他病毒则年龄差异不明显;不同性别、年龄患者的病毒谱构成比之间无统计学差异。时间特征方面,总体病毒阳性检出率呈现明显的季节分布特点,冬春季节病毒阳性检出率显著高于其他季节(χ²=38.560,P<0.001),轮状病毒常年有检出而其他病毒(星状病毒或肠道腺病毒)夏季无检出,但阳性高峰均在冬春季节,诺如病毒则季节变化不明显,但2016年阳性检出率显著高于其他年份(χ²=8.062,P=0.045);不同季度病原谱构成比有统计学差异(χ²=18.413,P＝0.003),冬春季节轮状病毒为主,夏秋季节诺如病毒为主,不同年份病原谱构成比无统计学差异。 结论 冬春季是深圳市龙华区食源性所致病毒性腹泻的高发季节,儿童(<15岁)为相对高危人群,病原谱主要是轮状病毒和诺如病毒,龙华区应针对以上特点进行针对性防控,提高轮状病毒疫苗接种率,加快诺如病毒疫苗研制,倡导居民养成健康的饮食、饮水、个人卫生习惯等。     

2008年广州市婴幼儿诺如病毒感染流行特征及基因型研究

目的了解广州市5岁以下婴幼儿诺如病毒感染状况及对诺如病毒阳性株进行基因型分析。方法收集广州市2008年5家病毒性腹泻监测点医院的门诊临床诊断为病毒性腹泻的5岁以下患儿临床资料及粪便标本692份,采用ELISA方法检测轮状病毒、腺病毒、星状病毒和诺如病毒抗原,将诺如病毒抗原阳性的标本用RT-PCR方法进行诺如病毒核酸扩增,阳性产物回收、纯化并测序,结合GenBank中的相关序列进行型别流行特点分析。结果 692份标本中,ELISA方法检测4种病毒的阳性率分别为轮状病毒31.9%(221/692)、诺如病毒21.2%(147/692)、腺病毒6.1%(42/692)、星状病毒1.2%(8/692),混合感染占6.8%(47/692)。诺如病毒腹泻病例发病高峰在9—11月份,占51.7%(76/147),2岁以下病例数占91.8%(135/147)。临床症状以腹泻、呕吐、发热、腹痛为主。147份诺如病毒ELISA阳性标本中RT-PCR方法检测诺如病毒核酸阳性率为84.4%(124/147),经测序及与GenBank中的相关序列比对,证实124份均属诺如病毒GⅡ遗传组,其中1份是GⅡ2型,其余均为GⅡ4型,GⅡ4型中又有不同分支。结论诺如病毒是广州市5岁以下儿童病毒性腹泻的常见病原之一,仅次于轮状病毒,常见于2岁以下婴幼儿,流行优势株基因型为GⅡ4型。     

淮安市2013-2014年诺如病毒感染流行病学分析

目的了解淮安市诺如病毒感染流行病学特征。方法 2013-2014年采集526例急性胃肠炎患者粪便标本,采用实时荧光PCR检测诺如病毒,并进行流行病学调查。结果 526份急性胃肠炎患者粪便样本中诺如病毒阳性64份,阳性率为12.2%。64例诺如病毒阳性病例中,男37例,女27例,年龄1~86岁。秋冬季诺如病毒阳性率较高,春夏季阳性率较低,不同季节诺如病毒阳性率差异有统计学意义(P0.001);18、≥60岁人群阳性率较高,分别为17.1%、14.8%,不同年龄间差异有统计学意义(P0.05);住院患者诺如病毒阳性率高于门诊患者,有高热(38℃)、呕吐、水样便患者诺如病毒阳性率较高。结论诺如病毒是淮安地区急性胃肠炎的主要病原之一,秋冬季节高发,少儿及老年人群是易感人群。     

