糖皮质激素对大鼠腹腔肥大细胞分泌组胺的快速抑制作用

目的:分析糖皮质激素对大鼠腹腔肥大细胞分泌组胺的快速抑制作用.方法:采用荧光分光光度法测定邻苯二甲醛与组胺在碱性条件下生成的荧光物质,检测不同条件下大鼠腹腔肥大细胞分泌的组胺.结果:(1)用10-7mol/L皮质酮预处理细胞7 min后,肥大细胞分泌组胺即受到抑制(P＜0.05);(2)牛血清白蛋白偶联的皮质酮(B-BSA)可以模拟皮质酮的快速抑制作用;(3)糖皮质激素细胞内受体拮抗剂RU38486对皮质酮的快速抑制作用无阻断效应;(4)蛋白质合成抑制剂放线菌酮预处理细胞3 h后,皮质酮仍可快速抑制肥大细胞分泌组胺.结论:皮质酮对大鼠腹腔肥大细胞分泌组胺具有快速抑制作用,这一作用不直接依赖于细胞内蛋白质合成,也不依赖细胞内的糖皮质激素受体.此种快速抑制作用属非基因组机制.     

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系3AO细胞细胞外信号调节酶1和2活性的影响

目的 观察糖皮质激素对人卵巢癌细胞系3AO细胞中丝裂原激活的蛋白激酶家族成员细胞外信号调节酶(ERK)1和2活性,以及ERKI/2抑制剂PD98089对3AO细胞增殖的影响.方法 采用Western印迹法检测地塞米松(Dex)作用前后及未经药物处理(对照)组的ERKI和2蛋白活性,细胞增殖通过细胞计数完成.结果 Dex(1X10-7mol/L)处理3AO细胞5 min即出现ERK1和ERK2磷酸化程度降低.且两者呈同步变化;随着时间延长,ERK1和ERK2磷酸化程度明显降低,4 h时分别为处理前的26%和15%,具有时间依赖性;同时具有浓度抑制性,其中最大抑制出现在浓度为1X10-6 mol/L时,抑制率为85%;糖皮质激素受体(GR)拮抗剂RU486不能逆转这些效应.应用ERKI/2抑制剂PD98059处理3AO细胞,能够显著抑制细胞增殖,抑制程度与Dex组相同;而PD98059与Dex合用时可以增强两者单独应用时的抑制效应.结论 Dex能够以不依赖GR的方式,快速抑制ERK蛋白活性,ERK信号通路可能参与抑制细胞增殖的过程.     

人卵泡液中白血病抑制因子浓度及其对卵母细胞发育的影响

目的: 探讨人卵泡液中是否存在白血病抑制因子(LIF)及其对卵母细胞发育的影响. 方法: 采用ELISA法检测66例体外受精-胚胎移植患者取卵日卵泡液及其血清中LIF浓度,分析卵泡液中LIF浓度与卵母细胞发育的关系. 结果: 66份卵泡液中LIF浓度为(28.5±13.1) ng/L, 血清LIF浓度为(3.0±1.5) ng/L ,差异非常显著(P＜0.01),而且两者间无相关性(r=0.1915, P＞0.05). 含成熟卵母细胞的卵泡液中LIF浓度为(33.7±11.1)ng/L,含未成熟卵母细胞的卵泡液LIF浓度为(18.0±10.5)ng/L,两者比较差异非常显著(P＜0.01). 结论: 卵泡液中存在较高浓度的LIF,其对卵母细胞发育有促进作用.     

地钱素M抗前列腺肿瘤活性的初步探讨

目的 检测苔藓植物联苄类化合物地钱素M的抗肿瘤活性,并初探其对前列腺癌细胞的作用机制.方法 MTT法检测地钱素M对人白血病细胞株(K562)、人肝癌细胞株(HepG2)、人乳腺癌细胞株(MCF-7)、人前列腺癌细胞株(LNCaP、DU145及PC-3)和人正常视网膜色素上皮细胞株(hTERT-RPE1)的增殖影响;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测地钱素M对PC-3细胞增殖的作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达;4',6-二脒基-2.苯基吲哚(DAPI)染色法检测PC-3细胞核的变化.结果 地钱素M可抑制K562、HepG2、MCF-7、LNCaP、DU145、PC-3细胞的增殖,其对PC-3细胞增殖的抑制作用尤为显著,而对hTERT-RPE1细胞增殖的抑制作用较弱.BrdU结果显示,地钱素M能够降低BrdU在PC-3细胞中的掺入;流式细胞术示,地钱素M将PC-3细胞阻滞在GO-G1期,且出现明显的subG1峰,并伴随周期相关蛋白的变化;DAPI示,细胞核发生凋亡的特征性变化.结论 地钱素M具有抑制肿瘤细胞增殖的活性,并引起PC-3细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡.     

