慢性饮酒对大鼠肺组织中TIMP-1 表达的影响

摘要 目的 通过观察慢性饮酒大鼠的肺组织及基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）等指标的变化,以探讨酒精与肺纤维化之间的关系及可能的机制。 方法 健康雄性SPF级Sprague-Dawley大鼠20只,随机分成对照组(C组) 10只,每日给定量无酒精液体饲料单笼喂养;酒精组(A组)10只,每日给定量酒精液体饲料单笼喂养,不再提供饮水。16周后,通过Masson染色观察肺间质中胶原沉积的情况,用比色法计算大鼠肺组织中的谷胱甘肽（GSH）和羟脯氨酸（HYP）的含量、通过Elisa方法检测肺组织TIMP-1含量。结果 ⑴Masson染色结果显示：酒精组较对照组在肺泡间隔中胶原纤维沉积增多。⑵与对照组比较,酒精组肺组织GSH含量减少,HYP含量增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。⑶与对照组比较,酒精组肺组织TIMP-1表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 慢性摄入酒精可以引起大鼠肺泡间隔胶原纤维沉积,肺组织中TIMP-1的表达升高。饮酒可能是引起大鼠肺纤维化的原因之一。     

慢性饮酒对大鼠肺组织TGF-β1和bFGF mRNA表达的影响

目的:观察慢性饮酒后大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达,探讨慢性饮酒对肺间质的影响。方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠20只随机分为无乙醇液体饲料的对照组和乙醇液体饲料的乙醇组,每组10只。喂养16周后观察所有大鼠肺泡内炎性细胞浸润程度并评分,Masson染色观察肺间质胶原沉积情况,电镜观察肺组织超微结构变化,实时荧光定量PCR检测肺组织TGF-β1和bFGF mRNA的表达量。结果:光镜下肺泡内炎性细胞浸润程度评分乙醇组高于对照组,差异有统计学意义(Z=50,P<0.05)。乙醇组电镜可见线粒体膜和嵴均有不同程度融合、模糊不清,细胞间隔均可见不同程度的胶原纤维沉积。乙醇组肺组织中TGF-β1和bFGF mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(t分别为3.702和3.487,均P<0.01)。结论:慢性饮酒可增加大鼠肺组织中TGF-β1、bFGF mRNA表达量,使肺组织胶原沉积,引起肺泡炎症和肺间质疾病。     

谷胱甘肽复方注射液对免疫性肝纤维化大鼠肝组织MMP-13及TIMP-1表达的影响

目的:研究谷胱甘肽复方注射液(CGII)对猪血清所致免疫性肝纤维化大鼠肝组织中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)以及组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA和蛋白表达的影响。方法:猪血清腹腔注射8周,复制大鼠免疫性肝纤维化模型。将雄性Wistar大鼠随机分为正常组(N组)、模型组(M组)、还原型谷胱甘肽(GSH)组、CGII高(CH,10.8 mg·kg-1)、中(CM,5.4 mg·kg-1)、低(CL,2.7 mg·kg-1)剂量组,第6周末取大鼠肝组织行病理切片,苏木素-伊红(HE)染色,观察病理学改变;用实时荧光定量PCR和Western Blot检测大鼠肝组织中MMP-13以及TIMP-1 mRNA和蛋白的表达。结果:病理结果显示,与模型组相比,CH,CM和CL各组大鼠肝纤维化程度均有明显改善,大鼠肝组织内TIMP-1 mRNA及蛋白水平显著降低,MMP-13 mR-NA和蛋白表达水平明显升高。结论:CGII可明显减轻免疫性大鼠肝纤维化程度,其机制可能与下调TIMP-1 mRNA及蛋白水平,上调MMP-13 mRNA及蛋白水平,改善肝纤维化中MMP-13/TIMP-1的不平衡表达有关。     

丹芍化纤胶囊对肺纤维化大鼠MMP-2和TIMP-1表达的影响

目的 观察丹芍化纤(DSH)胶囊对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)表达的影响,并初步探讨其抗肺纤维化的作用机制.方法 选取30只SD大鼠,随机分为正常对照组、肺纤维化模型组和丹芍化纤胶囊治疗组.在模型组和治疗组大鼠的气管内注射博来霉素(5mg·kg...     

