Survivin蛋白在肝门部胆管癌中的表达及其与p53相关性的研究

目的：检测肝门部胆管癌中凋亡抑制因子Survivin蛋白的表达，研究其与肝门部胆管癌的临床特征的关系，并探讨其与p53的相关性。方法：采用免疫组织化学方法检测86例肝门部胆管癌组织、10例癌旁组织（距肿瘤边缘约1．0cm）及10例正常胆管组织中Survivin蛋白和p53蛋白的表达，结合临床病理学资料进行统计学分析。结果：86例肝门部胆管癌组织中，Survivin蛋白阳性率为82．6％（71／86），p53蛋白阳性率为76．7％（66，86），Survivin与p53在癌旁组织和正常胆管组织中均呈阴性表达，与癌组织相比差异有统计学意义（P〈O．05）；Survivin表达与肝门部胆管癌病理分级、Bismuth分型、患者的性别及年龄和肿瘤大小均无关（P〉0．05），但淋巴结转移阳性组Survivin蛋白表达水平明显高于淋巴结转移阴性组，差异有统计学意义（P〈0．05）；p53蛋白在肝门部胆管癌中与肿瘤组织病理分级、淋巴结有无转移相关（P〈0．05），与其他病理学特征无关（P〉O．05）。71例Survivin阳性表达者中同时表达p53阳性者58例，15例阴性表达者中表达p53阳性者8例，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肝门部胆管癌组织中Survivin和p53的表达显著高于癌旁组织和正常胆管组织，其在肝门部胆管癌的发展、转移过程中可能具有重要作用。     

C-kit和SCF基因在胆管细胞癌中的表达及意义

目的 拟通过检测C-kit、SCF基因在胆管细胞癌中的表达来了解C-kit、SCF与胆管细胞癌发生和发展之间的关系。方法采用免疫组化S-P法检测48例肝胆管细胞癌及20例肝外胆管癌标本C-kit、SCF蛋白表达情况，同时取对应的癌旁胆管组织及另取30例肝及胆管良性病变胆管组织作对照，所有数据采用X^2检验。结果48例肝胆管细胞癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为39例（81．3％）和36例（75．0％），20例肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为12例（60．0％）和13例（65．0%），癌旁胆管组织中4例C-kit、5例SCF呈弱阳性表达，30例肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF蛋白均呈阴性表达。两癌组织与癌旁胆管组织、肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF表达阳性率比较差异有显著性（P〈0．05）。Ⅲ～Ⅳ期胆管细胞癌C-kit、SCF蛋白表达阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0．05），中低分化癌高于高分化癌（P〈0．05），有淋巴结转移癌高于无淋巴结转移癌（P〈0．05）。而肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达与其临床病理各因素无明显相关（P〉0．05）。C-kit、SCF蛋白表达与胆管细胞癌病人年龄、性别、肿瘤直径无关。结论 C-kit、SCF蛋白过表达可能在胆管细胞癌的发生、发展中发挥作用。     

信号调节蛋白α1在胆管细胞性肝癌中的表达及生物学意义

目的 观察信号调节蛋白Sirp α1在胆管细胞性肝癌中的表达。方法 选取手术切除胆管癌和癌旁组织24例，10％甲醛固定24h后石蜡包埋切片，采用免疫组织化学方法测定胆管癌和癌旁组织Sirp α1表达。结果 Sirp α1在胆管癌细胞胞浆散在淡黄色表达，癌旁胆管细胞胞浆棕黄色表达，表达差异显著（P〈0．05），其表达程度与胆管癌肿瘤大小、组织分化程度、有无癌栓和子灶和淋巴结转移与否有关，肿瘤越大和分化程度越差，伴有子灶、胆管和门静脉癌栓者，Sirp α1表达越低（P〈0．05），而与血AFP和CA19-9高低无关（P〉0．05）。结论 Sirp α1作为一种负向调控因子参与了胆管细胞性肝癌的发生发展，但关于其详细调控机制尚待进一步研究。     