吸入性糖皮质激素对豚鼠速发性支气管哮喘反应的快速作用

目的：研究吸入性糖皮质激素对豚鼠速发性支气管哮喘的快速作用。方法：以卵白蛋白为抗原致敏豚鼠，抗原再次激发速发性支气管哮喘反应前，处理组雾化吸入糖皮质激素布地奈德（3mg/ml混悬于羟甲基纤维素赋形剂）5min，对照组雾化吸入赋形剂和生理盐水。实时测量哮喘豚鼠肺功能参数，肺动态顺应性（Cdyn)和肺阻力（RL)的变化，作为反映哮喘严重程度的指标。结果：基因组机制介导的糖皮质激素作用需要数小时才能起效，而抗原激发前雾化吸入糖皮质激素布地奈德在10min内明显抑制了豚鼠支气管哮喘反应的Cdyn和RL变化（P＜0.05)。结论：糖皮质激素布地奈德快速抑制豚鼠速发性哮喘，为研究糖皮质激素非基因组机制提供了直观的实验基础，进一步的研究将可能为糖皮质激素在包括哮喘在内的变态反应性疾病中的临床应用提供理论依据。     

IL-2对人中性粒细胞吞噬功能的影响

目的观察IL-2对人中性粒细胞吞噬功能的影响。方法用新鲜健康成人外周血分别加入不同浓度IL-2(20,40,80,160 U/ml)孵育2 h后,与金黄色葡萄球菌混合,孵育5 min后,瑞特染色,观察并计算中性粒细胞吞噬百分率和吞噬指数。结果正常中性粒细胞吞噬百分率和吞噬指数为(38.71±2.37)%和0.35±0.032;加入IL-2 20,40,80,160 U/ml,中性粒细胞吞噬百分率和吞噬指数分别为(45.38±1.94)%和0.49±0.084,(51.12±2.06)%和0.61±0.054,(56.73±1.32)%和0.67±0.028,(59.46±1.72)%和0.71±0.039。结论IL-2能提高人中性粒细胞吞噬功能,具有增强人非特异性免疫功能的作用。     

人中性粒细胞防御素的研究进展

人中性粒细胞防御素是机体天然防御体系的重要组成部分，存在于人中性粒细胞中，具有广泛的杀菌活性、细胞毒性及趋化作用，是当前国内、外生物医学研究的热点。作者对人中性粒细胞防御素的分子生物学特征、生物学活性研究进展及其病理生理作用作一综述。     

青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制初探

目的：探讨青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制。方法：进行人瘢痕疙瘩成纤维细胞的原代分离、培养和传代。不同浓度青蒿素分别预处理人瘢痕疙瘩成纤维细胞,每隔24 h用CCK?8法测定细胞增殖情况,连续测定5 d,观察药物处理的最佳浓度。后续实验分为空白组、青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组,流式细胞术检测各组早期细胞凋亡率,real?time PCR法检测各组基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）2、MMP9、STAT3 mRNA的表达水平,Western blot法检测各组MMP2、MMP9、STAT3、p?STAT3蛋白的表达水平。结果：根据CCK?8实验结果选择150 μg/mL青蒿素作用48 h的细胞为后续实验干预浓度和时间。流式细胞术结果显示,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组早期凋亡细胞百分比明显高于空白组,青蒿素+IL?6组的早期凋亡细胞百分比低于青蒿素组和青蒿素+AG490组（P < 0.01）。real?time PCR检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组中MMP2、MMP9 mRNA的表达均显著降低（P < 0.01）;MMP2、MMP9 mRNA在青蒿素组、青蒿素+AG490组的表达较青蒿素+IL?6组显著降低（P < 0.01）。Western blot检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组中STAT3、p?STAT3、MMP2、MMP9蛋白的表达均明显降低（P < 0.01）,p?STAT3、MMP2、MMP9蛋白在青蒿素组、青蒿素+AG490组中的表达低于在青蒿素+IL?6组中的表达（P < 0.01）。结论：青蒿素对瘢痕疙瘩起抑制作用,其机制可能通过抑制p?STAT3的过度激活来抑制MMP2、MMP9的表达。     