大蒜素对肺纤维化大鼠MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的:观察大蒜素对大鼠肺纤维化的干预作用,并初步探讨其机制。方法:用博莱霉素制作大鼠肺纤维化模型,取造模存活的Wistar大鼠36只及正常大鼠12只,随机分成4组:大蒜素组、秋水仙碱组、模型组和正常对照组,各组造模后第2天开始分别给予大蒜素20 mg.kg-1、秋水仙碱100μg.kg-1、生理盐水10 mL.kg-1灌胃,qd。分别于第7天和第28天处死各组大鼠6只后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺组织肺纤维化程度,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,RT-PCR法检测大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)mRNA的表达。结果:在HE染色和Masson染色中,大蒜素组及秋水仙碱组肺炎分级和肺纤维化分级较模型组降低。第28天大蒜素组和秋水仙碱组大鼠肺组织羟脯氨酸含量较模型组显著降低。第7天和第28天大蒜素组和秋水仙碱组MMP-2、TIMP-2 mRNA在大鼠肺组织的表达均低于模型组。结论:大蒜素可能通过调节MMP-2、TIMP-2的基因表达使之趋于平衡,延缓肺纤维化进程。     

归肺理气方对痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病大鼠血清与肺组织MMP-9和TIMP-1的影响

目的观察归肺理气方对痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血清与肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法将61只SD大鼠随机分为7组(正常组、正常+中药中剂量组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、泼尼松组),采用香烟熏吸加气管内注入脂多糖(LPS)法建立大鼠痰热壅肺证COPD模型。予归肺理气方高、中、低3个浓度及强的松灌胃干预28d,检测血清与肺组织MMP-9和TIMP-1含量。结果模型组大鼠血清与肺组织的MMP-9和TIMP-1含量以及MMP-9/TIMP-1值较正常组显著增加(P0.05),中药中、高剂量组与泼尼松组的MMP-9量以及MMP-9/TIMP-1值较模型组显著下降(P0.05)。结论归肺理气方可调节痰热壅肺证慢性阻塞性肺疾病大鼠的MMP-9/TIMP-1失衡,可能有一定的改善COPD气道重塑作用。     

大黄酸对肝纤维化大鼠肝脏α-SMA、MMP-13及TIMP-1mRNA表达的影响

目的 研究大黄酸对腹腔注射四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠肝脏 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响.方法 2019年3月选取雄性SD大鼠60只,采用完全随机抽样法分为空白对照组(N组)、CCl4模型组(M组)、秋水仙碱组(...     

熊果酸对香烟诱导肺气肿大鼠干预作用及其对肺组织MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 通过观察熊果酸对香烟诱导大鼠肺气肿的干预作用及其对肺组织MMP-9和TIMP-1表达的影响,探讨熊果酸减轻肺气肿的作用机制.方法 建立香烟诱导肺气肿大鼠模型,将40只SPF级雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为健康对照组、模型组、熊果酸10mg/kg(UA10)组、熊果酸20 mg/kg(UA20)组以及熊果酸40 mg/kg(UA40)组,每组8只.取每只大鼠的右下叶肺组织,石蜡包埋切片,常规HE染色.对HE染色标本进行肺气肿评分即每视野的平均肺泡数和平均肺泡直径的测定.进行TIMP-1、MMP-9免疫组化染色,主要应用链霉素亲生物素蛋白-过氧化酶复合技术.对石蜡包埋的肺组织标本行MMP-9、TIMP-1相对含量的测定.结果 与对照组比较,模型组大鼠肺泡腔扩大、部分肺泡间隔断裂、肺泡腔融合、肺气肿形成.熊果酸各组大鼠可见局部轻度肺气肿形成,主要表现为肺泡间隔略增宽,肺泡腔呈局限性轻度扩大;模型组大鼠肺泡平均内衬间隔(120.17±10.86)μm明显高于对照组(47.76±3.55)pm、平均肺泡数(14.25±10.23)/mm2明显低于对照组(338.08±26.08)/mm2、MMP-9相对阳性面积(18.16±4.62)％明显高于对照组(5.38±0.93)％、TIMP-1 相对阳性面积(5.36±2.15)明显低于对照组(12.80±1.31)％,MMP-9/TIMP-1比值(3.38±0.79)明显高于对照组(0.42±0.16),均具有统计学差异(P＜0.01);与模型组比较,熊果酸10 mg/kg,20 mg/kg,40 mg/kg组平均内衬间隔分别为(104.48±10.85)μm、(80.82±7.68)μm、(53.90±9.92)μm均显著减少,平均肺泡数分别为(165.12±16.65)/mm2、(206.98±25.55)/mm2、(279.94±29.53)/mm2均显著增加,MMP-9蛋白表达含量分别为(14.31±1.90)％、(10.52±1.88)％、(6.90±0.43)％均显著减少,TIMP-1 蛋白表达含量分别为(7.07±1.3)％、(9.86±1.80)％、(11.56±1.46)％均升高,MMP-9/TIMP-1 比值分别为(2.02±0.54)、(1.06±0.37)、(0.52±0.23)均降低,均具有统计学差异(P＜0.01).结论 熊果酸有减轻香烟所致大鼠肺气肿作用,且熊果酸可能通过调节蛋白酶/抗蛋白酶失衡减轻肺气肿.     

