Fas/APO-1 在泌尿系肿瘤细胞中的表达

为了探讨Ｆａｓ／ＡＰＯ１在泌尿系恶性肿瘤发生发展中的作用，采用免疫细胞化学方法对６种泌尿系肿瘤细胞，膀胱癌（Ｔ２４，ＥＪ，ＢＩＵ８７），肾癌（ＧＲＣ１，ＲＣＣ９４９），前列腺癌（ＰＣ３Ｍ）和一种原代培养正常肾间质成纤维细胞Ｆａｓ／ＡＰＯ１分子的表达进行了检测。结果显示原代培养正常肾间质成纤维细胞和Ｔ２４细胞系Ｆａｓ／ＡＰＯ１分子表达较强，ＰＣ３Ｍ属中等强度表达，ＲＣＣ９４９与ＢＩＵ８７属微弱表达，而ＥＪ及ＧＲＣ１则不表达。Ｆａｓ／ＡＰＯ１在泌尿系恶性肿瘤培养细胞中的表达强度偏低或完全不表达，可能参与了泌尿系恶性肿瘤的发生和发展。     

多药耐药基因在泌尿系统肿瘤细胞系中的表达

目的检测泌尿系统肿瘤多药耐药基因及其产物的表达。方法对肾颗粒细胞癌细胞系ＧＲＣ１，肾透明细胞癌细胞系ＲＣＣ９４９，膀胱移行细胞癌细胞系ＢＩＵ８７、Ｔ２４、ＥＪ，前列腺癌细胞系ＰＣ３ｍ和对照的白血病细胞系ＨＬ６０进行免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测。结果只有ＧＲＣ１同时表达Ｐ糖蛋白（ＰＧＰ）和ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ，其他肿瘤细胞系均无表达。结论泌尿系肿瘤细胞系多数无ＰＧＰ也没有ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ水平的表达，只有ＧＲＣ１例外     

Wnt/Frizzled信号通路靶基因C-myc在肾癌中的生物学意义

目的 探讨Ｃ－ｍｙｃ基因作为Ｗｎｔ／Ｆｒｉｚｚｌｅｄ信号通路靶基因在肾癌生物学行为中的表达极其意义。方法 采用细胞核蛋白印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ）、免疫组化及免疫细胞化学Ｃ－ｍｙｃ蛋白半定量分析方法，对３２例肾癌组织及肾癌细胞株ＧＲＣ－Ｉ、ＲＣＣ－９４９进行了研究。结果 Ｃ－ｍｙｃ蛋白半定量分析方法，对３２例肾癌组织及肾癌细胞株ＧＲＣ－Ｉ、ＲＣＣ－９４９进行了研究。结果 Ｃ－ｍｙｃ在肾癌组织     

gp130在肾癌细胞系RCC-949中的表达缺陷

目的 探讨白细胞介素－６（ＩＬ－６）受体系统在肾癌细胞系ＲＣＣ－９４９中表达的意义。方法 应用免疫细胞化学方法检测肾癌细胞系ＲＣＣ－９４９中ＩＬ－６蛋白的表达,观察ｒｈＩＬ－６对ＲＣＣ－９４９生长的作用,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测其ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０ ｍＲＮＡ的表达。结果 肾癌细胞系ＲＣＣ－９４９可以在转录和翻译水平表达ＩＬ－６,但该细胞系的ｇｐ１３０ ｍＲＮＡ表达     