肾癌中原癌基因EphB4及其蛋白表达的研究

目的：研究人肾癌组织中EphB4基因及其蛋白的表达及其在肾癌发生、发展中的作用和临床意义。方法：取液氮保存的原发性肾癌新鲜标本40例,相应癌旁组织（阴性切缘）40例,正常肾脏组织30例,采用半定量逆转录PCR（RTPCR）和免疫组化SP法检测EphB4基因及其蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行分析。结果：EphB4基因在肾癌组织和癌旁组织中都表达,且癌旁表达低于肿瘤表达,差异有统计意义（P〈0．05）;正常肾脏组织不表达（P〈0．01）;40例肾癌标本中,25例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为62．5％,40癌旁组织中,10例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为25．0％;两者有显著差异性（P〈0．05）。EphB4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关（P〉0．05）,但与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。结论：原癌基因EphB4及其蛋白在人肾癌组织中过度表达,且与肾癌的发生,发展相关,可能成为肾癌预后的侯选标志物之一。     

核因子kB在胆管癌中的表达及其与微血管形成的关系

目的探讨胆管癌中核因子kB（NF-κB）表达及其与微血管形成的关系。方法应用免疫组化法检测1997-2003年50例胆管癌组织、27例癌旁组织及9例正常胆管组织的微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VECF）和NF-κB的表达。结果NF-κB在胆管癌和癌旁组织中阳性表达率分别为96．0％（48／50）和100．0％（27／27），高于正常组织44．4％（4／9）（P〈0．01）；NF-κB强阳性表达组MVD高于弱阳性组和阴性组（F=12．662，P〈0．01）；NF-κB表达与MVD、VECF的表达均呈正相关（rs=0、542、0．660，P〈0．01）。结论NF-κB在胆管癌中高表迭，与微血管形成呈正相关，NF-κB可能通过调节VECF等血管形成相关因子促进微血管形成。     

人肝细胞性肝癌性激素受体的表达

目的：研究人肝细胞性肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织中雄激素受体（AR）和雌激素受体（ER）的表达水平及分布规律。方法：应用单克隆抗体免疫组化法检测50例肝细胞性肝癌标本的肿瘤组织、癌旁组织和10例肝内胆管结石的肝组织中AR和ER的表达情况。结果：在肝癌组织、癌旁组织和肝内胆管结石的肝组织中，AR的阳性表达率分别为30％、8％和0％，除癌组织显著高于癌旁组织外（P＜0．01），其它各组无显著性差异（P＞0．05）；ER的阳性表达率分别为12％、10％和20％，在三组中均无显著性差异（P＞0．05），在所有阳性片中，AR和ER的标记指数（LI）均＜25。结论：AR和ER在肝细胞性肝癌组织中的表达率很低。     

促血管生成素家族在大肠腺癌中的表达及与微血管密度和临床病理特征的关系

目的 探讨促血管生成素-1（Ang-1）、促血管生成素-2（Ang-2）、促血管生成素受体（Tie-2）及血管内皮生长因子（VEGF）在大肠腺癌及癌旁正常组织中的表达，及与微血管密度（MVD）和临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测Ang-1、Ang-2、Tie-2及VEGF在45例大肠腺癌及10例癌旁正常组织中的表达。结果 大肠腺癌组织中的Ang-2蛋白及VEGF蛋白明显高于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越低，Ang-2及VEGF蛋白的表达率越高（P〈0．05），Ang-2与VEGF蛋白的表达存在明显正相关性（r=0．997，P〈0．01）；大肠腺癌组织中的Ang-1蛋白明显低于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越高，Ang-1蛋白的表达率越高（P〈0．05）；Tie-2蛋白在大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。大肠腺癌的分化程度越低，MVD越高（P〈0．05），腺癌组织中Ang-1蛋白阳性表达组MVD明显低于阴性表达组（P〈0．01），Ang-2蛋白阳性表达组MVD明显高于阴性表达组（P〈0．01）。≥5cm及有淋巴结转移的大肠腺癌组织中，Ang-2蛋白的表达明显增加（x^2=8．889，P〈0．01；x^2=10．020，P〈0．01）。结论 在大肠腺癌组织中，相对Ang-1占优势的Ang-2的过度表达，可能在肿瘤的血管生成和进展过程中起着重要作用。     