己酮可可碱对肺纤维化大鼠肺中基质金属蛋白酶的影响

目的:观察己酮可可碱在抗大鼠肺纤维化过程中,基质金属蛋白酶(MMPs)及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs,MMPs特异性抑制剂)的变化,以探讨己酮可可碱抗肺纤维化的机制. 方法:采用气管内灌注平阳霉素的方法复制鼠肺纤维化模型,并设正常对照组和己酮可可碱治疗组,取肺进行MMP-2和TIMPs免疫组织化学分析,MMPs蛋白电泳;肺组织溶胶原活性测定. 结果:在肺泡炎阶段,己酮可可碱明显减弱了MMP-2的过度表达,同时增强了TIMPs的表达,使MMP-2/TIMPs值接近正常组,肺组织溶胶原活性稳定;在肺纤维化阶段,肺纤维化组MMP-2/TIMP明显下降时,己酮可可碱治疗组MMP-2/TIMPs值仍接近正常组水平. 结论:己酮可可碱调节MMP-2/TIMPs的比例是其抗肺纤维化的一个重要因素.     

扎鲁司特对哮喘模型肺组织金属蛋白酶抑制剂1表达的影响

目的 观察白三烯受体拮抗剂扎鲁司特对肺组织组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）表达水平的影响。方法 108只健康雄性豚鼠随机分为3组：哮喘发作组（A组）,哮喘发作＋扎鲁司特治疗组（B组）,生理盐水对照组（C）组,每组36只。每组均分为24h和1、2、4、8、12周6个小组。免疫组化标记分析肺组织中TIMP-1表达水平。结果 C组肺组织中TIMP-1的表达无明显改变。卵蛋白激发后,A组TIMP-1的表达C组稍增高,但各个时期无明显差异。B组随时间的推移,TIMP-1的表达逐渐增加,8周起B组TIMP-1表达较A组、C组明显增多,激发后12周3组之间两两比较有显著性差异（P〈0．05）。结论 扎鲁司特可以增加哮喘豚鼠肺组织TIMP-1的表达水平,白三烯受体拮抗剂对预防和减轻哮喘气道重塑有积极意义。     

N-乙酰半胱氨酸对慢性饮酒大鼠肺纤维化的干预作用的研究

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对慢性饮酒大鼠肺组织的病理形态及肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。方法：健康雄性大鼠随机分成乙醇组、乙醇+NAC组、对照组各10只,乙醇组和乙醇+NAC组每日给予乙醇液体饲料,乙醇+NAC组给予NAC 300 mg/（kg?d）。8周后处死,观察肺组织病理改变,检测肺组织中的SOD、MDA的含量。结果：乙醇组肺组织可见不同程度的肺泡壁Ⅱ型上皮细胞增生及肺泡间隔炎性细胞浸润,肺泡间隔中胶原纤维沉积增多;乙醇+NAC组胶原纤维沉积和炎性细胞浸润程度比乙醇组轻。乙醇+NAC组肺泡炎、纤维化评分低于乙醇组（P＜0.05或P＜0.01）。乙醇+NAC组肺组织匀浆SOD活力高于乙醇组,MDA含量低于乙醇组（P＜0.05）。结论：NAC提高慢性饮酒大鼠肺组织SOD的活力,降低MDA的含量,减轻肺组织的纤维化程度,对慢性饮酒大鼠肺纤维化有预防作用。     