PDTC合并泰素帝对裸鼠移植瘤抑制效应的研究

目的研究PDTC合并泰素帝对SGC-7901人胃癌细胞裸鼠移植瘤的抑制效应及对核因子-κB表达的影响,探讨其对泰素帝的化疗增敏作用。方法将接种SGC-7901人胃癌细胞成瘤的裸鼠分为PDTC组、泰素帝组、联合用药组及对照组,动态观察裸鼠移植瘤体积变化,采用实时荧光定量PCR法测定裸鼠移植瘤组织内c-IAP2及XIAP mRNA表达的改变,采用Western Blot方法检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达的改变。结果治疗结束后所有药物治疗组瘤体体积均较对照组降低（P〈0.01）,联合用药组与PDTC组及泰素帝组相比,降低最为明显（P〈0.01）。泰素帝组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组升高（P〈0.05）,而联合用药组XIAP及c-IAP2 mRNA表达较对照组、泰素帝组明显下降（P〈0.01）。泰素帝处理后胞浆及胞核NF-κB P65含量增加,而PDTC联合作用后胞浆及胞核NF-κB P65含量较泰素帝组明显降低。结论泰素帝与PDTC均能抑制裸鼠移植瘤生长,并且两者具有协同作用,其机制可能与PDTC拮抗泰素帝的NF-κB激活、抑制其下游凋亡抑制蛋白基因表达有关。     

G31P对人肝癌细胞增殖黏附及侵袭作用的影响

目的探讨原发性肝细胞癌中CXCR1、 CXCR2和CXCL8的表达及CXCR1/2受体阻断剂G31P对Hep-G2细胞体外增殖、黏附和侵袭作用的影响。方法选取2018年12月至2020年12月在安徽医科大学第四附属医院普通外科和肿瘤科接受部分肝切除手术的50例肝癌患者,用免疫组织化学方法,检测癌组织和癌旁组织中CXCR1、 CXCR2、CXCL8的表达水平,分析比较CXCR1、CXCR2及CXCL8在肝癌不同临床病理特征中的表达情况。采用Spearman相关分析CXCR1、CXCR2及CXCL8表达与pAKT、pERK、CyclinD1、Bcl-2、VEGF、MMP-9表达量之间的相关性;分别用0、10、50 ng/mL的G31P处理肝癌细胞Hep-G2,每个浓度5个孔,用CCK-8法、ECM实验以及Transwell小室侵袭实验,观察其对Hep-G2增殖、黏附以及侵袭能力的影响。结果肿瘤组织中CXCR1、CXCR2和CXCL8的阳性率高于相应正常癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);且不同肝癌TNM分期的患者,CXCR1、CXCR2及CXCL8表达差异有统计学意义(P&l...     

Forskolin augments the effects of glucocorticoids on proliferation and differentiation of a human osteosarcoma cell line by u

Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎａｕｇｍｅｎｔｓｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆａｈｕｍａｎｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｂｙｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｇｌｕ...     

反义IGF-I R基因对肝癌细胞生长的抑制作用

目的:研究反义IGF-IR基因对肝癌细胞株7721细胞生长的抑制作用.方法:利用基因治疗的反义技术,通过脂质体介导将IGF-IR正、反义基因真核表达载体导入人肝癌细胞株SMMC-7721,经潮霉素筛选阳性克隆后,分别采用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡,MTT法检测细胞生长及软琼脂克隆形成试验.结果:1GF-IR反义细胞与7721细胞IGF-IR正义细胞在前6 d生长趋势无明显变化,第7天后反义IGF-IR细胞生长减慢.反义IGF-IR基因细胞G1/G 2期细胞明显增加,为63.9%,明显高于7721细胞(49.8%);S期减少(1 9.3%),细胞凋亡增加(5.89%),不能在软琼脂中生长,而7721细胞及IGF-I R正义细胞在软琼脂中生长良好.结论:反义IGF-IR基因对肝癌细胞株7721生长具有明显抑制作用.     