广州地区病毒性腹泻的病原分布和病毒基因分型调查

摘要:目的　初步了解广州地区儿童和成人病毒性腹泻的病原学构成和分布情况及相关病毒的分子特征。方法　收集2012年11月-2013年5月于珠江医院就诊的腹泻患者的粪便标本,采用免疫层析法检测轮状病毒和腺病毒抗原,实时荧光PCR检测诺如病毒GI/GII,上述检测阳性标本进行病毒基因测序分型。结果　290例患者中,3种常见病毒的检出率分别为21.4%、15.5%和1.7%;男性患者病毒阳性率显著高于女性患者（χ2＝0.017,P＜0.05）;≤5岁患者轮状病毒阳性率最高,为28.49%（χ2＝0.017,P＜0.05）,＞5岁患者诺如病毒阳性率最高,为21.62%;轮状病毒性腹泻秋冬季节高发;轮状病毒G/P分型以G1P8、G9P8、G2P4和G3P8为主,占92.16%,诺如病毒共检测出8种基因型,以GII.4型为主,占53.33%;病毒合并其他常见腹泻病原体感染占病毒阳性标本的15.89%。结论　轮状病毒和诺如病毒分别是广州地区婴幼儿和成人病毒性腹泻的主要病原体,本地区流行的轮状病毒和诺如病毒优势株分别是G1P8和GII.4,诺如病毒基因型多样性更丰富;混合感染常见,需引起重视。     

2017年苏州市5岁以下住院儿童病毒性腹泻病原学分析

目的了解苏州市5岁以下住院儿童病毒性腹泻病原体的分布情况,为病毒性腹泻的防治提供依据。方法收集2017年某儿童医院因腹泻住院的5岁以下儿童粪便标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测轮状病毒,用聚合酶链反应(PCR)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测诺如病毒、札如病毒、肠道腺病毒及星状病毒。结果共采集300份样本,病毒阳性检出率为49.67%,其中,轮状病毒37.00%、诺如病毒19.33%、札如病毒1.33%、肠道腺病毒1.33%、星状病毒1.33%。单病毒阳性117份,阳性率39.00%;两种病毒阳性32份,阳性率10.67%。轮状病毒在19～24月龄患儿检出率最高(68.00%),其次为13～18月龄(51.67%);诺如病毒在49～59月龄检出率最高(38.46%),其次为13～18月龄(35.00%)。轮状病毒G分型以G9型为主(77.48%),P分型以P8型为主(98.20%)。结论轮状病毒和诺如病毒是苏州市5岁以下住院儿童病毒性腹泻主要病原体。     

北京地区79例婴幼儿诺如病毒腹泻的临床特点分析

目的分析婴幼儿诺如病毒腹泻的发病特点，为临床诊断提供依据。方法对2002年1月至2006年12月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的318例急性腹泻患儿采集粪便标本，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测粪便诺如病毒抗原，同时用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测轮状病毒。结果经检测的318份粪便标本中，诺如病毒阳性标本共79份，阳性检出率为24．8％（79/318）。其中有48例在10-12月份检出，占阳性标本的60．8％（48/79）。2岁以内患儿占91．2％。有16例同时合并轮状病毒感染。经统计学分析，轮状病毒混合感染组与单纯诺如病毒感染组在发热的严重程度上有差异，但是在腹泻严重程度上的差异无统计学意义。诺如病毒阳性患儿中有14例是以其他疾病住院，分别于住院1-11d出现腹泻。结论诺如病毒是引起婴幼儿急性腹泻的病原之一，也是医院内感染性腹泻的病因之一。     