Chronic Effect of Aluminium Ingestion on Bone in Calcium-Deficient Rats

Abstract: In order to elucidate the relationship of osteogenesis with aluminum and iron deposition, we investigated the histopathological findings of bone in calcium and/or aluminium-deficient rats, together with levels of calcium, aluminium and iron in sera and bone tissues, and also the level of serum parathyroid hormone. Four week old male STD-Wistar rats were divided into four groups to examine the effects of four kinds of diets for ten weeks. The rats on normal diet (Group I) and normal diet+aluminum (Group II) did not show any pathological changes of the bones, but in both calcium-deficient diet group (Group III) and calcium deficient diet added aluminium (Group IV), the compact bone converted into spongy bone in varying degrees, paticularly in Group IV. Aluminium deposition was demonstrated at the calcification fronts and the cement lines only in Group IV as red or violet-red lines with aluminium stain, together with iron deposition as revealed with Berlin blue stain, showing similar distribution pattern as aluminum. It was clearly indicated that aluminium and iron, instead of calcium, deposited on the calcification front of the bone under the condition of calcium deficiency, inhibiting the normal osteogenesis.     

钩薄过敏颗粒对CVA大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其 抑制剂1表达的影响

目的:通过研究钩薄过敏颗粒对咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA及蛋白表达的影响,探讨其治疗CVA的可能机制.方法:将30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、钩薄过敏颗粒低、高剂量组、地塞米松组;每组6只.除正常组外,其余各组给予10％OVA和Al(OH)3混合物皮下注射建立致敏CVA大鼠模型,第15天开始每日给药,第28天将大鼠处死,RT-PCR方法检测大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1 mRNA表达,Western-blot技术检测大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达.结果:与正常组相比,模型组肺组织中MMP-9、TIMP-1 mRNA和蛋白水平明显增加(P<0.01);与模型组相比,钩薄过敏颗粒组肺组织中mRNA及MMP-9、TIMP-1蛋白水平明显下降(P<0.01).结论:钩薄过敏颗粒治疗CVA有效,其作用机制可能与下调肺组织中MMP-9、TIMP-1基因及蛋白表达有关.     

急性减压缺氧对大鼠肺组织损伤的研究

目的：观察氧化应激相关指标在模拟急进高原缺氧大鼠肺组织的变化情况。方法成年健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、缺氧1、3、5 d组,每组10只。观察缺氧不同时间大鼠肺组织病理学的改变情况,检测肺组织相关生化指标水平。结果缺氧各组大鼠肺组织均有明显损伤,且以缺氧3d组大鼠损伤尤为严重。与正常对照组比较,缺氧各组大鼠肺组织总抗氧化能力( total antioxidant capacity, TAOC)、还原型谷胱甘肽( reduced glutathione, GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-PX)、总一氧化氮合酶( total nitric oxide synthase, TNOS)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)在缺氧3 d组显著降低(P<0．05,P<0．01),丙二醛(maleic dialde-hyde, MDA)、乳酸( lactate, LD)含量显著升高( P<0．01),且随缺氧时间的延长逐渐增加;总超氧化物歧化酶( total superoxide dismutase, TSOD)、Na+K+-ATP酶活力显著降低(P<0．05,P<0．01),一氧化氮(nitric oxide, NO)含量在缺氧1、3 d组明显降低(P<0．01)。结论急进高原缺氧大鼠肺损伤机制与氧化应激反应有关,机体抗氧化能力降低、自由基增加是导致肺组织损伤的重要因素,且损伤程度与缺氧暴露时间有关。     