生长因子Wnt-5A在六种泌尿肿瘤细胞系中的异常表现

为了探讨生长因子Ｗｎｔ５Ａ在泌尿系肿瘤发生中的作用,采用半定量ＲＴＰＣＲ（逆转录多聚酶链反应）方法对６种泌尿肿瘤细胞系、一种原代培养肾纤维母细胞（ＰＲＦ）及１例正常人肾组织（ＮＲＴ）进行Ｗｎｔ５Ａ检测。材料与方法　６种泌尿恶性肿瘤细胞系：膀胱癌（Ｔ２４、ＥＪ、ＢＩＵ８７）、肾细胞癌（ＧＲＣ１、ＲＣＣ９４９）和前列腺癌（ＰＣ３Ｍ）取自本所免疫室。所有的细胞系均用ＲＰＭＩ１６４０含有１６％ＦＣＳ,１０ｍｍｏｌ／ＬＨｅｐｅｓ和２ｍｍｏｌ／Ｌ谷氨酰胺的培养液培养于３７℃的ＣＯ２孵箱内。取…     

前列腺癌细胞中表皮生长因子受体的表达和激活

目的：探讨前列腺癌（ＰＣａ）细胞中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达和激活及其与雄激之间的相互作用。方法：采用免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,检测雄激素依赖人ＰＣａ细胞株ＬＮＣａＰ及雄激素非依赖人ＰＣａ细胞株ＤＵ－１４５、ＰＣ－３中ＥＧＦＲ的表达和磷酸化激活,测定雄激素对ＬＮＣａＰ ＥＧＦＲ表达和激活的影响。结果：在ＤＵ－１４５和ＰＣ－３中,ＥＧＦＲ表达和激活的基础与表皮生长因子（ＥＧＦ）处     

TGF-β1及其受体在两种人肾癌细胞系中的表达

探讨转化生长因子β１及其受体在人肾部细胞系和正常肾细胞中的作用。方法应用免疫细胞化学和ＲＴ－ＰＣＲ方法,检测二种人肾癌细胞系和一种原代培养肾纤维母细胞ＴＧＦ－β１及其Ⅰ和Ⅱ型受体的表达情况。结论由于人肾癌细胞系表达Ⅱ型受体量减少或丢失,因而对ＴＧＦ－β１抑制作用减弱,这可能是肾癌细胞系呈侵袭性生长的部分原因。     

TGFβ1及其Ⅰ,Ⅱ型受体在肾癌中的表达

目的 探讨肾癌中转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）及其Ⅰ、Ⅱ型受体（ＴＧＦβ－Ｒ－Ｉ、ＴＧＦβ－Ｒ－ＩＩ）表达及其意义。方法 采用免疫组化技术（ＳＰ法）对４６例肾癌例,１１例正常肾组织ＴＧＦβ１、ＴＧＦβ－Ｒ－Ｉ、Ｒ－ＩＩ进行检测,结合临床资料进行分析。结果 肾癌组ＴＧＦβ１表达量较正常肾组高（Ｐ〈０．０５）;ＴＧＦβ－Ｒ－ＩＩ在肾癌组及正常肾组均表达;ＴＧＦβ－Ｒ－Ｉ在肾癌中阳性率较正常肾阳性率低（     

Fas mRNA在泌尿系肿瘤组织中的表达

目的 了解Ｆａｓ ｍＲＮＡ在泌尿系肿瘤组织中的表达情况。方法 采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测３７例泌尿系恶性肿瘤组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达，其中肾癌２１例，膀胱癌１１例、肾盂癌４例，前列腺肉瘤１例；原位杂交法检测３４例肾癌和１９例癌旁正常肾组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。结果 ３７例肿瘤组织中检出Ｆａｓ ｍＲＮＡ阳性表达共２０例，阳性率为５４％，阳性表达组织中未发现有缺失突变的存在。其中肾     

Fas配体基因在肾细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨Ｆａｓ配体（ｒａｓ ｌｉｇａｎｄ,ＦａｓＬ）基因在肾细胞癌中的表达及临床临床。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组织技术化学分别检测ＦａｓＬ ｍＲＮＡ及蛋白在５１例肾细胞癌中的表达。结果 ５１例肿瘤 ３２例ＦａｓＬ基因阳性表达。其中１、２、３级肿瘤中ＦａｓＬ的阳性表达率分别为２５．０％、６３．６％、８８．２％,１、２、３、４期肿瘤肿瘤中Ｆａｓｌ的阳性表达率分别为３１．６     