肝细胞癌门静脉癌栓中肝细胞生长因子及其受体的表达

目的研究肝细胞生长因子（HGF）及其受体C-Met在肝细胞癌门静脉癌栓中的表达，探讨HGF及C-Met的表达与门静脉癌栓形成与发展的关系。方法用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测HGFmRNA及C-MetmRNA在20例肝细胞癌门静脉癌栓及其癌旁组织、10例无门静脉癌栓形成的肝细胞癌和癌旁组织及10例正常肝组织中的表达。结果HGF及C-Met在肝癌及癌栓中的阳性表达率均显著高于正常肝组织及癌旁组织，差异有统计学意义（P〈0．05），HGF及C—Met在癌栓中及肝癌中表达的阳性率比较差异无统计学意义（P〉0．05），HGF与C—Met在各组织中的表达阳性率高低差异无统计学意义（P〉0．05）。HGF及C—Met在肝癌及癌栓中的表达量均显著高于正常肝组织及癌旁组织，差异有统计学意义（P〈0．05），HGF及C-Met在癌栓中表达量显著高于其在肝癌中表达量（P〈0．05），HGF与C-Met在各组织中的表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HGF及C-Met参与了肝癌的形成，而肝癌患者HGF及C-Met量的升高可能是肝癌发展形成门静脉癌栓的原因之一，HGF及C—Met可作为门静脉癌栓形成的监测指标。     

载脂蛋白M在结直肠癌组织中的表达及其临床病理相关性

目的探讨载脂蛋白M（apoM）在结直肠癌组织中表达水平的变化及其临床相关性。方法采用荧光定量PCR检测20例结直肠癌组织及其癌旁组织中apoM的mRNA表达：采用免疫组织化学方法检测7例正常肠黏膜、6例肠炎组织、10例肠息肉、20例结直肠癌及其癌旁组织中apoM的蛋白表达水平。结果apoMmRNA在结直肠癌组织和癌旁组织中均有表达．前者相对表达量显著低于后者（0．05±0．01比0．19±0．05,P〈0．05）。无淋巴结转移者apoMmRNA表达水平显著低于有淋巴结转移者（P〈0．01）。结直肠癌组织中apoM蛋白表达中位分值为5．50．显著低于癌旁组织（10．5,P〈0．05）、肠炎组织（9．75,P〈0．05）、肠息肉组织（11．0,P〈0．01）及正常黏膜组织（10．5,P〈0．05）。未见结肠癌组织中apoM蛋白水平与患者临床病理特征有关（P〉0．05）。结论载脂蛋白apoM在肠癌组织中的mRNA及蛋白水平较正常组织及良性病变组织显著降低。结直肠癌组织中apoMmRNA表达水平与淋巴结转移有关。     

Survivin与Caspase--3及相关性研究在胆管细胞癌中的表达

目的探讨Survivin和Caspase－3在胆管细胞癌中的表达及相互关系。方法用免疫组化S-P法分别检测Survivin和CasDase－3在胆管细胞癌、癌旁组织及正常胆管组织中的表达。结果①Survivin在胆管细胞癌中的表达显著高于癌旁组织和正常胆管组织（P〈0.01）；Caspase－3在胆管细胞癌中的表达显著低于癌旁组织和正常胆管组织（P〈0．01）。②在胆管细胞癌中，Survivin的表达随着肿瘤分化程度的降低而增强（rs=0．404，P〈0．01）．Caspase-3的表达随着肿瘤分化程度的降低而减弱（rs=-0．389，R0．05）。③Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌中的表达呈负相关（rs=-0．765，P〈0．01）。结论Survivin的高表达和Caspase-3的失表达抑制了胆管细胞癌细胞的凋亡。可能与胆管细胞癌细胞的生长有关；Survivin和Caspase-3表达的负相关性反映了Survivin抑制Caspase-3介导的细胞凋亡，可能与癌细胞的发生发展有密切关系。     

Survivin与Caspase-3在胆管细胞癌中的表达及相关性研究

目的 探讨Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌中的表达及相互关系.方法 用免疫组化S-P法分别检测Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌、癌旁组织及正常胆管组织中的表达.结果 ①Survivin在胆管细胞癌中的表达显著高于癌旁组织和正常胆管组织(P＜0.01);Caspase-3在胆管细胞癌中的表达显著低于癌旁组织和正常胆管组织(P＜0.01).②在胆管细胞癌中,Survivin的表达随着肿瘤分化程度的降低而增强(rs=0.404,P＜0.01),Caspase-3的表达随着肿瘤分化程度的降低而减弱(rs=0.389,P＜0.05).③Survivin和Caspase-3在胆管细胞癌中的表达呈负相关(rs=-0.765,P＜0.01).结论 Survivin的高表达和Caspase-3的失表达抑制了胆管细胞癌细胞的凋亡,可能与胆管细胞癌细胞的生长有关;Survivin和Caspase-3表达的负相关性反映了Survivin抑制Caspase-3介导的细胞凋亡.可能与癌细胞的发生发展有密切关系.     