北京地区婴幼儿诺如病毒与轮状病毒所致腹泻的临床比较分析

目的 在病原学检测的基础上分析、比较婴幼儿诺如病毒腹泻与轮状病毒腹泻的临床特点.方法 对2002年1月至2006年12月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的779例急性腹泻患儿收集粪便标本,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法检测轮状病毒基因,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)对其中318份标本检测诺如病毒抗原.结果 779份标本检出轮状病毒阳性263例,阳性检出率为33.8%;318份标本中诺如病毒阳性79例,阳性检出率为24.8%;其中16例为轮状病毒和诺如病毒混合感染.诺如病毒组在发热程度上与轮状病毒组差异有统计学意义,其他临床表现如发病年龄、日平均腹泻次数、疾病病程等均相似,而混合感染组与其他两组临床表现的差异均无统计学意义;但流行季节有所不同,轮状病毒腹泻更集中于寒冷季节,始于10月,直至次年4月,而于10月至次年1月的检出阳性率最高;诺如病毒的检出没有明显的季节性,一年四季均可检出,但是冬季的检出率略高于其他季节.结论 轮状病毒仍是秋冬季婴幼儿急性腹泻的主要病原,诺如病毒也是引起婴幼儿急性腹泻的重要病原之一,两者也是引起院内急性病毒性腹泻的主要病原,但两者的临床表现没有差异.     

2012-2014年湖南省感染性腹泻哨点医院儿童诺如病毒感染及基因型别分析

目的 了解湖南省感染性腹泻哨点医院儿童诺如病毒的感染状况及基因型别。 方法 2012年1月-2014年12月采集湖南省哨点医院腹泻患儿的粪便标本,应用诺如病毒特异性引物进行扩增,选择扩增阳性产物进行基因测序和进化分析。 结果 936份粪便标本RT-PCR检测诺如病毒核酸,阳性100份,阳性率10.68%。对40份诺如病毒核酸阳性标本进行基因序列测定与分析,38份为GⅡ型,其中31份为GⅡ.4型。在31株GⅡ.4型中,Sydney 2012和GII.4 Den Haag 2006b各栓出14株。 结论 2012-2014年湖南省哨点医院儿童腹泻病例中诺如病毒的感染率较高,GⅡ.4是优势株,其中GⅡ.4 sydney 2012和Den Haag 2006b是主要型别。     

2012-2014年深圳市宝安区成人和儿童感染性腹泻病原学分析

目的 了解深圳市宝安区成人(>14岁)和儿童(0~14岁)感染性腹泻的病原学差异。 方法 采集宝安区2012年1月-2014年12月成人和儿童感染性腹泻患者的粪便标本,进行病原学分离、鉴定,并对检测结果统计分析。 结果 检测成人标本4 512份,总检出率17.00%,主要病原为副溶血性弧菌,检出率为7.49%,腹泻的主要症状为腹痛和水样便,发生率分别为65.81%、53.57%。检测儿童标本2 608份,总检出率28.80%,主要病原为轮状病毒和诺如病毒,检出率分别为10.35%、8.44%,腹泻的主要症状为发热和水样便,发生率分别为32.28%和46.78%,成人和儿童腹泻均多发于夏秋两季。 结论 2012-2014年副溶血性弧菌是深圳市宝安区成人感染性腹泻的主要病原,轮状病毒和诺如病毒是儿童感染性腹泻的主要病原菌,加强不同人群的监测,根据各种病原在不同季节检出率的差异开展相应的防控措施。     

杭州地区2009-2010年急性腹泻患者中杯状病毒的检测和分型

目的 了解2009-2010年杭州地区急性腹泻患者中杯状病毒基因型别和分子流行病学特征.方法 收集2009-2010年杭州地区920例急性腹泻患者的粪便标本和流行病学资料,用多重PCR方法进行杯状病毒检测,测定部分标本的阳性扩增片段基因序列,并对序列进行系统进化分析.结果 急性腹泻患者杯状病毒检出率为21.8％(201/920),其中诺如病毒(NV)G Ⅰ型25例、GⅡ型170例、札如病毒(SAV) 11例,4例为NVⅠ型和Ⅱ型混合感染、1例为NVⅡ型和SAV混合感染.NV基因型别包括:GⅠ-1(3株)、G Ⅰ-2(1株)、GⅡ-4/2006b变异株(7株)、GⅡ-2(1株)、GⅡ-7(1株)和GⅡ-4/2008变异株(2株);SAV基因型别包括:G Ⅰ -2(5株)、GⅠ-1(4株)和GⅡ-1(1株).杯状病毒的流行在不同季节、年龄组人群均有发病.结论 杯状病毒是2009-2010年引起杭州地区急性腹泻的主要病原之一,其病原具有病毒多样性和基因型别多样性,NVGⅡ-4/2006b变异株或类似株可能是2009-2010年杭州地区流行的优势株.     