Fas配体诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用

目的　探讨Fas配体 (FasL)诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用的关系。　方法　采用免疫组化技术检测 4 4例肾癌组织FasL表达及肿瘤周围浸润淋巴细胞 (TIL)凋亡情况 ,并应用肾癌细胞株 786 0、GRC 1与JurkatT淋巴细胞共培养检测T细胞凋亡率。SP法检测Ki6 7表达 ,评价肾癌预后。　结果　 (1) 4 4例肾癌组织FasL表达阳性率 4 6 .5 % ,高于正常肾组织的 2 3.2 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。随肾癌分期增加 ,FasL表达阳性率增加。肾癌FasL表达率与Ki6 7表达率呈显著正相关 (r =0 .93,P <0 .0 1)。 (2 )肾癌组织TIL凋亡率为 33.9% ,高于正常肾组织的3.5 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。肾癌FasL表达率与TIL凋亡率呈显著正相关 (r =0 .96 ,P <0 .0 1)。 (3) 786 0FasL表达率 18.6 % ,GRC 1表达率 2 .3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。Ju rkat细胞与 786 0细胞共培养的凋亡率 14 .9% ,与GRC 1共培养的凋亡率 1.3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。中和抗体NOK 2中和 786 0细胞FasL后 ,与之共培养的Jurkat细胞凋亡率显著减少 (P <0 .0 1)。　结论　肾癌组织FasL表达增高 ,以此诱导淋巴细胞凋亡 ,实现对宿主的免疫攻击。     

人膀胱移行细胞癌各种透明质酸合成酶基因亚型的表达及意义

目的:研究各种透明质酸合成酶亚型(HASs)mRNA在人膀胱移行细胞癌中的表达及其潜在的临床价值.方法:运用半定量RT-PCR方法,对145例不同恶性度的人膀胱移行细胞癌、22例正常人膀胱黏膜组织标本和4种人BTCC细胞系的HAS亚型mRNA的表达情况进行研究.结果:PCR 23循环后,正常膀胱黏膜组织中7例扩增出微弱的HASl mRNA条带(28%,7/25),其余无任何条带扩增出来;所有膀胱移行细胞癌组织标本和细胞系有一种以上的HAS亚型mRNA被扩增出来.不同膀胱癌组织、细胞系表达的HASs mRNA的种类及表达程度各不相同,但随着肿瘤恶性程度的增高,其表达的各种HASs mRNA的种类趋向相同.每个膀胱癌组织、细胞系均有一种HASs mRNA优势表达,但其类型及优势表达程度互不相同.结论:人膀胱移行细胞癌出现了HAS亚型mRNA的异常高表达,可能与肿瘤的发生、发展有密切关系,是BTCC生物治疗潜在的靶点;同时进一步证实了尿透明质酸作为膀胱癌的"标志物"的可靠性.     

VEGF在膀胱癌细胞中的表达

探讨血管内皮生长因子在膀胱肿瘤发生发展中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应方法检测三种人膀胱癌细胞系和正常膀胱组织中ＶＥＧＦｍＲＮＡ的表达,同时用免疫化学方法检测三种人膀胱癌细胞系ＶＥＧＦ蛋白表达。结果三种膀胱纱均有ＶＥＧＦｍＲＮＡ的表达,正常膀组织无表达;     