PUMA蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨PUMA蛋白在胆管细胞癌组织中的表达及与胆管癌的临床病理关系。方法:应用免疫组化法检测60例肝外胆管细胞组织与正常胆管细胞组织中PUMA蛋白的表达情况。结果:胆管细胞癌组织PUMA蛋白的表达率为38.3%,低于癌旁组织中(48.3%)和正常胆管组织(63.3%)。PUMA蛋白的表达与肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移情况有关,与患者年龄、性别及肿瘤部位无关。结论:PUMA蛋白的表达缺失与肝外胆管癌的发生发展密切相关。     

胆管癌中14-3-3蛋白各亚型的表达及其临床意义

目的 探讨14-3-3蛋白各亚型在胆管癌组织中的表达情况及其临床意义.方法 采用石蜡包埋组织,进行免疫组织化学染色,分析14-3-3蛋白各亚型在20 例胆管癌及5 例胆管癌旁正常组织的表达状态,探讨其与胆管癌临床病理参数之间的关系.结果 14-3-3 蛋白β、γ、ε、ζ、η、θ和σ亚型在胆管癌组织原发灶表达的阳性率分别为85.00% (17/20)、85.00% (17/20)、55.00% (11/20)、75.00% (15/20)、50.00% (10/20)、80.00% (16/20) 和80.00%(16/20).其中,β、γ、η、σ、ε和θ亚型与癌旁正常胆管组织比较,具有统计学意义(P<0.05),而ζ亚型无统计学意义(P>0.05);14-3-3蛋白阳性表达率与胆管癌的分化程度、恶性级别及是否淋巴结转移均无差别(P>0.05).结论 14-3-3蛋白七个亚型中β、γ、η、σ、ε和θ亚型在胆管癌原发组织中高表达,表明14-3-3蛋白在胆管癌的发生过程中具有重要作用.     

SNCG在胆管癌组织中的表达及其临床意义

目的观察γ-突触核蛋白（γ-synuclein,SNCG）在胆管癌及胆管正常组织中的表达,探讨SNCG在胆管癌发生、发展及浸润转移中的作用及其临床意义。方法采用免疫组化染色方法检测60例胆管癌及34例胆管正常组织中SNCG蛋白的表达情况,并分析其与胆管癌临床病理特征的关系。结果胆管癌组织中SNCG表达阳性率为73.33%（44/60）,高于其在胆管正常组织中的表达阳性率（5.88%,2/34）,其差异有统计学意义（P〈0.01）。SNCG蛋白的表达与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0.01）,但与患者的年龄、性别及肿瘤分化程度无关（P〉0.05）。结论 SNCG蛋白的表达与胆管癌的发生、发展和浸润转移相关,可能在胆管癌的浸润转移中发挥重要作用。SNCG有望成为新的胆管癌的肿瘤标志物,为预后判断和制定相应的治疗方案提供依据。     

Vps4在肝癌及癌旁组织中的差异性表达及其临床意义

【摘要】 目的 液泡蛋白分选因子4（vacuolar protein sorting 4 Vps4）是调节细胞分裂、病毒芽胞形成的重要因素,本文检测其在肝细胞癌（HCC）患者的癌旁组织、癌组织及正常肝组织中差异性表达,分析该蛋白与肝癌临床病理资料之间的关系。方法 应用免疫组织化学法检测56对经手术切除并有明确病理诊断为肝细胞癌的癌组织、癌旁组织及11例正常肝组织标本中Vps4的表达。比较上述组织中Vps4的表达并分析该蛋白表达与临床病理资料之间的关系。结果=1）癌组织、癌旁组织、正常肝组织、癌栓、转移性淋巴结等组织的细胞质中均可表达Vps4;２）癌组织中Vps4平均表达量低于癌旁组织和正常肝组织,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;正常肝组织与癌旁组织中Vps4的平均表达量无明显差异（Ｐ＞０．０５）;３）Vps4的表达与ＨＢＶ－ＤＮＡ复制量有关,与年龄、性别、肿瘤直径、肝内多发病灶、肝外淋巴结转移、肝胞膜完整性、肝硬化、ＡＦＰ表达量、Ｃｈｉｌｄ－Ｐｕｇｈ分级、脉管癌栓、Edmonson分级、TNM分期等无关。结论 癌组织中Vps4表达明显低于正常肝组织及癌旁组织,且与ＨＢＶ－ＤＮＡ复制量有关,Vps4表达可能影响肝癌的发生和发展。     