乌司他丁对急性肺损伤小鼠肺组织中白细胞介素-10表达的影响

目的探讨鸟司他丁（UTI）对急性肺损伤（Au）小鼠肺组织中白细胞介素-10（IL-10）表达的影响。方法将昆明种小鼠50只随机分为脂多糖（LPs）组和uTI组，腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型，用放射免疫法测定各组各时相点肺组织匀浆上清液中IL-10的含量，同时观察肺组织形态学改变。结果两组小鼠肺组织中IL-10含量均呈上升趋势，UTI组升高幅度明显高于LPS组（P〈0．05）。结论UTI可能通过上调抗炎因子IL-10的表达，对Au小鼠产生保护作用。     

Differential Induction of Peroxygenase-Dependent Microsomal Aniline Hydroxylase by Chronic Ethanol Ingestion

ABSTRACT

The liver microsomal-mediated hydroxylation of aniline, which is selectively induced by chronic (EtOH) ingestion, has been studied as a function of NADPH plus dioxygen (O₂)- or hydroperoxide-dependent reactions. Consistent with the well-documented induction of aniline hydroxylase following chronic ethanol -ingestion, the results showed selectivity towards aniline hydroxylase by the NADPH plus 0₂- and tert-butyl hydroper-xide (t-BuOOH)-dependent reactions with microsomes from EtOH-fed rats. On the other hand, the cumene hydroperoxide (CumOOH)-dependent aniline hydroxylase activity was not discriminated between microsomes from EtOH-and pair-fed rats. In parallel experiments with positive controls, CumOOH did show selectivity for phenobarbital (PB)- induced microsomal aniline hydroxylase compared to chow-fed rats. The K_cat/K_m values, which indicate the efficiency of enzyme catalysis, for NADPH plus 0₂-, t-BuOOH, and CumOOH-dependent aniline hydroxylase from EtOH-fed rats were 102, 37, and 5 and from pair-fed rats were 68, 4, and 4 (nmol p-aminophenol/min/nmol cytochrome P-450)/mM aniline, respectively. The relative K_cat/K_m ratio for EtOH-fed to that of pair-fed microsomal aniline hydroxylase from NADPH plus 0₂-, t-BuOOH-, and CumOOH-dependent reactions were 1.5, 7.4. and 1.2, respectively. The present preliminary studies indicate that the catalytic efficiency of EtOH-induced aniline hydroxylase is significantly greater for the t-BuOOH-dependent reaction.     

全蝎醇提物对慢性癫痫模型大鼠海马GFAP mRNA表达的影响

目的：研究全蝎醇提物（EES）对慢性癫痫模型大鼠海马胶质纤维酸性蛋白（GFAP）mRNA表达的影响。方法：大鼠首日腹腔注射氯化锂（Licl）127mg·kg^-1（3mmol·kg^-1）,18～24h后腹腔注射硫酸阿托品1mg·kg^-1,30min后腹腔注射毛果芸香碱（Pilo）30mg·kg^-1,以复制慢性癫痫模型。实验分为正常对照（等容生理盐水）、模型（等容生理盐水）、丙戊酸（120mg·kg^-1）和EES高、中、低剂量（1160、580、290mg·kg^-1）组。观察各组大鼠慢性癫痫发作级别情况,用RT-PCR方法测定大鼠癫痫持续状态后6h和1、3、7、14、30d各时点海马GFAP mRNA的表达情况。结果：与模型组比较,EES高、中剂量组大鼠慢性癫痫发作级别有显著性差异（P〈0.05）。在复制模型后3d大鼠海马GFAP mRNA表达明显上调,7d达峰值,然后逐渐下调,但仍显著高于正常对照组。给药7d时,与模型组比较,EES高、中剂量组GFAP mRNA表达显著下调（P〈0.05）。结论：高、中剂量EES能降低慢性癫痫模型大鼠海马GFAP mRNA的表达,可能是EES发挥抗癫痫作用的机制之一。     

实验性糖尿病早期大鼠组织胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的研究

四氧嘧啶诱发大鼠糖尿病模型后2周时,用逆转录扩增方法（RT－PCR）分析了肝脏及坐骨神经组织胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF－Ⅰ）基因表达（mRNA含量）。结果显示两种组织的IGF－ⅠmRNA均下降,程度因糖尿病严重状态而异,且出现在神经电生理异常之前。提示糖尿病早期IGF－ⅠmRNA表达下降可能为糖尿病外周神经病变的病因。