一起老人护理院诺如病毒急性胃肠炎暴发的调查

目的调查分析1起某老人护理院诺如病毒急性胃肠炎暴发的原因,为今后老年人此类疾病的防控提供参考依据。方法采用个案调查收集病例资料,采集部分病例和工作人员肛拭子标本,运用实时荧光定量RT-PCR进行诺如病毒核酸检测。结果 21份肛拭子样本中,19份诺如病毒GⅡ犁核酸阳性,其中11份阳性为发病老人肛拭子样本,8份为工作人员肛拭子样本。结论该疫情是一起由GⅡ型诺如病毒引起感染性腹泻暴发疫情,密切生活接触及未能及时消毒是疫情暴发的主要原因。     

北京市东城区一起GⅠ型诺如病毒感染暴发疫情的调查报告

目的 通过对某小学（以下称F小学）一起GⅠ型诺如病毒引起的急性胃肠炎暴发疫情进行调查和分析,为有效控制学校内发生的急性胃肠炎暴发疫情提供科学依据和经验借鉴。方法 采用现场流行病学调查方法,对F小学的急性胃肠炎暴发疫情中病例进行个案调查,采集病例和餐饮人员样本和环境样本,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒核酸。结果 2018年10月19 - 22日,F小学共报告急性胃肠炎病例145例,罹患率为21.77%。采集呕吐物及粪便标本29份,采集环境涂抹标本10份, 经检测9份粪便标本和2份涂抹标本为GⅠ型诺如病毒病毒核酸阳性。结论 此次疫情为一起由GⅠ型诺如病毒引起的小学生急性胃肠炎暴发疫情,餐饮人员隐性感染可能与本次疫情有关。     

岳阳市5岁以下儿童病毒性腹泻病原学分析

目的了解岳阳市5岁以下病毒性腹泻儿童中的A组轮状病毒、人杯状病毒、腺病毒及星状病毒4种病毒感染的情况。方法收集2010年岳阳市妇幼保健院住院腹泻患儿粪便90份,采用ELISA法对A组轮状病毒进行检测,用PCR/RT-PCR对人杯状病毒、腺病毒、星状病毒和A组轮状病毒进行分型检测,并对以上腹泻患儿的临床资料进行分析。结果 90份标本中,4种病毒的阳性率：A组轮状病毒为24.4%、人杯状病毒为10.0%、腺病毒为3.3%、星状病毒为0%、混合感染阳性率2.2%,均为A组轮状病毒和杯状病毒混合感染。结论岳阳市5岁以下儿童病毒性腹泻的病原复杂,以A组轮状病毒和诺如病毒为主,2岁以下为发病高危人群,同时存在不同病原混合感染的现象,值得关注。     

厦门地区婴幼儿腹泻诺如病毒分子流行病学研究

目的:了解厦门地区婴幼儿腹泻诺如病毒(NV)分子流行病学特征。方法:收集2010年5月～2011年4月全年轮状病毒抗原阴性的急性非细菌性腹泻标本,用实时荧光RT-PCR法扩增NV ORF1-ORF2结合区,测序扩增片段后进行比对、分型及构建系统进化树。结果:全年共获得366份标本,共检测出81份为NV阳性标本,其中GI组5例,GII组76例;NV在厦门地区全年可见散发,但在每年7和11月有明显的流行高峰,且腹泻感染患儿主要集中在3岁以下;已分型的NV基因组(55例)以GII-4/2006b占绝对优势,其构成比达60.00%(33/55),其余为GII-3占25.45%(14/55),GII-6占5.45%(3/55),GII-2占3.64%(2/55),此外GII-12、GI-4、GI-5各占1.81%(1/55)。结论:厦门地区NV夏秋季发病率较高,GII-4/2006b变异株为优势株,且感染的NV可能存在病毒重组。