肝内胆管癌中ErbB4的表达及临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体Erb B4在人肝内胆管癌(ICC)组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化法分别检测24例ICC患者癌组织(ICC组)、癌旁胆管组织(癌旁组)及16例肝内胆管结石患者胆管组织(结石组)中Erb B4的表达,并分析Erb B4表达与ICC患者临床病理因素的关系。结果:Erb B4的强阳性表达率在ICC组中为75.0%,明显高于癌旁组(45.8%)和结石组(37.5%)(均P0.05);且ICC组胞核Erb B4阳性表达率高于另两组(均P0.05),而胞膜与胞质Erb B4阳性表达率3组间差异无统计学意义(均P0.05)。Erb B4的高表达与ICC患者淋巴结转移及TNM分期有关(均P0.05)。结论:Erb B4的表达增高与核内移与ICC的发生发展以及浸润转移密切相关。     

pre-miR-146a基因rs2910164位点单核苷酸多态性与胆管癌的关系

目的：探讨pre-miR-146a基因表达及其rs2910164位点多态性与胆管癌的关系。 方法：分别用基因直接测序与定量PCR方法检测70例胆管癌患者的胆管癌组织（胆管癌组）及 39例胆管非肿瘤性疾病患者的胆管组织（对照组）中pre-miR-146a基因rs2910164位点单核苷酸多态性与pre-miR-146a表达,分析不同基因型与pre-miR-146a表达量、胆管癌临床病理及其预后的关系。 结果：胆管癌组的pre-miR-146a基因型分布与对照组有明显差异,前者表现为GG和GC基因型比例明显高于CC基因型,且G等位基因频率明显高于C等位基因（均P<0.05）;对照组GG和GC基因型人群的pre-miR-146a表达量较CC基因型低,但差异无统计学意义（P>0.05）,胆管癌组织pre-miR-146a表达量明显低于对照组胆管组织（P<0.05）;Logistic多元回归分析显示GG和GC基因型可能是胆管癌的危险因素（P=0.052）,分层分析显示GG和GC基因型与胆管癌患者的临床分期和淋巴结转移有关（均P<0.05）;生存分析显示GG和GC基因型胆管癌患者的生存率低于CC基因型胆管癌患者,但差异无统计学意义（P=0.178）。 结论：pre-miR-146a基因rs2910164位点G等位基因频率升高可能是导致pre-miR-146a基因表达降低以及胆管癌发生发展的危险因素。

     

microRNA let-7a对胆管癌细胞凋亡和周期的影响

目的:探讨microRNA(miRNA) let-7a在胆管癌组织中的表达及其意义.方法:用Real-time PCR检测let-7a在胆管癌与正常胆管组织中的表达;将胆管癌HuCCT-1细胞分为let-7a过表达组(转染let-7a mimics),阴性对照组(转染阴性对照序列)和空白对照组(无转染),分别用Real-time PCR和流式细胞仪检测各组细胞let-7a的表达,细胞凋亡和周期情况.结果:let-7a在胆管癌组织中表达较正常胆管组织明显下调(P＜0.01);与空白对照组比较,let-7a过表达组HuCCT-1细胞的let-7a表达明显升高,细胞凋亡率明显增加(均P＜0.01),而阴性对照组与空白对照组间无统计学差异(均P＞0.05);各组间细胞周期差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胆管癌组织中let-7a表达下调,let-7a表达下调抑制了细胞凋亡,从而可能在促进胆管癌发生与发展中起了重要作用.     

PROX-1与Ki-67在胆管癌中的表达及意义

目的：探讨PROX-1及Ki-67在胆管癌中表达及意义。 方法：用免疫组化法检测46例肝门部胆管癌患者（伴淋巴结转移29例,无淋巴结转移17例）癌组织与23例胆管良性病变患者胆管组织中PROX-1及Ki-67的表达,分析PROX-1及Ki-67的表达与胆管癌淋巴转移及其他临床病理因素的关系。 结果：PROX-1与Ki-67两者的阳性表达率在良性病变胆管组织、无淋巴结转移胆管癌组织、伴淋巴结转移胆管组织中依次增高,差异均有统计学意义（均P<0.05）;两者的阳性表达率均与胆管癌的分化程度有关（均P<0.05）,而与患者的性别、年龄无关（P>0.05）;胆管癌组织中PROX-1与Ki-67表达正相关（r=0.831,P<0.05）。 结论：PROX-1与Ki-67的高表达与胆管癌的恶性生物学行为密切相关,且两者表达量之间存在关联性。