野生型p53基因转染对人胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用

目的 研究野生型p53基因对人未分化胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用。方法 用表达人野生型p53基因全长cDNA的真核载体pcDNA3—p53，转染人未分化胃癌细胞系HGC27，对转染后细胞进行生长曲线、细胞生长抑制率及流式细胞术分析，观察其生物学特性变化。结果 外源野生型p53基因在HGC27细胞内稳定表达，经pcDNA3—p53转染的HGC27细胞生长速度受到明显抑制，流式细胞分析显示G1期增加，S期下降，细胞出现凋亡。结论 野生型p53基因能在HGC27细胞内表达，且能抑制其生长并促进细胞凋亡。     

genistein抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系SKOV3体外侵袭作用的分子机制

目的 探讨 genistein 抑制人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系 SKOV3体外侵袭作用的分子机制.方法 利用微孔滤膜培养小室进行双室联合培养,建立体外趋化运动模型,观察 genistein 对SKOV3趋化运动能力的影响;用免疫组化和原位杂交方法检测 genistein 对细胞表面黏附分子CD44v6、基质金属蛋白酶及其组织抑制物MMP-9/TIMP-1,MMP-2/TIMP-2蛋白和mRNA表达水平的影响.结果 20 μmol/L和40 μmol/L genistein处理SKOV3细胞后,细胞的运动能力分别下降至对照组的 (46.9±5.8)%和(28.3±4.7)%,差异显著(P＜0.01).免疫细胞化学和原位杂交检测结果表明:和对照组相比,20 μmol/L genistein处理SKOV3细胞后48 h,CD44v6、 MMP-9及MMP-2的蛋白和mRNA表达均减弱(P＜0.05),而TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平增强(P＜0.05).结论 genistein明显抑制SKOV3细胞的趋化运动能力、降低SKOV3细胞黏附分子CD44v6的表达、下调MMP-9与MMP-2表达,并上调TIMP-1与TIMP-2表达,这可能是其抑制人卵巢癌细胞系SKOV3体外侵袭作用的重要分子基础.     

重组人内皮抑素在酵母中的表达及对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长的抑制

目的在一种高效外源基因表达系统———毕赤酵母系统表达重组人内皮抑素,评价纯化的内皮抑素对人肺腺癌Astc-a-1细胞生长抑制的作用,为临床研究做进一步的探讨。方法和结果在酵母系统成功表达了重组人内皮抑素(re-combinant human endostatin),经肝素亲和层析得到了较高纯度的内皮抑素,经过筛选的人内皮抑素能够有效抑制ECV-304细胞的增殖,并与对照组有非常显著性差异(P<0.01);动物实验表明其能够有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1细胞的生长,统计学分析有非常显著性差异(P<0.01)。结论酵母系统内能够大量表达具有生物学活性的重组人内皮抑素,能在人体外有效抑制裸鼠肺腺癌Astc-a-1的生长,对其应用于临床具有重要意义。     

苦参素注射液联合顺铂对肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及其机制

目的 探讨苦参素注射液(matrine injection,MI)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及其机制.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期分布,半定量RT-PCR法检测c-myc mRNA表达,二步法免疫组化检测c-Myc、P27和CyclinD1蛋白表达.结果 MI、DDP单独应用均对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制作用(P＜0.01或P＜0.05),联合用药具有协同效应.与单药组相比,联合用药组的细胞抑制率显著上升(P ＜0.0 5或P＜0.01),G0/G1期细胞比例显著升高(P＜0.05),S期细胞比例明显减少(P＜0.05),P27表达显著上升(P＜0.05),c-myc mR NA和蛋白、CyclinD1表达显著降低(P＜0.05).结论 MI联合DDP具有明显的协同抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖的作用,使细胞周期阻滞于G0/G1期,其机制可能与上调P27、下调c-myc基因和CyclinD1表达有关.