Fas和FasL蛋白在肾癌组织中的表达及意义

目的　探讨凋亡相关基因产物Fas和FasL蛋白在肾癌发生中的作用以及与转移、预后的关系。方法　采用免疫组织化学方法对46例肾癌组织和15例正常肾组织Fas和FasL蛋白的表达进行检测。结果　肾癌组织Fas表达率为18.14%,低于正常肾组织（46.15%,P<0.05）,随肾癌分级的增加,表达强度下降。肾癌组织FasL蛋白表达率为70.26%,高于正常肾组织（10.32%,P<0.05）,随肾癌分级的增加,表达强度增高。正常肾组织Fas与FasL的表达有相关性（r=0.689,P<0.05）,肾癌组织无相关性（r=0.143,P>0.05）,有淋巴结转移组FasL(89.42%)与无淋巴结转移组(60.39%)比较,差别有显著性意义(P<0.01)。生存率>5年组Fas(25.39%)和FasL(61.26%)与生存率<5年组Fas(15.24%)和FasL(85.35%)的差别均有显著性意义(P均<0.05)。结论　Fas和FasL蛋白相互作用失衡在肾癌的发生、发展中起重要作用,表达情况与肾癌病理分级及转移、预后有一定关系。     

肾癌特异相关基因GYLZ-RCC18的表达及对肾癌细胞生长及增殖活性的影响

目的 通过检测肾癌相关新基因GYLZ－RCC18（基因号：BE825133）在肾癌中的表达特点及其对肾癌细胞生长、增殖的影响，探讨GYLZ－RCC18基因的功能及其在肾癌发生发展中的作用。方法 应用逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）的方法检测肾癌相关基因GYLZ－RCC18在31例肾癌标本中的表达特点；观察GYLZ－RCC18反义寡核苷酸对肾癌细胞生长、增殖活性、形态学的影响。结果 GYLZ－RCC18基因在肾癌组织特异表达，正常肾组织较肾癌组织低表达或不表达，两者表达量差异为1－9倍。GYLZ－RCC18基因的表达在高分级、高分期肾癌明显高于低分级、低分期肾癌；导入GYLZ－RCC18反义寡核苷酸后，可明显抑制癌细胞的生长和增殖活性，并减少分期肾癌，导入GYLZ－RCC18反义寡核苷酸后，可明显抑制癌细胞的生长和增殖活性，并减少GRC－1细胞的核分裂。结论 GYLZ－RCC18是肾癌组织相对较特异表达的新基因，它的高表达与肾癌发生发展以及生长、增殖密切相关，它的成功克隆为阐明肾癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径，为今后肾癌的特异诊断，基因治疗提供了新的理论依据。     

The evaluation of Fas/Fas ligand system in renal cell carcinoma--the effect of preoperative interferon-alpha therapy

OBJECTIVES: In order to investigate the effect of preoperative interferon (IFN)-alpha on Fas/Fas ligand (FasL) system, we examined Fas and FasL expression and the occurrence of apoptotic cell death in a preoperative therapy group, and in a control group using surgically resected renal cell carcinoma (RCC) tissues. METHODS: Ten cases were served as the preoperative therapy group, and sixteen cases as the control group. IFN-alpha was administered at five megaunits daily intramuscularly for two weeks in the preoperative therapy group. Immunohistochemistry for Fas and FasL, and terminal-deoxynucleotidyl-transferase (TdT)-mediated digoxigenin-dUTP nick end-labeling (TUNEL) were employed. We defined the labeling index (LI) as percentage of Fas- or FasL-positive cells in carcinomatous cells, and apoptotic index (AI) as percentage of TUNEL-positive cells in carcinomatous cells. RESULTS: Significant correlations were found between the LIs of Fas and AIs in all 26 cases. LIs of Fas and AIs of the preoperative therapy group were significantly higher than those of the control group. FasL expression was detected in nine out of ten cases in the preoperative therapy group, and in fourteen out of sixteen cases in the control group. There were no significant differences in LIs of FasL between two groups. CONCLUSION: These data suggest that apoptosis via the Fas/FasL system is functional, and that preoperative IFN-alpha treatment may up-regulate the Fas/FasL system in RCC. On the other hand, we need to investigate about an immune-escape mechanism through the FasL expression considering the relatively frequent expression of FasL in our results in RCC from now.